納米金電化學(xué)傳感器在生物分子檢測中的應(yīng)用Applicationofnanometergoldelectrochemicalensorinbiomoleculardetection摘要：電化學(xué)生物傳感器是能感應(yīng)或響應(yīng)生物分子化學(xué)量，并將其轉(zhuǎn)換成電信號輸出的器件或裝置，廣泛應(yīng)用于環(huán)境監(jiān)測和醫(yī)藥學(xué)等領(lǐng)域的分析檢測。近年來，金納米粒子（AuNPs）因其具有靈活的可控尺寸，良好的生物相容性，強穩(wěn)定性，吸附性和電子傳輸性能，可催化能力較高等優(yōu)勢，而應(yīng)用于電化學(xué)生物傳感器中,極大地優(yōu)化了傳感器的性能。目前，AuNPs電化學(xué)傳感器已可用于精密檢測多種生物分子，如核苷酸、蛋白質(zhì)、糖、脂、酶活性和微生物等。本文主要對納米金的優(yōu)異性能及在電化學(xué)生物傳感器中的應(yīng)用進(jìn)展及其發(fā)展前景進(jìn)行綜述。關(guān)鍵詞：納米金；電化學(xué)；生物傳感器金納米粒子（goldnanoparticles,AuNPs）俗稱納米金，早在公元前5世紀(jì)已被發(fā)現(xiàn)，當(dāng)時稱為“膠體金”[1]。AuNPs在20世紀(jì)60年代首先作為特殊標(biāo)記物用于生化分析，在1971年AuNPs被引入電子顯微鏡免疫技術(shù)，作為探針進(jìn)行細(xì)胞表面和細(xì)胞內(nèi)多糖、蛋白質(zhì)、多肽、抗原、激素、核酸等生物大分子的精確定位[2]。近年來，AuNPs作為傳感器重要材料再次掀起了一股研究的熱潮，用于核苷酸、蛋白質(zhì)、糖、脂、酶活性和微生物的精密檢測。納米金電化學(xué)生物傳感器是由納米金生物材料作為敏感組件，電極作為轉(zhuǎn)換組件，以電勢、電流或電壓作為檢測信號的傳感器[3]其通過自身的敏感組件將我們無法直接感知的物理信息，生物信息，化學(xué)信息等通過接收電壓信號、電導(dǎo)信號、電流信號將檢測體系以離子種類或濃度變化等方式呈現(xiàn)出來，能直接檢測出生物大分子、理化參數(shù)等，在醫(yī)學(xué)臨床應(yīng)用領(lǐng)域、食品分析、生物檢測、環(huán)境監(jiān)測等方面具有很好的應(yīng)用前景。1.納米金的特征性質(zhì)1.1一般理化特性AuNPs尺寸一般在1~100nm之間，具有靈活可控的尺寸，良好的生物相容性，強穩(wěn)定性，吸附性和電子傳輸性能，高電子密度和催化能力等特點[4]。AuNPs官能團簡單，物理化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定，易于合成，具有很好的熒光性、導(dǎo)電性和催化性質(zhì)，當(dāng)其與各種生物大分子結(jié)合后，依然保留各自的生物活性，可實現(xiàn)對生物分子的重復(fù)標(biāo)記。AuNPs按尺度大小還能展現(xiàn)出不同的顏色特征，可用于生物分子的可視化檢測，而且AuNPs對溫度和溶液介電常數(shù)表現(xiàn)出敏感的反應(yīng)，檢出限量遠(yuǎn)低于染料分子，易于對所標(biāo)記的生物分子進(jìn)行檢測[5]。此外，AuNPs還具有制備簡便、分析快捷、易操作、對細(xì)胞無毒害等優(yōu)勢。1.2表面等離子共振特性表面等離子共振特性是AuNPs最重要的性質(zhì)之一，可產(chǎn)生“電漿共振”現(xiàn)象[1]。AuNPs被特定波長的光照射后，電子開始震蕩，偶極子產(chǎn)生。當(dāng)離子共振產(chǎn)生在520nm附近的可見光區(qū)域內(nèi)時，可利用紫外-可見光分光光度計進(jìn)行檢測觀察。1.3熒光特性熒光特性是由于聚合物穩(wěn)定的金納米粒子的光致發(fā)光和樹枝狀分子封裝產(chǎn)生。金納米粒子由于被芘基，甲硫基苯基，芴基和其他探針包裹后，共振能量發(fā)生遷移而具有熒光特性。其中樹枝狀納米簇的尺寸決定了熒光發(fā)射的最大值，粒子尺寸越大，熒光發(fā)射波長越長。這種特性使金納米在材料科學(xué)和生物光子學(xué)等多個領(lǐng)域有著優(yōu)良的應(yīng)用前景。[6]1.4電化學(xué)性質(zhì)納米金的電化學(xué)性質(zhì)主要體現(xiàn)在氧化還原活性方面。納米金的氧化還原型充放電行為可發(fā)生在其15種氧化態(tài)下。這種充放電行為的產(chǎn)生是由于納米金表面具有相當(dāng)于一個納米尺度電極的雙電層電容，隨包覆粒子烷基鏈長度的減少而增加。當(dāng)納米金粒子的粒徑減小到一定程度時，其靜電吸引能將大于其自身熱運動所產(chǎn)生的能量[7]，這時單電子將在烷基硫醇與電極或探針之間發(fā)生轉(zhuǎn)移，雙電子層便進(jìn)行了充放電，納米金粒子的電化學(xué)性質(zhì)與粒子中心核含有的金原子個數(shù)以及表面的烷基保護穩(wěn)定基團有緊密的相關(guān)性。根據(jù)納米金粒子的電化學(xué)性質(zhì)就可分析出納米金粒子的氧化還原態(tài)個數(shù)。1.5吸附性納米金粒子具有對其他集團的吸附性是因為其表面存在許多具有不飽和性質(zhì)的懸空部位，可與其他原子結(jié)合，導(dǎo)致納米金活性較高。該懸空部位的產(chǎn)生是由于其內(nèi)外原子所處的晶體場環(huán)境不同導(dǎo)致的。納米金容易吸附O2、CO、NO、N2O等其他基團并產(chǎn)生化學(xué)反應(yīng)。大部分吸附都為可逆反應(yīng)，并且其等溫吸附曲線在一定范圍內(nèi)完全符合Langmuir吸附方程。利用這種性質(zhì)可將納米金粒子吸附到負(fù)載載體上制備高活性納米金催化劑[8]。2.納米金的制備方法2.1.化學(xué)還原法：氯金酸還原法是在還原劑的作用下將水溶液中的金離子還原成金原子，將金原子聚集成微小的金核并吸附正負(fù)離子形成吸附層，在靜電力的作用下形成穩(wěn)定的膠體溶液。由于納米金一般是不穩(wěn)定的，具有易團聚的表面活性，制備過程中選擇加入表界面活性抑制劑和反絮凝劑來避免這種團聚。當(dāng)?shù)鞍踪|(zhì)為電中性時，即PH為8等于或稍偏于蛋白質(zhì)等電點時，蛋白質(zhì)分子表面張力最大。蛋白質(zhì)與納米金顆粒相互間的靜電作用較小，處于微弱的水化狀態(tài)，這時抑制劑可將蛋白質(zhì)吸附在表面，形成蛋白層，避免與其它納米金的接觸，使納米金處于穩(wěn)定狀態(tài).[9]2.2.晶種法：晶種法制備過程是要預(yù)先合成一種尺寸較小的金納米粒子，將其作為晶種，在晶種表面繼續(xù)還原氯金酸，并使粒子在一定生長溶液中繼續(xù)生長，通過調(diào)節(jié)晶種、生長溶液的比例控制產(chǎn)物不同的形貌和粒徑，制備出不同尺寸和比率的納米金顆粒，如：球形的納米顆粒、棒狀的納米顆粒、三角形的納米顆粒等。[10-11]2.3.相轉(zhuǎn)移法：相轉(zhuǎn)移法根據(jù)最原始的是Brust雙相反應(yīng)，用于10-20nm納米金顆粒的制備[12]在兩相或單相體系中，以TOAB為相轉(zhuǎn)移劑，以烷基硫醇為穩(wěn)定劑，NaBH4為還原劑，將氯金酸轉(zhuǎn)移到有機相中，制備出的納米金的顆粒大小范圍在1~8nm。這種方法制備出的納米金尺寸大小取決于硫醇/金鹽的比例和加入還原劑速度，比例越大，加入速度越快，制得的納米金尺寸就更小，單分散性更好?？筛鶕?jù)需要的納米金尺寸和性質(zhì)調(diào)整溶劑比例和加入速度。2.4聚合物保護法：聚合物保護法以含有聚乙二醇、硫醇或硫醚的聚合物為配體，NaBH4為還原劑，制備尺寸小于10nm的納米金，根據(jù)聚合物穩(wěn)定劑不同則納米金顆粒具有不同溶解性的這一特質(zhì)。硫醚或硫醇修飾的聚合物配體能直接合成尺寸小于5nm的具有高分散性的納米金，納米金顆粒的大小和分散性主要是由聚合物的結(jié)構(gòu)、濃度以及配體能與金屬結(jié)合基團的個數(shù)決定的。[13]3.納米金電化學(xué)傳感器的分類納米金電化學(xué)傳感器具有靈敏度高，時間短，穩(wěn)定性好等優(yōu)點，現(xiàn)已廣泛應(yīng)用于生物分子的檢測。納米金電化學(xué)傳感器是基于納米金的電子傳輸性質(zhì)制備的，使之與其他材料相結(jié)合，增加其導(dǎo)電性，以電位測定法和電流分析的方式變換電信號，從而制備出更優(yōu)良的傳感器，實現(xiàn)對生物分子的檢測。3.1有機化合物類3.1.1高分子有機化合物類高分子有機化合物在納米金電化學(xué)傳感器中應(yīng)用廣泛，。舉例如下：納米金電化學(xué)傳感器在多藥耐藥MDR1基因的檢測上就是用石墨烯/碳納米管復(fù)合物為材料修飾玻碳電極構(gòu)建的[14]；在納米導(dǎo)電聚毗咯薄膜層對納米金進(jìn)行修飾，形成新的電化學(xué)DNA生物傳感器[15]；在電化學(xué)發(fā)光免疫特異性檢測蛋白質(zhì)時將納米金封裝在樹枝聚合物中通過共價固定魯米諾[16]和前列腺特異性抗體作為信號分子；電化學(xué)傳感器檢測多巴胺時，將聚（3,4-乙烯二氧噻吩）薄膜在鉑電極表面與納米金在靜電作用下結(jié)合[17]；納米金修飾有多壁碳納米管絲網(wǎng)印刷電極，制成用來檢測富組氨酸蛋白Ⅱ的傳感器；用納米金修飾單壁碳納米管，利用電化學(xué)阻抗法構(gòu)建金電極通過二茂鐵抑肽素檢測摩爾蛋白酶等傳感器。3.1.2其他有機物類其他有機物也可與納米金結(jié)合形成電化學(xué)傳感器。其中殼聚糖的研究在近年來已成為熱點，殼聚糖[16]可通過對氯金酸進(jìn)行還原來完成在納米金粒子上的原位合成，利用原位合成技術(shù)構(gòu)建DNA生物傳感器，用來檢測慢性粒細(xì)胞白血病BCR/ABL融合基因。殼聚糖凝膠還可以與納米金、酶標(biāo)二抗混合溶液在電極表面形成納米敏感膜，從而構(gòu)建酶免疫傳感器，對結(jié)核桿菌進(jìn)行檢測。此外還有用納米金修飾雙層類脂膜，再將雌激素固定在脂膜中來構(gòu)建電化學(xué)傳感器，檢測雌激素類似物質(zhì)。這種能形成電化學(xué)傳感器的有機物還有許多，比如納米金與氨基結(jié)合的材料在電極表面能夠自動分散成膜，形成檢測環(huán)境遺傳毒性污染物的電化學(xué)傳感器[19]。；納米金在谷胱甘肽的保護下構(gòu)建的可用于檢測白介素的免疫傳感器，；納米金在3-巰基丙酸甲酯改變性狀，通過測量電壓的變化來傳感乙酸濃度，這種傳感器靈敏度可達(dá)到10-6量級；除此之外還有利用納米金的化學(xué)吸附性，與硫醇溶膠形成凝膠網(wǎng)狀，檢測肝炎抗原。3.2無機化合物類無機化合物與納米金形成電化學(xué)傳感器是現(xiàn)代傳感器的研究熱點，在生物學(xué)檢測中也具有重要研究意義，其中金屬氧化物與納米金組合應(yīng)用較為廣泛，例如用于定量檢測有機磷的二氧化鋯[20]納米粒子與納米金粒子在玻碳電極上沉積制成的電化學(xué)傳感器，；氧化鐵納米粒子，納米金，碳納米管雜化物構(gòu)建的實現(xiàn)甲胎蛋白的檢測的電化學(xué)傳感器；通過在含有二硫化鉬的石墨電極上用恒定電法沉積納米金構(gòu)建能夠檢測多菌靈的電化學(xué)傳感器。3.3其它除化合物外，納米金還可與其他材料形成電化學(xué)傳感器，包括磁珠，金銀殼材料，多空金電極等。4.納米金電化學(xué)傳感器檢測生物分子納米金具有操作簡單、生態(tài)環(huán)保、靈敏度高等性質(zhì)。其顏色也因等離子共振(SurfacePlasmonResonance)[7]受其聚集程度和溶液顏色影響，以其平均半徑為標(biāo)準(zhǔn)，納米金粒子間距減小呈凝聚狀態(tài)時，等離子共振體將發(fā)生藍(lán)移，間距越小越趨向于藍(lán)色，當(dāng)納米金顆粒間距增加呈分散狀態(tài)時，宏觀顏色趨近于紅色，這就是納米金的光學(xué)性質(zhì)，納米金顆粒除光學(xué)特征外還具有良好的生物相容性，能夠結(jié)合特定的抗原、蛋白質(zhì)、抗體等[21]。除此之外，與親核試劑發(fā)生特異性吸附、與-NH2產(chǎn)生非共價吸附、與巰基之間產(chǎn)生共價鍵等也是納米金所具有的特殊化學(xué)性質(zhì)。我們根據(jù)電化學(xué)分析法的操作簡單，價格經(jīng)濟，可快速、靈敏分析元素等優(yōu)勢特征建立了一種新型檢測技術(shù)方法—電化學(xué)生物傳感器，憑借檢測速度快，操作簡便，靈敏度高，較好的熱穩(wěn)定性和化學(xué)穩(wěn)定性、成本低可聯(lián)系動態(tài)監(jiān)測等優(yōu)勢廣泛應(yīng)用在生物傳感領(lǐng)域。隨著電化學(xué)傳感器功能的不斷完善與發(fā)展，人們發(fā)現(xiàn)現(xiàn)代納米科學(xué)技術(shù)在電化學(xué)傳感器領(lǐng)域具有很大的應(yīng)用發(fā)展空間，其中納米金結(jié)構(gòu)的各種優(yōu)勢被廣泛應(yīng)用于電化學(xué)生物傳感器中，從而達(dá)到了檢測目標(biāo)物的高效性，科學(xué)性，合理性。下面是各種電化學(xué)傳感器與納米金結(jié)合后檢測生物分子的實例。4.1比色法檢測核苷酸 比色法以被烷琉基寡核苷酸修飾的納米金顆粒作為報告集團，與待測的靶片段進(jìn)行雜交，使寡聚核苷酸形成雙螺旋結(jié)構(gòu)。這種結(jié)構(gòu)加熱時會發(fā)生解離，伴有顏色變化。發(fā)生變形時溶液顏色會恢復(fù)至雜交前顏色。而靶片段與探針變性后解離所需的能量要求很高，所以所需的溶解溫度較高，根據(jù)熔解度和顏色變化，就可以區(qū)分不完全匹配的靶片段。納米金電化學(xué)生物傳感器就是利用這種性質(zhì)將金顆粒與特定抗體連接實現(xiàn)對較大抗原的檢測。[22]如將與特定抗體連接的金溶膠妊娠試劑加入孕婦尿液中，呈顯著紅色即為妊娠狀態(tài)，無顏色變化則是未妊娠。0.5克金就可以實現(xiàn)對一萬人次的測定，這種方法判斷結(jié)果清晰可靠，操作簡單，不需要大型儀器的檢測使用，直接從溶液顏色和熔解溫度即可實現(xiàn)對核苷酸的檢測，并完克服了普通檢測方法中放射性標(biāo)記物及污染情況存在等問題。但是這種應(yīng)用納米金顆粒指示基團的分析方法還處于起步階段。4.2熒光淬滅法及可視化檢測蛋白質(zhì)蛋白質(zhì)檢測在臨床應(yīng)用上具有重大意義，近年來人們不斷探索納米金在高效檢測蛋白質(zhì)方面的應(yīng)用前景。研究發(fā)現(xiàn)納米金熒光淬滅測定抗原的方法可以檢測病人的血清，并能夠成功與傳統(tǒng)放射免疫分析法的結(jié)果對比相吻合，納米金的共散射效應(yīng)也可以檢測載脂蛋白A和載脂蛋白B。用抗體和巰基寡核苷酸修飾的納米金作探針，通過銀染反應(yīng)可檢測蛋白質(zhì)含量，將具有熒光基團修飾的寡核苷酸鏈連接到納米金表面上也能夠通過熒光法達(dá)到測定蛋白質(zhì)含量的作用，納米探針可進(jìn)行多目標(biāo)檢測，為實現(xiàn)腫瘤標(biāo)志物聯(lián)合檢測奠定了基礎(chǔ)?？衫媒鸺{米粒子免疫聚集時分散度和消光系數(shù)的變化來檢測人IｇＧ[23]。納米金可視化檢測凝血酶利用的是納米金尺寸變化可引起溶液顏色的變化這一特征，首先用纖維蛋白原修飾納米金顆粒和微孔板表面，向微孔板里加入納米金顆粒和待測物質(zhì)，利用纖維蛋白與凝血酶的相互作用將納米金顆粒固定在微孔板表面，在氯金酸(HAuCl4)-羥胺(NH2OH)溶液的存在下將Au3+還原成更大的納米金顆粒。使溶液顏色發(fā)生改變，從而實現(xiàn)了可視化檢測凝血酶。4.3耦聯(lián)放大信號法檢測糖納米金電化學(xué)傳感器實現(xiàn)了對糖連續(xù)性、重復(fù)性的檢測，應(yīng)用金納米顆粒與待測糖相耦聯(lián)來放大檢測信號，并與人工合成的多價糖受體一苯硼酸聚合物（boropolymer）及琉基乙胺修飾電極構(gòu)成了糖傳感界面。通過糖與金納米顆粒復(fù)合物及苯硼酸聚合物,（boropolymer）之間的結(jié)合常數(shù)大小達(dá)到對糖檢測的作用。依次可檢測出糖的順序為：麥芽糖＞半乳糖＞甘露糖＞葡萄糖＞海藻糖＞乳糖。[24]4.4薄膜形成法檢測脂有機磷農(nóng)藥在世界領(lǐng)域被廣泛使用，但其生物累積性和副作用會危害人體健康并對生態(tài)環(huán)境產(chǎn)生惡劣影響，金納米粒子作為電化學(xué)生物載體與乙酰膽堿酯酶在靜電力的作用下被固定在玻碳電極上，起生物傳感作用的就是粒子表面形成的均勻穩(wěn)定的超薄多層分子體系膜。[25]納米金電化學(xué)生物傳感器可快速靈敏可靠的實現(xiàn)對有機磷農(nóng)藥的檢測。該傳感器具有良好電催化特性、生物相容性。4.5多元法檢測小分子有機物納米金電化學(xué)生物傳感器已經(jīng)實現(xiàn)對小分子有機物的多樣性檢測，其中納米金電化學(xué)生物傳感器檢測多巴胺的研究成果頗豐，例如利用納米金結(jié)合二茂鐵氧化還原信號制備的功能化金納米粒子傳感器，有效提高了對多巴胺檢測的靈敏度，檢測限度也達(dá)到了5.7×10-10mol/L(3σ)。[26]利用納米金對多巴胺適體（DBA）的固定作用制成的鉑碳電極（GCE）-納米金（nano-Au）—HT—含硫堇的納米復(fù)合材料夾心型適體傳感器。創(chuàng)造了多巴胺的最低檢出限0.33pmol/L(S/N=3).[27]此外利用納米金粒子對ECL信號的放大作用制備的電致化學(xué)發(fā)光酚傳感器根據(jù)ECL信號的差值實現(xiàn)對多巴胺的定量分析。科學(xué)的實現(xiàn)對多巴胺的定量檢測。[28]納米金間接壓電免疫傳感器通過以納米金為二抗的標(biāo)記物放大響應(yīng)信號，優(yōu)化了對小分子有機物的檢測，其再生性較好，重復(fù)使用率高，實現(xiàn)了高通量實時測定，在檢測生長素類植物激素中具有良好的發(fā)展前景；[29]4.6納米探針法檢測微生物致病微生物是人體健康和食品安全的重要隱患之一[30]納米金電化學(xué)生物傳感器已實現(xiàn)對各種微生物的特異性檢測。例如;以［Fe(CN6)］3－/4－為探針，用納米金固定人腸道病毒EV71型抗體，來檢測人血清蛋白中的EV71病毒的探針法[31]；以半胱氨酸和納米金自組裝單層為基礎(chǔ)，制備出用來檢測登革熱病毒的電化學(xué)免疫傳感器[32]；通過果膠納米金復(fù)合材料（CCLP-AuNPs）固定單克隆抗體，使免疫復(fù)合物與抗兔IgGHRP結(jié)合，利用阻抗法和伏安法檢測銅綠假單胞菌等。[33]5.展望：雖然納米金電化學(xué)生物傳感器的研究已經(jīng)取得了突破性的進(jìn)展，但仍存在著許多問題，首先其對尿酸的雜交檢測特異性不高，在檢測生物硫醇分子中不能細(xì)致區(qū)分出谷胱甘肽、半胱氨酸和同型半胱氨酸，其次傳感器中仍存在復(fù)雜的探針設(shè)計，經(jīng)濟方面消耗很大，對外界環(huán)境因素的干擾不具備穩(wěn)定性等問題。希望通過不斷的科學(xué)探索與應(yīng)用后，納米金電化學(xué)生物傳感器能克服這些問題并最大限度的將納米纖維的優(yōu)勢特征開發(fā)利用，我們也將進(jìn)一步對納米金進(jìn)行研究探索，使納米金有望能夠在電化學(xué)生物傳感器領(lǐng)域開發(fā)出具有獨特性的新物質(zhì)，實現(xiàn)穩(wěn)定方便的固定納米材料優(yōu)質(zhì)探針的生產(chǎn)，為生物模擬酶傳感器的技術(shù)發(fā)展帶來新的上升空間作者簡介第一作者：孫佳琦（1997—03），女（漢族），在讀本科生，吉林醫(yī)藥學(xué)院生物制藥專業(yè)通訊作者：王程（1979—10），男（漢族），博士，現(xiàn)就職于吉林醫(yī)藥學(xué)院，講師，研究方向為生物科學(xué)類參考文獻(xiàn)[1]KellyKL,CoronadoE,LinLZ,etal.TheOpticalPropertiesofMetalNanoparticles:TheInfluenceofSize,Shape,andDielectricEnvironment.Cheminform,2003,34(16):668-677[2]喬飛燕,張浩力,李富榮.金納米粒子在生物醫(yī)學(xué)工程中的應(yīng)用[J].國際生物醫(yī)學(xué)工程雜志,2006(06):33[3]鐘桐生,劉國東,俞汝勤等.電化學(xué)免疫傳感器研究進(jìn)展[J].化學(xué)傳感器,2002,1(22):8-14.[4]ANDB,ELSAYEDM.Preparationandgrowthmechanismofgoldnanorods(NRs)usingseed-mediatedgrowthmethod[J].ChemistryofMaterials,2003,15[5]于黎娟,禚林海,唐波.納米金光學(xué)探針的生物分析應(yīng)用新進(jìn)展[J].分析科學(xué)學(xué)報,2010,26(06):719-723.3-336+368.[6]劉曉婧.金屬離子/納米粒子耦合多肽自組裝構(gòu)筑超分子模擬酶[D].天津大學(xué),2016.[7]袁帥,劉崢,馬肅.納米金粒子的理化性質(zhì)、制備及修飾技術(shù)和應(yīng)用研究現(xiàn)狀及進(jìn)展[J].材料導(dǎo)報,2012,26(09):52-58.[8]文莉.金團簇和納米粒子的合成、表征及應(yīng)用[D].廈門大學(xué),2008.[9]鐘桐生,劉國東,俞汝勤等.電化學(xué)免疫傳感器研究進(jìn)展[J].化學(xué)傳感器,2002,1(22):8-14.[10]LibingZhang,TaoLi,BinglingLi,JingLiandErkangWang,Carbonnanotube–DNAhybrid?uorescentsensorforsensitiveandselectivedetectionofmercury(II)ion[J].Chem.Commun.,2010,46,1476–1478.[11]ZhuZQ,SuYY,LiJ,etal.HighlySensitiveElectrochemicalSensorforMercury(II)onsbyUsingaMercury-SpecificOligonucleotideProbeandGoldNanoparticle-BasedAmplification[J].Anal.Chem.,2060–7666.[12]ShaoN,JinJY,CheungSM,YangRH,ChanWH,MoT,Spiropyran-BasedEnsembleforVisualRecognitionandQuantificationofCysteineandHomocysteineatPhysiologicalLevels[J].Angew.Chem.Int.Ed.2006,45(30):4944-4948[13]WangZ,TanB,HussainI,etal.Designofpolymericstabilizersforsize-controlledsynthesisofmonodispersegoldnanoparticlesinwater[J].Langmuir,2007,23(2):885-95.[14]孫藝銘.金/碳納米復(fù)合材料生物傳感器檢測多藥耐藥基因MDR1及其表達(dá)蛋白ABCB1的實驗研究[D].[15]嚴(yán)貞貞.納米金/聚吡咯在DNA電化學(xué)傳感器中的應(yīng)用[D].南京理工大學(xué),2009.[16]葛慎光.新型功能納米材料在電化學(xué)生物傳感器中的研究與應(yīng)用[D].山東大學(xué),2013.[17]劉珂珂,劉清,褚艷紅,etal.一種檢測多巴胺的電化學(xué)生物傳感器及其制備方法:.[18]李身鋒.納米金原位合成生物傳感器的構(gòu)建及其對慢性粒細(xì)胞白血病BCR/ABL融合基因檢測的研究[D].重慶醫(yī)科大學(xué),2012.[19]夏瑋.納米金電化學(xué)生物傳感技術(shù)研究[D].華中科技大學(xué),2011.[20]劉淑娟,鐘興剛,李彥,etal.一種基于納米粒子吸附的有機磷電化學(xué)生物傳感器:.[21]Tsai,C.S.Y.,T.B