獸醫(yī)微生物學(xué)作為獸醫(yī)學(xué)與微生物學(xué)的交叉學(xué)科，聚焦動物病原微生物的形態(tài)、生理、致病機(jī)制及檢測防控，是動物疫病診斷、防控及公共衛(wèi)生安全的核心支撐。本文系統(tǒng)梳理核心知識模塊，并配套精選題庫，助力理論學(xué)習(xí)與實(shí)踐應(yīng)用。一、重點(diǎn)知識梳理（一）細(xì)菌學(xué)核心要點(diǎn)細(xì)菌是動物疫病的重要病原，其分類、形態(tài)與致病特性是診斷的關(guān)鍵：形態(tài)與染色：革蘭氏陽性菌（如葡萄球菌、鏈球菌）細(xì)胞壁肽聚糖層厚，染色呈紫色；革蘭氏陰性菌（大腸桿菌、沙門氏菌、巴氏桿菌）含外膜，染色呈紅色。形態(tài)包括球形（葡萄球菌）、桿狀（大腸桿菌）、螺旋形（螺桿菌）。重要病原菌特性：大腸桿菌：腸桿菌科革蘭氏陰性短桿菌，通過菌毛黏附、內(nèi)毒素致病，致幼畜腹瀉、敗血癥（如仔豬黃白?。罁?jù)O、K、H抗原分型。沙門氏菌：革蘭氏陰性、周生鞭毛，致動物副傷寒（如雞白?。?、食物中毒，血清型超2000種，內(nèi)毒素與侵襲力是主要致病因子。金黃色葡萄球菌：革蘭氏陽性球菌（葡萄串狀排列），產(chǎn)凝固酶、腸毒素，致化膿感染（如奶牛乳腺炎）、毒素性疾?。ㄈ缡澄镏卸荆?，耐藥株（MRSA）需重點(diǎn)關(guān)注。多殺性巴氏桿菌：革蘭氏陰性球桿菌，兩極染色（瑞氏染色更清晰），致禽霍亂、豬肺疫，莢膜抗吞噬，內(nèi)毒素引發(fā)敗血癥。（二）病毒學(xué)核心要點(diǎn)病毒無細(xì)胞結(jié)構(gòu)，依賴宿主細(xì)胞復(fù)制，其核酸類型與致病特點(diǎn)決定防控策略：結(jié)構(gòu)與分類：核心為核酸（DNA/RNA），衣殼（蛋白）保護(hù)核酸，部分病毒（如流感病毒）含囊膜。按核酸分：DNA病毒：如豬偽狂犬病病毒（皰疹病毒科，雙鏈DNA），致仔豬神經(jīng)癥狀、妊娠母豬流產(chǎn)；鴨瘟病毒（皰疹病毒），致鴨類出血性疫病。RNA病毒：口蹄疫病毒（微RNA病毒科，單股正鏈RNA），致偶蹄動物口蹄水皰，抗原易變異；豬瘟病毒（黃病毒科，單股正鏈RNA），致豬全身性出血、免疫抑制；禽流感病毒（正黏病毒科，分節(jié)段單股負(fù)鏈RNA），H5、H7亞型高致??；新城疫病毒（副黏病毒科，單股負(fù)鏈RNA），致禽急性敗血。致病特點(diǎn)：細(xì)胞水平（殺細(xì)胞效應(yīng)、包涵體形成、細(xì)胞轉(zhuǎn)化）；機(jī)體水平（免疫抑制、持續(xù)感染、垂直傳播，如豬瘟病毒致免疫耐受）。（三）真菌學(xué)核心要點(diǎn)真菌多為條件致病，淺部與深部感染需區(qū)分：致病類型：淺部真菌（如犬小孢子菌、石膏樣小孢子菌）寄生于角質(zhì)層，致動物皮膚癬?。ò_斑、脫毛）；深部真菌（如白色念珠菌）條件致病，致黏膜（口腔、腸道）、內(nèi)臟感染，酵母樣菌落+假菌絲為特征。致病機(jī)制：菌絲/孢子侵襲組織，分泌蛋白酶、脂酶破壞宿主細(xì)胞；細(xì)胞壁成分（如甘露聚糖）抑制吞噬，逃避免疫。（四）微生物致病機(jī)制與宿主免疫病原與宿主的相互作用決定疫病發(fā)展：致病機(jī)制：侵襲力：黏附（菌毛、血凝素）、定植（生物膜）、侵襲（透明質(zhì)酸酶溶解組織）。毒素：外毒素（蛋白質(zhì)，如肉毒毒素阻斷神經(jīng)傳導(dǎo)）；內(nèi)毒素（革蘭氏陰性菌脂多糖，致發(fā)熱、休克）。宿主免疫：固有免疫：皮膚黏膜屏障、吞噬細(xì)胞（中性粒細(xì)胞吞噬細(xì)菌）、補(bǔ)體（溶菌）、干擾素（抗病毒）。適應(yīng)性免疫：體液免疫（抗體中和毒素、阻斷黏附）；細(xì)胞免疫（CD8+CTL殺傷感染細(xì)胞，Th1介導(dǎo)遲發(fā)型超敏反應(yīng)）。（五）微生物檢測技術(shù)精準(zhǔn)檢測是疫病防控的前提：傳統(tǒng)技術(shù)：形態(tài)學(xué)：革蘭氏染色（區(qū)分革蘭氏陰/陽性菌）、瑞氏染色（觀察巴氏桿菌兩極染色）、負(fù)染（電鏡觀察病毒形態(tài)）。分離培養(yǎng)：細(xì)菌用血瓊脂（觀察溶血）、麥康凱瓊脂（篩選革蘭氏陰性菌）；病毒用雞胚（流感病毒）、細(xì)胞培養(yǎng)（Vero細(xì)胞培養(yǎng)狂犬病毒）?，F(xiàn)代技術(shù)：分子生物學(xué)：PCR（熒光定量PCR檢測豬瘟病毒RNA）、基因芯片（多病原篩查）、測序（分析病毒變異）。免疫學(xué)：ELISA（檢測口蹄疫抗體）、膠體金試紙（快速檢測豬瘟抗原）、免疫熒光（細(xì)胞內(nèi)病毒定位）。二、精選題庫及解析（一）選擇題（每題1分，共10題）1.下列屬于革蘭氏陽性菌的是（）A.大腸桿菌B.沙門氏菌C.金黃色葡萄球菌D.巴氏桿菌答案：C解析：金黃色葡萄球菌細(xì)胞壁肽聚糖層厚，無外膜，革蘭氏染色陽性；其余為革蘭氏陰性菌。2.口蹄疫病毒的核酸類型是（）A.雙鏈DNAB.單股正鏈RNAC.單股負(fù)鏈RNAD.雙鏈RNA答案：B解析：口蹄疫病毒屬微RNA病毒科，核酸為單股正鏈RNA，可直接作為mRNA翻譯蛋白。3.致動物皮膚癬病的真菌多屬于（）A.深部真菌B.淺部真菌C.酵母樣真菌D.條件致病真菌答案：B解析：淺部真菌（如犬小孢子菌）寄生于角質(zhì)層，致皮膚癬病；深部真菌多侵犯內(nèi)臟。4.多殺性巴氏桿菌的典型染色特征是（）A.革蘭氏陽性B.兩極染色C.抗酸染色陽性D.芽孢染色陽性答案：B解析：多殺性巴氏桿菌為革蘭氏陰性球桿菌，瑞氏染色時兩端（兩極）著色深，呈“兩極染色”。5.豬瘟病毒的致病特點(diǎn)不包括（）A.免疫抑制B.垂直傳播C.殺細(xì)胞效應(yīng)D.持續(xù)感染答案：C解析：豬瘟病毒致細(xì)胞免疫抑制、持續(xù)感染，可垂直傳播；殺細(xì)胞效應(yīng)多見于流感病毒等，豬瘟病毒以免疫抑制為主。6.檢測細(xì)菌內(nèi)毒素常用的方法是（）A.凝集試驗(yàn)B.鱟試驗(yàn)C.中和試驗(yàn)D.補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)答案：B解析：鱟試驗(yàn)利用鱟試劑與內(nèi)毒素（脂多糖）的特異性反應(yīng)，快速檢測革蘭氏陰性菌內(nèi)毒素。7.白色念珠菌的菌落特征是（）A.絲狀菌落B.酵母樣菌落C.油煎蛋樣菌落D.黏液型菌落答案：B解析：白色念珠菌為條件致病真菌，在沙保弱培養(yǎng)基上形成酵母樣菌落，鏡下可見假菌絲。8.禽流感病毒的高致病亞型多為（）A.H1、N1B.H3、N2C.H5、H7D.H9、N2答案：C解析：禽流感病毒H5、H7亞型易變異出高致病株，HA蛋白裂解位點(diǎn)含多個堿性氨基酸，可在全身組織復(fù)制。9.細(xì)菌外毒素的特點(diǎn)是（）A.脂多糖成分B.耐熱C.抗原性弱D.可制成類毒素答案：D解析：外毒素為蛋白質(zhì)，抗原性強(qiáng)，不耐熱，可經(jīng)甲醛脫毒制成類毒素（如破傷風(fēng)類毒素）。10.檢測病毒抗原最常用的免疫學(xué)方法是（）A.ELISAB.瓊脂擴(kuò)散C.血凝試驗(yàn)D.中和試驗(yàn)答案：A解析：ELISA（酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)）靈敏度高、特異性強(qiáng)，廣泛用于病毒抗原/抗體檢測（如口蹄疫抗體檢測）。（二）簡答題（每題5分，共5題）1.簡述大腸桿菌的致病機(jī)制及主要致病類型。答案：致病機(jī)制：依賴毒力因子①菌毛（如K88菌毛黏附腸上皮，致仔豬腹瀉）；②內(nèi)毒素（革蘭氏陰性菌細(xì)胞壁成分，致發(fā)熱、休克）；③腸毒素（耐熱/不耐熱腸毒素，致腸黏膜分泌亢進(jìn)、腹瀉）；④志賀樣毒素（致出血性腸炎）。致病類型：①腸道感染（幼畜腹瀉、旅行者腹瀉）；②腸道外感染（敗血癥、尿路感染、乳腺炎）。2.分析禽流感病毒高致病性的分子基礎(chǔ)。答案：高致病性與HA（血凝素）和NA（神經(jīng)氨酸酶）的氨基酸序列相關(guān)：①HA蛋白裂解位點(diǎn)含多個堿性氨基酸（如精氨酸），可被多種組織蛋白酶裂解，使病毒在全身組織復(fù)制；②HA受體結(jié)合特性（結(jié)合α-2,3和α-2,6唾液酸受體）決定宿主范圍，H5、H7亞型易變異出高致病株。3.簡述固有免疫與適應(yīng)性免疫在抗微生物感染中的協(xié)同作用。答案：固有免疫啟動防御：①皮膚黏膜屏障阻擋病原；②吞噬細(xì)胞吞噬、殺傷病原，分泌細(xì)胞因子（如IL-12）激活適應(yīng)性免疫；③補(bǔ)體溶菌、調(diào)理吞噬。適應(yīng)性免疫精準(zhǔn)清除：①體液免疫（抗體中和毒素、阻斷黏附，激活補(bǔ)體）；②細(xì)胞免疫（CD8+CTL殺傷感染細(xì)胞，Th1介導(dǎo)遲發(fā)型超敏反應(yīng)，輔助巨噬細(xì)胞活化）。兩者通過細(xì)胞因子、抗原呈遞協(xié)同，形成完整免疫應(yīng)答。4.比較細(xì)菌外毒素與內(nèi)毒素的差異。答案：特性外毒素內(nèi)毒素--------------------------------------------------------來源革蘭氏陽性菌（及部分陰性菌）革蘭氏陰性菌成分蛋白質(zhì)脂多糖（LPS）毒性強(qiáng)（特異性致病，如肉毒中毒）弱（全身性反應(yīng)，如發(fā)熱、休克）耐熱性不耐熱（60~80℃破壞）耐熱（160℃2~4h破壞）抗原性強(qiáng)（可制成類毒素）弱（抗原性差）5.列舉3種獸醫(yī)臨床常用的病毒檢測技術(shù)，并說明應(yīng)用場景。答案：①熒光定量PCR：檢測病毒核酸（如豬瘟病毒RNA、偽狂犬病毒DNA），用于早期診斷、病原定量。②ELISA：檢測病毒抗原（如禽流感病毒抗原）或抗體（如口蹄疫抗體），用于群體篩查、免疫效果評估。③膠體金試紙：快速檢測病毒抗原（如豬瘟抗原），用于基層現(xiàn)場快速診斷。（三）案例分析題（每題10分，共2題）1.案例：某規(guī)模化豬場突發(fā)疫情，仔豬高熱、嘔吐、腹瀉，部分出現(xiàn)神經(jīng)癥狀；妊娠母豬流產(chǎn)，死胎率高。剖檢見淋巴結(jié)腫大、出血，腎臟點(diǎn)狀出血，脾臟邊緣梗死。問題：推測可能的病原，設(shè)計(jì)檢測方案。分析：病原推測：豬瘟病毒（或豬偽狂犬病病毒，需鑒別）。豬瘟典型病變?yōu)槠⑴K邊緣梗死、腎臟點(diǎn)狀出血；豬偽狂犬病仔豬神經(jīng)癥狀更突出。檢測方案：①核酸檢測：采集病豬血液、脾臟，熒光定量PCR檢測豬瘟病毒RNA（或偽狂犬病毒DNA）。②抗原檢測：免疫熒光法檢測組織切片中病毒抗原；或膠體金試紙檢測血液中抗原。③抗體檢測：ELISA檢測豬瘟抗體（未免疫豬抗體陽性提示感染；免疫豬抗體水平低提示免疫失敗或野毒感染）。④分離鑒定：病料接種PK-15細(xì)胞（豬瘟）或Vero細(xì)胞（偽狂犬），觀察細(xì)胞病變，結(jié)合中和試驗(yàn)鑒定。2.案例：某養(yǎng)鴨場鴨只精神沉郁、流淚、頭頸部腫脹，排綠色稀便，剖檢見食道黏膜出血、壞死，肝臟有壞死灶。問題：判斷病原，說明診斷依據(jù)與防控措施。分析：病原：鴨瘟病毒（鴨病毒性腸炎）。診斷依據(jù)：臨床癥狀（頭腫、流淚、綠色稀便）；剖檢病變（食道黏膜出血壞死、肝