生物樣本凍存技術(shù)專員崗位招聘考試試卷及答案一、填空題（每題1分，共10分）1.細(xì)胞凍存液中常用的保護(hù)劑是______。2.細(xì)胞凍存的理想降溫速率為______℃/min左右。3.長期凍存生物樣本的常用容器是______。4.凍存管的材質(zhì)通常要求耐______（溫度）。5.樣本復(fù)蘇時(shí)，應(yīng)將凍存管迅速投入______℃水浴中。6.組織凍存前需將樣本切割成______的小塊。7.液氮罐的安全閥作用是______。8.凍存樣本的標(biāo)識(shí)需包含______、凍存日期、樣本類型等。9.細(xì)胞凍存后，應(yīng)先置于______℃冰箱過夜，再轉(zhuǎn)入液氮。10.避免凍存樣本污染的關(guān)鍵操作是______。二、單項(xiàng)選擇題（每題2分，共20分）1.下列哪種降溫方式最適合大多數(shù)動(dòng)物細(xì)胞凍存？A.快速投入液氮B.程序降溫儀（-1℃/min）C.室溫放置D.4℃冰箱過夜2.液氮罐的保存溫度約為？A.-80℃B.-196℃C.0℃D.4℃3.細(xì)胞凍存液中DMSO的常用濃度是？A.5%B.10%C.20%D.30%4.復(fù)蘇細(xì)胞時(shí)，凍存管在37℃水浴中解凍的時(shí)間一般不超過？A.1minB.2minC.5minD.10min5.組織凍存前，是否需要去除樣本中的血液？A.需要B.不需要C.視樣本類型而定D.僅需去除動(dòng)脈血6.凍存管的密封要求是？A.僅需蓋緊蓋子B.需用石蠟密封管口C.需用膠帶纏繞D.無特殊要求7.細(xì)胞凍存前，離心收集細(xì)胞的常用轉(zhuǎn)速是？A.500rpm×5minB.1000rpm×5minC.2000rpm×10minD.3000rpm×5min8.長期凍存樣本（>1年）應(yīng)放置在？A.-80℃冰箱B.液氮罐氣相C.液氮罐液相D.4℃冰箱9.下列哪種樣本凍存不需要添加保護(hù)劑？A.原代細(xì)胞B.腫瘤組織C.細(xì)菌D.某些病毒10.凍存記錄中不需要包含的信息是？A.樣本來源B.凍存者姓名C.樣本重量D.解凍次數(shù)三、多項(xiàng)選擇題（每題2分，共20分）1.細(xì)胞凍存液的主要成分包括？A.DMSOB.胎牛血清（FBS）C.基礎(chǔ)培養(yǎng)基D.抗生素2.細(xì)胞凍存的注意事項(xiàng)有？A.避免反復(fù)凍融B.樣本標(biāo)識(shí)清晰唯一C.快速解凍復(fù)蘇D.凍存前細(xì)胞活力>90%3.液氮罐的維護(hù)要點(diǎn)包括？A.定期檢查液氮量（每周1次）B.避免罐內(nèi)進(jìn)入水分C.安全閥定期校驗(yàn)D.長期不用需排空液氮4.組織凍存的預(yù)處理步驟有？A.去除脂肪、壞死組織B.切割成小塊C.加入預(yù)冷凍存液D.立即投入液氮5.樣本復(fù)蘇的正確操作是？A.37℃水浴快速解凍B.解凍后立即離心棄上清C.加入預(yù)溫培養(yǎng)基重懸D.靜置10min后再培養(yǎng)6.凍存樣本標(biāo)識(shí)應(yīng)包含的信息有？A.樣本編號(hào)B.凍存日期C.樣本類型D.凍存位置7.細(xì)胞凍存時(shí)，降溫過程中可使用的輔助工具是？A.程序降溫儀B.異丙醇凍存盒C.干冰D.液氮8.液氮罐的類型包括？A.儲(chǔ)存罐B.運(yùn)輸罐C.氣相罐D(zhuǎn).液相罐9.避免凍存樣本污染的措施有？A.無菌操作B.使用一次性凍存管C.樣本間保持距離D.定期消毒液氮罐10.凍存樣本的質(zhì)量控制指標(biāo)包括？A.細(xì)胞活力B.組織完整性C.核酸純度D.蛋白質(zhì)含量四、判斷題（每題2分，共20分）1.凍存液中DMSO濃度越高，細(xì)胞保護(hù)效果越好。（）2.細(xì)胞凍存應(yīng)采用快速降溫、緩慢復(fù)蘇的方式。（）3.組織凍存前需徹底解凍后再處理。（）4.液氮罐中的樣本可長期暴露在空氣中。（）5.復(fù)蘇細(xì)胞時(shí)應(yīng)將凍存管緩慢放入37℃水浴。（）6.凍存樣本的標(biāo)識(shí)需包含樣本名稱和凍存日期。（）7.DMSO是常用的細(xì)胞凍存保護(hù)劑，具有低毒性。（）8.液氮罐液氮量應(yīng)保持在總?cè)萘康?/3以上，防止樣本暴露。（）9.反復(fù)凍融對(duì)樣本的細(xì)胞活力、核酸質(zhì)量無影響。（）10.細(xì)胞凍存后，可直接放入液氮罐中。（）五、簡答題（每題5分，共20分）1.簡述細(xì)胞凍存的基本步驟。2.組織凍存與細(xì)胞凍存的主要區(qū)別是什么？3.液氮罐使用的注意事項(xiàng)有哪些？4.樣本凍存記錄應(yīng)包含哪些核心信息？六、討論題（每題5分，共10分）1.如何減少凍存樣本的反復(fù)凍融對(duì)其質(zhì)量的影響？2.當(dāng)液氮罐液氮量不足時(shí)，應(yīng)采取哪些應(yīng)急措施？---答案部分一、填空題答案1.二甲基亞砜（DMSO）2.-13.液氮罐4.低溫（-196℃）5.376.0.5-1cm37.釋放罐內(nèi)壓力，防止爆炸8.樣本編號(hào)9.-8010.無菌操作二、單項(xiàng)選擇題答案1.B2.B3.B4.B5.A6.B7.B8.C9.D10.D三、多項(xiàng)選擇題答案1.ABC2.ABCD3.ABC4.ABC5.ABC6.ABCD7.AB8.ABCD9.ABC10.ABC四、判斷題答案1.×2.×3.×4.×5.×6.√7.√8.√9.×10.×五、簡答題答案1.①收集對(duì)數(shù)生長期細(xì)胞，離心棄上清；②加入預(yù)冷凍存液（10%DMSO+90%FBS）重懸，調(diào)整細(xì)胞濃度；③分裝至凍存管，密封并標(biāo)注信息；④先置于-80℃冰箱過夜，次日轉(zhuǎn)入液氮罐長期凍存。2.①樣本類型：細(xì)胞為懸浮/貼壁細(xì)胞，組織為實(shí)體組織；②預(yù)處理：組織需切割成小塊、去除雜質(zhì)，細(xì)胞無需；③凍存液：組織可能需添加特定保護(hù)劑，細(xì)胞常用DMSO+FBS；④降溫：組織可稍快降溫，細(xì)胞需慢凍（-1℃/min）；⑤復(fù)蘇：組織需緩慢解凍，細(xì)胞需快速解凍。3.①戴防護(hù)裝備（手套、護(hù)目鏡），避免液氮接觸皮膚；②定期檢查液氮量（每周1次），保持1/3以上；③避免罐內(nèi)進(jìn)水，防止爆炸；④安全閥定期校驗(yàn)，確保正常；⑤樣本取放時(shí)輕拿輕放，避免污染；⑥長期不用需排空液氮，干燥保存。4.①樣本基本信息：編號(hào)、名稱、類型、來源、數(shù)量；②凍存信息：日期、時(shí)間、操作者、凍存位置；③樣本狀態(tài)：細(xì)胞活力、組織完整性、核酸純度；④其他：凍存液成分、降溫方式、異常記錄等。六、討論題答案1.①合理分裝樣本：將樣本分成小份（如100μL/管），避免一次解凍全部樣本；②規(guī)范操作：復(fù)蘇時(shí)快速解凍（37℃水浴<2min），解凍后立即使用，不再次凍存；③優(yōu)化凍存方式：采用程序降溫儀保證降溫速率，減少細(xì)胞損傷；④記錄解凍次數(shù)：對(duì)反復(fù)解凍的樣本及時(shí)標(biāo)記，優(yōu)先使用；⑤備份樣本：重要樣本制備多份凍存，減少單份樣本的使用頻率。2.