2025年高職生物技術(shù)（生物實(shí)驗(yàn)技術(shù)）試題及答案

（考試時(shí)間：90分鐘滿分100分）班級______姓名______第I卷（選擇題共40分）答題要求：本卷共20小題，每小題2分。在每小題給出的四個(gè)選項(xiàng)中，只有一項(xiàng)是符合題目要求的。1.下列關(guān)于生物實(shí)驗(yàn)技術(shù)中常用儀器的說法，錯(cuò)誤的是（）A.顯微鏡是觀察細(xì)胞結(jié)構(gòu)的重要工具B.離心機(jī)可用于分離細(xì)胞中的各種細(xì)胞器C.移液器能準(zhǔn)確移取一定體積的液體D.培養(yǎng)箱用于提供細(xì)胞生長所需的特定環(huán)境2.以下哪種染色劑常用于觀察細(xì)胞中的DNA（）A.甲基綠B.蘇丹ⅢC.健那綠D.吡羅紅3.在生物實(shí)驗(yàn)中，對實(shí)驗(yàn)材料的選擇要求不包括（）A.容易獲得B.價(jià)格昂貴C.具有代表性D.符合實(shí)驗(yàn)?zāi)康?.關(guān)于PCR技術(shù)，下列說法正確的是（）A.只能擴(kuò)增DNA片段B.需要引物參與C.不需要DNA聚合酶D.反應(yīng)體系不需要緩沖液5.下列哪種方法可用于檢測蛋白質(zhì)的含量（）A.雙縮脲試劑法B.斐林試劑法C.碘液法D.蘇丹Ⅲ染色法6.細(xì)胞培養(yǎng)過程中，需要控制的條件不包括（）A.溫度B.光照C.氣體成分D.pH值7.凝膠電泳技術(shù)常用于分離（）A.蛋白質(zhì)B.核酸C.多糖D.以上都是8.下列關(guān)于酶的實(shí)驗(yàn)，說法錯(cuò)誤的是（）A.酶具有高效性B.酶具有專一性C.酶的活性不受溫度影響D.可通過檢測產(chǎn)物生成量來檢測酶活性9.用于固定細(xì)胞形態(tài)的試劑是（）A.甲醛B.乙醇C.丙酮D.以上都可以10.提取植物細(xì)胞中的葉綠素，常用的試劑是（）A.無水乙醇B.丙酮C.石油醚D.以上都可以11.下列關(guān)于微生物培養(yǎng)的說法，正確的是（）A.培養(yǎng)基只需含有碳源和氮源B.培養(yǎng)細(xì)菌需要無氧環(huán)境C.接種環(huán)需要灼燒滅菌D.培養(yǎng)皿不需要滅菌12.檢測微生物是否具有某種酶活性，可采用的方法是（）A.觀察菌落形態(tài)B.檢測產(chǎn)物生成C.檢測底物消耗D.B和C都可以13.關(guān)于基因工程技術(shù)，下列說法錯(cuò)誤的是（）A.需要限制酶切割DNAB.需要DNA連接酶連接DNA片段C.可用于生產(chǎn)蛋白質(zhì)藥物D.只能用于動(dòng)物細(xì)胞14.蛋白質(zhì)的純化方法不包括（）A.離子交換層析B.凝膠過濾層析C.紙層析D.親和層析15.下列關(guān)于生物實(shí)驗(yàn)安全的說法，錯(cuò)誤的是（）A.實(shí)驗(yàn)前要熟悉實(shí)驗(yàn)操作規(guī)程B.可在實(shí)驗(yàn)室飲食C.處理生物廢棄物要符合規(guī)定D.避免接觸有毒有害物質(zhì)16.觀察細(xì)胞有絲分裂，常用的材料是（）A.洋蔥根尖B.菠菜葉C.人的口腔上皮細(xì)胞D.酵母菌17.下列關(guān)于DNA提取的說法，正確的是（）A.可采用物理方法破碎細(xì)胞B.提取過程不需要離心C.不需要去除雜質(zhì)D.提取的DNA不需要保存18.用于檢測細(xì)胞凋亡的方法是（）A.臺盼藍(lán)染色B.吉姆薩染色C.AnnexinV-FITC/PI雙染法D.以上都不是19.下列關(guān)于生物芯片技術(shù)的說法，正確的是（）A.可同時(shí)檢測多種生物分子B.只能檢測蛋白質(zhì)C.不需要標(biāo)記物D.檢測結(jié)果不準(zhǔn)確20.生物實(shí)驗(yàn)中，數(shù)據(jù)記錄的要求不包括（）A.及時(shí)準(zhǔn)確B.可隨意涂改C.完整清晰D.有備份第II卷（非選擇題共60分）21.（10分）簡述PCR技術(shù)的原理及主要步驟。22.（10分）如何進(jìn)行細(xì)胞的原代培養(yǎng)？23.（10分）分析凝膠電泳分離核酸的原理。24.（15分）材料：在研究某種微生物對特定藥物的敏感性實(shí)驗(yàn)中，將該微生物接種在含有不同濃度藥物的培養(yǎng)基上，培養(yǎng)一段時(shí)間后觀察菌落生長情況。問題：請?jiān)O(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)步驟，并分析實(shí)驗(yàn)結(jié)果能得出哪些結(jié)論。25.（15分）材料：某科研小組欲研究一種新的蛋白質(zhì)的功能，通過基因工程技術(shù)獲得了該蛋白質(zhì)，并進(jìn)行了相關(guān)實(shí)驗(yàn)。問題：請闡述基因工程獲取該蛋白質(zhì)的基本流程，以及如何通過實(shí)驗(yàn)初步探究其功能。答案：1.B2.A3.B4.B5.A6.B7.D8.C9.D10.D11.C12.D13.D14.C15.B16.A17.A18.C19.A20.B21.PCR技術(shù)原理：以擬擴(kuò)增的DNA分子為模板，以一對分別與模板5′端和3′端相互補(bǔ)的寡核苷酸片段為引物，在DNA聚合酶的作用下，按照半保留復(fù)制的機(jī)制沿著模板鏈延伸直至完成新的DNA合成，重復(fù)這一過程，即可使目的DNA片段得到擴(kuò)增。主要步驟：變性，將雙鏈DNA模板加熱至95℃左右，使雙鏈解開成為單鏈；退火，將溫度降至55℃左右，引物與模板單鏈結(jié)合；延伸，溫度升至72℃左右，DNA聚合酶以dNTP為原料，從引物的3′端開始延伸合成新的DNA鏈。22.選取合適的組織或器官，用剪刀剪碎，再用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理，使細(xì)胞分散開來。將細(xì)胞懸液接種到培養(yǎng)瓶中，加入適量的培養(yǎng)基，置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。培養(yǎng)過程中要注意控制溫度、氣體成分、pH值等條件，定期觀察細(xì)胞生長情況，當(dāng)細(xì)胞生長至一定密度時(shí)，進(jìn)行傳代培養(yǎng)。23.核酸分子在電場作用下會向與其所帶電荷相反的電極移動(dòng)。不同大小和形狀的核酸分子在凝膠中的遷移速度不同，分子越小、越呈球形，遷移速度越快；分子越大、越呈線性，遷移速度越慢。通過凝膠電泳可以將不同大小的核酸分子分離開來，根據(jù)遷移距離和條帶位置等可以分析核酸的分子量大小、純度等信息。24.實(shí)驗(yàn)步驟：準(zhǔn)備一系列含有不同濃度該藥物的培養(yǎng)基，將等量的該微生物接種到各個(gè)培養(yǎng)基上，在適宜條件下培養(yǎng)一段時(shí)間，觀察并記錄每個(gè)培養(yǎng)基上菌落的生長情況。結(jié)論：若在高濃度藥物培養(yǎng)基上菌落生長受抑制或不生長，低濃度藥物培養(yǎng)基上菌落生長較好，說明該微生物對該藥物敏感，且藥物濃度越高抑制作用越強(qiáng)；若各濃度培養(yǎng)基上菌落生長情況無明顯差異，說明該微生物對該藥物不敏感。25.基因工程獲取該蛋白質(zhì)的基本流程：獲取目的基因，可通過PCR擴(kuò)增、從基因文庫中獲取等方法；構(gòu)建基因表達(dá)載體，將目的基因與載體連接；將重組表達(dá)載體導(dǎo)入受體細(xì)胞，如大腸桿菌等；