2026年生物制藥技術(shù)員中級專業(yè)知識測試一、單項(xiàng)選擇題（共20題，每題1分，共20分）1.在生物制藥生產(chǎn)中，用于細(xì)胞培養(yǎng)的培養(yǎng)基通常需要添加哪種成分以支持細(xì)胞生長？A.胰島素B.葡萄糖C.胰蛋白酶D.絲裂霉素答案：B解析：葡萄糖是細(xì)胞培養(yǎng)中最常用的碳源，為細(xì)胞提供能量。胰島素主要用于調(diào)節(jié)血糖，胰蛋白酶用于細(xì)胞消化，絲裂霉素是抗腫瘤藥物。2.在生物制藥純化過程中，哪種層析技術(shù)常用于分離蛋白質(zhì)？A.離子交換層析B.凝膠過濾層析C.氣相色譜法D.超臨界流體萃取答案：A解析：離子交換層析利用蛋白質(zhì)表面電荷差異進(jìn)行分離，廣泛應(yīng)用于蛋白質(zhì)純化。凝膠過濾層析用于分離分子量，氣相色譜法用于小分子，超臨界流體萃取用于提取。3.生物制藥中，哪種酶制劑常用于DNA/RNA提??？A.蛋白酶KB.RNA酶C.腺苷脫氨酶D.超氧化物歧化酶答案：A解析：蛋白酶K用于降解蛋白質(zhì)，避免RNA/DNA降解。RNA酶會降解RNA，腺苷脫氨酶作用于核苷酸，超氧化物歧化酶是抗氧化酶。4.在生物制藥生產(chǎn)中，哪種滅菌方法適用于熱敏性物料？A.巴氏滅菌法B.滅菌鍋滅菌C.低溫冷凍滅菌D.輻射滅菌答案：A解析：巴氏滅菌法（72℃15秒或60℃30分鐘）適用于熱敏性物料。滅菌鍋滅菌（121℃15分鐘）不適用，低溫冷凍滅菌和輻射滅菌適用于無菌包裝。5.生物制藥中，哪種緩沖液常用于維持pH穩(wěn)定？A.Tris-HClB.乙酸鈉C.磷酸緩沖液D.HEPES答案：C解析：磷酸緩沖液（pH6.0-8.0）應(yīng)用廣泛，Tris-HCl（pH7.5-8.3）常用于細(xì)胞培養(yǎng)，乙酸鈉（pH4.5-6.0）用于酸化，HEPES（pH7.0-8.0）耐酶解。6.在生物制藥過程中，哪種設(shè)備用于監(jiān)測無菌操作？A.超凈工作臺B.生物安全柜C.燭狀過濾器D.濕熱滅菌鍋答案：B解析：生物安全柜提供局部空氣凈化，防止污染。超凈工作臺僅提供潔凈環(huán)境，燭狀過濾器用于除菌，濕熱滅菌鍋用于滅菌。7.生物制藥中，哪種培養(yǎng)基用于篩選酵母菌？A.麥康凱培養(yǎng)基B.血漿凝固酶培養(yǎng)基C.酵母提取物蛋白胨葡萄糖（YPD）培養(yǎng)基D.營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基答案：C解析：YPD培養(yǎng)基富含酵母生長因子，常用于酵母篩選。麥康凱用于細(xì)菌，血漿凝固酶用于金黃色葡萄球菌，營養(yǎng)肉湯用于通用培養(yǎng)。8.在生物制藥中，哪種方法用于檢測蛋白質(zhì)純度？A.紫外分光光度法B.SDS電泳C.薄層色譜法D.酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）答案：B解析：SDS通過分子量分離檢測純度。紫外分光光度法檢測濃度，薄層色譜法用于小分子，ELISA用于定量。9.生物制藥中，哪種設(shè)備用于細(xì)胞計(jì)數(shù)？A.顯微鏡B.血細(xì)胞計(jì)數(shù)板C.流式細(xì)胞儀D.熒光顯微鏡答案：B解析：血細(xì)胞計(jì)數(shù)板（Neubauer計(jì)數(shù)板）經(jīng)典且經(jīng)濟(jì)。顯微鏡用于觀察形態(tài)，流式細(xì)胞儀定量分析，熒光顯微鏡用于標(biāo)記觀察。10.在生物制藥中，哪種溶劑用于細(xì)胞裂解？A.甲醇B.Tris緩沖液C.蛋白酶K溶液D.高滲鹽溶液答案：D解析：高滲鹽溶液（如0.1MNaCl）通過滲透壓裂解細(xì)胞。甲醇用于有機(jī)提取，Tris緩沖液用于pH調(diào)節(jié)，蛋白酶K用于消化。11.生物制藥中，哪種技術(shù)用于基因編輯？A.PCRB.CRISPR-Cas9C.基因測序D.基因芯片答案：B解析：CRISPR-Cas9通過RNA引導(dǎo)切割DNA，實(shí)現(xiàn)精準(zhǔn)編輯。PCR用于擴(kuò)增，基因測序用于檢測，基因芯片用于表達(dá)分析。12.在生物制藥中，哪種方法用于去除多糖雜質(zhì)？A.超濾B.親和層析C.酶解D.離子交換層析答案：C解析：酶解（如使用葡萄糖酶）特異性降解多糖。超濾用于分離分子量，親和層析用于結(jié)合蛋白，離子交換層析用于電荷分離。13.生物制藥中，哪種設(shè)備用于監(jiān)控發(fā)酵罐pH？A.pH電極B.溫度計(jì)C.氣體流量計(jì)D.攪拌器轉(zhuǎn)速計(jì)答案：A解析：pH電極實(shí)時監(jiān)測酸堿度。溫度計(jì)監(jiān)控溫度，氣體流量計(jì)監(jiān)控通氣，攪拌器轉(zhuǎn)速計(jì)監(jiān)控混合。14.在生物制藥中，哪種培養(yǎng)基用于培養(yǎng)細(xì)菌？A.酵母提取物蛋白胨大豆（YPD）培養(yǎng)基B.瓊脂平板培養(yǎng)基C.沙門氏菌選擇性培養(yǎng)基D.肉湯培養(yǎng)基答案：B解析：瓊脂平板用于分離培養(yǎng)。YPD用于酵母，沙門氏菌選擇性培養(yǎng)基用于特定菌株，肉湯用于液體培養(yǎng)。15.生物制藥中，哪種方法用于檢測病毒活性？A.ELISAB.病毒滴定法（TCID50）C.病毒基因組測序D.熒光定量PCR答案：B解析：病毒滴定法通過細(xì)胞病變測定病毒效價。ELISA檢測抗體/抗原，基因組測序檢測序列，熒光定量PCR檢測RNA量。16.在生物制藥中，哪種設(shè)備用于監(jiān)測無菌灌裝？A.霍夫曼灌裝機(jī)B.灌裝機(jī)器人C.無菌監(jiān)測罩D.潔凈室壓力計(jì)答案：C解析：無菌監(jiān)測罩（RABS）防止污染?；舴蚵嘌b機(jī)是設(shè)備類型，灌裝機(jī)器人是自動化工具，壓力計(jì)監(jiān)控潔凈度。17.生物制藥中，哪種技術(shù)用于蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)預(yù)測？A.X射線晶體學(xué)B.核磁共振波譜法C.跨膜預(yù)測（TMHMM）D.質(zhì)譜分析答案：C解析：TMHMM預(yù)測跨膜區(qū)域。X射線晶體學(xué)和核磁共振波譜法用于高分辨率結(jié)構(gòu)，質(zhì)譜分析用于肽段鑒定。18.在生物制藥中，哪種方法用于去除內(nèi)毒素？答案：C解析：超濾（如0.22μm膜）可去除內(nèi)毒素。離子交換層析用于蛋白純化，酶解和凝膠過濾不直接去除內(nèi)毒素。19.生物制藥中，哪種培養(yǎng)基用于培養(yǎng)放線菌？A.馬丁氏瓊脂培養(yǎng)基B.營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基C.酵母提取物麥芽提取物（YEM）培養(yǎng)基D.碳酸鈣培養(yǎng)基答案：C解析：YEM培養(yǎng)基富含放線菌生長因子。馬丁氏瓊脂用于分枝桿菌，營養(yǎng)瓊脂通用，碳酸鈣用于檢測抑菌圈。20.在生物制藥中，哪種設(shè)備用于監(jiān)測溫度？A.溫度探頭B.熱風(fēng)循環(huán)烘箱C.冷凍干燥機(jī)D.真空泵答案：A解析：溫度探頭直接測量溫度。烘箱和冷凍干燥機(jī)是設(shè)備，真空泵用于減壓。二、多項(xiàng)選擇題（共10題，每題2分，共20分）21.生物制藥中，哪些因素影響細(xì)胞培養(yǎng)效率？A.培養(yǎng)基成分B.溫度控制C.氣體組成D.轉(zhuǎn)染效率E.機(jī)械攪拌答案：A、B、C、E解析：培養(yǎng)基、溫度、CO2濃度、攪拌促進(jìn)生長。轉(zhuǎn)染效率屬于基因操作，非常規(guī)培養(yǎng)。22.在生物制藥純化過程中，哪些方法可用于蛋白質(zhì)分離？A.離子交換層析B.凝膠過濾層析C.親和層析D.超濾E.薄層色譜法答案：A、B、C、D解析：四種均為主流純化技術(shù)。薄層色譜法用于小分子檢測。23.生物制藥中，哪些設(shè)備用于無菌檢測？A.霍夫曼灌裝機(jī)B.生物安全柜C.濕熱滅菌鍋D.沉降菌計(jì)數(shù)器E.超凈工作臺答案：B、C、D、E解析：生物安全柜、滅菌鍋、沉降菌計(jì)數(shù)器、超凈工作臺均用于無菌控制。霍夫曼灌裝機(jī)是設(shè)備類型。24.在生物制藥中，哪些培養(yǎng)基用于微生物篩選？A.麥康凱培養(yǎng)基B.血漿凝固酶培養(yǎng)基C.酵母提取物蛋白胨葡萄糖（YPD）培養(yǎng)基D.營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基E.沙門氏菌選擇性培養(yǎng)基答案：A、B、E解析：麥康凱（腸桿菌科）、血漿凝固酶（葡萄球菌）、沙門氏菌選擇性培養(yǎng)基用于特定菌種。YPD用于酵母，營養(yǎng)肉湯通用。25.生物制藥中，哪些方法用于檢測蛋白質(zhì)表達(dá)？A.SDS電泳B.WesternblotC.ELISAD.蛋白質(zhì)印跡E.熒光定量PCR答案：A、B、C、D解析：四種均為蛋白質(zhì)檢測技術(shù)。熒光定量PCR檢測RNA。26.在生物制藥中，哪些設(shè)備用于細(xì)胞培養(yǎng)？A.生物反應(yīng)器B.超凈工作臺C.離心機(jī)D.培養(yǎng)箱E.渦旋混合器答案：A、B、D、E解析：生物反應(yīng)器、超凈工作臺、培養(yǎng)箱、渦旋混合器用于培養(yǎng)。離心機(jī)用于分離。27.生物制藥中，哪些技術(shù)用于基因編輯？A.CRISPR-Cas9B.TALENC.ZFND.基因測序E.基因合成答案：A、B、C解析：三種基因編輯技術(shù)。測序和合成是輔助工具。28.在生物制藥中，哪些方法用于去除雜質(zhì)？A.超濾B.親和層析C.酶解D.離子交換層析E.凝膠過濾層析答案：A、B、C、D、E解析：五種均為主流去除雜質(zhì)技術(shù)。29.生物制藥中，哪些設(shè)備用于滅菌？A.滅菌鍋B.輻射滅菌設(shè)備C.低溫冷凍滅菌D.熱風(fēng)循環(huán)烘箱E.超聲波清洗機(jī)答案：A、B、C解析：三種滅菌方法。烘箱和超聲波清洗機(jī)非滅菌。30.在生物制藥中，哪些因素影響發(fā)酵效率？A.攪拌速度B.pH控制C.營養(yǎng)物供應(yīng)D.溫度波動E.氣體流量答案：A、B、C、E解析：攪拌、pH、營養(yǎng)、通氣影響發(fā)酵。溫度波動會降低效率。三、判斷題（共10題，每題1分，共10分）31.生物制藥中，SDS電泳通過蛋白質(zhì)的分子量進(jìn)行分離。（√）32.超濾可用于分離蛋白質(zhì)和小分子雜質(zhì)。（√）33.病毒滴定法（TCID50）通過細(xì)胞病變數(shù)量測定病毒效價。（√）34.酵母提取物蛋白胨大豆（YPD）培養(yǎng)基適用于細(xì)菌培養(yǎng)。（×）35.CRISPR-Cas9技術(shù)通過RNA引導(dǎo)切割DNA。（√）36.離子交換層析利用蛋白質(zhì)表面電荷差異進(jìn)行分離。（√）37.蛋白酶K可用于DNA/RNA提取過程中的蛋白質(zhì)降解。（√）38.熱風(fēng)循環(huán)烘箱適用于熱敏性物料的滅菌。（×）39.超凈工作臺和生物安全柜均提供局部空氣凈化。（×）40.生物制藥中，葡萄糖是細(xì)胞培養(yǎng)中最常用的碳源。（√）四、簡答題（共5題，每題4分，共20分）41.簡述生物制藥中純化蛋白質(zhì)的步驟及其原理。答案：1.粗提：細(xì)胞裂解后，通過離心或過濾去除細(xì)胞碎片，得到粗提液。2.澄清：使用超濾或離心去除大分子雜質(zhì)（如鹽、脂類）。3.初步純化：通過離子交換層析或凝膠過濾層析去除小分子雜質(zhì)和未結(jié)合蛋白。4.精細(xì)純化：使用親和層析（如抗體偶聯(lián)）或離子交換層析進(jìn)一步提高純度。5.濃縮與緩沖液置換：通過超濾濃縮，并置換至儲存緩沖液。原理：利用蛋白質(zhì)與雜質(zhì)的理化性質(zhì)差異（如電荷、分子量、特異性結(jié)合）進(jìn)行分離。42.簡述生物制藥中細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)化要點(diǎn)。答案：1.培養(yǎng)基優(yōu)化：添加生長因子、激素和碳源（如葡萄糖）。2.溫度和pH控制：維持37℃和7.2-7.4的pH。3.氣體組成：95%空氣+5%CO2提供氧氣和酸堿平衡。4.攪拌和通氣：防止代謝產(chǎn)物積累，促進(jìn)氧氣傳遞。5.接種密度：避免過度或不足接種。原理：提供最佳生長環(huán)境，最大化細(xì)胞活力和產(chǎn)物產(chǎn)量。43.簡述生物制藥中滅菌的方法及其適用范圍。答案：1.濕熱滅菌：121℃15分鐘，適用于熱敏性物料（如培養(yǎng)基）。2.干熱滅菌：160℃2小時，適用于玻璃器皿。3.輻射滅菌：伽馬射線或電子束，適用于無菌包裝。4.過濾除菌：0.22μm膜，適用于熱敏性液體（如疫苗）。適用范圍：根據(jù)物料特性選擇。44.簡述生物制藥中ELISA檢測的原理及其步驟。答案：原理：利用抗體-抗原特異性結(jié)合，通過酶標(biāo)抗體顯色定量。步驟：1.包被：將抗原/抗體固定于微孔板。2.結(jié)合：加入待測樣本，與酶標(biāo)抗體結(jié)合。3.洗滌：去除未結(jié)合成分。4.顯色：加入底物，酶催化顯色。5.定量：通過酶標(biāo)儀讀取吸光度。45.簡述生物制藥中基因編輯的流程及其應(yīng)用。答案：流程：1.設(shè)計(jì)gRNA靶向序列。2.構(gòu)建CRISPR-Cas9載體。3.轉(zhuǎn)染細(xì)胞，使Cas9/gRNA進(jìn)入細(xì)胞。4.DNA修復(fù)（NHEJ或HDR）產(chǎn)生突變。應(yīng)用：疾病模型構(gòu)建、藥物篩選、基因治療。五、論述題（共2題，每題10分，共20分）46.論述生物制藥中純化蛋白質(zhì)的挑戰(zhàn)及解決方案。答案：挑戰(zhàn)：1.雜質(zhì)復(fù)雜：包含鹽、小分子、多糖、宿主細(xì)胞蛋白等。2.目標(biāo)蛋白不穩(wěn)定：易降解或變構(gòu)。3.純化效率低：分步純化可能導(dǎo)致?lián)p失。解決方案：1.多步純化結(jié)合：結(jié)合離子交換、凝膠過濾和親和層析，逐步去除雜質(zhì)。2.優(yōu)化條件：降