病理科技術操作管理手冊一、標本接收與登記1.標本接收每天由專人負責接收來自各臨床科室的標本。接收時，需核對標本信息，包括患者姓名、性別、年齡、住院號、科室、標本名稱、標本數(shù)量等，確保與申請單信息一致。對于信息不完整或有疑問的標本，及時與臨床科室溝通補充或核實。檢查標本的固定情況，固定液應足量（一般為標本體積的510倍），常用固定液為10%中性福爾馬林。若標本未固定或固定不充分，應重新固定或延長固定時間。對于特殊標本，如需要特殊固定液（如Zenker固定液用于某些神經(jīng)組織）的，應按照要求進行處理。2.標本登記將接收的標本信息準確錄入計算機管理系統(tǒng)，同時在紙質登記本上進行登記。登記內容除上述基本信息外，還應包括標本接收時間、接收人等。對于批量標本，可采用條形碼管理系統(tǒng)，提高工作效率和準確性。對標本進行編號，編號應具有唯一性，便于后續(xù)的查詢和管理。編號規(guī)則可根據(jù)醫(yī)院實際情況制定，一般采用年份+月份+流水號的形式。二、標本取材1.取材前準備取材人員應穿戴好防護用品，如工作服、口罩、手套等。檢查取材所需的器械，如手術刀、剪刀、鑷子等是否鋒利、完好，確保取材操作順利進行。根據(jù)標本類型和檢查目的，準備合適的包埋盒和固定液。包埋盒應干凈、無破損，規(guī)格根據(jù)標本大小選擇。2.取材操作取材時，應嚴格按照解剖學部位和病變情況進行，確保所取組織具有代表性。對于手術切除標本，應全面觀察標本的外觀、大小、形狀、顏色等，記錄病變的位置、大小、數(shù)量等信息。對于腫瘤標本，除取病變組織外，還應取病變周圍的正常組織、切緣組織等，以判斷腫瘤的浸潤范圍和手術切緣是否陽性。取材厚度一般為23mm，大小根據(jù)包埋盒規(guī)格適當調整。取材過程中，應注意避免組織擠壓、損傷，保持組織的完整性。對于微小標本，如穿刺活檢標本，應小心操作，防止標本丟失。3.取材后處理將取材后的組織放入相應的包埋盒中，注明標本編號、取材部位等信息。包埋盒應及時放入固定液中，確保組織充分固定。清理取材臺面和器械，將器械進行清洗、消毒，以備下次使用。三、脫水處理1.脫水劑選擇常用的脫水劑為梯度酒精，一般從70%酒精開始，依次經(jīng)過80%、90%、95%酒精，最后用無水酒精脫水。脫水劑的濃度和脫水時間應根據(jù)組織的大小、類型和固定情況進行調整。對于某些特殊組織，如脂肪組織、腦組織等，可采用特殊的脫水方法或添加其他脫水劑，如正丁醇、叔丁醇等，以提高脫水效果。2.脫水操作將固定好的組織從包埋盒中取出，放入脫水吊籃中。按照脫水程序，依次將組織放入不同濃度的脫水劑中進行脫水。脫水時間一般為：70%酒精24小時，80%酒精24小時，90%酒精24小時，95%酒精24小時，無水酒精Ⅰ24小時，無水酒精Ⅱ24小時。脫水過程中，應注意脫水劑的更換時間和順序，確保脫水效果。同時，要保持脫水設備的正常運行，定期檢查脫水劑的濃度和水位。四、透明處理1.透明劑選擇常用的透明劑為二甲苯。透明劑應具有良好的透明效果，能使組織變得透明，便于石蠟浸入。2.透明操作將脫水后的組織從無水酒精中取出，放入透明劑中進行透明處理。透明時間一般為：二甲苯Ⅰ12小時，二甲苯Ⅱ12小時。透明時間不宜過長，以免組織變脆。透明過程中，應觀察組織的透明程度，當組織變得透明、無白色混濁現(xiàn)象時，說明透明效果良好。五、浸蠟處理1.石蠟選擇選擇熔點適宜的石蠟，一般為5658℃。石蠟應純凈、無雜質，具有良好的韌性和硬度。2.浸蠟操作將透明后的組織從透明劑中取出，放入熔化的石蠟中進行浸蠟處理。浸蠟程序一般為：石蠟Ⅰ12小時，石蠟Ⅱ12小時，石蠟Ⅲ12小時。浸蠟過程中，應保持石蠟的溫度恒定，避免石蠟凝固。浸蠟結束后，將組織放入包埋模具中，加入熔化的石蠟進行包埋。包埋時，應注意組織的擺放方向和位置，確保切片質量。六、切片制作1.切片前準備檢查切片機的性能，確保切片機運轉正常。安裝合適的刀片，刀片應鋒利、無缺口。將包埋好的組織塊固定在切片機的標本夾上，調整組織塊的位置和角度，使組織切面與刀片垂直。2.切片操作根據(jù)組織的類型和要求，調整切片厚度，一般為46μm。啟動切片機，緩慢推進組織塊，進行切片操作。切片過程中，應保持切片的連續(xù)性和完整性，避免切片破碎、折疊。對于較硬的組織，如骨組織、鈣化組織等，可采用特殊的切片方法，如磨片法、脫鈣后切片法等。3.切片后處理將切好的切片用毛筆輕輕挑起，放入溫水中展平。然后將切片撈到載玻片上，用烤片機烘干，使切片牢固地附著在載玻片上。清理切片機和切片臺面，將刀片取下進行清洗、消毒，妥善保存。七、染色處理1.蘇木精伊紅（HE）染色（1）脫蠟至水將烘干的切片放入二甲苯中脫蠟，一般為二甲苯Ⅰ510分鐘，二甲苯Ⅱ510分鐘。然后依次經(jīng)過無水酒精Ⅰ、無水酒精Ⅱ、95%酒精、90%酒精、80%酒精、70%酒精，每個梯度酒精中浸泡23分鐘，最后用蒸餾水沖洗。（2）蘇木精染色將切片放入蘇木精染液中染色510分鐘，然后用自來水沖洗。用鹽酸酒精分化液分化數(shù)秒，再用自來水沖洗，使細胞核呈藍色。（3）伊紅染色將切片放入伊紅染液中染色13分鐘，然后用蒸餾水沖洗。（4）脫水、透明、封片將染色后的切片依次經(jīng)過95%酒精Ⅰ、95%酒精Ⅱ、無水酒精Ⅰ、無水酒精Ⅱ脫水，每個梯度酒精中浸泡23分鐘。然后放入二甲苯Ⅰ、二甲苯Ⅱ中透明，每個二甲苯中浸泡510分鐘。最后用中性樹膠封片。2.特殊染色根據(jù)診斷需要，可進行特殊染色，如免疫組織化學染色、原位雜交染色等。特殊染色應嚴格按照操作規(guī)程進行，包括抗原修復、抗體孵育、顯色等步驟。特殊染色過程中，應設置陽性對照和陰性對照，以確保染色結果的準確性。染色結束后，應及時觀察和記錄染色結果。八、封片1.封片劑選擇常用的封片劑為中性樹膠，具有良好的透明度和粘性。封片劑應無氣泡、無雜質，對組織無損害。2.封片操作將染色后的切片從二甲苯中取出，用鑷子輕輕夾起，在干凈的濾紙上吸去多余的二甲苯。然后在切片上滴加適量的封片劑，蓋上蓋玻片，注意避免產生氣泡。用濾紙擦去蓋玻片周圍多余的封片劑，將封好的切片放入切片盒中，妥善保存。九、質量控制1.標本質量控制定期檢查標本的固定情況，確保固定液的濃度和用量符合要求。對固定不充分或固定過度的標本，應及時采取相應的處理措施。檢查標本的取材部位和取材方法是否正確，確保所取組織具有代表性。對于取材不當?shù)臉吮?，應重新取材?.切片質量控制定期檢查切片的厚度、平整度、連續(xù)性等指標，確保切片質量符合要求。對于切片質量不佳的標本，應重新切片。檢查切片的染色效果，包括細胞核和細胞質的染色情況、染色的均勻性等。對于染色不佳的切片，應重新染色。3.試劑質量控制定期檢查試劑的質量，包括試劑的濃度、有效期、穩(wěn)定性等。對過期或質量不合格的試劑，應及時更換。在使用新的試劑前，應進行質量驗證，確保試劑的性能符合要求。十、檔案管理1.切片檔案管理將封好的切片按照編號順序放入切片盒中，存放在切片柜中。切片柜應保持干燥、通風，避免切片受潮、發(fā)霉。建立切片檔案數(shù)據(jù)庫，記錄切片的基本信息，如患者姓名、住院號、標本編號、切片日期、診斷結果等。方便查詢和統(tǒng)計。2.病理報告檔案管理將病理報告按照編號順序進行裝訂，存放在檔案柜中。檔案柜應妥善保管，防止檔案丟失、損壞。建立病理報告電子檔案數(shù)據(jù)庫，將病理報告掃描成電子文檔，存儲在計算機服務器中。方便遠程查詢和共享。十一、安全管理1.生物安全病理科工作人員應嚴格遵守生物安全操作規(guī)程，穿戴好防護用品，避免接觸標本中的病原體。對廢棄的標本、組織、試劑等應按照生物安全要求進行處理，如高壓滅菌、化學消毒等。定期對工作環(huán)境進行消毒，保持工作環(huán)境的清潔衛(wèi)生。2.化學安全病理科使用的試劑大多具有毒性和