(2025年)病理學(xué)技術(shù)(師)專業(yè)知識題庫附答案一、單項選擇題（每題2分，共40分）1.組織固定時，10%中性福爾馬林的pH值應(yīng)控制在A.5.0-5.5B.6.0-6.5C.7.0-7.4D.8.0-8.5答案：C2.石蠟切片制作中，脫水步驟的正確順序是A.70%→80%→90%→95%→無水乙醇B.50%→70%→80%→95%→無水乙醇C.80%→90%→95%→無水乙醇（Ⅰ）→無水乙醇（Ⅱ）D.95%→無水乙醇（Ⅰ）→無水乙醇（Ⅱ）→80%→70%答案：C3.冰凍切片時，組織塊與OCT包埋劑的溫度差異應(yīng)控制在A.≤5℃B.≤10℃C.≤15℃D.≤20℃答案：B4.HE染色中，蘇木精染色后分化的目的是A.增強(qiáng)細(xì)胞核著色B.去除胞漿多余染料C.使細(xì)胞核與胞漿對比更清晰D.延長染色時間答案：C5.免疫組化實驗中，內(nèi)源性生物素干擾最常見于A.肝臟、腎臟B.皮膚、肌肉C.神經(jīng)、脂肪D.血液、淋巴答案：A6.原位雜交技術(shù)中，探針標(biāo)記常用的放射性核素是A.32PB.131IC.??CaD.??Fe答案：A7.組織標(biāo)本運(yùn)送至病理科的時間要求，常溫下不超過A.1小時B.2小時C.4小時D.6小時答案：C8.瑞氏染色時，血涂片過厚會導(dǎo)致A.細(xì)胞重疊，染色過深B.細(xì)胞皺縮，染色過淺C.背景模糊，核質(zhì)不清D.胞漿顆粒顯示不清答案：A9.電鏡標(biāo)本固定時，戊二醛的常用濃度是A.0.5%-1%B.1%-2%C.2.5%-4%D.5%-6%答案：C10.免疫熒光染色中，熒光素與抗體的結(jié)合比例（F/P比）最佳范圍是A.1-2B.2-3C.3-4D.4-5答案：B11.分子病理中，DNA提取時，蛋白酶K的作用是A.裂解細(xì)胞膜B.降解RNAC.消化蛋白質(zhì)D.沉淀DNA答案：C12.組織包埋時，石蠟熔點(diǎn)選擇的依據(jù)是A.環(huán)境溫度B.組織類型C.切片厚度D.染色方法答案：A（注：通常環(huán)境溫度高時選擇高熔點(diǎn)石蠟，反之選擇低熔點(diǎn)）13.特殊染色中，Masson三色染色顯示膠原纖維的顏色是A.紅色B.藍(lán)色C.綠色D.黃色答案：B14.細(xì)胞爬片固定時，若需保留抗原性，常用固定液是A.甲醇-冰醋酸（3:1）B.4%多聚甲醛C.95%乙醇D.10%中性福爾馬林答案：B15.病理切片質(zhì)量控制中，“空泡”現(xiàn)象最可能的原因是A.脫水不徹底B.包埋時石蠟溫度過高C.切片刀不鋒利D.烤片溫度過低答案：A（注：脫水不徹底導(dǎo)致石蠟滲透不良，形成空泡）16.熒光原位雜交（FISH）中，變性步驟的溫度一般為A.55-60℃B.65-70℃C.75-80℃D.85-90℃答案：D17.脫落細(xì)胞涂片制作時，“拉片法”適用于A.稀薄液體標(biāo)本B.黏稠液體標(biāo)本C.血性標(biāo)本D.膿性標(biāo)本答案：A18.免疫組化結(jié)果判讀時，陽性對照缺失的主要影響是A.無法判斷抗體活性B.無法排除內(nèi)源性干擾C.無法確定染色強(qiáng)度D.無法區(qū)分特異性與非特異性染色答案：A19.組織芯片制作中，供體蠟塊的取樣孔徑通常為A.0.6mmB.1.2mmC.1.8mmD.2.4mm答案：A20.數(shù)字病理切片掃描時，分辨率要求至少達(dá)到A.0.5μm/像素B.1.0μm/像素C.1.5μm/像素D.2.0μm/像素答案：A二、判斷題（每題1分，共10分）1.組織固定時，固定液體積應(yīng)至少為組織體積的5倍。（√）2.冰凍切片染色后無需封片可直接觀察。（×，需用甘油或?qū)Ｓ梅馄瑒?.HE染色中，伊紅染色過深時可用75%乙醇分化。（×，應(yīng)用稀鹽酸乙醇或自來水沖洗）4.免疫組化中，血清封閉的目的是阻斷非特異性蛋白結(jié)合。（√）5.分子病理實驗中，RNA提取時需全程在4℃以下操作。（×，冰上操作即可，避免反復(fù)凍融）6.電鏡標(biāo)本脫水時，丙酮濃度梯度為30%→50%→70%→80%→90%→100%。（√）7.特殊染色中，PAS染色顯示糖原需先經(jīng)淀粉酶消化對照。（√）8.細(xì)胞涂片固定應(yīng)在細(xì)胞干燥后進(jìn)行，避免細(xì)胞脫落。（×，應(yīng)在細(xì)胞未干燥時固定）9.數(shù)字病理切片存儲格式推薦使用TIFF或SVS。（√）10.組織芯片制作中，受體蠟塊的孔間距應(yīng)≥0.5mm。（√）三、簡答題（每題8分，共40分）1.簡述組織脫水不徹底的后果及預(yù)防措施。答：后果：①石蠟無法完全滲透，切片出現(xiàn)空泡或裂隙；②組織發(fā)脆，切片易碎裂；③染色時染料滲透不均，影響結(jié)果判讀。預(yù)防措施：①根據(jù)組織類型調(diào)整脫水時間（如脂肪組織需延長）；②定期更換脫水劑，避免濃度降低；③脫水梯度設(shè)置合理（70%→80%→90%→95%→無水乙醇Ⅰ→無水乙醇Ⅱ）；④厚大組織需先修小至2-3mm厚度。2.列舉HE染色中“核著色過淺”的可能原因及解決方法。答：可能原因及解決方法：①蘇木精老化：更換新鮮蘇木精液；②染色時間不足：延長蘇木精染色時間（3-5分鐘）；③分化過度：減少鹽酸乙醇分化時間（5-10秒）；④返藍(lán)不充分：延長自來水沖洗或氨水浸泡時間（至切片變藍(lán)）；⑤組織固定不當(dāng)（如甲醛固定不足）：確保固定液體積≥組織5倍，固定時間6-24小時。3.免疫組化實驗中，“背景著色深”的常見原因及處理措施。答：常見原因及處理：①非特異性蛋白結(jié)合：增加血清封閉時間（30分鐘）或使用BSA封閉；②內(nèi)源性過氧化物酶殘留：用3%過氧化氫孵育10分鐘（需排除紅細(xì)胞干擾）；③一抗?jié)舛冗^高：梯度稀釋優(yōu)化抗體濃度；④洗滌不充分：增加PBS洗滌次數(shù)（3次，每次5分鐘）；⑤孵育溫度過高：4℃過夜或37℃1小時（避免室溫過久）；⑥組織壞死或自溶：規(guī)范標(biāo)本固定流程，縮短取材時間。4.簡述RNA提取的關(guān)鍵步驟及質(zhì)量控制指標(biāo)。答：關(guān)鍵步驟：①組織勻漿：使用Trizol裂解液快速勻漿（避免RNA酶污染）；②分層：加入氯仿離心，取上清（避免接觸中間層）；③沉淀：異丙醇沉淀RNA，75%乙醇洗滌；④溶解：DEPC水溶解RNA（65℃助溶）。質(zhì)量控制指標(biāo)：①濃度（Nanodrop測A260，1OD=40μg/mL）；②純度（A260/A280≥1.8，A260/A230≥2.0）；③完整性（瓊脂糖凝膠電泳觀察28S、18S條帶，28S/18S≈2:1）。5.病理技術(shù)質(zhì)量控制中，“切片質(zhì)量”的評價標(biāo)準(zhǔn)包括哪些？答：評價標(biāo)準(zhǔn)：①厚度均勻（3-5μm），無皺褶、裂隙；②組織無收縮、變形（固定充分）；③染色對比清晰（核漿分明，紅藍(lán)適度）；④無刀痕、顫痕（刀片鋒利，切片機(jī)穩(wěn)定）；⑤封片無氣泡、溢膠（中性樹膠量適中，蓋玻片輕壓）；⑥標(biāo)簽清晰（與申請單信息一致）。四、案例分析題（10分）某醫(yī)院病理科收到一例乳腺癌手術(shù)標(biāo)本，體積約5cm×4cm×3cm，臨床要求行HE染色及ER、PR、HER2免疫組化檢測。請描述從標(biāo)本接收到出片的完整技術(shù)流程。答：完整流程：①標(biāo)本接收：核對信息（姓名、ID、部位），測量體積并記錄，4℃暫存≤2小時；②取材：沿最大切面切開，選取腫瘤中心及邊緣組織（2-3mm厚），每塊≤2cm×1.5cm，標(biāo)記“腫瘤”“切緣”；③固定：10%中性福爾馬林（體積≥組織5倍），固定6-24小時（避免過久影響抗原）；④脫水：70%（2h）→80%（2h）→90%（2h）→95%（2h）→無水乙醇Ⅰ（1h）→無水乙醇Ⅱ（1h）；⑤透明：二甲苯Ⅰ（30min）→二甲苯Ⅱ（30min）（避免過度透明致組織變脆）；⑥包埋：石蠟（熔點(diǎn)56-58℃，環(huán)境溫度25℃），定向包埋（腫瘤面朝下）；⑦切片：厚度4μm，展片水溫45℃，撈片至載玻片（防脫片處理）；⑧烤片：60℃烤片2小時（促進(jìn)貼附）；⑨HE染色：脫蠟（二甲苯2×5min）→梯度乙醇復(fù)水→蘇木精染色3min→鹽酸乙醇分化5秒→自來水返藍(lán)10min→伊紅染色1min→梯度乙醇脫水→二甲苯透明→中性樹膠封片；⑩免疫