2025年腸桿菌科庫及答案1.腸桿菌科細(xì)菌的基本生物學(xué)特性包括哪些核心要點(diǎn)？腸桿菌科細(xì)菌均為革蘭陰性桿菌，無芽胞，多數(shù)菌株具有周鞭毛（如大腸埃希菌），部分菌株有莢膜（如肺炎克雷伯菌）或菌毛；代謝類型為兼性厭氧，氧化酶試驗(yàn)陰性（與弧菌科、非發(fā)酵菌鑒別關(guān)鍵）；能發(fā)酵葡萄糖產(chǎn)酸或產(chǎn)酸產(chǎn)氣（傷寒沙門菌例外，僅產(chǎn)酸），觸酶陽性，還原硝酸鹽為亞硝酸鹽；DNAG+C含量為38%-60%，種屬間通過16SrRNA基因序列差異區(qū)分。2.埃希菌屬與克雷伯菌屬的主要鑒別依據(jù)是什么？鑒別要點(diǎn)包括：①動(dòng)力試驗(yàn)：埃希菌屬（如大腸埃希菌）有周鞭毛，36℃培養(yǎng)動(dòng)力陽性；克雷伯菌屬（如肺炎克雷伯菌）無鞭毛，動(dòng)力陰性。②脲酶試驗(yàn)：克雷伯菌屬脲酶陽性（4小時(shí)內(nèi)顯色），埃希菌屬脲酶陰性（或延遲陽性）。③黏液型菌落：克雷伯菌屬在血平板上常形成大而黏稠、易拉絲的菌落，埃希菌屬菌落較濕潤但無拉絲現(xiàn)象。④V-P試驗(yàn)：克雷伯菌屬V-P試驗(yàn)陽性（產(chǎn)乙酰甲基甲醇），埃希菌屬通常陰性。3.腸產(chǎn)毒性大腸埃希菌（ETEC）的致病機(jī)制分為哪幾個(gè)階段？ETEC致病分三階段：①黏附定植：通過菌毛黏附素（如CFA/I、CFA/II）與小腸黏膜上皮細(xì)胞表面受體（如GM1神經(jīng)節(jié)苷脂）結(jié)合，避免被腸蠕動(dòng)清除。②毒素分泌：定植后產(chǎn)生熱不穩(wěn)定毒素（LT）和/或熱穩(wěn)定毒素（ST）。LT為A-B亞單位毒素，A亞單位激活腸黏膜細(xì)胞腺苷酸環(huán)化酶，使cAMP水平升高；ST通過激活鳥苷酸環(huán)化酶增加cGMP水平。③液體分泌亢進(jìn)：cAMP/cGMP升高導(dǎo)致腸黏膜細(xì)胞主動(dòng)分泌Cl?、HCO??并抑制Na?吸收，最終引起水樣腹瀉。4.2025年全球腸桿菌科細(xì)菌耐藥監(jiān)測(cè)顯示，產(chǎn)ESBL菌株的主要流行基因型有哪些變化？2025年監(jiān)測(cè)數(shù)據(jù)顯示，CTX-M型ESBL（尤其是CTX-M-15、CTX-M-14）仍為全球優(yōu)勢(shì)基因型（占比約78%），在亞洲和歐洲部分地區(qū)，CTX-M-27型因質(zhì)粒傳播加速，占比升至12%；SHV型（如SHV-12）在拉丁美洲流行率維持在15%-20%；TEM型（如TEM-52）因克拉維酸抑制效果下降，在北美部分社區(qū)獲得性感染中檢出率回升至8%。值得注意的是，新型ESBL如OXA-172（兼具部分碳青霉烯酶活性）在東南亞醫(yī)院環(huán)境中出現(xiàn)局部暴發(fā)。5.實(shí)驗(yàn)室鑒定腸桿菌科細(xì)菌時(shí)，常規(guī)生化反應(yīng)組合應(yīng)包含哪些項(xiàng)目？常規(guī)生化反應(yīng)需覆蓋：①糖發(fā)酵試驗(yàn)：葡萄糖（產(chǎn)酸/產(chǎn)氣）、乳糖（區(qū)分致病菌與非致病菌，如沙門菌屬不發(fā)酵乳糖）、甘露醇、蔗糖。②氨基酸代謝試驗(yàn)：靛基質(zhì)（吲哚）試驗(yàn)（大腸埃希菌陽性，產(chǎn)氣腸桿菌陰性）、甲基紅（MR）試驗(yàn)（大腸埃希菌陽性，克雷伯菌屬陰性）、V-P試驗(yàn)（克雷伯菌屬陽性）。③酶類試驗(yàn)：脲酶（克雷伯菌屬陽性）、苯丙氨酸脫氨酶（變形桿菌屬陽性）。④其他：枸櫞酸鹽利用試驗(yàn)（產(chǎn)氣腸桿菌陽性，大腸埃希菌陰性）、硫化氫產(chǎn)生（沙門菌屬、變形桿菌屬陽性）。6.碳青霉烯耐藥腸桿菌科（CRE）的主要耐藥機(jī)制有哪些？CRE耐藥機(jī)制包括：①碳青霉烯酶產(chǎn)生：A類（如KPC-2、KPC-3）、B類（金屬酶，如NDM-1、IMP-4）、D類（如OXA-48、OXA-181）β-內(nèi)酰胺酶，其中B類酶可水解所有β-內(nèi)酰胺類抗生素（除單環(huán)類）。②外膜蛋白缺失：主要為孔蛋白（如OmpC、OmpF）表達(dá)下調(diào)或缺失，減少碳青霉烯類進(jìn)入胞內(nèi)。③主動(dòng)外排系統(tǒng)激活：如AcrAB-TolC系統(tǒng)過度表達(dá)，將胞內(nèi)藥物泵出。臨床分離株中，85%以上CRE由碳青霉烯酶介導(dǎo)耐藥，其中NDM型在印度次大陸占比超60%，KPC型在北美占比約55%。7.2025年針對(duì)產(chǎn)KPC型CRE感染的治療推薦方案是什么？2025年《多重耐藥革蘭陰性菌感染治療指南》推薦：①血流感染或重癥感染：首選頭孢他啶/阿維巴坦（2g/0.5gq8h）聯(lián)合美羅培南（1gq8h），或亞胺培南/西司他丁/雷利巴坦（0.5g/0.5g/0.25gq6h）單藥治療（適用于MIC≤4μg/mL）。②尿路感染：若菌株對(duì)替加環(huán)素敏感（MIC≤2μg/mL），可選用替加環(huán)素（首劑100mg，維持50mgq12h）；或根據(jù)藥敏使用磷霉素氨丁三醇（3gq24h，僅適用于下尿路感染）。③需注意：產(chǎn)KPC菌株常合并對(duì)氟喹諾酮類、氨基糖苷類耐藥，經(jīng)驗(yàn)性治療需避免單藥使用這些藥物。8.沙門菌屬的血清學(xué)分型依據(jù)是什么？主要抗原包括哪些？沙門菌屬血清學(xué)分型基于O抗原（菌體抗原，脂多糖核心多糖側(cè)鏈）、H抗原（鞭毛抗原，蛋白質(zhì)）和Vi抗原（莢膜抗原，僅部分菌株如傷寒沙門菌具有）。O抗原為分組依據(jù)（如A組O2、B組O4、D組O9），H抗原分第1相（特異性，如a、b、d）和第2相（非特異性，如1、2、3），用于定種（如傷寒沙門菌O9+Hd+Vi）。2025年新發(fā)現(xiàn)的O抗原變異株（如O55型）已被納入WHO沙門菌血清學(xué)分型數(shù)據(jù)庫。9.腸桿菌科細(xì)菌引起的醫(yī)院感染中，最常見的感染類型及高危因素有哪些？醫(yī)院感染類型前三位為：①尿路感染（占45%），主要與導(dǎo)尿管留置相關(guān)；②肺炎（占30%），多見于機(jī)械通氣患者；③血流感染（占18%），與中心靜脈導(dǎo)管、手術(shù)切口感染相關(guān)。高危因素包括：入住ICU（尤其是≥7天）、使用廣譜抗生素（如三代頭孢≥5天）、免疫抑制狀態(tài)（如化療、激素治療）、高齡（≥65歲）、侵入性操作（如血液透析）。2025年數(shù)據(jù)顯示，ICU內(nèi)腸桿菌科醫(yī)院感染發(fā)病率較2020年上升12%，與CRE定植率增加直接相關(guān)。10.簡(jiǎn)述MALDI-TOFMS在腸桿菌科鑒定中的技術(shù)優(yōu)勢(shì)及局限性。優(yōu)勢(shì)：①快速：從菌落制備到出結(jié)果僅需5-10分鐘（傳統(tǒng)生化鑒定需4-24小時(shí)）；②準(zhǔn)確率高：對(duì)常見種（如大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌）的種水平鑒定準(zhǔn)確率>95%；③成本低：?jiǎn)未舞b定成本約為傳統(tǒng)方法的1/3；④可同時(shí)檢測(cè)少量混合菌（如2種菌的混合樣本）。局限性：①無法區(qū)分近緣種（如肺炎克雷伯菌與臭鼻克雷伯菌）；②對(duì)變異菌株（如缺失主要核糖體蛋白的突變株）可能誤判；③數(shù)據(jù)庫需定期更新（2025年主流數(shù)據(jù)庫已包含1800+腸桿菌科菌株圖譜）；④無法直接提供藥敏信息（需結(jié)合其他方法）。11.腸致病性大腸埃希菌（EPEC）的特征性病變是什么？其分子機(jī)制如何？EPEC引起的特征性病變?yōu)椤梆じ?脫落”（A/E）損傷：細(xì)菌黏附腸黏膜上皮細(xì)胞后，導(dǎo)致局部微絨毛破壞、細(xì)胞骨架重排，最終形成緊密黏附的杯狀結(jié)構(gòu)。分子機(jī)制：①Bfp菌毛（bundle-formingpili）介導(dǎo)初始黏附；②Ⅲ型分泌系統(tǒng)（T3SS）將效應(yīng)蛋白Tir（translocatedintiminreceptor）注入宿主細(xì)胞，Tir插入細(xì)胞膜后與細(xì)菌表面的Intimin蛋白結(jié)合，觸發(fā)宿主細(xì)胞內(nèi)信號(hào)通路（如酪氨酸磷酸化），招募肌動(dòng)蛋白等細(xì)胞骨架蛋白，形成A/E損傷。12.2025年新型β-內(nèi)酰胺酶抑制劑復(fù)方制劑有哪些？針對(duì)腸桿菌科的覆蓋范圍如何？2025年新獲批的復(fù)方制劑包括：①頭孢地爾/阿維巴坦（Cefiderocol/Avibactam）：對(duì)產(chǎn)金屬酶（如NDM）的CRE有效（因頭孢地爾通過鐵載體通路進(jìn)入胞內(nèi)，不受金屬酶影響）；②美羅培南/法硼巴坦（Meropenem/Vaborbactam）：增強(qiáng)對(duì)KPC型CRE的活性（法硼巴坦抑制A類和C類β-內(nèi)酰胺酶）；③替比培南/西司他?。═ebipenem/Cilastatin）：口服碳青霉烯類，對(duì)產(chǎn)ESBL腸桿菌科引起的尿路感染有效（西司他丁抑制腎小管二肽酶，提高尿藥濃度）。這些藥物對(duì)傳統(tǒng)耐藥機(jī)制（如ESBL、AmpC酶）的覆蓋度>90%，但對(duì)OXA-48型CRE的敏感性仍需結(jié)合藥敏結(jié)果。13.變形桿菌屬的主要致病特點(diǎn)及實(shí)驗(yàn)室鑒定注意事項(xiàng)有哪些？致病特點(diǎn)：①遷徙生長現(xiàn)象：在普通瓊脂平板上呈擴(kuò)散性生長（因周鞭毛活躍），易污染其他菌落；②產(chǎn)尿素酶：分解尿素產(chǎn)氨，導(dǎo)致尿液pH升高，易形成磷酸銨鎂結(jié)石（與復(fù)雜性尿路感染相關(guān)）；③部分菌株（如奇異變形桿菌）可產(chǎn)生溶血素和蛋白酶，增強(qiáng)組織侵襲力。實(shí)驗(yàn)室鑒定注意：①需使用含0.1%石碳酸或4%瓊脂的培養(yǎng)基抑制遷徙生長；②苯丙氨酸脫氨酶試驗(yàn)陽性（與其他腸桿菌科鑒別關(guān)鍵）；③硫化氫試驗(yàn)陽性（TSI培養(yǎng)基底層變黑）；④脲酶試驗(yàn)強(qiáng)陽性（1小時(shí)內(nèi)顯色）。14.腸桿菌科細(xì)菌的毒力島（PAI）通常攜帶哪些功能基因？其水平轉(zhuǎn)移機(jī)制是什么？PAI攜帶的功能基因包括：①黏附相關(guān)基因（如eae編碼Intimin，bfp編碼Bfp菌毛）；②毒素基因（如stx編碼志賀毒素，hly編碼溶血素）；③分泌系統(tǒng)基因（如esc編碼T3SS）；④鐵獲取系統(tǒng)基因（如ybt編碼耶爾森菌鐵載體）；⑤調(diào)控基因（如ler調(diào)控毒力基因表達(dá)）。水平轉(zhuǎn)移機(jī)制主要通過噬菌體（轉(zhuǎn)導(dǎo)）、質(zhì)粒（接合）或整合子（轉(zhuǎn)化）介導(dǎo)，其中接合轉(zhuǎn)移是腸桿菌科PAI擴(kuò)散的主要方式（如大腸埃希菌的pO157質(zhì)?？赏ㄟ^性菌毛轉(zhuǎn)移至其他菌株）。15.2025年社區(qū)獲得性腸桿菌科感染的流行病學(xué)特點(diǎn)有哪些變化？變化包括：①耐藥譜變遷：產(chǎn)ESBL大腸埃希菌在社區(qū)尿路感染中的檢出率從2020年的18%升至2025年的27%，其中CTX-M-15型占比超60%；②血清型分布：肺炎克雷伯菌社區(qū)獲得性肝膿腫的優(yōu)勢(shì)血清型從K1/K2型轉(zhuǎn)變?yōu)镾T11型（攜帶rmpA2毒力基因及blaCTX-M-15）；③易感人群擴(kuò)展：既往健康的年輕人（18-35歲）因外賣飲食增加（交叉污染風(fēng)險(xiǎn)），感染率較5年前上升15%；④病原體譜變化：陰溝腸桿菌（現(xiàn)歸為腸桿菌屬）在社區(qū)皮膚軟組織感染中的檢出率升至8%（原<2%），與抗生素自我藥療導(dǎo)致的菌群失調(diào)相關(guān)。16.實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)產(chǎn)碳青霉烯酶腸桿菌科（CPE）的表型方法有哪些？各自的優(yōu)缺點(diǎn)是什么？表型方法包括：①改良Hodge試驗(yàn)（MHT）：利用美羅培南紙片誘導(dǎo)碳青霉烯酶產(chǎn)生，觀察大腸埃希菌ATCC25922的抑菌圈變形（陽性提示產(chǎn)碳青霉烯酶）。優(yōu)點(diǎn)：操作簡(jiǎn)單，成本低；缺點(diǎn)：靈敏度低（對(duì)金屬酶不敏感），需24小時(shí)觀察。②CarbaNP試驗(yàn)：檢測(cè)細(xì)菌裂解液是否水解亞胺培南（產(chǎn)酸使指示劑變色）。優(yōu)點(diǎn)：2小時(shí)內(nèi)出結(jié)果，對(duì)A類、B類、D類酶均敏感；缺點(diǎn)：需嚴(yán)格無菌操作，污染可能導(dǎo)致假陽性。③顯色培養(yǎng)基（如CHROMagarKPC）：通過顏色反應(yīng)區(qū)分產(chǎn)KPC、NDM等酶的菌株。優(yōu)點(diǎn)：可同時(shí)篩查多種CPE；缺點(diǎn)：特異性受接種量影響（需5-10個(gè)菌落），對(duì)混合感染可能漏檢。2025年推薦MHT聯(lián)合CarbaNP試驗(yàn)作為基層實(shí)驗(yàn)室的初篩組合。17.耶爾森菌屬（腸桿菌科）的主要致病種及臨床特征是什么？主要致病種為小腸結(jié)腸炎耶爾森菌（Y.enterocolitica）和假結(jié)核耶爾森菌（Y.pseudotuberculosis）。小腸結(jié)腸炎耶爾森菌：①經(jīng)糞-口傳播（污染食物/水），好發(fā)于冬季；②臨床表現(xiàn)為急性胃腸炎（發(fā)熱、腹痛、腹瀉）、腸系膜淋巴結(jié)炎（易誤診為闌尾炎），免疫低下者可引發(fā)敗血癥。假結(jié)核耶爾森菌：①主要感染動(dòng)物（如嚙齒類），人類通過接觸感染；②臨床表現(xiàn)為發(fā)熱、結(jié)節(jié)性紅斑（與超抗原激活T細(xì)胞相關(guān)）、肝脾膿腫，兒童多見。2025年監(jiān)測(cè)顯示，小腸結(jié)腸炎耶爾森菌O:3血清型在歐洲的感染率較2020年上升20%，與生奶消費(fèi)增加相關(guān)。18.腸桿菌科細(xì)菌的生物被膜形成對(duì)感染治療的影響是什么？目前有哪些針對(duì)性干預(yù)策略？生物被膜影響：①細(xì)菌被包裹在胞外多糖基質(zhì)中，減少抗生素滲透（如碳青霉烯類在生物被膜中的濃度僅為游離菌的1/10）；②被膜內(nèi)細(xì)菌代謝活性降低，對(duì)抗生素（如β-內(nèi)酰胺類，作用于活躍分裂細(xì)胞）敏感性下降；③誘導(dǎo)耐藥基因水平轉(zhuǎn)移（被膜內(nèi)細(xì)菌密度高，接合頻率增加）。干預(yù)策略：①新型抗生素：如達(dá)托霉素（破壞生物被膜基質(zhì)）、奧馬環(huán)素（穿透被膜能力強(qiáng)）；②酶類藥物：如DNA酶（降解被膜中的eDNA）、藻酸酶（分解銅綠假單胞菌被膜，但對(duì)腸桿菌科效果有限）；③噬菌體療法：篩選能裂解被膜菌的噬菌體（如針對(duì)大腸埃希菌的φEcoM-GJ1）；④物理方法：如低頻超聲破壞被膜結(jié)構(gòu)（已在尿路感染動(dòng)物模型中驗(yàn)證有效）。19.2025年腸桿菌科細(xì)菌的全基因組測(cè)序（WGS）在感染控制中的應(yīng)用有哪些進(jìn)展？進(jìn)展包括：①爆發(fā)追蹤：通過單核苷酸多態(tài)性（SNP）分析，48小時(shí)內(nèi)可確定醫(yī)院內(nèi)CRE爆發(fā)的傳播鏈（傳統(tǒng)脈沖場(chǎng)凝膠電泳需5-7天）；②耐藥基因預(yù)測(cè)：WGS可同時(shí)檢測(cè)blaKPC、blaNDM、qnr（喹諾酮耐藥）、rmt（氨基糖苷耐藥）等基因，指導(dǎo)精準(zhǔn)治療；③毒力評(píng)估：分析毒力島（如PAI-1、PAI-2）和毒力基因（如stx、eae）的攜帶情況，判斷菌株致病力（如ST131型大腸埃希菌的WGS可提示是否為高毒力克隆）；④公共衛(wèi)生監(jiān)測(cè)：全球WGS數(shù)據(jù)庫（如EnteroBase）已收錄超100萬株腸桿菌科序列，支持跨區(qū)域耐藥/毒力趨勢(shì)分析。20.針對(duì)腸桿菌科細(xì)菌的疫苗研發(fā)現(xiàn)狀及2025年突破點(diǎn)是什么？現(xiàn)狀：目前無獲