溶瘤病毒在難治性腫瘤中的探索演講人2026-01-08

溶瘤病毒的作用機制與難治性腫瘤的病理基礎(chǔ)未來展望與個體化治療新方向溶瘤病毒聯(lián)合治療策略：協(xié)同增效的實踐探索溶瘤病毒臨床應(yīng)用的挑戰(zhàn)與突破溶瘤病毒臨床前研究與轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)進展目錄

溶瘤病毒在難治性腫瘤中的探索作為腫瘤治療領(lǐng)域的研究者，我始終在探索那些能為晚期患者帶來新希望的方向。難治性腫瘤——那些對傳統(tǒng)放化療、靶向治療耐藥，或因腫瘤微環(huán)境異常、基因異質(zhì)性過高而難以攻克的“堡壘”，長期困擾著臨床實踐。近年來，溶瘤病毒作為一種兼具“直接殺傷”與“免疫激活”雙重效應(yīng)的腫瘤治療手段，逐漸從實驗室走向臨床試驗，為我們打開了新的思路。本文將從作用機制、臨床前轉(zhuǎn)化、臨床應(yīng)用挑戰(zhàn)、聯(lián)合治療策略及未來方向五個維度，系統(tǒng)梳理溶瘤病毒在難治性腫瘤中的探索歷程，并結(jié)合親身經(jīng)歷的臨床觀察，呈現(xiàn)這一領(lǐng)域的進展與突破。01ONE溶瘤病毒的作用機制與難治性腫瘤的病理基礎(chǔ)

難治性腫瘤的定義與臨床痛點難治性腫瘤并非單一疾病類型，而是涵蓋“原發(fā)耐藥”（初始治療無效）、“繼發(fā)耐藥”（治療中進展）、“特殊部位腫瘤”（如腦瘤、胰腺癌）及“罕見腫瘤”等復(fù)雜群體。其核心病理特征可概括為三點：1.免疫抑制性微環(huán)境：腫瘤相關(guān)成纖維細胞（CAFs）、髓系來源抑制細胞（MDSCs）浸潤，T細胞耗竭，免疫檢查點分子（如PD-L1、CTLA-4）高表達，形成“免疫冷腫瘤”。2.物理屏障與異質(zhì)性：實體瘤間質(zhì)壓力高（達60-100mmHg）、血管異常扭曲，阻礙藥物遞送；同時腫瘤細胞基因突變譜復(fù)雜，導(dǎo)致單一靶點藥物易耐藥。3.治療抵抗機制：DNA修復(fù)能力增強（如BRCA突變回復(fù)）、藥物外排泵高表達（

難治性腫瘤的定義與臨床痛點如P-gp）、凋亡通路異常（如p53突變），使化療、靶向治療效果受限。在臨床一線，我見過太多晚期胰腺癌患者因吉西他濱聯(lián)合白蛋白紫杉醇治療3個月后腫瘤仍進展，或膠質(zhì)母細胞瘤患者術(shù)后放化療后半年內(nèi)復(fù)發(fā)——這些案例揭示了現(xiàn)有治療手段的局限性，也凸顯了開發(fā)新療法的迫切性。

溶瘤病毒的作用機制：選擇性殺傷與免疫激活的雙重邏輯溶瘤病毒是一類天然或經(jīng)過基因工程改造后，能在腫瘤細胞中特異性復(fù)制并裂解細胞，而對正常細胞影響較小的病毒。其治療效應(yīng)并非簡單的“以毒攻毒”，而是通過“裂解-激活-記憶”的級聯(lián)反應(yīng)，重塑腫瘤免疫微環(huán)境。

溶瘤病毒的作用機制：選擇性殺傷與免疫激活的雙重邏輯選擇性感染與腫瘤細胞裂解：精準“定點爆破”溶瘤病毒對腫瘤細胞的靶向性依賴于“病毒-細胞”相互作用的雙重特異性：-受體介導(dǎo)的感染特異性：部分病毒通過表面蛋白與腫瘤細胞高表達的受體結(jié)合，如腺病毒（如Ad5）通過柯薩奇病毒-腺病毒受體（CAR）感染腫瘤細胞，而CAR在膠質(zhì)母細胞瘤、胰腺癌中高表達，在正常組織中低表達；單純皰疹病毒（HSV-1，如T-VEC）則通過結(jié)合硫酸乙酰肝素蛋白聚糖（HSPG）進入細胞，該受體在黑色素瘤、頭頸鱗癌中過度表達。-細胞內(nèi)復(fù)制許可性：腫瘤細胞常存在抑癌基因（如p53、Rb）失活或DNA損傷修復(fù)缺陷，為病毒復(fù)制提供了“許可環(huán)境”。例如，ONYX-015（一種E1B-55kD基因缺失的腺病毒）因無法結(jié)合p53，無法在正常細胞中復(fù)制，而在p53突變的腫瘤細胞中高效復(fù)制并裂解細胞。

溶瘤病毒的作用機制：選擇性殺傷與免疫激活的雙重邏輯選擇性感染與腫瘤細胞裂解：精準“定點爆破”基因工程技術(shù)進一步強化了這種選擇性：通過插入腫瘤特異性啟動子（如Survivin、hTERT）控制病毒復(fù)制必需基因（如E1A）的表達，使病毒僅在腫瘤細胞中激活。例如，DNX-2401（Δ24-RGD）敲除了腺病毒E1A的CDK結(jié)合域，并整合RGD肽增強整合素靶向性，在膠質(zhì)母細胞瘤中顯示出更強的腫瘤特異性。

溶瘤病毒的作用機制：選擇性殺傷與免疫激活的雙重邏輯免疫微環(huán)境重塑：從“免疫冷”到“免疫熱”的轉(zhuǎn)化溶瘤病毒最突破性的價值在于其“免疫原性細胞死亡”（ICD）效應(yīng)：病毒裂解腫瘤細胞后，釋放腫瘤相關(guān)抗原（TAAs）、損傷相關(guān)分子模式（DAMPs，如HMGB1、ATP）及病毒相關(guān)分子模式（PAMPs），激活先天免疫與適應(yīng)性免疫應(yīng)答：-抗原呈遞細胞（APC）激活：DAMPs與Toll樣受體（TLRs）結(jié)合，促進樹突狀細胞（DCs）成熟，遷移至淋巴結(jié)，通過MHC分子呈遞TAAs，激活CD8+T細胞。-T細胞浸潤與功能恢復(fù)：病毒感染誘導(dǎo)IFN-α/β、TNF-α等炎癥因子釋放，募集CD8+T細胞、NK細胞浸潤腫瘤；同時，病毒可下調(diào)PD-L1表達，逆轉(zhuǎn)T細胞耗竭狀態(tài)。例如，T-VEC（表達GM-CSF）在黑色素瘤臨床試驗中，不僅直接裂解腫瘤，還顯著增加腫瘤浸潤CD8+T細胞密度。

溶瘤病毒的作用機制：選擇性殺傷與免疫激活的雙重邏輯聯(lián)合治療的協(xié)同基礎(chǔ)：機制互補與增敏效應(yīng)溶瘤病毒與現(xiàn)有治療手段的協(xié)同效應(yīng)源于機制互補：-與化療/放療聯(lián)用：化療藥物（如吉西他濱）可抑制干擾素反應(yīng)，增強病毒復(fù)制；放療誘導(dǎo)的免疫原性細胞死亡可提供更多抗原，與病毒激活的免疫應(yīng)答形成“1+1>2”效應(yīng)。-與免疫檢查點抑制劑（ICB）聯(lián)用：病毒釋放的抗原可“點燃”T細胞，ICB（如抗PD-1）則解除T細胞抑制，解決“T細胞失能”這一ICB耐藥的關(guān)鍵問題。02ONE溶瘤病毒臨床前研究與轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)進展

溶瘤病毒臨床前研究與轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)進展01在右側(cè)編輯區(qū)輸入內(nèi)容從實驗室到臨床，溶瘤病毒的轉(zhuǎn)化依賴于對“病毒-腫瘤-免疫”互作網(wǎng)絡(luò)的深入解析，以及基因工程技術(shù)的迭代升級。02目前進入臨床研究的溶瘤病毒主要分為五大類，其工程化改造方向各具特色：（一）溶瘤病毒的分類與工程化改造：從“天然選擇”到“精準設(shè)計”

皰疹病毒類（HSV-1）：代表性病毒T-VEC-天然特性：基因組大（152kb），可容納外源基因；嗜神經(jīng)性低，安全性可控。-工程改造：刪除ICP34.5基因（抑制干擾素反應(yīng)，增強腫瘤選擇性）；插入GM-CSF基因，促進APC募集與激活。T-VEC成為首個FDA批準的溶瘤病毒（2015年，用于黑色素瘤）。

腺病毒類：靶向性與免疫調(diào)節(jié)的雙重優(yōu)化-ONYX-015：E1B-55kD基因缺失，靶向p53缺陷腫瘤，但臨床單藥療效有限，提示需聯(lián)合治療。-DNX-2401（Δ24-RGD）：刪除E1A的CDK結(jié)合域（依賴Rb通路缺陷），插入RGD肽靶向整合素αvβ3，在膠質(zhì)母細胞瘤PDX模型中，瘤內(nèi)注射后可擴散至腫瘤深部，并激活CD8+T細胞浸潤。

呼腸病毒類：天然復(fù)制許可性與廣譜抗腫瘤活性-呼腸病毒3型（Reo3）：通過黏附蛋白σ1與腫瘤細胞表面JAM-A受體結(jié)合，激活PKR通路誘導(dǎo)凋亡，在胰腺癌、肺癌中顯示出廣譜活性。其優(yōu)勢是不依賴特定基因突變，但對腫瘤微環(huán)境低氧狀態(tài)敏感。

麻疹病毒類：強效免疫激活與全身效應(yīng)-麻疹疫苗病毒（Edmonston株）：表達CD46（麻疹病毒受體）的腫瘤細胞（如多發(fā)性骨髓瘤、卵巢癌）易被感染；工程化后可表達甲狀腺素（NIS），便于SPECT成像監(jiān)測病毒分布。I期試驗中，部分多發(fā)性骨髓瘤患者達到部分緩解（PR）。

痘病毒類：大容量載體與免疫調(diào)節(jié)功能-JX-594（改造的牛痘病毒）：表達GM-CSF和TK基因，TK基因可增強病毒在增殖腫瘤細胞中的復(fù)制；同時通過抑制PI3K/AKT通路，逆轉(zhuǎn)腫瘤耐藥。在肝癌臨床試驗中，聯(lián)合索拉非尼可延長患者生存期。

痘病毒類：大容量載體與免疫調(diào)節(jié)功能臨床前模型驗證：從“體外實驗”到“體內(nèi)模擬”的嚴謹遞進溶瘤病毒的臨床轉(zhuǎn)化依賴于多層次模型驗證，以確保有效性與安全性：

體外模型：篩選病毒株與優(yōu)化條件-腫瘤細胞系與原代細胞：通過MTT、CCK-8法檢測病毒對腫瘤細胞的殺傷效率，如DNX-2401在U87膠質(zhì)母細胞瘤細胞中48小時裂解率達80%；同時，用正常細胞（如人胚肺成纖維細胞HELF）驗證選擇性，裂解率<10%。-腫瘤微環(huán)境模擬：共培養(yǎng)腫瘤細胞與CAFs、MDSCs，觀察病毒在免疫抑制環(huán)境中的復(fù)制能力，發(fā)現(xiàn)溶瘤病毒可分泌IFN-γ，抑制CAFs活化，降低間質(zhì)壓力。

動物模型：療效與安全性的“試金石”-皮下瘤模型：將腫瘤細胞接種于小鼠皮下，待成瘤后瘤內(nèi)注射病毒，監(jiān)測腫瘤體積變化。例如，T-VEC在B16F10黑色素瘤小鼠模型中，腫瘤抑制率達70%，而對照組僅20%。01-原位移植模型（PDX）：更接近臨床腫瘤微環(huán)境，如將患者來源的胰腺癌組織移植到小鼠胰腺，發(fā)現(xiàn)溶瘤病毒聯(lián)合吉西他濱可顯著延長生存期（中位OS從28天延長至45天）。02-人源化小鼠模型：植入人源免疫細胞，評估免疫激活效應(yīng)。例如，在NSG小鼠中植入人PBMCs，再接種腫瘤細胞后給予溶瘤病毒，可檢測到人源CD8+T細胞浸潤增加，證實其在人體免疫環(huán)境中的活性。03

藥代動力學(xué)與生物分布：明確“病毒去哪兒”通過熒光標(biāo)記（如GFP、Cy5.5）或qPCR檢測病毒DNA，研究病毒在體內(nèi)的代謝過程：-給藥途徑：瘤內(nèi)注射時，病毒主要局限于腫瘤組織，血液中病毒滴度低；靜脈注射時，雖可到達遠處腫瘤，但易被肝臟、脾臟清除，需通過PEG化修飾或納米載體延長循環(huán)時間。-擴散范圍：在膠質(zhì)母細胞瘤模型中，DNX-2401可從注射點擴散至2-3mm外的腫瘤區(qū)域，突破部分物理屏障。03ONE溶瘤病毒臨床應(yīng)用的挑戰(zhàn)與突破

溶瘤病毒臨床應(yīng)用的挑戰(zhàn)與突破盡管臨床前數(shù)據(jù)令人鼓舞，但溶瘤病毒從“II期有效”到“III期確證”仍面臨諸多挑戰(zhàn)。結(jié)合近十年的臨床試驗觀察，我將核心問題與應(yīng)對策略總結(jié)如下。

臨床試驗的階段性進展：從“安全性確證”到“療效探索”I期臨床：劑量限制與安全性邊界I期試驗主要確定最大耐受劑量（MTD）和劑量限制毒性（DLT）。以DNX-2401治療復(fù)發(fā)膠質(zhì)母細胞瘤為例：01-劑量遞組：1×10^7至5×10^9PFU（空斑形成單位），未達到MTD，DLT為1級發(fā)熱、頭痛，3級癲癇發(fā)作（1/20例）。02-療效信號：2例患者6個月無進展生存（PFS6）率達25%，其中1例患者緩解持續(xù)18個月，提示“低劑量高效”的可能性——這與病毒免疫激活而非直接殺傷相關(guān)。03

臨床試驗的階段性進展：從“安全性確證”到“療效探索”II期臨床：療效初步驗證與生物標(biāo)志物發(fā)現(xiàn)II期試驗聚焦特定瘤種的療效，并探索預(yù)測性生物標(biāo)志物：-黑色素瘤（T-VEC）：OPTiM研究納入436例晚期患者，ORR為26%（對照組11%），完全緩解（CR）率達8%，且緩解持續(xù)時間>6個月。亞組分析顯示，腫瘤浸潤淋巴細胞（TILs）高表達的患者獲益更顯著。-膠質(zhì)母細胞瘤（DNX-2401）：II期試驗納入37例患者，瘤內(nèi)注射后6個月生存率為47.1%（歷史對照15%），且部分患者出現(xiàn)“遠隔效應(yīng)”（未注射部位的腫瘤縮?。?，提示系統(tǒng)性免疫激活。-胰腺癌（JX-594）：聯(lián)合吉西他濱的II期試驗顯示，疾病控制率（DCR）為35%（對照組18%），但III期試驗未達主要終點，提示瘤種選擇與聯(lián)合策略的重要性。

臨床試驗的階段性進展：從“安全性確證”到“療效探索”III期臨床：療效確證與適應(yīng)癥拓展的“分水嶺”III期試驗是溶瘤病毒走向市場的關(guān)鍵，但結(jié)果喜憂參半：-成功案例：T-VEC聯(lián)合抗PD-1抗體（Pembrolizumab）治療黑色素瘤的III期試驗（MASTERKEY-265）顯示，ORR達39%（T-VEC單藥26%），證實聯(lián)合策略的潛力。-失敗案例：溶瘤腺病毒Ad5-Δ24-RGD聯(lián)合順鉑/紫杉醇治療非小細胞肺癌的III期試驗，未改善PFS和OS，可能與給藥途徑（靜脈注射導(dǎo)致腫瘤內(nèi)藥物濃度低）及患者選擇（未篩選免疫浸潤高的患者）有關(guān)。

臨床應(yīng)用中的核心挑戰(zhàn)與應(yīng)對策略遞送效率問題：突破“物理屏障”與“免疫清除”-挑戰(zhàn)：實體瘤間質(zhì)壓力高阻礙病毒擴散；血液中中和抗體（NAbs）可結(jié)合病毒顆粒，使其失活。靜脈注射時，>90%病毒被肝臟Kupffer細胞清除，腫瘤內(nèi)遞送效率<1%。-策略：-局部給藥優(yōu)化：瘤內(nèi)注射聯(lián)合“間質(zhì)減容術(shù)”（如透明質(zhì)酸酶、膠原酶），降低間質(zhì)壓力；或使用超聲微泡實現(xiàn)病毒“爆破式”釋放。-載體系統(tǒng)改造：用脂質(zhì)體、聚合物納米顆粒包裹病毒，保護其免受NABs清除；或利用紅細胞載體，延長血液循環(huán)時間。-免疫調(diào)節(jié)預(yù)處理：短期使用環(huán)磷酰胺降低NAbs滴度，或使用抗CD20抗體清除B細胞，提高病毒感染效率。

臨床應(yīng)用中的核心挑戰(zhàn)與應(yīng)對策略免疫原性與重復(fù)給藥限制：打破“中和抗體壁壘”-挑戰(zhàn)：初次給藥后，機體產(chǎn)生NAbs，阻止同一血清型病毒的再次給藥；過強的免疫反應(yīng)可能導(dǎo)致細胞因子釋放綜合征（CRS），嚴重時可危及生命。-策略：-病毒外殼改造：通過基因編輯替換病毒衣殼蛋白（如腺纖維蛋白），降低NABs識別；或使用“空殼病毒”（只含衣殼，不含DNA），誘導(dǎo)免疫耐受。-交替血清型給藥：如先用Ad5血清型病毒，后續(xù)改用Ad35血清型，避免NABs干擾。-劑量與節(jié)奏控制：采用“低劑量多次給藥”策略，避免CRS發(fā)生；或聯(lián)合糖皮質(zhì)激素，但需注意可能抑制抗腫瘤免疫。

臨床應(yīng)用中的核心挑戰(zhàn)與應(yīng)對策略腫瘤異質(zhì)性與耐藥性：應(yīng)對“選擇性逃逸”-挑戰(zhàn)：腫瘤細胞表面受體表達差異（如部分細胞CAR陰性）導(dǎo)致病毒感染不全；病毒復(fù)制抑制因子（如STAT3、PKR）高表達可阻斷病毒復(fù)制。-策略：-聯(lián)合靶向藥物：使用STAT3抑制劑（如Stattic）或JAK抑制劑，解除對病毒復(fù)制的抑制；例如，溶瘤病毒聯(lián)合JAK抑制劑在胰腺癌模型中，病毒復(fù)制效率提高5倍。-“雞尾酒”病毒療法：同時使用靶向不同受體的病毒株（如Ad5+Ad35），覆蓋更多腫瘤細胞亞群。-個體化病毒設(shè)計：基于患者腫瘤基因譜，定制病毒株（如針對EGFR突變患者，設(shè)計靶向EGFR啟動子的溶瘤病毒）。

臨床應(yīng)用中的核心挑戰(zhàn)與應(yīng)對策略生物標(biāo)志物缺乏：實現(xiàn)“精準分層”的瓶頸-挑戰(zhàn)：目前缺乏可靠標(biāo)志物預(yù)測患者是否從溶瘤病毒中獲益，導(dǎo)致臨床試驗入組混雜，療效差異大。-探索方向：-病毒標(biāo)志物：血液中病毒DNA滴度、病毒復(fù)制相關(guān)基因表達（如E1AmRNA）可反映病毒活性。-腫瘤免疫標(biāo)志物：基線CD8+T細胞浸潤密度、PD-L1表達、T細胞克隆多樣性（通過TCR測序）與療效正相關(guān)。-血清標(biāo)志物：IFN-α、IL-12等炎癥因子水平升高提示免疫激活，可能預(yù)示良好療效。04ONE溶瘤病毒聯(lián)合治療策略：協(xié)同增效的實踐探索

溶瘤病毒聯(lián)合治療策略：協(xié)同增效的實踐探索單一溶瘤病毒療效有限，而聯(lián)合治療已成為提高難治性腫瘤緩解率的主流方向。結(jié)合臨床實踐，以下三類聯(lián)合策略最具潛力。

與免疫檢查點抑制劑聯(lián)合：“免疫點火”與“免疫剎車釋放”溶瘤病毒與ICB的協(xié)同效應(yīng)已在多項臨床試驗中得到驗證：-機制基礎(chǔ)：病毒裂解釋放抗原，激活T細胞（“點火”）；ICB解除PD-1/PD-L1通路對T細胞的抑制（“釋放剎車”），解決“T細胞失能”這一ICB耐藥的核心問題。-臨床案例：-T-VEC聯(lián)合Pembrolizumab治療晚期黑色素瘤（III期MASTERKEY-265）：ORR達44%（T-VEC單藥26%），中位PFS延長7.1個月，且CR率從8%提高至21%。-DNX-2401聯(lián)合Pembrolizumab治療膠質(zhì)母細胞瘤（I期試驗）：6個月生存率為62.5%，其中3例患者達到影像學(xué)緩解，1例患者緩解持續(xù)24個月，且腦脊液中檢測到激活的CD8+T細胞。

與免疫檢查點抑制劑聯(lián)合：“免疫點火”與“免疫剎車釋放”-聯(lián)合時機：臨床觀察顯示，先給予溶瘤病毒“預(yù)熱”免疫微環(huán)境，再序貫ICB，比同步聯(lián)合效果更佳——這為臨床用藥順序提供了參考。

與化療/放療聯(lián)合：“直接殺傷”與“免疫激活”的互補化療與放療的“細胞毒性”與溶瘤病毒的“免疫原性”形成互補：-化療增敏：吉西他濱可抑制干擾素信號通路，解除對病毒復(fù)制的抑制；順鉑可增加腫瘤細胞膜通透性，促進病毒進入。例如，胰腺癌模型中，溶瘤病毒聯(lián)合吉西他濱的腫瘤抑制率是單藥的2倍。-放療增敏：放療誘導(dǎo)的ICD釋放更多抗原，與病毒激活的免疫應(yīng)答形成“協(xié)同放大”；同時，局部放療可改善腫瘤血管通透性，促進病毒擴散。頭頸鱗癌臨床試驗中，放療后瘤內(nèi)注射溶瘤病毒，局部控制率提高28%。-減毒增效：低劑量化療（如環(huán)磷酰胺）可清除MDSCs，逆轉(zhuǎn)免疫抑制，為溶瘤病毒創(chuàng)造更favorable的微環(huán)境。

與其他免疫治療聯(lián)合：“多通路激活”與“免疫記憶增強”-與CAR-T聯(lián)合：溶瘤病毒可“改造”腫瘤微環(huán)境，降低免疫抑制，促進CAR-T細胞浸潤。例如，在膠質(zhì)母細胞瘤中，溶瘤病毒聯(lián)合CAR-T-EGFRvIII（靶向EGFR突變亞型），小鼠模型生存期延長60%，且CAR-T細胞在腫瘤中持續(xù)存在。-與腫瘤疫苗聯(lián)合：溶瘤病毒釋放的抗原作為“內(nèi)源性疫苗”，與外源性新抗原疫苗聯(lián)合，可增強T細胞克隆多樣性。黑色素瘤I期試驗中，溶瘤病毒聯(lián)合個性化neoantigen疫苗，T細胞受體（TCR）多樣性指數(shù)提高3倍。-與細胞因子聯(lián)合：IL-2、IL-15等細胞因子可促進T細胞增殖，但全身毒性大；溶瘤病毒局部表達細胞因子（如IL-12），可提高局部濃度，降低全身毒性。例如，表達IL-12的溶瘤腺病毒在肝癌模型中，腫瘤內(nèi)IFN-γ水平升高10倍，而血清中無明顯變化。05ONE未來展望與個體化治療新方向

未來展望與個體化治療新方向溶瘤病毒在難治性腫瘤中的探索仍處于“成長期”，但合成生物學(xué)、單細胞測序、人工智能等新技術(shù)的融合，為其帶來了前所未有的發(fā)展機遇。

基因工程溶瘤病毒的“智能化”設(shè)計-合成生物學(xué)邏輯門設(shè)計：構(gòu)建“AND門”病毒（需同時滿足兩個條件才復(fù)制），如“腫瘤特異性受體+低氧條件”雙控病毒，僅在腫瘤低氧區(qū)域（如胰腺癌中心）復(fù)制，避免脫靶效應(yīng)。-多功能融合病毒：同時表達免疫調(diào)節(jié)因子（如IL-12、抗PD-L1單鏈抗體）、促凋亡蛋白（如TRAIL）和成像報告基因（如Luciferase），實現(xiàn)“治療-監(jiān)測一體化”。例如，表達抗PD-L1的溶瘤麻疹病毒，可在殺傷腫瘤的同時，實時通過生物發(fā)光成像監(jiān)測療效。-跨種屬溶瘤病毒：利用動物病毒（如禽痘病毒、鼠源逆轉(zhuǎn)錄病毒）改造，因其與人類病毒無交叉免疫，可規(guī)避NABs問題。I期試驗顯示，改造的禽痘病毒在實體瘤中安全性良好。

個體化溶瘤病毒治療：“量身定制”的新范式-基于腫瘤特征的病毒選擇：通過NGS檢測腫瘤基因突變譜（如p53、Rb）、受體表達（如CAR、EGFR），匹配相應(yīng)溶瘤病毒。例如，針對EGFR擴增的非小細胞肺癌，設(shè)計靶向EGFR啟動子的溶瘤腺病毒。01-患者來源的病毒改造：從患者腫瘤組織中分離天然溶瘤病毒（如柯薩奇病毒、腺病毒），體外擴增并改造后回輸，提高病毒與腫瘤的匹配度。02-聯(lián)合