2025年大學(xué)生物技術(shù)（細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)）試題及答案

（考試時(shí)間：90分鐘滿分100分）班級(jí)______姓名______第I卷（選擇題，共40分）答題要求：本卷共20小題，每小題2分。在每小題給出的四個(gè)選項(xiàng)中，只有一項(xiàng)是符合題目要求的。請(qǐng)將正確答案的序號(hào)填在括號(hào)內(nèi)。1.細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)中，最常用的基礎(chǔ)培養(yǎng)基是（）A.DMEM培養(yǎng)基B.RPMI-1640培養(yǎng)基C.MEM培養(yǎng)基D.F-12培養(yǎng)基2.細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，血清的主要作用不包括（）A.提供營養(yǎng)物質(zhì)B.促進(jìn)細(xì)胞貼壁C.調(diào)節(jié)細(xì)胞代謝D.抑制細(xì)胞生長3.細(xì)胞培養(yǎng)過程中，防止微生物污染的關(guān)鍵措施是（）A.嚴(yán)格的無菌操作B.使用抗生素C.定期更換培養(yǎng)基D.控制培養(yǎng)溫度4.細(xì)胞傳代培養(yǎng)時(shí)，一般選擇細(xì)胞處于（）時(shí)進(jìn)行傳代。A.潛伏期B.對(duì)數(shù)生長期C.平臺(tái)期D.衰退期5.以下哪種細(xì)胞系常用于腫瘤研究（）A.NIH/3T3細(xì)胞B.HEK293細(xì)胞C.Hela細(xì)胞D.CHO細(xì)胞6.細(xì)胞培養(yǎng)箱中，二氧化碳的作用是（）A.調(diào)節(jié)pH值B.提供營養(yǎng)C.促進(jìn)細(xì)胞呼吸D.抑制微生物生長7.細(xì)胞凍存時(shí)，常用的保護(hù)劑是（）A.DMSOB.甘油C.乙醇D.甲醛8.細(xì)胞復(fù)蘇時(shí)，正確的操作順序是（）A.37℃水浴快速解凍，離心棄上清，加入新鮮培養(yǎng)基培養(yǎng)B.4℃冰箱解凍，離心棄上清，加入新鮮培養(yǎng)基培養(yǎng)C.室溫解凍，離心棄上清，加入新鮮培養(yǎng)基培養(yǎng)D.直接將凍存管放入培養(yǎng)箱中解凍培養(yǎng)9.細(xì)胞培養(yǎng)過程中，檢測細(xì)胞活力常用的方法是（）A.臺(tái)盼藍(lán)染色法B.結(jié)晶紫染色法C.蘇木精染色法D.伊紅染色法10.用于細(xì)胞培養(yǎng)的水，一般要求是（）A.蒸餾水B.去離子水C.雙蒸水D.超純水11.細(xì)胞培養(yǎng)瓶使用前通常需要進(jìn)行的處理是（）A．高壓滅菌B.紫外線照射C.酒精擦拭D.烘干12.細(xì)胞培養(yǎng)過程中，發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基顏色變黃，可能的原因是（）A.細(xì)胞代謝產(chǎn)物積累B.培養(yǎng)基變質(zhì)C.培養(yǎng)箱溫度過高D.二氧化碳濃度過高13.以下哪種細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)可用于大規(guī)模生產(chǎn)生物制品（）A.懸浮培養(yǎng)B.貼壁培養(yǎng)C.微載體培養(yǎng)D.以上均可14.細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，支原體污染的檢測方法不包括（）A.熒光定量PCR檢測B.相差顯微鏡觀察C.革蘭氏染色D.支原體培養(yǎng)檢測15.細(xì)胞培養(yǎng)所用的血清，通常需要經(jīng)過（）處理。A.過濾除菌B.高溫滅菌C.紫外線照射D.化學(xué)消毒16.細(xì)胞培養(yǎng)過程中，胰蛋白酶的作用是（）A.消化細(xì)胞間的連接B.分解培養(yǎng)基中的蛋白質(zhì)C.促進(jìn)細(xì)胞生長D.抑制細(xì)胞凋亡17.對(duì)于原代細(xì)胞培養(yǎng)，以下說法正確的是（）A.原代細(xì)胞培養(yǎng)比傳代細(xì)胞培養(yǎng)更容易B.原代細(xì)胞培養(yǎng)能保持細(xì)胞的原始特性C.原代細(xì)胞培養(yǎng)不需要特殊條件D.原代細(xì)胞培養(yǎng)只能傳代一次18.細(xì)胞培養(yǎng)過程中，如何判斷細(xì)胞是否處于對(duì)數(shù)生長期（）A.細(xì)胞形態(tài)飽滿，生長迅速B.細(xì)胞數(shù)量不再增加C.細(xì)胞開始出現(xiàn)死亡D.培養(yǎng)基顏色變深19.細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，常用的抗生素不包括（）A.青霉素B.鏈霉素C.慶大霉素D.胰島素20.細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)中，細(xì)胞凍存的溫度一般是（）A.-20℃B.-80℃C.-196℃D.-70℃第II卷（非選擇題，共60分）（一）填空題（共15分）答題要求：請(qǐng)?jiān)跈M線上填寫正確答案。1.細(xì)胞培養(yǎng)的基本條件包括合適的培養(yǎng)基、適宜的溫度、______、______等。2.細(xì)胞培養(yǎng)過程中，常見的污染類型有細(xì)菌污染、______污染、______污染。3.細(xì)胞傳代培養(yǎng)的步驟一般包括______、______、接種細(xì)胞等。4.細(xì)胞培養(yǎng)所用的器皿，如培養(yǎng)瓶、吸管等，在使用前需要進(jìn)行______處理，以去除可能存在的雜質(zhì)和微生物。5.細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，血清的質(zhì)量對(duì)細(xì)胞生長至關(guān)重要，優(yōu)質(zhì)血清應(yīng)具備______、______等特點(diǎn)。（二）簡答題（共20分）答題要求：簡要回答問題，條理清晰。1.簡述細(xì)胞培養(yǎng)過程中防止微生物污染的主要措施。2.細(xì)胞凍存和復(fù)蘇的基本原則是什么？3.如何選擇合適的細(xì)胞培養(yǎng)基？4.細(xì)胞培養(yǎng)過程中，如何進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)？（三）實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)題（共15分）答題要求：根據(jù)題目要求，設(shè)計(jì)合理的實(shí)驗(yàn)方案。請(qǐng)?jiān)O(shè)計(jì)一個(gè)實(shí)驗(yàn)，比較兩種不同品牌血清對(duì)細(xì)胞生長的影響。（四）材料分析題（共10分）材料：在細(xì)胞培養(yǎng)過程中，研究人員發(fā)現(xiàn)某細(xì)胞系在培養(yǎng)一段時(shí)間后，細(xì)胞生長速度明顯減慢，細(xì)胞形態(tài)也發(fā)生了改變。通過檢測發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基的pH值下降，乳酸含量升高。問題：請(qǐng)分析可能導(dǎo)致這些現(xiàn)象的原因，并提出相應(yīng)的解決措施。（五）論述題（共20分）答題要求：論述全面，觀點(diǎn)明確，論據(jù)充分。論述細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)在生物技術(shù)領(lǐng)域的重要性及應(yīng)用前景。答案：1.A2.D3.A4.B5.C6.A7.A8.A9.A10.C11.A12.A13.D14.C15.A16.A17.B18.A19.D20.B填空題答案：1.合適的氣體環(huán)境、無菌條件2.真菌污染、支原體污染3.消化細(xì)胞、離心收集細(xì)胞4.清洗和消毒5.無病毒、無支原體簡答題答案：1.主要措施包括嚴(yán)格的無菌操作，如在超凈工作臺(tái)內(nèi)進(jìn)行操作，操作人員穿戴無菌工作服、口罩、手套等；對(duì)培養(yǎng)基、血清等進(jìn)行過濾除菌處理；定期對(duì)培養(yǎng)環(huán)境、培養(yǎng)器皿等進(jìn)行消毒；避免交叉污染，不同細(xì)胞系的操作工具分開使用等。2.細(xì)胞凍存的基本原則是慢凍，采用梯度降溫的方式，使細(xì)胞內(nèi)的水分逐漸滲出，減少冰晶形成對(duì)細(xì)胞的損傷。細(xì)胞復(fù)蘇的基本原則是快融，將凍存細(xì)胞迅速放入37℃水浴中快速解凍，減少冰晶在細(xì)胞內(nèi)的停留時(shí)間。3.選擇合適的細(xì)胞培養(yǎng)基需要考慮細(xì)胞類型，不同細(xì)胞對(duì)營養(yǎng)成分的需求不同；培養(yǎng)基的成分，如氨基酸、維生素、無機(jī)鹽等的種類和含量；血清的質(zhì)量和添加量；培養(yǎng)基的pH值、滲透壓等是否適合細(xì)胞生長；還要考慮成本和來源的穩(wěn)定性等因素。4.細(xì)胞計(jì)數(shù)可采用血細(xì)胞計(jì)數(shù)板法。將細(xì)胞懸液稀釋到合適濃度，取一定體積的稀釋液加入血細(xì)胞計(jì)數(shù)板的計(jì)數(shù)室，在顯微鏡下計(jì)數(shù)四角和中央大方格內(nèi)的細(xì)胞數(shù)，按照公式計(jì)算細(xì)胞濃度。公式為：細(xì)胞濃度（個(gè)/mL）=（N/5）×10000×稀釋倍數(shù)，其中N為計(jì)數(shù)的細(xì)胞總數(shù)。實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)題答案：實(shí)驗(yàn)方案如下：1.準(zhǔn)備兩種不同品牌的血清，分別標(biāo)記為血清A和血清B。2.選擇同一細(xì)胞系，將細(xì)胞接種到多個(gè)培養(yǎng)瓶中，分為三組，每組若干個(gè)培養(yǎng)瓶。3.第一組培養(yǎng)瓶中加入血清A，第二組培養(yǎng)瓶中加入血清B，第三組培養(yǎng)瓶中加入不含血清的基礎(chǔ)培養(yǎng)基作為對(duì)照。4.在相同的培養(yǎng)條件下，如溫度、氣體環(huán)境等，培養(yǎng)細(xì)胞一段時(shí)間。5.定期觀察細(xì)胞的生長情況，如細(xì)胞形態(tài)、生長速度等，并記錄。6.培養(yǎng)結(jié)束后，通過細(xì)胞計(jì)數(shù)等方法比較三組細(xì)胞的生長情況，分析兩種血清對(duì)細(xì)胞生長的影響。材料分析題答案：可能原因：細(xì)胞代謝產(chǎn)生的酸性物質(zhì)導(dǎo)致培養(yǎng)基pH值下降，乳酸含量升高，進(jìn)而影響細(xì)胞生長環(huán)境，導(dǎo)致細(xì)胞生長速度減慢和形態(tài)改變。解決措施：更換新鮮的培養(yǎng)基，去除代謝產(chǎn)物；適當(dāng)增加換液頻率；檢查培養(yǎng)條件是否合適，如溫度、氣體環(huán)境等；檢測細(xì)胞是否受到污染，如有污染及時(shí)采取相應(yīng)措施。論述題答案：細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)在生物技術(shù)領(lǐng)域具有極其重要的地位。它是生物技術(shù)研究的基礎(chǔ)，為基因工程、細(xì)胞工程、蛋白質(zhì)工程等提供了關(guān)鍵的技術(shù)支持。通過細(xì)胞培養(yǎng)