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高級中學名校試卷PAGEPAGE1河南省青桐鳴大聯(lián)考2024-2025學年高二下學期4月月考一、選擇題:本題共16小題,每小題3分,共48分。在每小題給出的四個選項中,只有一項符合題目要求。1.某生物興趣小組開展果酒和果醋制作實驗。在制作過程中,下列操作及相關原理的敘述正確的是()A.制作果酒時,葡萄汁要裝滿發(fā)酵瓶,以減少雜菌污染B.果酒制作的菌種是酵母菌,它是一種兼性厭氧型細菌C.當缺少糖源時,醋酸菌可將乙醇轉化為乙酸D.果醋發(fā)酵時,發(fā)酵瓶需一直打開,以保證充足的氧氣供應【答案】C〖祥解〗酵母菌屬于真菌,是兼性厭氧微生物。在有氧條件下,進行有氧呼吸大量繁殖,為后續(xù)發(fā)酵提供足夠菌種;無氧時,通過無氧呼吸將葡萄糖分解為酒精和二氧化碳,此特性是果酒發(fā)酵的核心基礎。發(fā)酵初期需提供氧氣,使酵母菌大量繁殖;后期密封創(chuàng)造無氧環(huán)境進行酒精發(fā)酵。同時,要控制適宜溫度(一般為18-30℃),保障酵母菌活性和發(fā)酵效率。醋酸菌是好氧細菌,對氧氣需求嚴格,其代謝活動依賴充足氧供應。在不同條件下,醋酸菌代謝途徑不同,當氧氣、糖源充足時,將葡萄糖分解為醋酸;缺少糖源時,把乙醇轉化為乙醛再變?yōu)橐宜??!驹斘觥緼、制作果酒時,葡萄汁不能裝滿發(fā)酵瓶,要留有約1/3的空間,防止發(fā)酵液溢出,A錯誤;B、制作果酒的菌種是酵母菌,它是一種真菌,而不是細菌,且酵母菌是兼性厭氧型微生物,在有氧和無氧條件下都能生存,B錯誤;C、醋酸菌是好氧細菌,當缺少糖源時,醋酸菌在有氧條件下可將乙醇轉化為乙醛,再將乙醛變?yōu)橐宜?,C正確;D、果醋發(fā)酵時,需要保證充足的氧氣供應,但不能一直打開發(fā)酵瓶,因為這樣容易導致雜菌污染,可通過安裝有脫脂棉的通氣口來通氣,D錯誤。故選C。2.借助纖維素酶將秸稈降解以生產燃料乙醇,在緩解全球能源危機方面意義重大。科研人員著手進行高產纖維紫酶菌株的選育研究,流程如圖1所示。要鑒定是否培育出高產纖維素酶菌株,可采用剛果紅平板法。此方法的原理:纖維素被分解后,剛果紅不能與纖維素的分解產物相結合.培養(yǎng)基菌落周圍會出現(xiàn)透明圈,具體情況如圖2所示。下列敘述正確的是()A.富集培養(yǎng)基屬于液體培養(yǎng)基,CMC平板中的培養(yǎng)基是固體培養(yǎng)基B.CMC平板中的纖維素是唯一的碳源和氮源C.紫外線和60Co-γ射線處理都可定向選擇高纖維素酶菌株D.由圖2可知,a中的菌株分解纖維素的能力最強【答案】A〖祥解〗采用富集培養(yǎng)的方法篩選出高產纖維素酶菌株,經過的一般步驟是采集菌樣→富集培養(yǎng)→純種分離→性能測定,在進行富集培養(yǎng)前一般不對黑土壤進行高壓蒸汽滅菌處理,避免殺死菌種?!驹斘觥緼、富集培養(yǎng)基進行搖瓶培養(yǎng),利于微生物與營養(yǎng)物質充分接觸,屬于液體培養(yǎng)基,而CMC平板可在其表面形成菌落,其中的培養(yǎng)基是固體培養(yǎng)基,A正確;B、纖維素只含C、H、O元素,只能作為碳源,無法充當?shù)?,B錯誤;C、紫外線和60Co-γ射線處理是誘變育種手段,可以誘發(fā)基因突變,基因突變具有不定向性,不能定向選擇高產纖維素酶菌株,C錯誤;D、纖維素分解菌周圍可以形成透明圈,是因為剛果紅可以與纖維素結合呈現(xiàn)一定的顏色,但纖維素被分解后這種顏色消失,則形成透明圈,從圖中可以看出,d中的透明圈直徑與菌落直徑的比值最大,所以d中的菌株分解纖維素的能力最強,D錯誤。故選A。3.某制藥企業(yè)利用發(fā)酵工程生產青霉素,在整個流程中采取了一系列措施。下列相關敘述正確是()A.擴大培養(yǎng)時,為提高效率可直接將從自然界篩選的菌種接種到工業(yè)發(fā)酵罐中B.配制培養(yǎng)基時,無需反復試驗,按照標準配方制備即可滿足青霉素生產需求C.發(fā)酵過程中,需監(jiān)控培養(yǎng)液中的微生物數(shù)量、產物濃度以及溫度、pH、溶解氧等條件D.發(fā)酵結束后,直接收集發(fā)酵液就能得到青霉素【答案】C〖祥解〗發(fā)酵工程是指利用微生物特定功能,通過現(xiàn)代工程技術,規(guī)?;a對人類有用的產品。它一般包括菌種的選育,擴大培養(yǎng),培養(yǎng)基的配制、滅菌,接種,發(fā)酵,產品的分離、提純等方面,其中的發(fā)酵是發(fā)酵工程的中心環(huán)節(jié)。【詳析】A、工業(yè)發(fā)酵罐體積大,直接將從自然界篩選的菌種接種到工業(yè)發(fā)酵罐中,菌種數(shù)量往往難以滿足發(fā)酵需求,應先進行擴大培養(yǎng),A錯誤;B、在生產實踐中,培養(yǎng)基的配方要經過反復試驗才能確定,不同的生產環(huán)境、設備等因素會影響青霉素產生菌對營養(yǎng)物質的需求等,不能簡單按標準配方制備,B錯誤;C、發(fā)酵過程中,要隨時檢測培養(yǎng)液中的微生物數(shù)量、產物濃度,還要及時添加必需的營養(yǎng)組分,嚴格控制溫度、pH和溶解氧等發(fā)酵條件,C正確;D、如果發(fā)酵產品是代謝物(青霉素屬于代謝物),需要根據(jù)產品的性質采取適當?shù)奶崛?、分離和純化措施來獲得產品,而不是直接收集發(fā)酵液作為成品,D錯誤。故選C。4.利用“細胞農業(yè)”技術(即通過細胞擴大培養(yǎng)形成產物),成功培育出“人造茶葉”,其含有茶多酚、咖啡堿等植物基本生命活動的非必需物質,與普通茶葉在口感和成分上極為相似。下列敘述錯誤的是()A.利用“細胞農業(yè)”技術培育“人造茶葉”時,沒有體現(xiàn)植物細胞的全能性B.通過“細胞農業(yè)”獲得植物產品,能夠避免農藥殘留對人體健康的潛在危害C.“人造茶葉”生產過程中若采用固體培養(yǎng)基培養(yǎng),相比液體培養(yǎng)基更有利于提高產量D.“人造茶葉”中的茶多酚與咖啡堿屬于植物細胞的次生代謝物【答案】C〖祥解〗植物細胞工程應用:“細胞農業(yè)”利用細胞擴大培養(yǎng)生產植物產品,屬于植物細胞工程范疇。與傳統(tǒng)種植相比,該技術可避免農藥殘留等問題,體現(xiàn)生物技術在農業(yè)生產中的創(chuàng)新應用。植物代謝產物分為初生代謝物(生命活動必需)和次生代謝物(生命活動非必需)?!驹斘觥緼、“細胞農業(yè)”技術培育“人造茶葉”主要是通過細胞擴大培養(yǎng)形成產物,并非培育完整植株,沒有體現(xiàn)植物細胞的全能性,A正確;B、傳統(tǒng)茶葉種植可能會使用農藥,而“細胞農業(yè)”在相對可控的環(huán)境下生產,能避免農藥殘留對人體健康的潛在危害,B正確;C、液體培養(yǎng)基能讓細胞與營養(yǎng)物質更充分接觸,相比固體培養(yǎng)基更有利于細胞生長和代謝物積累,更有利于提高產量,C錯誤;D、茶多酚與咖啡堿不是植物生長發(fā)育所必需的物質,屬于植物細胞的次生代謝物,D正確。故選C。5.鐵皮石斛是我國傳統(tǒng)名貴中藥材,其莖可入藥,在增強免疫力等方面有一定功效。但鐵皮石斛自然繁殖困難,生長緩慢。利用植物組織培養(yǎng)技術可對其進行快速繁殖。下列有關敘述錯誤的是()A.鐵皮石斛的莖尖等分生組織含病毒極少,以其為材料易培育出脫毒苗B.誘導鐵皮石斛細胞形成愈傷組織時,需要提供適宜的光照條件C.可通過大規(guī)模培養(yǎng)鐵皮石斛細胞,實現(xiàn)其藥用成分的工廠化生產D.愈傷組織進行再分化培養(yǎng)時需要調整培養(yǎng)基中的植物激素配比【答案】B〖祥解〗細胞工程是指應用細胞生物學、分子生物學和發(fā)育生物學等多學科的原理和方法,通過細胞器、細胞或組織水平上的操作,有目的地獲得特定的細胞、組織、器官、個體或其產品的一門綜合性的生物工程。【詳析】A、植物的莖尖等分生組織分裂旺盛,病毒難以侵染,含病毒極少,利用這些部位作為外植體進行植物組織培養(yǎng),容易培育出脫毒苗,A正確;B、誘導植物細胞脫分化形成愈傷組織的過程中,不需要光照,光照可能會抑制愈傷組織的形成,B錯誤;C、通過大規(guī)模培養(yǎng)鐵皮石斛細胞,利用細胞增殖來積累其產生的藥用成分,能夠實現(xiàn)藥用成分的工廠化生產,C正確;D、植物組織培養(yǎng)過程中生長素和細胞分裂素的濃度和比例等會影響植物細胞的發(fā)育方向,故愈傷組織進行再分化培養(yǎng)時需要調整培養(yǎng)基中的植物激素配比,D正確。故選B。6.如圖是以基因型為AAaa的四倍體植株花藥為原材料培育新品種的過程。下列敘述錯誤的是()A.過程①的外植體消毒一般使用酒精和次氯酸鈉處理B.過程②經脫分化形成愈傷組織C.經③④過程后最終可獲得四倍體植株D.過程①獲得的植株都是純合子【答案】D〖祥解〗分析題圖可知,①是花藥接種,②是脫分化,③是再分化,④形成試管苗后進行移栽?!驹斘觥緼、過程①為花藥接種,外植體消毒一般先用體積分數(shù)為70%的酒精消毒幾秒,再用5%左右的次氯酸鈉溶液處理一段時間,A正確;B、過程②經脫分化形成愈傷組織,B正確;C、愈傷組織經秋水仙素處理后染色體數(shù)目加倍,最終可培育出的植株為四倍體,C正確;D、AAaa產生的花粉有3種,即AA、aa和Aa,經過秋水仙素處理后得到的AAAA、aaaa是純合子,而AAaa是雜合子,D錯誤。故選D7.如圖為牛的某種成纖維細胞培養(yǎng)過程示意圖。下列敘述正確的是()A.在合成培養(yǎng)基中,通常需加入動物血清等天然成分B.動物細胞培養(yǎng)過程中需要在培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素以保證無毒環(huán)境C.④中會出現(xiàn)細胞接觸抑制的現(xiàn)象而③不會D.在進行傳代培養(yǎng)時,④中的細胞均可直接用離心法收集【答案】A〖祥解〗(1)動物細胞培養(yǎng)的過程:取動物組織塊→剪碎組織→用胰蛋白酶處理分散成單個細胞→制成細胞懸液→轉入培養(yǎng)液中(原代培養(yǎng))→放入二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)→貼滿瓶壁的細胞用酶分散為單個細胞,制成細胞懸液→轉入培養(yǎng)液(傳代培養(yǎng))→放入二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)。(2)動物細胞培養(yǎng)的條件:無菌、無毒的環(huán)境:①消毒、滅菌;②添加一定量的抗生素;③定期更換培養(yǎng)液,以清除代謝廢物。營養(yǎng)物質:糖、氨基酸、促生長因子、無機鹽、微量元素等,還需加入血清、血漿等天然物質。溫度和PH:36.5℃±0.5℃;適宜的pH:7.2~7.4。氣體環(huán)境:95%空氣(細胞代謝必需的)和5%的CO2(維持培養(yǎng)液的PH)?!驹斘觥緼、由于人對細胞所需的營養(yǎng)物質尚未全部研究清楚,在合成培養(yǎng)基中,通常需加入動物血清等天然成分,A正確;B、動物細胞培養(yǎng)過程中需要在培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素以防止雜菌污染,B錯誤;C、無論是原代培養(yǎng)(③)還是傳代培養(yǎng)(④),正常的動物細胞培養(yǎng)都會出現(xiàn)細胞接觸抑制現(xiàn)象,即當細胞貼壁生長到表面相互接觸時,細胞就會停止分裂增殖,C錯誤;D、傳代培養(yǎng)時,懸浮細胞可直接用離心法收集,而貼壁細胞需重新用胰蛋白酶處理使其分散成單個細胞,再用離心法收集,D錯誤。故選A。8.下列關于干細胞的敘述正確的是()①胚胎干細胞發(fā)育成的各種細胞所攜帶的遺傳信息相同,但表達情況不同②成體干細胞具有組織特異性,能發(fā)育成完整個體③造血干細胞主要存在于胚胎的骨髓、外周血和臍帶血中④iPS細胞的誘導過程無須破壞胚胎,理論上可避免免疫排斥反應A.①② B.①④ C.②③ D.③④【答案】B〖祥解〗干細胞是一類具有自我復制能力及多向分化潛能的細胞,在一定條件下,它可以分化成多種功能細胞。根據(jù)干細胞的發(fā)育潛能分為三類:全能干細胞、多能干細胞和單能干細胞?!驹斘觥竣倥咛ジ杉毎l(fā)育為不同細胞時涉及細胞分化,細胞分化的實質是基因的選擇性表達,遺傳物質并未發(fā)生變化,①正確;②成體干細胞具有組織特異性,一般只能分化成特定的細胞或組織,不具有發(fā)育成完整個體的能力,②錯誤;③造血干細胞主要存在于成體的骨髓、外周血和臍帶血中,并非胚胎中,③錯誤;④iPS細胞的誘導過程無須破壞胚胎,且iPS細胞可以來源于病人自身的體細胞,將它移植回病人體內后,理論上可以避免免疫排斥反應,④正確。綜上,①④正確。故選B。9.克隆猴在生物科技研究中具有重要意義,如圖為克隆猴的培育流程,Kdm4d的mRNA有助于提高胚胎發(fā)育率,TSA能影響表觀遺傳修飾的物質。下列敘述正確的是()A.從母猴卵巢中采集卵母細胞后,需在體外培養(yǎng)至減數(shù)分裂ⅠB.用滅活的仙臺病毒處理是為了破壞體細胞中除細胞核之外的結構C.克隆小猴的遺傳物質來自胎猴和母猴D.Kdm4d的mRNA和TSA都會使某些基因表達關閉【答案】C〖祥解〗細胞核移植概念:將動物的一個細胞的細胞核移入一個已經去掉細胞核的卵母細胞中,使其重組并發(fā)育成一個新的胚胎,這個新的胚胎最終發(fā)育成動物個體。用核移植的方法得到的動物稱為克隆動物。目前核移植技術中普遍使用的去核方法是顯微直接去除法以及密度梯度離心,紫外光短時間照射、化學物質處理等方法?!驹斘觥緼、從母猴卵巢中采集卵母細胞后,需在體外培養(yǎng)至減數(shù)分裂Ⅱ,A錯誤;B、用滅活的仙臺病毒短暫處理體細胞,目的是誘導體細胞與去核卵母細胞融合,不是破壞體細胞中除細胞核外的結構,B錯誤;C、克隆小猴細胞核遺傳物質來自胎猴,細胞質遺傳物質來自提供去核卵母細胞的母猴,C正確;D、僅知Kdm4d的mRNA有助于提高胚胎發(fā)育率,TSA能影響表觀遺傳修飾,根據(jù)題干無法判斷它們會使某些基因表達關閉,D錯誤。故選C。10.下列關于圖示模型的敘述正確的是()A.若A和B分別表示精子和卵子,則它們都需要獲能處理才能融合成CB.若A和B分別表示不同的植物細胞,則成功獲得融合細胞C的標志是再生出細胞壁C.若D表示單克隆抗體,則A和B可在小鼠體內融合成CD.若C表示雜交瘤細胞,則其具有A和B的所有特點【答案】B〖祥解〗植物的體細胞雜交是將不同植物的細胞通過細胞融合技術形成雜種細胞,進而利用植物的組織培養(yǎng)將雜種細胞培育成多倍體的雜種植株。植物體細胞雜交依據(jù)的原理是細胞膜的流動性和植物細胞的全能性?!驹斘觥緼、若A和B分別表示精子和卵子,則它們都需要經過培養(yǎng)才能融合成C,如精子需要需要獲能處理,卵細胞需要培養(yǎng)到減數(shù)第二次分裂中期,A錯誤;B、若A和B分別表示不同的植物細胞,則原生質體融合后成功的標志是再生出細胞壁,即細胞C再生出細胞壁是融合成功的標志,B正確;C、單克隆抗體由雜交瘤細胞產生,如果D表示單克隆抗體,A和B分別表示B淋巴細胞和骨髓瘤細胞,它們需在體外經誘導融合形成雜交瘤細胞(C),而不是在小鼠體內融合,C錯誤;D、雜交瘤細胞具有B淋巴細胞產生專一抗體和骨髓瘤細胞無限增殖的特點,但是不一定具有A和B所有特點,D錯誤。故選B。11.新型胚胎篩選技術(EDS/ESS)是對早期胚胎細胞進行代謝物分析和發(fā)育潛能評估后再進行胚胎移植,流程如圖所示。圖中檢測包括EDS(EDS是指胚胎植入前的代謝物分析)和ESS(ESS是指胚胎植入前的發(fā)育潛能綜合評估)。下列敘述正確的是()A.EDS檢測主要是為了評估胚胎的基因缺陷B.獲能液的成分不會因動物種類不同而有所差異C.進行ESS檢測能有效提高胚胎移植的成功率D.淘汰的胚胎可以直接用于器官的體外培養(yǎng)研究【答案】C〖祥解〗胚胎移植的基本程序主要包括:①對供、受體的選擇和處理;②配種或人工授精;③對胚胎的收集、檢查(對胚胎進行質量檢查)、培養(yǎng)或保存;④對胚胎進行移植;⑤移植后的檢查?!驹斘觥緼、由題干可知,EDS是指胚胎植入前的代謝物分析,并非評估基因缺陷,評估基因缺陷屬于基因檢測范疇,A錯誤;B、獲能液的成分因動物種類不同而有所差異,B錯誤;C、ESS是對胚胎植入前的發(fā)育潛能綜合評估,篩選出發(fā)育潛能高的胚胎進行移植,能有效提高胚胎移植的成功率,C正確;D、淘汰的胚胎不能直接用于器官的體外培養(yǎng)研究,涉及倫理等多方面問題,需要嚴格遵循法律法規(guī)和倫理準則,D錯誤。故選C。12.下列關于基因工程中基本工具的敘述正確的是()①限制性內切核酸酶能識別雙鏈DNA分子的特定核苷酸序列并切斷磷酸二酯鍵②大多數(shù)限制酶的識別序列由6個核苷酸組成③EcoRⅠ限制酶切割DNA分子產生平末端④T4DNA連接酶能連接黏性末端⑤質粒只存在于原核細胞中⑤大多數(shù)天然質粒都不需要人工改造,可以直接作為載體使用A.①③⑤ B.①②④ C.②④⑥ D.③⑤⑥【答案】B〖祥解〗基因工程的基本工具可概括為“分子手術刀”、“分子縫合針”和“分子運輸車”,它們分別對應限制性核酸內切酶、DNA連接酶和載體?!驹斘觥竣傧拗菩詢惹泻怂崦改芫珳首R別雙鏈DNA分子特定核苷酸序列,并切斷相應的磷酸二酯鍵,①正確;②多數(shù)限制酶識別序列為6個核苷酸,②正確;③EcoRⅠ限制酶切割后產生黏性末端,③錯誤;④T4DNA連接酶既能連接黏性末端也能連接平末端,④正確;⑤質粒是一種裸露的、結構簡單、獨立于真核細胞核或原核細胞擬核DNA之外,并具有自我復制能力的環(huán)狀雙鏈DNA分子,⑤錯誤;⑥天然的質粒不能直接被用作載體,基因工程中真正被用作載體的質粒都是在天然質粒的基礎上進行過人工改造的,⑥錯誤。綜上,①②④正確。故選B。13.在“DNA的粗提取與鑒定”實驗中,下列關于操作流程的敘述錯誤的是()A.可直接將洋蔥研磨液倒入塑料離心管中,通過離心獲取上清液B.在上清液中加入體積相等的、70%的酒精溶液,靜置2~3min,溶液中出現(xiàn)的白色絲狀物就是粗提取的DNAC.DNA在不同濃度的NaCl溶液中溶解度不同,它能溶于2mol/L的NaCl溶液D.若要鑒定絲狀物主要成分為DNA,可利用二苯胺試劑,沸水浴后觀察是否出現(xiàn)藍色【答案】B〖祥解〗實驗原理:DNA在不同濃度的NaCl溶液中溶解度不同,在0.14mol/L的NaCl溶液中溶解度最低,利用這一特性,通過改變NaCl溶液濃度,可使DNA析出或溶解,實現(xiàn)與其他物質分離;DNA不溶于酒精溶液,而細胞中的某些蛋白質可溶于酒精,用體積分數(shù)為95%的冷酒精能析出DNA,進一步提純。DNA的鑒定:在沸水浴條件下,DNA與二苯胺反應呈現(xiàn)藍色,以此鑒定DNA的存在?!驹斘觥緼、可直接將洋蔥研磨液倒入塑料離心管中,在1500r/min的轉速下離心5min,再取上清液放入燒杯中,A正確;B、在上清液中加入體積相等的、預冷的95%的酒精溶液,靜置2~3min,溶液中出現(xiàn)的白色絲狀物就是粗提取的DNA,B錯誤;C、DNA在不同濃度的NaCl溶液中溶解度不同,它能溶于2mol/L的NaCl溶液,C正確;D、在沸水浴條件下,DNA遇二苯胺會被染成藍色,所以將絲狀物溶于2mol/L的NaCl溶液后,滴加二苯胺試劑,沸水浴觀察是否出現(xiàn)藍色,可鑒定其是否為DNA,D正確。故選B。14.PCR技術是一種在生物體外快速擴增特定DNA片段的技術。在利用PCR技術擴增某DNA分子的過程中,下列相關敘述錯誤的是()A.加熱至90~95℃時,DNA雙鏈解開,該過程不需要解旋酶B.緩沖液中需提供TaqDNA聚合酶,其在高溫條件下能保持活性C.復性過程中,引物與模板DNA單鏈結合,該過程不需要酶的催化D.若進行n次循環(huán),最終得到的DNA分子中,不含引物的脫氧核苷酸鏈有2n+1條【答案】D〖祥解〗PCR全稱為聚合酶鏈式反應,是一項在生物體外復制特定DNA的核酸合成技術,其原理是DNA復制。PCR技術的前提條件是要有一段已知目的基因的核苷酸序以便合成一對引物。PCR的過程:①高溫變性:DNA解旋過程(PCR擴增中雙鏈DNA解開不需要解旋酶,高溫條件下氫鍵可自動解開);低溫復性:引物結合到互補鏈DNA上;③中溫延伸:合成子鏈。該過程所需要的條件:模板DNA、四種脫氧核苷酸、一對引物、熱穩(wěn)定DNA聚合酶(Taq酶)?!驹斘觥緼、PCR技術中,通過加熱至90~95℃使DNA雙鏈間的氫鍵斷裂,實現(xiàn)解旋,不需要解旋酶,A正確;B、PCR反應體系中需要TaqDNA聚合酶(耐高溫的DNA聚合酶),因為PCR過程中存在高溫變性步驟,普通的DNA聚合酶在高溫下會失活,而TaqDNA聚合酶能在高溫條件下保持活性,催化DNA子鏈的合成,B正確;C、復性過程是在溫度降低時,引物與模板DNA單鏈通過堿基互補配對結合,這一過程不需要酶的催化,C正確;D、若進行n次循環(huán),最終得到脫氧核苷酸鏈條數(shù)是2n+1,其中有2條不含引物,D錯誤。故選D。15.溶菌酶是動物體內產生的一種蛋白質,天然的溶菌酶在酸性環(huán)境下活性易受影響。若將溶菌酶分子中的一個亮氨酸改造成異亮氨酸,在酸性環(huán)境下其活性可顯著提高。如圖是利用蛋白質工程設計生產新型溶菌酶的流程圖。下列敘述錯誤的是()A.步驟甲中,通過X射線衍射等技術分析溶菌酶的空間結構B.步驟乙的設計需依據(jù)蛋白質的功能與結構關系來構建新模型C.步驟丙合成的新基因應能指導合成含異亮氨酸的溶菌酶D.最終獲得的新型溶菌酶活性提高,其組成的氨基酸數(shù)量改變【答案】D〖祥解〗蛋白質工程是指以蛋白質分子的結構規(guī)律及其與生物功能的關系作為基礎,通過改造或合成基因,來改造現(xiàn)有蛋白質,或制造一種新的蛋白質,以滿足人類生產和生活的需求。蛋白質工程的基本途徑是:從預期的蛋白質功能出發(fā)→設計預期的蛋白質結構→推測應有的氨基酸序列→找出相對應的脫氧核苷酸序列(基因)?!驹斘觥緼、在蛋白質工程中,常利用X射線衍射等技術來分析蛋白質的空間結構,從而為后續(xù)改造提供基礎,A正確;B、蛋白質的功能由其結構決定,在模型設計(步驟乙)時,需要依據(jù)蛋白質的功能與結構關系,對蛋白質結構進行改造設計,構建新的蛋白質模型,B正確;C、整個流程的目的是將溶菌酶分子中的一個亮氨酸改造成異亮氨酸,使溶菌酶在酸性環(huán)境下活性顯著提高,所以步驟丙合成的新基因應能指導合成含異亮氨酸的溶菌酶,C正確;D、題干僅表明將溶菌酶分子中的一個亮氨酸改造成異亮氨酸,只是氨基酸的種類發(fā)生了改變,其組成的氨基酸數(shù)量并未改變,D錯誤。故選D。16.下列關于各項生物技術應用的敘述正確的是()A.利用發(fā)酵工程生產酸奶,接種乳酸菌后需持續(xù)通入無菌空氣以促進其快速繁殖B.在細胞工程中,植物體細胞雜交獲得的雜種植株一定能表現(xiàn)出雙親的優(yōu)良性狀C.基因工程培育轉基因抗除草劑大豆時,只能將抗除草劑基因導入大豆的受精卵中D胚胎工程中,進行胚胎移植前需對供體和受體母牛進行同期發(fā)情處理【答案】D〖祥解〗胚胎移植的基本程序:①對供、受體的選擇和處理。選擇遺傳特性和生產性能優(yōu)秀的供體,有健康的體質和正常繁殖能力的受體,供體和受體是同一物種。并用激素進行同期發(fā)情處理,用促性腺激素對供體母牛做超數(shù)排卵處理。②配種或人工授精。③對胚胎的收集、檢查、培養(yǎng)或保存。配種或輸精后第7天,用特制的沖卵裝置,把供體母牛子宮內的胚胎沖洗出來(也叫沖卵)。對胚胎進行質量檢查,此時的胚胎應發(fā)育到桑椹或胚囊胚階段。直接將受體移植或放入-196℃的液氮中保存。④對胚胎進行移植。⑤移植后的檢查。對受體母牛進行是否妊娠的檢查?!驹斘觥緼、乳酸菌是厭氧菌,發(fā)酵生產酸奶時接種乳酸菌后應密封,創(chuàng)造無氧環(huán)境,若持續(xù)通入無菌空氣,會抑制乳酸菌發(fā)酵,A錯誤;B、植物體細胞雜交獲得的雜種植株不一定能表現(xiàn)出雙親的優(yōu)良性狀,因為基因的表達受多種因素影響,可能存在基因沉默等情況,導致某些性狀無法表達,B錯誤;C、基因工程培育轉基因抗除草劑大豆時,目的基因可以導入受精卵,也可以導入體細胞,C錯誤;D、胚胎工程中,進行胚胎移植前對供體和受體母牛進行同期發(fā)情處理,可使它們的生理狀態(tài)相同,D正確。故選D。二、非選擇題:本題共5小題,共52分。17.某種除草劑(一種含氮有機物,在水中溶解度低,含一定量該除草劑的培養(yǎng)基不透明)在土壤中不易降解,長期使用會污染土壤。為修復被該除草劑污染的土壤,按圖示過程選育能降解該除草劑的細菌?;卮鹣铝袉栴}:(1)要在長期使用該除草劑的土壤中取樣的主要原因是_______。將土樣置于無菌水中(而不是清水中)的主要目的是_______。(2)圖Ⅱ中的接種方法是_______,據(jù)圖可知,接種過程中接種環(huán)需要灼燒______次,該接種方法________(填“可以”或“不可以”)用于對細菌進行計數(shù),原因是_______。(3)常用的接種方法除了圖中所示的方法外,還有_______,該方法要想獲得符合要求的菌落,要對土壤懸浮液進行充分的稀釋,原因是________。(4)圖Ⅲ培養(yǎng)基上形成的五個菌落中的細菌所利用的氮源_______(填“相同”或“不相同”)。簡述圖Ⅲ中的透明圈是如何形成的:________?!敬鸢浮浚?)①.長期使用該除草劑的土壤中可能含有能降解該除草劑的細菌(合理即可)②.防止外來雜菌污染(2)①.平板劃線法②.6③.不可以④.平板劃線法只在劃線末端出現(xiàn)單菌落,因此不能統(tǒng)計出單菌落(合理即可)(3)①.稀釋涂布平板法②.稀釋度足夠高時,聚集在一起的細菌易分散成單個細胞,從而在培養(yǎng)基表面形成單個菌落(合理即可)(4)①.不相同②.能降解該除草劑的細菌將培養(yǎng)基中的除草劑分解,使菌落周圍的培養(yǎng)基從不透明變得透明,從而形成透明圈〖祥解〗微生物常用的接種方法:稀釋涂布平板法和平板劃線法。其中,前者不僅能獲得單菌落,而且還能用于微生物計數(shù)?!窘馕觥浚?)長期受除草劑污染的土壤,為能降解該除草劑的細菌提供了生存環(huán)境,所以更有可能從中找到目標細菌。使用無菌水可避免外界雜菌混入,保證所取土樣中微生物的純凈度。(2)由圖中接種操作軌跡可判斷使用的接種方法為平板劃線法,圖Ⅱ中劃線區(qū)域有5個,在接種前后以及每次劃線前都需要灼燒接種環(huán),即灼燒6次,平板劃線法在操作過程中,隨著劃線次數(shù)增加,菌液逐漸減少,只在劃線末端出現(xiàn)單菌落,因此不能統(tǒng)計出單菌落。(3)稀釋涂布平板法也是常用的微生物接種方法,該方法可以獲得單菌落,且還可用于計數(shù),其原理是對土壤懸浮液充分稀釋,聚集在一起的細菌易分散成單個細胞,從而在培養(yǎng)基表面形成單個菌落,根據(jù)菌落的特征可篩選出能降解除草劑的細菌。(4)培養(yǎng)基上形成的兩種菌落中的細菌所利用的氮源不同,有透明圈的是能夠利用除草劑中的氮源,沒有透明圈的是不能利用除草劑中的氮源。該除草劑會使培養(yǎng)基呈現(xiàn)不透明狀態(tài),當存在能降解該除草劑的細菌時,這些細菌會分解菌落周圍的除草劑,使得菌落周圍的培養(yǎng)基不再受除草劑影響而變得透明,從而形成透明圈。18.科學家用植物體細胞雜交技術,將白菜的原生質體和甘藍的原生質體融合,成功培育出了“白菜-甘藍”雜種植株,培育過程如圖所示,其中①~⑤表示過程,a~f表示細胞、組織或植株?;卮鹣铝袉栴}:(1)過程①需要使用______(酶)處理白菜細胞和甘藍細胞,獲得的原生質體a、b要置于______(填“等滲”或“低滲”)溶液,原因是______。過程②若采用化學法誘導原生質體融合,常用的試劑是_______(寫出1種)。(2)經過④獲得的愈傷組織要轉接到誘導生______的培養(yǎng)基上,再轉接到誘導生______的培養(yǎng)基上,若要誘導生根,則生長素與細胞分裂素的比例應______(填“<1”、“=1”或“>1”)。整個操作過程中對植物組織細胞只能消毒而不能滅菌,原因是_______。(3)植物體細胞雜交的意義是______?!敬鸢浮浚?)①.纖維素酶和果膠酶②.等滲③.原生質體無細胞壁保護,在低滲溶液中會吸水漲破④.聚乙二醇(PEG)(2)①.芽②.根③.>1④.滅菌會殺死植物組織細胞,消毒可避免雜菌污染且能保留細胞活性(3)打破生殖隔離,克服遠緣雜交不親和的障礙〖祥解〗植物細胞有細胞壁阻礙融合,利用纖維素酶和果膠酶可特異性分解細胞壁成分,獲得原生質體,這是雜交的基礎步驟,體現(xiàn)酶的專一性。通過物理法或化學法促使原生質體融合,形成雜種細胞,該過程依賴細胞膜的流動性,使不同細胞的細胞膜相互融合。植物體細胞雜交的意義是傳統(tǒng)雜交受生殖隔離限制,而植物體細胞雜交打破種間界限,使不同物種的遺傳物質融合,實現(xiàn)遠緣雜交,培育出具有優(yōu)良性狀的新物種,為作物育種和品種改良開辟新途徑,拓展了植物育種的范圍和方法?!窘馕觥浚?)植物細胞壁主要成分是纖維素和果膠,所以用纖維素酶和果膠酶去除細胞壁獲得原生質體,原生質體失去了細胞壁的支撐和保護,低滲溶液的滲透壓低于原生質體內部,原生質體會吸水漲破,所以要置于等滲溶液中。化學法誘導原生質體融合常用聚乙二醇(PEG)。(2)經過④獲得的愈傷組織要轉接到誘導生芽的培養(yǎng)基上,再轉接到誘導生根的培養(yǎng)基上,若要誘導生根,則生長素與細胞分裂素的比例應>1。滅菌會使植物組織細胞死亡,無法進行后續(xù)培養(yǎng),而消毒能去除部分微生物,保留細胞活性,滿足植物體細胞雜交操作需求。(3)植物體細胞雜交的意義是打破生殖隔離,克服遠緣雜交不親和的障礙。19.輪狀病毒是引起嬰幼兒腹瀉的主要病原體之一,快速準確檢測輪狀病毒十分關鍵。科研人員利用雜交瘤技術制備抗輪狀病毒衣殼蛋白(VP6)的單克隆抗體,用于檢測試劑盒開發(fā),其制備流程如圖所示。回答下列問題:(1)將特定的抗原注入小鼠體內的目的是_______,獲取B淋巴細胞時,常采用______(酶)等處理使組織分散。(2)B細胞和骨髓瘤細胞的融合過程體現(xiàn)了細胞膜具有_______,進行細胞融合時除使用PEG融合法外,還可采用_______(答出1種)。(3)只考慮細胞的兩兩融合,則圖中的細胞融合過程除了產生雜交瘤細胞外,還有______,能從中篩選出雜交瘤細胞是因為________。(4)圖中最后一個環(huán)節(jié)是對細胞進行克隆培養(yǎng)和_______,最終獲得的細胞需要在_______大規(guī)模培養(yǎng)或_______增殖。【答案】(1)①.刺激小鼠產生能分泌特異性抗體的B淋巴細胞②.胰蛋白酶##膠原蛋白酶(2)①.流動性②.滅活病毒誘導法##電融合法(3)①.B-B融合細胞、瘤-瘤融合細胞(合理即可)②.只有雜交瘤細胞能在HAT培養(yǎng)基上生長(4)①.抗體檢測②.體外條件下③.注射到小鼠腹腔內〖祥解〗(1)單克隆抗體的制備過程是:對小動物注射抗原,從該動物的脾臟中獲取效應B細胞,將效應B細胞與骨髓瘤細胞融合,篩選出能產生單一抗體的雜交瘤細胞,克隆化培養(yǎng)雜交瘤細胞(體內培養(yǎng)和體外培養(yǎng)),最后獲取單克隆抗體。誘導動物細胞融合的方法有:物理法(離心、振動)、化學法(聚乙二醇)、生物法(滅活的病毒)。(2)單克隆抗體的兩次篩選:①篩選得到雜交瘤細胞(去掉未雜交的細胞以及自身融合的細胞);②篩選出能夠產生特異性抗體的細胞群。兩次抗體檢測:專一抗體檢驗陽性。【解析】(1)將特定的抗原注入小鼠體內,目的是刺激小鼠的免疫系統(tǒng),使其產生能分泌特異性抗體的B淋巴細胞,動物組織通過胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理,可分散成單個細胞以便獲取B淋巴細胞。(2)B細胞和骨髓瘤細胞的融合過程體現(xiàn)了細胞膜具有流動性。細胞膜的組成成分可以運動,使得細胞在融合時能夠相互接觸、融合在一起。進行細胞融合時,除使用PEG融合法外,還可采用滅活病毒誘導法(利用滅活的病毒促使細胞融合)或電融合法(在電場作用下使細胞融合)。(3)只考慮細胞兩兩融合,會出現(xiàn)雜交瘤細胞(B細胞和骨髓瘤細胞融合)、B-B融合細胞、瘤-瘤融合細胞,由于小鼠骨髓瘤細胞不能在HAT培養(yǎng)基上生長,B細胞也不能在HAT培養(yǎng)基上長期存活,只有雜交瘤細胞能在HAT培養(yǎng)基上生長,所以能篩選出雜交瘤細胞。(4)圖中最后一個環(huán)節(jié)對細胞進行克隆培養(yǎng)和抗體檢測,目的是篩選出能產生特定抗體的雜交瘤細胞。最終獲得的細胞需要在體外條件下大規(guī)模培養(yǎng),這樣可以大量生產單克隆抗體。也可以將細胞注射到小鼠腹腔內增殖,小鼠腹腔為細胞提供了適宜的生長環(huán)境,也能獲得大量單克隆抗體。20.隨著生物科學技術的發(fā)展,動物的生殖方式變得越來越多樣化。如圖是胚胎工程技術研究及應用的相關情況,供體1是良種荷斯坦高產奶牛,供體2是健康的黃牛?;卮鹣铝袉栴}:(1)應用1中,為獲取更多細胞B,需對供體2注射_______,使用_______技術獲得重組細胞。(2)應用2中,通過_______(技術)得到受精卵。胚胎的早期發(fā)育過程中,______會發(fā)育成胎兒的各種組織,________會發(fā)育成胎膜和胎盤。(3)應用3中,通過胚胎分割技術獲得二分胚①和②,該操作通常應選擇發(fā)育良好、形態(tài)正常的_______進行分割。(4)胚胎干細胞培養(yǎng)時所需氣體主要為_______。如果誘導iPS細胞定向分化為原始生殖細胞,該技術可能的應用是_______?!敬鸢浮浚?)①.促性腺激素②.(體細胞)核移植(2)①.體外受精②.內細胞團③.滋養(yǎng)層細胞(3)桑葚胚或囊胚(4)①.95%的空氣和5%的CO2②.解決不育問題(合理即可)〖祥解〗分析題圖:應用1中:供體1提供細胞核,供體2提供細胞質,經過核移植技術形成重組細胞,并發(fā)育形成早期胚,再將胚胎移植到受體子宮發(fā)育成小牛,為克隆牛;應用2中:優(yōu)良公牛和供體1配種形成受精卵,并發(fā)育成早期胚胎,再將胚胎移植到受體子宮發(fā)育成小牛,屬于有性生殖;應用3中:采用了胚胎分割移植技術;應用4中:從早期胚胎和原始性腺中獲取胚胎干細胞,并進行體外干細胞培養(yǎng)?!窘馕觥浚?)題目中提到為獲取更多細胞B,需對供體2注射相關物質。因為在胚胎工程中,對供體進行超數(shù)排卵處理可獲得更多卵母細胞,而促性腺激素能促進雌性動物超數(shù)排卵。從細胞A(體細胞)和細胞B(去核卵母細胞)形成重組細胞的過程,利用的是體細胞核移植技術。(2)應用2中,通過體外受精技術可以得到受精卵。體外受精是指哺乳動物的精子和卵子在體外人工控制的環(huán)境中完成受精過程的技術。胚胎的早期發(fā)育過程中,內細胞團會發(fā)育成胎兒的各種組織,滋養(yǎng)層細胞會發(fā)育成胎膜和胎盤。(3)應用3中,通過胚胎分割技術獲得二分胚①和②,胚胎分割時通常選擇發(fā)育良好、形態(tài)正常的桑椹胚或囊胚進行分割,因為這個時期的胚胎細胞具有較高的全能性,分割后容易發(fā)育成完整個體。(4)胚胎干細胞培養(yǎng)時所需氣體主要有95%的空氣(提供氧氣)和5%的CO?(維持培養(yǎng)液的pH),所以①處填“95%的空氣和5%的CO?”。如果誘導iPS細胞定向分化為原始生殖細胞,原始生殖細胞與生殖有關,該技術可能的應用是解決不育問題等合理應用。21.智利番茄因具有抗TMV(煙草花葉病毒)基因(其部分序列如圖1),能抵抗TMV感染。研究人員擬利用抗TMV基因和基因表達載體(如圖2),通過轉基因技術培育抗TMV玉米?;卮鹣铝袉栴}:(1)PCR擴增時需要引物,引物的作用是________,在擴增TMV基因時,需設計引物的堿基序列為_________(寫出引物起始的6個堿基即可),同時,引物中還需添加________限制酶的識別序列,理由是________。(2)圖2的Ti質粒中還缺少一個重要組件啟動子,其作用是______。(3)在用導入了重組質粒的農桿菌感染玉米細胞后,需將玉米細胞接種到含______(填“潮霉素”或“卡那霉素”)的固體培養(yǎng)基中培養(yǎng),選擇Ti質粒作為基因表達載體的原因是_______。從個體水平檢測轉基因玉米是否制備成功,簡便而又可靠的方法是______。【答案】(1)①.使DNA聚合酶能夠從引物的3'端開始連接脫氧核苷酸②.5'-ATGGGC-3'和5'-CTAGTG-3'③.BamHI和SacI④.用BamHI和SacI兩種限制酶切割抗TMV基因和Ti質粒,不會破壞抗TMV基因,同時可防止目的基因和質粒的自身環(huán)化和反向連接(合理即可)(2)RNA聚合酶識別并結合的部位,驅動目的基因的轉錄(3)①.潮霉素②.Ti質粒中的T-DNA能整合到受體細胞的染色體DNA上,并穩(wěn)定表達③.通過煙草花葉病毒的侵染實驗可以檢測轉基因玉米是否培育成功〖祥解〗基因表達載體的構建是基因工程的核心步驟。基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等?!窘馕觥浚?)用PCR擴增時,需要引物,引物作用是使DNA聚合酶能夠從引物的3'端開始連接脫氧核苷酸,在擴增TMV基因時,設計的引物需與模板鏈3'端的堿基序列互補配對,所以兩個引物的起始堿基序列應分別為5'-ATGGGC-3'和5'-CTAGTG-3',分別在引物中添加限制酶BamHI和SacI切割位點的核苷酸序列,這樣用BamHI和SacI兩種限制酶切割抗TMV基因和Ti質粒,不會破壞抗TMV基因(質??偲溆鄡煞N限制酶會破壞抗TMV基因),同時可防止目的基因和質粒的自身環(huán)化和反向連接。(2)為使目的基因正常表達,還需要啟動子,其作用是RNA聚合酶識別并結合的部位,驅動目的基因的轉錄。(3)Ti質粒中的T-DNA能整合到受體細胞的染色體DNA上,并穩(wěn)定表達,潮霉素和目的基因會隨T-DNA進入細胞,導入目的基因的受體細胞可以在有潮霉素的選擇培養(yǎng)基中存活,從而將導入目的基因的受體細胞篩選出來。從個體水平檢測轉基因玉米是否制備成功,簡便而又可靠的方法是通過煙草花葉病毒的侵染實驗進行檢測。河南省青桐鳴大聯(lián)考2024-2025學年高二下學期4月月考一、選擇題:本題共16小題,每小題3分,共48分。在每小題給出的四個選項中,只有一項符合題目要求。1.某生物興趣小組開展果酒和果醋制作實驗。在制作過程中,下列操作及相關原理的敘述正確的是()A.制作果酒時,葡萄汁要裝滿發(fā)酵瓶,以減少雜菌污染B.果酒制作的菌種是酵母菌,它是一種兼性厭氧型細菌C.當缺少糖源時,醋酸菌可將乙醇轉化為乙酸D.果醋發(fā)酵時,發(fā)酵瓶需一直打開,以保證充足的氧氣供應【答案】C〖祥解〗酵母菌屬于真菌,是兼性厭氧微生物。在有氧條件下,進行有氧呼吸大量繁殖,為后續(xù)發(fā)酵提供足夠菌種;無氧時,通過無氧呼吸將葡萄糖分解為酒精和二氧化碳,此特性是果酒發(fā)酵的核心基礎。發(fā)酵初期需提供氧氣,使酵母菌大量繁殖;后期密封創(chuàng)造無氧環(huán)境進行酒精發(fā)酵。同時,要控制適宜溫度(一般為18-30℃),保障酵母菌活性和發(fā)酵效率。醋酸菌是好氧細菌,對氧氣需求嚴格,其代謝活動依賴充足氧供應。在不同條件下,醋酸菌代謝途徑不同,當氧氣、糖源充足時,將葡萄糖分解為醋酸;缺少糖源時,把乙醇轉化為乙醛再變?yōu)橐宜??!驹斘觥緼、制作果酒時,葡萄汁不能裝滿發(fā)酵瓶,要留有約1/3的空間,防止發(fā)酵液溢出,A錯誤;B、制作果酒的菌種是酵母菌,它是一種真菌,而不是細菌,且酵母菌是兼性厭氧型微生物,在有氧和無氧條件下都能生存,B錯誤;C、醋酸菌是好氧細菌,當缺少糖源時,醋酸菌在有氧條件下可將乙醇轉化為乙醛,再將乙醛變?yōu)橐宜?,C正確;D、果醋發(fā)酵時,需要保證充足的氧氣供應,但不能一直打開發(fā)酵瓶,因為這樣容易導致雜菌污染,可通過安裝有脫脂棉的通氣口來通氣,D錯誤。故選C。2.借助纖維素酶將秸稈降解以生產燃料乙醇,在緩解全球能源危機方面意義重大??蒲腥藛T著手進行高產纖維紫酶菌株的選育研究,流程如圖1所示。要鑒定是否培育出高產纖維素酶菌株,可采用剛果紅平板法。此方法的原理:纖維素被分解后,剛果紅不能與纖維素的分解產物相結合.培養(yǎng)基菌落周圍會出現(xiàn)透明圈,具體情況如圖2所示。下列敘述正確的是()A.富集培養(yǎng)基屬于液體培養(yǎng)基,CMC平板中的培養(yǎng)基是固體培養(yǎng)基B.CMC平板中的纖維素是唯一的碳源和氮源C.紫外線和60Co-γ射線處理都可定向選擇高纖維素酶菌株D.由圖2可知,a中的菌株分解纖維素的能力最強【答案】A〖祥解〗采用富集培養(yǎng)的方法篩選出高產纖維素酶菌株,經過的一般步驟是采集菌樣→富集培養(yǎng)→純種分離→性能測定,在進行富集培養(yǎng)前一般不對黑土壤進行高壓蒸汽滅菌處理,避免殺死菌種?!驹斘觥緼、富集培養(yǎng)基進行搖瓶培養(yǎng),利于微生物與營養(yǎng)物質充分接觸,屬于液體培養(yǎng)基,而CMC平板可在其表面形成菌落,其中的培養(yǎng)基是固體培養(yǎng)基,A正確;B、纖維素只含C、H、O元素,只能作為碳源,無法充當?shù)?,B錯誤;C、紫外線和60Co-γ射線處理是誘變育種手段,可以誘發(fā)基因突變,基因突變具有不定向性,不能定向選擇高產纖維素酶菌株,C錯誤;D、纖維素分解菌周圍可以形成透明圈,是因為剛果紅可以與纖維素結合呈現(xiàn)一定的顏色,但纖維素被分解后這種顏色消失,則形成透明圈,從圖中可以看出,d中的透明圈直徑與菌落直徑的比值最大,所以d中的菌株分解纖維素的能力最強,D錯誤。故選A。3.某制藥企業(yè)利用發(fā)酵工程生產青霉素,在整個流程中采取了一系列措施。下列相關敘述正確是()A.擴大培養(yǎng)時,為提高效率可直接將從自然界篩選的菌種接種到工業(yè)發(fā)酵罐中B.配制培養(yǎng)基時,無需反復試驗,按照標準配方制備即可滿足青霉素生產需求C.發(fā)酵過程中,需監(jiān)控培養(yǎng)液中的微生物數(shù)量、產物濃度以及溫度、pH、溶解氧等條件D.發(fā)酵結束后,直接收集發(fā)酵液就能得到青霉素【答案】C〖祥解〗發(fā)酵工程是指利用微生物特定功能,通過現(xiàn)代工程技術,規(guī)?;a對人類有用的產品。它一般包括菌種的選育,擴大培養(yǎng),培養(yǎng)基的配制、滅菌,接種,發(fā)酵,產品的分離、提純等方面,其中的發(fā)酵是發(fā)酵工程的中心環(huán)節(jié)。【詳析】A、工業(yè)發(fā)酵罐體積大,直接將從自然界篩選的菌種接種到工業(yè)發(fā)酵罐中,菌種數(shù)量往往難以滿足發(fā)酵需求,應先進行擴大培養(yǎng),A錯誤;B、在生產實踐中,培養(yǎng)基的配方要經過反復試驗才能確定,不同的生產環(huán)境、設備等因素會影響青霉素產生菌對營養(yǎng)物質的需求等,不能簡單按標準配方制備,B錯誤;C、發(fā)酵過程中,要隨時檢測培養(yǎng)液中的微生物數(shù)量、產物濃度,還要及時添加必需的營養(yǎng)組分,嚴格控制溫度、pH和溶解氧等發(fā)酵條件,C正確;D、如果發(fā)酵產品是代謝物(青霉素屬于代謝物),需要根據(jù)產品的性質采取適當?shù)奶崛 ⒎蛛x和純化措施來獲得產品,而不是直接收集發(fā)酵液作為成品,D錯誤。故選C。4.利用“細胞農業(yè)”技術(即通過細胞擴大培養(yǎng)形成產物),成功培育出“人造茶葉”,其含有茶多酚、咖啡堿等植物基本生命活動的非必需物質,與普通茶葉在口感和成分上極為相似。下列敘述錯誤的是()A.利用“細胞農業(yè)”技術培育“人造茶葉”時,沒有體現(xiàn)植物細胞的全能性B.通過“細胞農業(yè)”獲得植物產品,能夠避免農藥殘留對人體健康的潛在危害C.“人造茶葉”生產過程中若采用固體培養(yǎng)基培養(yǎng),相比液體培養(yǎng)基更有利于提高產量D.“人造茶葉”中的茶多酚與咖啡堿屬于植物細胞的次生代謝物【答案】C〖祥解〗植物細胞工程應用:“細胞農業(yè)”利用細胞擴大培養(yǎng)生產植物產品,屬于植物細胞工程范疇。與傳統(tǒng)種植相比,該技術可避免農藥殘留等問題,體現(xiàn)生物技術在農業(yè)生產中的創(chuàng)新應用。植物代謝產物分為初生代謝物(生命活動必需)和次生代謝物(生命活動非必需)?!驹斘觥緼、“細胞農業(yè)”技術培育“人造茶葉”主要是通過細胞擴大培養(yǎng)形成產物,并非培育完整植株,沒有體現(xiàn)植物細胞的全能性,A正確;B、傳統(tǒng)茶葉種植可能會使用農藥,而“細胞農業(yè)”在相對可控的環(huán)境下生產,能避免農藥殘留對人體健康的潛在危害,B正確;C、液體培養(yǎng)基能讓細胞與營養(yǎng)物質更充分接觸,相比固體培養(yǎng)基更有利于細胞生長和代謝物積累,更有利于提高產量,C錯誤;D、茶多酚與咖啡堿不是植物生長發(fā)育所必需的物質,屬于植物細胞的次生代謝物,D正確。故選C。5.鐵皮石斛是我國傳統(tǒng)名貴中藥材,其莖可入藥,在增強免疫力等方面有一定功效。但鐵皮石斛自然繁殖困難,生長緩慢。利用植物組織培養(yǎng)技術可對其進行快速繁殖。下列有關敘述錯誤的是()A.鐵皮石斛的莖尖等分生組織含病毒極少,以其為材料易培育出脫毒苗B.誘導鐵皮石斛細胞形成愈傷組織時,需要提供適宜的光照條件C.可通過大規(guī)模培養(yǎng)鐵皮石斛細胞,實現(xiàn)其藥用成分的工廠化生產D.愈傷組織進行再分化培養(yǎng)時需要調整培養(yǎng)基中的植物激素配比【答案】B〖祥解〗細胞工程是指應用細胞生物學、分子生物學和發(fā)育生物學等多學科的原理和方法,通過細胞器、細胞或組織水平上的操作,有目的地獲得特定的細胞、組織、器官、個體或其產品的一門綜合性的生物工程?!驹斘觥緼、植物的莖尖等分生組織分裂旺盛,病毒難以侵染,含病毒極少,利用這些部位作為外植體進行植物組織培養(yǎng),容易培育出脫毒苗,A正確;B、誘導植物細胞脫分化形成愈傷組織的過程中,不需要光照,光照可能會抑制愈傷組織的形成,B錯誤;C、通過大規(guī)模培養(yǎng)鐵皮石斛細胞,利用細胞增殖來積累其產生的藥用成分,能夠實現(xiàn)藥用成分的工廠化生產,C正確;D、植物組織培養(yǎng)過程中生長素和細胞分裂素的濃度和比例等會影響植物細胞的發(fā)育方向,故愈傷組織進行再分化培養(yǎng)時需要調整培養(yǎng)基中的植物激素配比,D正確。故選B。6.如圖是以基因型為AAaa的四倍體植株花藥為原材料培育新品種的過程。下列敘述錯誤的是()A.過程①的外植體消毒一般使用酒精和次氯酸鈉處理B.過程②經脫分化形成愈傷組織C.經③④過程后最終可獲得四倍體植株D.過程①獲得的植株都是純合子【答案】D〖祥解〗分析題圖可知,①是花藥接種,②是脫分化,③是再分化,④形成試管苗后進行移栽?!驹斘觥緼、過程①為花藥接種,外植體消毒一般先用體積分數(shù)為70%的酒精消毒幾秒,再用5%左右的次氯酸鈉溶液處理一段時間,A正確;B、過程②經脫分化形成愈傷組織,B正確;C、愈傷組織經秋水仙素處理后染色體數(shù)目加倍,最終可培育出的植株為四倍體,C正確;D、AAaa產生的花粉有3種,即AA、aa和Aa,經過秋水仙素處理后得到的AAAA、aaaa是純合子,而AAaa是雜合子,D錯誤。故選D7.如圖為牛的某種成纖維細胞培養(yǎng)過程示意圖。下列敘述正確的是()A.在合成培養(yǎng)基中,通常需加入動物血清等天然成分B.動物細胞培養(yǎng)過程中需要在培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素以保證無毒環(huán)境C.④中會出現(xiàn)細胞接觸抑制的現(xiàn)象而③不會D.在進行傳代培養(yǎng)時,④中的細胞均可直接用離心法收集【答案】A〖祥解〗(1)動物細胞培養(yǎng)的過程:取動物組織塊→剪碎組織→用胰蛋白酶處理分散成單個細胞→制成細胞懸液→轉入培養(yǎng)液中(原代培養(yǎng))→放入二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)→貼滿瓶壁的細胞用酶分散為單個細胞,制成細胞懸液→轉入培養(yǎng)液(傳代培養(yǎng))→放入二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)。(2)動物細胞培養(yǎng)的條件:無菌、無毒的環(huán)境:①消毒、滅菌;②添加一定量的抗生素;③定期更換培養(yǎng)液,以清除代謝廢物。營養(yǎng)物質:糖、氨基酸、促生長因子、無機鹽、微量元素等,還需加入血清、血漿等天然物質。溫度和PH:36.5℃±0.5℃;適宜的pH:7.2~7.4。氣體環(huán)境:95%空氣(細胞代謝必需的)和5%的CO2(維持培養(yǎng)液的PH)?!驹斘觥緼、由于人對細胞所需的營養(yǎng)物質尚未全部研究清楚,在合成培養(yǎng)基中,通常需加入動物血清等天然成分,A正確;B、動物細胞培養(yǎng)過程中需要在培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素以防止雜菌污染,B錯誤;C、無論是原代培養(yǎng)(③)還是傳代培養(yǎng)(④),正常的動物細胞培養(yǎng)都會出現(xiàn)細胞接觸抑制現(xiàn)象,即當細胞貼壁生長到表面相互接觸時,細胞就會停止分裂增殖,C錯誤;D、傳代培養(yǎng)時,懸浮細胞可直接用離心法收集,而貼壁細胞需重新用胰蛋白酶處理使其分散成單個細胞,再用離心法收集,D錯誤。故選A。8.下列關于干細胞的敘述正確的是()①胚胎干細胞發(fā)育成的各種細胞所攜帶的遺傳信息相同,但表達情況不同②成體干細胞具有組織特異性,能發(fā)育成完整個體③造血干細胞主要存在于胚胎的骨髓、外周血和臍帶血中④iPS細胞的誘導過程無須破壞胚胎,理論上可避免免疫排斥反應A.①② B.①④ C.②③ D.③④【答案】B〖祥解〗干細胞是一類具有自我復制能力及多向分化潛能的細胞,在一定條件下,它可以分化成多種功能細胞。根據(jù)干細胞的發(fā)育潛能分為三類:全能干細胞、多能干細胞和單能干細胞?!驹斘觥竣倥咛ジ杉毎l(fā)育為不同細胞時涉及細胞分化,細胞分化的實質是基因的選擇性表達,遺傳物質并未發(fā)生變化,①正確;②成體干細胞具有組織特異性,一般只能分化成特定的細胞或組織,不具有發(fā)育成完整個體的能力,②錯誤;③造血干細胞主要存在于成體的骨髓、外周血和臍帶血中,并非胚胎中,③錯誤;④iPS細胞的誘導過程無須破壞胚胎,且iPS細胞可以來源于病人自身的體細胞,將它移植回病人體內后,理論上可以避免免疫排斥反應,④正確。綜上,①④正確。故選B。9.克隆猴在生物科技研究中具有重要意義,如圖為克隆猴的培育流程,Kdm4d的mRNA有助于提高胚胎發(fā)育率,TSA能影響表觀遺傳修飾的物質。下列敘述正確的是()A.從母猴卵巢中采集卵母細胞后,需在體外培養(yǎng)至減數(shù)分裂ⅠB.用滅活的仙臺病毒處理是為了破壞體細胞中除細胞核之外的結構C.克隆小猴的遺傳物質來自胎猴和母猴D.Kdm4d的mRNA和TSA都會使某些基因表達關閉【答案】C〖祥解〗細胞核移植概念:將動物的一個細胞的細胞核移入一個已經去掉細胞核的卵母細胞中,使其重組并發(fā)育成一個新的胚胎,這個新的胚胎最終發(fā)育成動物個體。用核移植的方法得到的動物稱為克隆動物。目前核移植技術中普遍使用的去核方法是顯微直接去除法以及密度梯度離心,紫外光短時間照射、化學物質處理等方法?!驹斘觥緼、從母猴卵巢中采集卵母細胞后,需在體外培養(yǎng)至減數(shù)分裂Ⅱ,A錯誤;B、用滅活的仙臺病毒短暫處理體細胞,目的是誘導體細胞與去核卵母細胞融合,不是破壞體細胞中除細胞核外的結構,B錯誤;C、克隆小猴細胞核遺傳物質來自胎猴,細胞質遺傳物質來自提供去核卵母細胞的母猴,C正確;D、僅知Kdm4d的mRNA有助于提高胚胎發(fā)育率,TSA能影響表觀遺傳修飾,根據(jù)題干無法判斷它們會使某些基因表達關閉,D錯誤。故選C。10.下列關于圖示模型的敘述正確的是()A.若A和B分別表示精子和卵子,則它們都需要獲能處理才能融合成CB.若A和B分別表示不同的植物細胞,則成功獲得融合細胞C的標志是再生出細胞壁C.若D表示單克隆抗體,則A和B可在小鼠體內融合成CD.若C表示雜交瘤細胞,則其具有A和B的所有特點【答案】B〖祥解〗植物的體細胞雜交是將不同植物的細胞通過細胞融合技術形成雜種細胞,進而利用植物的組織培養(yǎng)將雜種細胞培育成多倍體的雜種植株。植物體細胞雜交依據(jù)的原理是細胞膜的流動性和植物細胞的全能性?!驹斘觥緼、若A和B分別表示精子和卵子,則它們都需要經過培養(yǎng)才能融合成C,如精子需要需要獲能處理,卵細胞需要培養(yǎng)到減數(shù)第二次分裂中期,A錯誤;B、若A和B分別表示不同的植物細胞,則原生質體融合后成功的標志是再生出細胞壁,即細胞C再生出細胞壁是融合成功的標志,B正確;C、單克隆抗體由雜交瘤細胞產生,如果D表示單克隆抗體,A和B分別表示B淋巴細胞和骨髓瘤細胞,它們需在體外經誘導融合形成雜交瘤細胞(C),而不是在小鼠體內融合,C錯誤;D、雜交瘤細胞具有B淋巴細胞產生專一抗體和骨髓瘤細胞無限增殖的特點,但是不一定具有A和B所有特點,D錯誤。故選B。11.新型胚胎篩選技術(EDS/ESS)是對早期胚胎細胞進行代謝物分析和發(fā)育潛能評估后再進行胚胎移植,流程如圖所示。圖中檢測包括EDS(EDS是指胚胎植入前的代謝物分析)和ESS(ESS是指胚胎植入前的發(fā)育潛能綜合評估)。下列敘述正確的是()A.EDS檢測主要是為了評估胚胎的基因缺陷B.獲能液的成分不會因動物種類不同而有所差異C.進行ESS檢測能有效提高胚胎移植的成功率D.淘汰的胚胎可以直接用于器官的體外培養(yǎng)研究【答案】C〖祥解〗胚胎移植的基本程序主要包括:①對供、受體的選擇和處理;②配種或人工授精;③對胚胎的收集、檢查(對胚胎進行質量檢查)、培養(yǎng)或保存;④對胚胎進行移植;⑤移植后的檢查?!驹斘觥緼、由題干可知,EDS是指胚胎植入前的代謝物分析,并非評估基因缺陷,評估基因缺陷屬于基因檢測范疇,A錯誤;B、獲能液的成分因動物種類不同而有所差異,B錯誤;C、ESS是對胚胎植入前的發(fā)育潛能綜合評估,篩選出發(fā)育潛能高的胚胎進行移植,能有效提高胚胎移植的成功率,C正確;D、淘汰的胚胎不能直接用于器官的體外培養(yǎng)研究,涉及倫理等多方面問題,需要嚴格遵循法律法規(guī)和倫理準則,D錯誤。故選C。12.下列關于基因工程中基本工具的敘述正確的是()①限制性內切核酸酶能識別雙鏈DNA分子的特定核苷酸序列并切斷磷酸二酯鍵②大多數(shù)限制酶的識別序列由6個核苷酸組成③EcoRⅠ限制酶切割DNA分子產生平末端④T4DNA連接酶能連接黏性末端⑤質粒只存在于原核細胞中⑤大多數(shù)天然質粒都不需要人工改造,可以直接作為載體使用A.①③⑤ B.①②④ C.②④⑥ D.③⑤⑥【答案】B〖祥解〗基因工程的基本工具可概括為“分子手術刀”、“分子縫合針”和“分子運輸車”,它們分別對應限制性核酸內切酶、DNA連接酶和載體?!驹斘觥竣傧拗菩詢惹泻怂崦改芫珳首R別雙鏈DNA分子特定核苷酸序列,并切斷相應的磷酸二酯鍵,①正確;②多數(shù)限制酶識別序列為6個核苷酸,②正確;③EcoRⅠ限制酶切割后產生黏性末端,③錯誤;④T4DNA連接酶既能連接黏性末端也能連接平末端,④正確;⑤質粒是一種裸露的、結構簡單、獨立于真核細胞核或原核細胞擬核DNA之外,并具有自我復制能力的環(huán)狀雙鏈DNA分子,⑤錯誤;⑥天然的質粒不能直接被用作載體,基因工程中真正被用作載體的質粒都是在天然質粒的基礎上進行過人工改造的,⑥錯誤。綜上,①②④正確。故選B。13.在“DNA的粗提取與鑒定”實驗中,下列關于操作流程的敘述錯誤的是()A.可直接將洋蔥研磨液倒入塑料離心管中,通過離心獲取上清液B.在上清液中加入體積相等的、70%的酒精溶液,靜置2~3min,溶液中出現(xiàn)的白色絲狀物就是粗提取的DNAC.DNA在不同濃度的NaCl溶液中溶解度不同,它能溶于2mol/L的NaCl溶液D.若要鑒定絲狀物主要成分為DNA,可利用二苯胺試劑,沸水浴后觀察是否出現(xiàn)藍色【答案】B〖祥解〗實驗原理:DNA在不同濃度的NaCl溶液中溶解度不同,在0.14mol/L的NaCl溶液中溶解度最低,利用這一特性,通過改變NaCl溶液濃度,可使DNA析出或溶解,實現(xiàn)與其他物質分離;DNA不溶于酒精溶液,而細胞中的某些蛋白質可溶于酒精,用體積分數(shù)為95%的冷酒精能析出DNA,進一步提純。DNA的鑒定:在沸水浴條件下,DNA與二苯胺反應呈現(xiàn)藍色,以此鑒定DNA的存在?!驹斘觥緼、可直接將洋蔥研磨液倒入塑料離心管中,在1500r/min的轉速下離心5min,再取上清液放入燒杯中,A正確;B、在上清液中加入體積相等的、預冷的95%的酒精溶液,靜置2~3min,溶液中出現(xiàn)的白色絲狀物就是粗提取的DNA,B錯誤;C、DNA在不同濃度的NaCl溶液中溶解度不同,它能溶于2mol/L的NaCl溶液,C正確;D、在沸水浴條件下,DNA遇二苯胺會被染成藍色,所以將絲狀物溶于2mol/L的NaCl溶液后,滴加二苯胺試劑,沸水浴觀察是否出現(xiàn)藍色,可鑒定其是否為DNA,D正確。故選B。14.PCR技術是一種在生物體外快速擴增特定DNA片段的技術。在利用PCR技術擴增某DNA分子的過程中,下列相關敘述錯誤的是()A.加熱至90~95℃時,DNA雙鏈解開,該過程不需要解旋酶B.緩沖液中需提供TaqDNA聚合酶,其在高溫條件下能保持活性C.復性過程中,引物與模板DNA單鏈結合,該過程不需要酶的催化D.若進行n次循環(huán),最終得到的DNA分子中,不含引物的脫氧核苷酸鏈有2n+1條【答案】D〖祥解〗PCR全稱為聚合酶鏈式反應,是一項在生物體外復制特定DNA的核酸合成技術,其原理是DNA復制。PCR技術的前提條件是要有一段已知目的基因的核苷酸序以便合成一對引物。PCR的過程:①高溫變性:DNA解旋過程(PCR擴增中雙鏈DNA解開不需要解旋酶,高溫條件下氫鍵可自動解開);低溫復性:引物結合到互補鏈DNA上;③中溫延伸:合成子鏈。該過程所需要的條件:模板DNA、四種脫氧核苷酸、一對引物、熱穩(wěn)定DNA聚合酶(Taq酶)?!驹斘觥緼、PCR技術中,通過加熱至90~95℃使DNA雙鏈間的氫鍵斷裂,實現(xiàn)解旋,不需要解旋酶,A正確;B、PCR反應體系中需要TaqDNA聚合酶(耐高溫的DNA聚合酶),因為PCR過程中存在高溫變性步驟,普通的DNA聚合酶在高溫下會失活,而TaqDNA聚合酶能在高溫條件下保持活性,催化DNA子鏈的合成,B正確;C、復性過程是在溫度降低時,引物與模板DNA單鏈通過堿基互補配對結合,這一過程不需要酶的催化,C正確;D、若進行n次循環(huán),最終得到脫氧核苷酸鏈條數(shù)是2n+1,其中有2條不含引物,D錯誤。故選D。15.溶菌酶是動物體內產生的一種蛋白質,天然的溶菌酶在酸性環(huán)境下活性易受影響。若將溶菌酶分子中的一個亮氨酸改造成異亮氨酸,在酸性環(huán)境下其活性可顯著提高。如圖是利用蛋白質工程設計生產新型溶菌酶的流程圖。下列敘述錯誤的是()A.步驟甲中,通過X射線衍射等技術分析溶菌酶的空間結構B.步驟乙的設計需依據(jù)蛋白質的功能與結構關系來構建新模型C.步驟丙合成的新基因應能指導合成含異亮氨酸的溶菌酶D.最終獲得的新型溶菌酶活性提高,其組成的氨基酸數(shù)量改變【答案】D〖祥解〗蛋白質工程是指以蛋白質分子的結構規(guī)律及其與生物功能的關系作為基礎,通過改造或合成基因,來改造現(xiàn)有蛋白質,或制造一種新的蛋白質,以滿足人類生產和生活的需求。蛋白質工程的基本途徑是:從預期的蛋白質功能出發(fā)→設計預期的蛋白質結構→推測應有的氨基酸序列→找出相對應的脫氧核苷酸序列(基因)。【詳析】A、在蛋白質工程中,常利用X射線衍射等技術來分析蛋白質的空間結構,從而為后續(xù)改造提供基礎,A正確;B、蛋白質的功能由其結構決定,在模型設計(步驟乙)時,需要依據(jù)蛋白質的功能與結構關系,對蛋白質結構進行改造設計,構建新的蛋白質模型,B正確;C、整個流程的目的是將溶菌酶分子中的一個亮氨酸改造成異亮氨酸,使溶菌酶在酸性環(huán)境下活性顯著提高,所以步驟丙合成的新基因應能指導合成含異亮氨酸的溶菌酶,C正確;D、題干僅表明將溶菌酶分子中的一個亮氨酸改造成異亮氨酸,只是氨基酸的種類發(fā)生了改變,其組成的氨基酸數(shù)量并未改變,D錯誤。故選D。16.下列關于各項生物技術應用的敘述正確的是()A.利用發(fā)酵工程生產酸奶,接種乳酸菌后需持續(xù)通入無菌空氣以促進其快速繁殖B.在細胞工程中,植物體細胞雜交獲得的雜種植株一定能表現(xiàn)出雙親的優(yōu)良性狀C.基因工程培育轉基因抗除草劑大豆時,只能將抗除草劑基因導入大豆的受精卵中D胚胎工程中,進行胚胎移植前需對供體和受體母牛進行同期發(fā)情處理【答案】D〖祥解〗胚胎移植的基本程序:①對供、受體的選擇和處理。選擇遺傳特性和生產性能優(yōu)秀的供體,有健康的體質和正常繁殖能力的受體,供體和受體是同一物種。并用激素進行同期發(fā)情處理,用促性腺激素對供體母牛做超數(shù)排卵處理。②配種或人工授精。③對胚胎的收集、檢查、培養(yǎng)或保存。配種或輸精后第7天,用特制的沖卵裝置,把供體母牛子宮內的胚胎沖洗出來(也叫沖卵)。對胚胎進行質量檢查,此時的胚胎應發(fā)育到桑椹或胚囊胚階段。直接將受體移植或放入-196℃的液氮中保存。④對胚胎進行移植。⑤移植后的檢查。對受體母牛進行是否妊娠的檢查?!驹斘觥緼、乳酸菌是厭氧菌,發(fā)酵生產酸奶時接種乳酸菌后應密封,創(chuàng)造無氧環(huán)境,若持續(xù)通入無菌空氣,會抑制乳酸菌發(fā)酵,A錯誤;B、植物體細胞雜交獲得的雜種植株不一定能表現(xiàn)出雙親的優(yōu)良性狀,因為基因的表達受多種因素影響,可能存在基因沉默等情況,導致某些性狀無法表達,B錯誤;C、基因工程培育轉基因抗除草劑大豆時,目的基因可以導入受精卵,也可以導入體細胞,C錯誤;D、胚胎工程中,進行胚胎移植前對供體和受體母牛進行同期發(fā)情處理,可使它們的生理狀態(tài)相同,D正確。故選D。二、非選擇題:本題共5小題,共52分。17.某種除草劑(一種含氮有機物,在水中溶解度低,含一定量該除草劑的培養(yǎng)基不透明)在土壤中不易降解,長期使用會污染土壤。為修復被該除草劑污染的土壤,按圖示過程選育能降解該除草劑的細菌?;卮鹣铝袉栴}:(1)要在長期使用該除草劑的土壤中取樣的主要原因是_______。將土樣置于無菌水中(而不是清水中)的主要目的是_______。(2)圖Ⅱ中的接種方法是_______,據(jù)圖可知,接種過程中接種環(huán)需要灼燒______次,該接種方法________(填“可以”或“不可以”)用于對細菌進行計數(shù),原因是_______。(3)常用的接種方法除了圖中所示的方法外,還有_______,該方法要想獲得符合要求的菌落,要對土壤懸浮液進行充分的稀釋,原因是________。(4)圖Ⅲ培養(yǎng)基上形成的五個菌落中的細菌所利用的氮源_______(填“相同”或“不相同”)。簡述圖Ⅲ中的透明圈是如何形成的:________?!敬鸢浮浚?)①.長期使用該除草劑的土壤中可能含有能降解該除草劑的細菌(合理即可)②.防止外來雜菌污染(2)①.平板劃線法②.6③.不可以④.平板劃線法只在劃線末端出現(xiàn)單菌落,因此不能統(tǒng)計出單菌落(合理即可)(3)①.稀釋涂布平板法②.稀釋度足夠高時,聚集在一起的細菌易分散成單個細胞,從而在培養(yǎng)基表面形成單個菌落(合理即可)(4)①.不相同②.能降解該除草劑的細菌將培養(yǎng)基中的除草劑分解,使菌落周圍的培養(yǎng)基從不透明變得透明,從而形成透明圈〖祥解〗微生物常用的接種方法:稀釋涂布平板法和平板劃線法。其中,前者不僅能獲得單菌落,而且還能用于微生物計數(shù)?!窘馕觥浚?)長期受除草劑污染的土壤,為能降解該除草劑的細菌提供了生存環(huán)境,所以更有可能從中找到目標細菌。使用無菌水可避免外界雜菌混入,保證所取土樣中微生物的純凈度。(2)由圖中接種操作軌跡可判斷使用的接種方法為平板劃線法,圖Ⅱ中劃線區(qū)域有5個,在接種前后以及每次劃線前都需要灼燒接種環(huán),即灼燒6次,平板劃線法在操作過程中,隨著劃線次數(shù)增加,菌液逐漸減少,只在劃線末端出現(xiàn)單菌落,因此不能統(tǒng)計出單菌落。(3)稀釋涂布平板法也是常用的微生物接種方法,該方法可以獲得單菌落,且還可用于計數(shù),其原理是對土壤懸浮液充分稀釋,聚集在一起的細菌易分散成單個細胞,從而在培養(yǎng)基表面形成單個菌落,根據(jù)菌落的特征可篩選出能降解除草劑的細菌。(4)培養(yǎng)基上形成的兩種菌落中的細菌所利用的氮源不同,有透明圈的是能夠利用除草劑中的氮源,沒有透明圈的是不能利用除草劑中的氮源。該除草劑會使培養(yǎng)基呈現(xiàn)不透明狀態(tài),當存在能降解該除草劑的細菌時,這些細菌會分解菌落周圍的除草劑,使得菌落周圍的培養(yǎng)基不再受除草劑影響而變得透明,從而形成透明圈。18.科學家用植物體細胞雜交技術,將白菜的原生質體和甘藍的原生質體融合,成功培育出了“白菜-甘藍”雜種植株,培育過程如圖所示,其中①~⑤表示過程,a~f表示細胞、組織或植株?;卮鹣铝袉栴}:(1)過程①需要使用______(酶)處理白菜細胞和甘藍細胞,獲得的原生質體a、b要置于______(填“等滲”或“低滲”)溶液,原因是______。過程②若采用化學法誘導原生質體融合,常用的試劑是_______(寫出1種)。(2)經過④獲得的愈傷組織要轉接到誘導生______的培養(yǎng)基上,再轉接到誘導生______的培養(yǎng)基上,若要誘導生根,則生長素與細胞分裂素的比例應______(填“<1”、“=1”或“>1”)。整個操作過程中對植物組織細胞只能消毒而不能滅菌,原因是_______。(3)植物體細胞雜交的意義是______?!敬鸢浮浚?)①.纖維素酶和果膠酶②.等滲③.原生質體無細胞壁保護,在低滲溶液中會吸水漲破④.聚乙二醇(PEG)(2)①.芽②.根③.>1④.滅菌會殺死植物組織細胞,消毒可避免雜菌污染且能保留細胞活性(3)打破生殖隔離,克服遠緣雜交不親和的障礙〖祥解〗植物細胞有細胞壁阻礙融合,利用纖維素酶和果膠酶可特異性分解細胞壁成分,獲得原生質體,這是雜交的基礎步驟,體現(xiàn)酶的專一性。通過物理法或化學法促使原生質體融合,形成雜種細胞,該過程依賴細胞膜的流動性,使不同細胞的細胞膜相互融合。植物體細胞雜交的意義是傳統(tǒng)雜交受生殖隔離限制,而植物體細胞雜交打破種間界限,使不同物種的遺傳物質融合,實現(xiàn)遠緣雜交,培育出具有優(yōu)良性狀的新物種,為作物育種和品種改良開辟新途徑,拓展了植物育種的范圍和方法?!窘馕觥浚?)植物細胞壁主要成分是纖維素和果膠,所以用纖維素酶和果膠酶去除細胞壁獲得原生質體,原生質體失去了細胞壁的支撐和保護,低滲溶液的滲透壓低于原生質體內部,原生質體會吸水漲破,所以要置于等滲溶液中?;瘜W法誘導原生質體融合常用聚乙二醇(PEG)。(2)經過④獲得的愈傷組織要轉接到誘導生芽的培養(yǎng)基上,再轉接到誘導生根的培養(yǎng)基上,若要誘導生根,則生長素與細胞分裂素的比例應>1。滅菌會使植物組織細胞死亡,無法進行后續(xù)培養(yǎng),而消毒能去除部分微生物,保留細胞活性,滿足植物體細胞雜交操作需求。(3)植物體細胞雜交的意義是打破生殖隔離,克服遠緣雜交不親和的障礙。19.輪狀病毒是引起嬰幼兒腹瀉的主要病原體之一,快速準確檢測輪狀病毒十分關鍵。科研人員利用雜交瘤技術制備抗輪狀病毒衣殼蛋白(VP6)的單克隆抗體,用于檢測試劑盒開發(fā),其制備流程如圖所示?;卮鹣铝袉栴}:(1)將特定的抗原注入小鼠體內的目的是_______,獲取B淋巴細胞時,常采用______(酶)等處理使組織分散。(2)B細胞和骨髓瘤細胞的融合過程體現(xiàn)了細胞膜具有_______,進行細胞融合時除使用PEG融合法外,還可采用_______(答出1種)。(3)只考慮細胞的兩兩融合,則圖中的細胞融合過程除了產生雜交瘤細胞外,還有______,能從中篩選出雜交瘤細胞是因為________。(4)圖中最后一個環(huán)節(jié)是對細胞進行克隆培養(yǎng)和_______,最終獲得的細胞需要在_______大規(guī)模培養(yǎng)或_______增殖?!敬鸢浮浚?)①.刺激小鼠產生能分泌特異性抗體的B淋巴細胞②.胰蛋白酶##膠原蛋白酶(2)①.流動性②.滅活病毒誘導法##電融合法(3)①.B-B融合細

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