廣東湛江市大成中學(xué)2026屆生物高三上期末學(xué)業(yè)質(zhì)量監(jiān)測(cè)模擬試題考生須知：1．全卷分選擇題和非選擇題兩部分，全部在答題紙上作答。選擇題必須用2B鉛筆填涂；非選擇題的答案必須用黑色字跡的鋼筆或答字筆寫在“答題紙”相應(yīng)位置上。2．請(qǐng)用黑色字跡的鋼筆或答字筆在“答題紙”上先填寫姓名和準(zhǔn)考證號(hào)。3．保持卡面清潔，不要折疊，不要弄破、弄皺，在草稿紙、試題卷上答題無(wú)效。一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1．下列關(guān)于細(xì)胞生命歷程的敘述錯(cuò)誤的是（）A．人體造血干細(xì)胞分化為各種血細(xì)胞的過(guò)程是不可逆的B．細(xì)胞分化會(huì)導(dǎo)致mRNA的種類和數(shù)量發(fā)生改變C．細(xì)胞凋亡的速率與其功能有關(guān)，白細(xì)胞凋亡的速率比紅細(xì)胞的慢2．“海底黑煙囪”是指海底富含硫化物的高溫?zé)嵋夯顒?dòng)區(qū)，其熱液噴出時(shí)形似“黑煙”。此區(qū)域是高溫、高壓、沒有陽(yáng)光和缺乏氧氣的極端環(huán)境，卻發(fā)現(xiàn)了許多前所未見的生物，包括大得出奇的紅蛤、海蟹、血紅色的管蟲、形狀類似蒲公英的水螅生物、蠕蟲及硫細(xì)菌（類似硝化細(xì)菌）等許多生物。下列說(shuō)法正確的是（）A．該生態(tài)系統(tǒng)的能量輸入是這里特殊的生產(chǎn)者固定的太陽(yáng)能B．當(dāng)前科學(xué)家利用該區(qū)域的某些生物研制耐熱酶，體現(xiàn)了生物多樣性的間接價(jià)值C．“海底黑煙囪”生態(tài)系統(tǒng)中的生物種間關(guān)系包括捕食、競(jìng)爭(zhēng)等D．“海底黑煙囪”中的細(xì)菌若移到地面實(shí)驗(yàn)室富氧環(huán)境里，其數(shù)量會(huì)呈“S”型增長(zhǎng)3．下圖是某植物在晴天和陰天兩種不同的環(huán)境條件下，凈光合速率隨時(shí)間變化的曲線，下列敘述正確的是A．由a～b段可以看出，此時(shí)限制葉片光合速率的主要環(huán)境因素是光照強(qiáng)度和CO2濃度B．在f～h對(duì)應(yīng)時(shí)段，植物體內(nèi)有機(jī)物總量的變化情況是先減少后增加C．h～i段的變化可能與植物體內(nèi)脫落酸的含量增加有關(guān)D．j點(diǎn)時(shí)，葉肉細(xì)胞內(nèi)光合速率等于呼吸速率4．某同學(xué)進(jìn)行“制作DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)模型”活動(dòng)，現(xiàn)提供六種不同形狀和顏色的材料分別代表核苷酸的三個(gè)組成部分，還有一些小棒用以連接各種化合物，若要制作一個(gè)含10對(duì)堿基（C有6個(gè)）的DNA雙鏈模型，則需要的小棒數(shù)目為（）A．68 B．78 C．82 D．845．某實(shí)驗(yàn)小組探究一定濃度的萘乙酸（NAA）溶液和細(xì)胞分裂素（KT）溶液對(duì)棉花主根長(zhǎng)度及側(cè)根數(shù)的影響，所得結(jié)果如圖所示。下列相關(guān)敘述或推理合理的是（）A．由甲組數(shù)據(jù)可知，沒有激素的調(diào)節(jié)棉花根也能生長(zhǎng)B．乙組與甲組和丙組可分別構(gòu)成對(duì)照實(shí)驗(yàn)和對(duì)比實(shí)驗(yàn)C．NAA和KT對(duì)棉花主根的頂端優(yōu)勢(shì)的作用有協(xié)同作用D．若去除丁組棉花的主根，則棉花的側(cè)根數(shù)不受影響6．關(guān)于“觀察根尖分生組織細(xì)胞的有絲分裂實(shí)驗(yàn)”及相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（）A．在同一分生組織中可以看到處于不同分裂時(shí)期的細(xì)胞，分裂間期的細(xì)胞最多B．通過(guò)統(tǒng)計(jì)視野中不同時(shí)期的細(xì)胞數(shù)目，可比較細(xì)胞周期不同時(shí)期的時(shí)間長(zhǎng)短C．有絲分裂產(chǎn)生的子細(xì)胞染色體數(shù)目不變，在形態(tài)、結(jié)構(gòu)和生理功能上保持相似性D．培養(yǎng)洋蔥根尖時(shí)添加適量DNA合成可逆抑制劑，可使細(xì)胞停滯在細(xì)胞周期的分裂期7．某海島上，因?yàn)榻?jīng)常有大風(fēng)天氣，昆蟲中無(wú)翅的或翅特別發(fā)達(dá)的個(gè)體比翅普通（中間型）的更易生存，長(zhǎng)此以往形成了現(xiàn)在的無(wú)翅或翅特別發(fā)達(dá)的昆蟲類型。下列分析錯(cuò)誤的是A．昆蟲翅的變異是多方向且可遺傳的B．昆蟲翅的全部基因構(gòu)成了該種群的基因庫(kù)C．大風(fēng)在昆蟲翅的進(jìn)化過(guò)程中起選擇作用D．自然選擇使有利變異得到保留并逐漸積累8．（10分）如圖分別表示載體蛋白和通道蛋白介導(dǎo)的兩種物質(zhì)運(yùn)輸方式，其中通道蛋白介導(dǎo)的運(yùn)輸速率比載體蛋白介導(dǎo)的運(yùn)輸速率快1000倍以上。下列敘述錯(cuò)誤的是（）A．通道蛋白介導(dǎo)的運(yùn)輸速率較快可能是因?yàn)橄牡哪芰枯^少B．載體蛋白在細(xì)胞膜上具有一定的流動(dòng)性C．兩種膜蛋白對(duì)運(yùn)輸?shù)奈镔|(zhì)均具有專一性D．載體蛋白介導(dǎo)的運(yùn)輸速率會(huì)受到載體蛋白數(shù)量的限制二、非選擇題9．（10分）我國(guó)一科研團(tuán)隊(duì)將小麥液泡膜Na+/K+逆向轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白基因（TaNHX2基因）轉(zhuǎn)移到水稻細(xì)胞內(nèi)，獲得了轉(zhuǎn)基因耐鹽水稻新品種。圖1是獲取的含有目的基因的DNA片斷，Sau3AI、EcoRI、BamHI為三種限制酶，圖中箭頭所指為三種限制酶的切點(diǎn)；圖2是土壤農(nóng)桿菌中用于攜帶目的基因的Ti質(zhì)粒結(jié)構(gòu)示意圖。請(qǐng)分析回答：（l）據(jù)圖分析可知，要構(gòu)建基因表達(dá)載體，需要用________限制酶對(duì)DNA片段和質(zhì)粒進(jìn)行切割，再用____連接。（2）為了獲得更多的目的基因用于實(shí)驗(yàn)研究，可以用小麥葉肉細(xì)胞的基因組為模板，利用TaNHX，基因的特異引物，通過(guò)________方法進(jìn)行擴(kuò)增，該方法用到的酶是____。（3）常用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將耐鹽基因?qū)胨炯?xì)胞。先將耐鹽基因插入Ti質(zhì)粒的_________中，然后導(dǎo)入農(nóng)桿菌中，再通過(guò)農(nóng)桿菌侵染水稻細(xì)胞，將耐鹽基因插入水稻細(xì)胞的_________上，最后通過(guò)植物細(xì)胞工程中的____技術(shù)獲得轉(zhuǎn)基因植株，從而使其遺傳特性得以穩(wěn)定維持和表達(dá)。（4）為了檢測(cè)實(shí)驗(yàn)成果，科研工作者在個(gè)體水平的檢測(cè)方法是____。10．（14分）Rag2基因缺失小鼠不能產(chǎn)生成熟的淋巴細(xì)胞。科研人員利用胚眙干細(xì)胞（ES細(xì)胞）對(duì)Rag2基因缺失小鼠進(jìn)行基因治療，其技術(shù)流程如圖（圖中數(shù)字序號(hào)表示的是相關(guān)過(guò)程）。請(qǐng)回答:（1）過(guò)程①將進(jìn)行培養(yǎng)的上皮細(xì)胞注入去核的卵母細(xì)胞中，接受細(xì)胞核的卵母細(xì)胞應(yīng)處于__________________時(shí)期。（2）過(guò)程②利用的技術(shù)是____________________，當(dāng)重組胚胎培養(yǎng)到囊胚期時(shí)，可從其_________分離出ES細(xì)胞。（3）過(guò)程③中獲取的目的基因是____________________，若要將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞，需要構(gòu)建_______________________，構(gòu)建之前可以根據(jù)_______________________設(shè)計(jì)引物，利用PCR技術(shù)對(duì)目的基因進(jìn)行擴(kuò)增。為了檢測(cè)ES細(xì)胞的DNA上是否插入了干擾素基因，可采用______________技術(shù)。（4）按此方法和圖示技術(shù)流程，完成Rag2基因缺失小鼠的基因治療涉及的酶有___________和耐高溫的DNA聚合酶（Taq酶）等。通測(cè)Rag2基因的表達(dá)情況，可提取治療后小鼠骨髓細(xì)胞的蛋白質(zhì)，用__________________進(jìn)行雜交實(shí)驗(yàn)。11．（14分）雜交水稻生產(chǎn)技術(shù)是我國(guó)現(xiàn)代農(nóng)業(yè)研究的一項(xiàng)重要成果，使我國(guó)的水稻產(chǎn)量得到大幅度提高，為我國(guó)和世界糧食安全作出了重要貢獻(xiàn)。（1）具有相對(duì)性狀的水稻純合子雜交，研究者根據(jù)F1、F2的表現(xiàn)型及比例可作出的判斷包括___________，以及通過(guò)比較正、反交結(jié)果可推斷控制該性狀的基因是否位于細(xì)胞核中。（2）1970年袁隆平團(tuán)隊(duì)在水稻（野生型）中發(fā)現(xiàn)了一株雄性不育植株（雄蕊異常，不能產(chǎn)生有功能的花粉；雌蕊正常，接受外來(lái)的正常花粉能受精結(jié)實(shí)）。通過(guò)分析下圖所示的雜交實(shí)驗(yàn)，研究者發(fā)現(xiàn)該雄性不育性狀是由細(xì)胞質(zhì)基因和細(xì)胞核基因共同控制的。上述雜交中子代的細(xì)胞質(zhì)基因均由母本提供。用S表示細(xì)胞質(zhì)不育基因，N表示細(xì)胞質(zhì)可育基因。用R（R1、R2）表示細(xì)胞核中可恢復(fù)育性的基因，其等位基因r（r1、r2）無(wú)此功能。只有當(dāng)細(xì)胞質(zhì)中含有S基因，細(xì)胞核中r基因純合時(shí)，植株才表現(xiàn)出雄性不育性狀。其他類型的基因組合均為雄性可育。通過(guò)雜交一可生產(chǎn)雜交種子（利用雄性不育株生產(chǎn)可育的F1種子，供生產(chǎn)使用)；通過(guò)雜交二可用來(lái)繁殖不育系（每年繁殖出基因型相同且雄性不育的植株）。請(qǐng)以遺傳圖解的形式寫出雜交一和雜交二的親本及F1的基因型（不要求寫配子基因型）。__________________（3）研究發(fā)現(xiàn)細(xì)胞質(zhì)S基因（在線粒體DNA上）編碼的蛋白質(zhì)阻礙水稻花粉發(fā)育而導(dǎo)致雄性不育，而R基因能夠消除S基因?qū)ǚ郯l(fā)育的不利影響。為研究其中的機(jī)制，分析了不同基因型水稻的線粒體不育基因表達(dá)情況，結(jié)果見下表：根據(jù)表中結(jié)果，從R基因影響線粒體不育基因S表達(dá)的角度，解釋R基因恢復(fù)育性可能的機(jī)制。____________________________12．稻瘟病是水稻最重要的病害之一，為達(dá)到防治目的，科研人員通過(guò)轉(zhuǎn)基因技術(shù)培育出了抗稻瘟病水稻品種?；卮鹣铝袉?wèn)題：（1）通過(guò)RT-PCR技術(shù)以抗稻瘟病基因的RNA為模板擴(kuò)增出cDNA。在PCR過(guò)程中，兩個(gè)引物是_____酶的結(jié)合位點(diǎn)；用cDNA單鏈與該抗性水稻植株的單鏈DNA進(jìn)行分子雜交，可能出現(xiàn)游離的單鏈區(qū)，其原因是_____。（2）利用RT-PCR技術(shù)擴(kuò)增基因時(shí)，設(shè)計(jì)兩種引物的堿基序列的主要依據(jù)是_____，為了便于擴(kuò)增后的X基因與質(zhì)粒連接，常在兩條引物上設(shè)計(jì)加入不同的限制酶酶切位點(diǎn)，主要目的是_____。（3）基因工程中，將重組質(zhì)粒導(dǎo)入植物細(xì)胞采用最多的方法是_____，導(dǎo)入動(dòng)物受精卵采用的方法是_____。（4）若要檢測(cè)抗稻瘟病基因是否翻譯出相應(yīng)蛋白質(zhì)，可采用的分子水平的檢測(cè)方法是_____。

參考答案一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1、C【解析】

1、細(xì)胞分化在一個(gè)有性繁殖的多細(xì)胞生物個(gè)體中，胚胎細(xì)胞分裂后的未定型細(xì)胞或簡(jiǎn)單可塑性細(xì)胞，在形態(tài)和化學(xué)組成上向?qū)Ｒ恍曰蛱禺愋苑较蜣D(zhuǎn)化，演化成特定的細(xì)胞類型的這一過(guò)程。2、細(xì)胞凋亡指為維持內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定，由基因控制的細(xì)胞自主的有序的死亡。細(xì)胞凋亡與細(xì)胞壞死不同，細(xì)胞凋亡不是一件被動(dòng)的過(guò)程，而是主動(dòng)過(guò)程，它涉及一系列基因的激活、表達(dá)以及調(diào)控等的作用，它并不是病理?xiàng)l件下，自體損傷的一種現(xiàn)象，而是為更好地適應(yīng)生存環(huán)境而主動(dòng)爭(zhēng)取的一種死亡過(guò)程?！驹斀狻緼、細(xì)胞分化過(guò)程一般是不可逆的，人體造血干細(xì)胞分化為各種血細(xì)胞的過(guò)程是不可逆的，A正確；B、細(xì)胞分化產(chǎn)生的不同細(xì)胞內(nèi)的部分基因會(huì)選擇性表達(dá)，導(dǎo)致mRNA的種類和數(shù)量發(fā)生改變，B正確；C、白細(xì)胞凋亡的速率比紅細(xì)胞快，是由于細(xì)胞凋亡的速度與其自身功能密切相關(guān)，C錯(cuò)誤；故選C?！军c(diǎn)睛】結(jié)合細(xì)胞分化和細(xì)胞凋亡的內(nèi)容分析選項(xiàng)。2、C【解析】

分析：“海底黑煙囪"是高溫、高壓、沒有陽(yáng)光和缺乏氧氣的極端環(huán)境，與地表環(huán)境有很大不同，其能源是來(lái)自于地?zé)岷土蚧瘹涞难趸渲猩畹募t蛤、海蟹、管蟲、水螅生物、蠕蟲及硫細(xì)菌等生物之間也存在著復(fù)雜的種間關(guān)系?！驹斀狻緼、該生態(tài)系統(tǒng)的能量輸入是這里特殊的生產(chǎn)者通過(guò)化能合成作用獲得的能量，A錯(cuò)誤；B、利用該生態(tài)系統(tǒng)中的生物研制耐熱酶，體現(xiàn)的是生物多樣性的直接價(jià)值，B錯(cuò)誤；C、“海底黑煙囪”生態(tài)系統(tǒng)中的生物如紅蛤、海蟹、管蟲、水螅生物、蠕蟲及硫細(xì)菌等生物種間存在捕食、競(jìng)爭(zhēng)等關(guān)系，C正確；D、“海底黑煙囪”是高溫、高壓、沒有陽(yáng)光和缺乏氧氣的極端環(huán)境，將其中的細(xì)菌移到地面實(shí)驗(yàn)室富氧環(huán)境里，細(xì)菌會(huì)死亡，D錯(cuò)誤。故選C。3、C【解析】

陰天條件下，光照較弱，溫度較低，光照強(qiáng)度和溫度成為限制葉片光合速率的主要環(huán)境因素，A錯(cuò)誤；在f～h對(duì)應(yīng)時(shí)段，凈光合速率大于0，有機(jī)物總量一直在積累，B錯(cuò)誤；.h～i段氣孔關(guān)閉，脫落酸能誘導(dǎo)氣孔關(guān)閉，因此h～i段的變化可能與植物體內(nèi)脫落酸的含量增加有關(guān)，C正確；j點(diǎn)時(shí)，植物光合作用速度等于呼吸作用，因此葉肉細(xì)胞內(nèi)光合速率大于葉肉細(xì)胞內(nèi)呼吸速率，D錯(cuò)誤?！究键c(diǎn)定位】光反應(yīng)、暗反應(yīng)過(guò)程的能量變化和物質(zhì)變化【名師點(diǎn)睛】?jī)艄夂纤俾?總光合速率-呼吸速率，當(dāng)凈光合速率大于0時(shí)，表明此時(shí)的光合作用強(qiáng)度大于呼吸作用強(qiáng)度；小于0時(shí)，則表明光合作用小于呼吸作用?！驹斀狻空?qǐng)?jiān)诖溯斎朐斀猓?、D【解析】

DNA的雙螺旋結(jié)構(gòu)：①DNA分子是由兩條反向平行的脫氧核苷酸長(zhǎng)鏈盤旋而成的。②DNA分子中的脫氧核糖和磷酸交替連接，排列在外側(cè)，構(gòu)成基本骨架，堿基在內(nèi)側(cè)。③兩條鏈上的堿基通過(guò)氫鍵連接起來(lái)，形成堿基對(duì)且遵循堿基互補(bǔ)配對(duì)原則（A-T之間有2個(gè)氫鍵，C-G之間有3個(gè)氫鍵）。【詳解】該模型中含10對(duì)堿基（C有6個(gè)），則C-G堿基對(duì)6個(gè)，A-T堿基對(duì)4個(gè)，其中A和T之間有2個(gè)氫鍵，C-G之間有3個(gè)氫鍵；又由于每個(gè)脫氧核苷酸內(nèi)部有兩個(gè)化學(xué)鍵，脫氧核苷酸之間有1個(gè)化學(xué)鍵，則需要2×4+3×6+20×2+（10-1）×2=84個(gè)小棒。綜上所述，D正確，A、B、C錯(cuò)誤。故選D。5、B【解析】

分析柱形圖：該實(shí)驗(yàn)的自變量是施加試劑的種類，因變量是主根長(zhǎng)度和側(cè)根數(shù)，甲乙組對(duì)比來(lái)看，NAA能抑制主根生長(zhǎng)，甲丙組對(duì)比來(lái)看，KT能促進(jìn)主根生長(zhǎng)；乙、丁組對(duì)比可知，一定濃度的KT對(duì)NAA促進(jìn)側(cè)根生長(zhǎng)的效應(yīng)具有增強(qiáng)作用?！驹斀狻緼、棉花根內(nèi)有內(nèi)源激素，另外沒有空白對(duì)照組的原始數(shù)據(jù)，所以不能得出沒有激素的調(diào)節(jié)棉花根也能生長(zhǎng)的結(jié)論，A錯(cuò)誤；B、甲組是對(duì)照組，乙組和丙組是實(shí)驗(yàn)組，因此乙組與甲組和丙組可分別枃成對(duì)照實(shí)驗(yàn)和對(duì)比實(shí)驗(yàn)，B正確；C、NAA能一定程度地抑制根的頂端優(yōu)勢(shì)，而KT能促進(jìn)根的頂端優(yōu)勢(shì)，C錯(cuò)誤；D、若去除丁組棉花的主根，則棉花主根的頂端優(yōu)勢(shì)會(huì)解除，因此側(cè)根數(shù)可能會(huì)更多，D錯(cuò)誤。故選B。6、D【解析】

１、有絲分裂不同時(shí)期的特點(diǎn)：（１）間期：進(jìn)行DNA的復(fù)制和有關(guān)蛋白質(zhì)的合成；（２）前期：核膜、核仁逐漸解體消失，出現(xiàn)紡錘體和染色體；（３）中期：染色體形態(tài)固定、數(shù)目清晰；（４）后期：著絲點(diǎn)分裂，姐妹染色單體分開成為染色體，并均勻地移向兩極；（５）末期：核膜、核仁重建、紡錘體和染色體消失。2、有絲分裂的意義：親代細(xì)胞的染色體經(jīng)過(guò)復(fù)制后，精確地平均分配到兩個(gè)子細(xì)胞中，保持了細(xì)胞的親子代之間遺傳性狀的穩(wěn)定性?！驹斀狻緼、分裂間期所占時(shí)間最長(zhǎng)，故不同分裂時(shí)期的細(xì)胞中分裂間期的細(xì)胞最多，A正確；B、視野中不同時(shí)期的細(xì)胞數(shù)目與細(xì)胞周期不同時(shí)期的時(shí)間長(zhǎng)短成正比例，B正確；C、有絲分裂產(chǎn)生的子細(xì)胞染色體數(shù)目不變，在形態(tài)、結(jié)構(gòu)和功能上保持相似性，C正確；D、DNA復(fù)制發(fā)生在分裂間期，培養(yǎng)洋蔥根尖時(shí)添加適量DNA合成可逆抑制劑，可使細(xì)胞停滯在細(xì)胞周期的分裂間期，D錯(cuò)誤。故選D。7、B【解析】

在海島上經(jīng)常有大風(fēng)天氣，昆蟲中無(wú)翅的或翅特別發(fā)達(dá)的個(gè)體比翅普通（中間型）的更易生存，是因?yàn)槌崽貏e發(fā)達(dá)的個(gè)體不容易被大風(fēng)刮海里去，因而能存活下來(lái)并繁殖后代；無(wú)翅的可以躲避大風(fēng)，也能存活下來(lái)并繁殖后代；中間型由于翅膀不夠強(qiáng)大，容易被海風(fēng)刮到大海里淹死，在達(dá)爾文看來(lái)，自然對(duì)生物進(jìn)行了定向選擇，保留有利變異。【詳解】A、海島上昆蟲中有三種翅膀類型，說(shuō)明昆蟲翅的變異是多方向且可遺傳的，A正確；B、一個(gè)生物種群的全部等位基因的總和稱為種群的基因庫(kù)，所以昆蟲翅的全部基因不能構(gòu)成該種群的基因庫(kù)，B錯(cuò)誤；C、大風(fēng)在昆蟲翅的進(jìn)化過(guò)程中起自然選擇作用，C正確；D、自然選擇是定向的，使有利變異得到保留并逐漸積累，D正確。故選B。8、A【解析】

據(jù)圖分析，兩種溶質(zhì)分子通過(guò)載體蛋白和通道蛋白的方式都是協(xié)助擴(kuò)散，都不消耗能量?！驹斀狻緼、圖中通道蛋白介導(dǎo)的運(yùn)輸屬于協(xié)助擴(kuò)散，不需要消耗能量，A錯(cuò)誤；B、載體蛋白在運(yùn)輸物質(zhì)時(shí)變形，說(shuō)明細(xì)胞膜上具有一定的流動(dòng)性，B正確；C、兩種膜蛋白均轉(zhuǎn)運(yùn)相應(yīng)的物質(zhì)，因此兩種膜蛋白均具有專一性，C正確；D、由于載體蛋白數(shù)量有限，則介導(dǎo)的運(yùn)輸速率會(huì)受到載體蛋白數(shù)量的限制，D正確。故選A。二、非選擇題9、EcoRIDNA連接酶PCRTaq酶（或耐高溫的DNA聚合酶）T-DNA染色體DNA植物組織培養(yǎng)將轉(zhuǎn)基因水稻種植在鹽堿地上或用一定濃度的鹽水澆灌觀察結(jié)果【解析】

基因工程技術(shù)的基本步驟：（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸?kù)中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等。（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法。（4）目的基因的檢測(cè)與鑒定：分子水平上的檢測(cè)：①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)。個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。【詳解】（1）如圖所示，用EcoRI酶切可獲得目的基因，同時(shí)質(zhì)粒上也具有EcoRI酶切位點(diǎn)，因此可用EcoRI限制酶對(duì)DNA片段和質(zhì)粒進(jìn)行切割，再用DNA連接酶將兩個(gè)片段連接起來(lái)。（2）在體外可用PCR擴(kuò)增技術(shù)對(duì)目的基因進(jìn)行擴(kuò)增，PCR用的酶是耐熱的Taq酶。（3）在利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將目的基因?qū)胨炯?xì)胞（植物細(xì)胞）時(shí)，應(yīng)該將耐鹽基因插入Ti質(zhì)粒的T-DNA上，經(jīng)過(guò)轉(zhuǎn)化作用進(jìn)入水稻細(xì)胞，并將其插入水稻細(xì)胞染色體的DNA上，最后通過(guò)植物細(xì)胞工程中的植物組織培養(yǎng)技術(shù)獲得轉(zhuǎn)基因植株，從而使其遺傳特性得以穩(wěn)定維持和表達(dá)。（4）耐鹽目的基因在個(gè)體水平上的檢測(cè)方法是：將轉(zhuǎn)基因水稻種植在鹽堿地上或用一定濃度的鹽水澆灌觀察結(jié)果。【點(diǎn)睛】本題考查基因工程的相關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記基因工程的原理、操作步驟等，掌握各操作步驟中需要注意的細(xì)節(jié)，能結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確答題。10、MⅡ中早期胚胎培養(yǎng)內(nèi)細(xì)胞團(tuán)（正常的）Rag2基因含（正常的）Rag2基因的基因表達(dá)載體（正常的）Rag2基因的脫氧核苷酸序列（或堿基對(duì)序列或遺傳信息）DNA分子雜交限制性核酸內(nèi)切酶、DNA連接酶和胰蛋白酶抗Rag2蛋白的抗體【解析】

題圖分析：圖示是利用胚胎干細(xì)胞(ES細(xì)胞)對(duì)Rag2基因缺失小鼠進(jìn)行基因治療的過(guò)程圖解，其中①表示核移植過(guò)程，②表示早期胚胎培養(yǎng)過(guò)程，③表示采用基因工程技術(shù)將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞。然后將改造后的受體細(xì)胞經(jīng)過(guò)培養(yǎng)之后回輸?shù)交蛉毕菪∈篌w內(nèi)獲得治療?！驹斀狻浚?）MII中期的卵母細(xì)胞含有細(xì)胞核全能性表達(dá)的物質(zhì)和環(huán)境條件，故接受細(xì)胞核的卵母細(xì)胞應(yīng)處于MII中期，即過(guò)程①將進(jìn)行培養(yǎng)的上皮細(xì)胞注入去核的處于MII中期的卵母細(xì)胞中。（2）過(guò)程②利用的技術(shù)是早期胚胎培養(yǎng)，內(nèi)細(xì)胞團(tuán)將來(lái)發(fā)育成胚胎的各種組織，滋養(yǎng)層細(xì)胞將來(lái)發(fā)育成胎膜和胎盤，故當(dāng)重組胚胎培養(yǎng)到囊胚期時(shí)，可從其內(nèi)細(xì)胞團(tuán)分離出具有全能性的ES細(xì)胞。（3）根據(jù)題干信息可知，過(guò)程③中獲取的目的基因是（正常的）Rag2基因，若要將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞，需要構(gòu)建含（正常的）Rag2基因的基因表達(dá)載體，構(gòu)建之前可以根據(jù)Rag2基因的脫氧核苷酸序列（或堿基對(duì)序列或遺傳信息）設(shè)計(jì)引物，利用PCR技術(shù)對(duì)目的基因進(jìn)行擴(kuò)增。將目的基因?qū)隕S細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法，為了檢測(cè)ES細(xì)胞的DNA上是否插入了干擾素基因，可采用DNA分子雜交技術(shù)。（4）按此方法和圖示技術(shù)流程，完成Rag2基因缺失小鼠的基因治療涉及的技術(shù)包括基因工程、PCR技術(shù)、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)，其中基因工程涉及的酶有限制性核酸內(nèi)切酶、DNA連接酶，動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)涉及的酶有胰蛋白酶，PCR技術(shù)涉及的酶有耐高溫DNA聚合酶（Taq酶）等。檢測(cè)Rag2基因的表達(dá)情況，可采用抗原一抗體雜交法，即提取治療后小鼠骨髓細(xì)胞的蛋白質(zhì)，用抗Rag2蛋白的抗體進(jìn)行雜交實(shí)驗(yàn)?！军c(diǎn)睛】熟知圖中個(gè)步驟的含義以及操作流程是解答本題的關(guān)鍵！掌握關(guān)于基因治療的各個(gè)環(huán)節(jié)的基礎(chǔ)知識(shí)是解答本題的另一關(guān)鍵！11、通過(guò)F1的性狀表現(xiàn)可以判斷性狀的顯隱性，通過(guò)F2的性狀分離比，初步推測(cè)性狀受幾對(duì)基因控制R1不影響線粒體不育基因的轉(zhuǎn)錄,但抑制不育蛋白的產(chǎn)生或積累；R2抑制不育基因的轉(zhuǎn)錄，或在轉(zhuǎn)錄后降解不育基因的mRNA；R1、R2基因的共同作用抑制了不育基因的表達(dá)，使育性恢復(fù)正常?！窘馕觥?/p>

1、自由組合定律的實(shí)質(zhì)：位于非同源染色體上的非等位基因的分離或組合是互不干擾的；在減數(shù)分裂過(guò)程中，同源染色體上的等位基因彼此分離的同時(shí)，非同源染色體上的非等位基因自由組合。2、基因分離定律和基因自由組合定律適用于細(xì)胞核遺傳?！驹斀狻浚?）具有相對(duì)性狀的水稻純合子雜交，可以通過(guò)F1的性狀表現(xiàn)判斷性狀的顯隱性，并通過(guò)F2的性狀分離比，初步推測(cè)性狀受幾對(duì)基因控制，以及通過(guò)比較正、反交結(jié)果可推斷控制該性狀的基因是否位于細(xì)胞核中。（2）分析題中信息：用S表示細(xì)胞質(zhì)不育基因，N表示細(xì)胞質(zhì)可育基因。用R（R1、R2）表示細(xì)胞核中可恢復(fù)育性的基因，其等位基因r（r1、r2）無(wú)此功能。只有當(dāng)細(xì)胞質(zhì)中含有S基因，細(xì)胞核中r基因純合時(shí)，植株才表現(xiàn)出雄性不育性狀。綜上可知，基因型為S(r1r1r2r2)的個(gè)體表現(xiàn)為雄性不育性狀（雄蕊異常，不能產(chǎn)生有功能的花粉；雌蕊正常，接受外來(lái)的正?；ǚ勰苁芫Y(jié)實(shí)），在雜交中可用作母本；其他類型的基因組合，如：N(R1-R2-)、N(r1r1r2r2)、S(R1-R2-)等均為雄性可育。想要通過(guò)雜交一得到可生產(chǎn)的雜交種子，即利用雄性不育株S(r1r1r2r2)生產(chǎn)可育的F1種子，供生產(chǎn)使用，則應(yīng)選用的雜交組合為S(r1r1r2r2)♀×N(R1R1R2R2)♂；通過(guò)雜交二用來(lái)繁殖不育系，每年繁殖出基因型相同且雄性不育的植株，即純合的雄性不育植株S(r1r1r2r2)，應(yīng)選用的雜交組合為S(r1r1r2r2)♀×N(r1r1r2r2)♂，可知雜交過(guò)程如下：（3）分析表格中的數(shù)據(jù)可知，S(R1R1r2r2)與S(r1r1r2r2)相比，不育基因轉(zhuǎn)錄的mRNA含量相同，但不育基因編碼的蛋白質(zhì)減少，說(shuō)明R1不影響線粒體不育基因的轉(zhuǎn)錄,但抑制不育蛋白的產(chǎn)生或積累；S(r1r1R2R2)與S(r1r1r2r2)相比，不育基因轉(zhuǎn)錄的mRNA含量和不育基因編碼的蛋白質(zhì)均減少，說(shuō)明R2抑制不育基因的轉(zhuǎn)錄，或在轉(zhuǎn)錄后降解不育基因的mRNA；S(R1R1R2R2)與S(r1r1r2r2)相比，水稻育性恢復(fù)正常，說(shuō)明R1、R2基因的共同作用抑制了不育基因的表達(dá)，使育性恢復(fù)正常?！军c(diǎn)睛】本題難度較大，通過(guò)雜交水稻育性的內(nèi)容，考查考生從題干中獲取信息、設(shè)計(jì)遺傳實(shí)驗(yàn)的能力，解決本題的關(guān)鍵是要對(duì)自由組合定律的內(nèi)容掌握全面，且對(duì)細(xì)胞質(zhì)遺傳和細(xì)胞核遺傳有一定了解，能夠進(jìn)行知識(shí)遷移，用所學(xué)遺傳學(xué)知識(shí)，解決實(shí)際問(wèn)題。12、熱穩(wěn)定DNA聚合DNA分子含有內(nèi)含子非編碼區(qū)等序列，mRNA分子中沒有相應(yīng)互補(bǔ)的堿基序列X基因兩端的部分脫氧核苷酸序列使X基因能定向插入表達(dá)載體，減少自連農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法顯微注射法抗原-抗體雜交【解析】