高級(jí)中學(xué)名校試卷PAGEPAGE1天津市五區(qū)縣重點(diǎn)校聯(lián)考2024-2025學(xué)年高二下學(xué)期4月期中第Ⅰ卷（共50分）一、選擇題（本題共20小題，1~10每題2分，11~20每題3分，共50分，在每題列出的四個(gè)選項(xiàng)中，只有一項(xiàng)是最符合題目要求的。1.無(wú)菌操作是生物實(shí)驗(yàn)中一項(xiàng)重要的基本操作。下列過(guò)程不需要嚴(yán)格無(wú)菌操作的是（）A.傳統(tǒng)泡菜的制作 B.酵母菌的純培養(yǎng)C.動(dòng)物細(xì)胞的傳代培養(yǎng) D.花藥離體培養(yǎng)【答案】A〖祥解〗在傳統(tǒng)生物技術(shù)中，無(wú)需進(jìn)行嚴(yán)格滅菌，根據(jù)目的菌種的代謝特征設(shè)置相應(yīng)的培養(yǎng)條件?！驹斘觥吭趥鹘y(tǒng)生物技術(shù)中，如傳統(tǒng)泡菜的制作過(guò)程，不需要嚴(yán)格的無(wú)菌操作，通常是根據(jù)目的菌種的代謝特征設(shè)置相應(yīng)的培養(yǎng)條件進(jìn)行的，而實(shí)驗(yàn)室中的一些生物工程技術(shù)，如酵母菌的純培養(yǎng)、動(dòng)物細(xì)胞的傳代培養(yǎng)、花藥離體培養(yǎng)等需要嚴(yán)格的無(wú)菌操作，A正確，BCD錯(cuò)誤。故選A。2.利用傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)制作的果酒、腐乳、泡菜等極大地豐富了人們的飲食，它們是我國(guó)傳統(tǒng)飲食文化的重要組成部分。下列有關(guān)敘述正確的是（）A.制作果酒、腐乳和泡菜所利用的主要微生物均含有細(xì)胞核B.制作腐乳時(shí)主要利用了毛霉產(chǎn)生的淀粉酶將淀粉分解成單糖C.泡菜咸而不酸的原因可能是加入食鹽過(guò)少導(dǎo)致雜菌大量增殖D.在果酒發(fā)酵基礎(chǔ)上進(jìn)行果醋制作，需升高溫度、增加通氣性【答案】D〖祥解〗參與果酒制作的微生物是酵母菌；參與果醋制作的微生物是醋酸菌，醋酸菌能將糖或酒精轉(zhuǎn)變成醋酸；參與腐乳制作的微生物有多種，如青霉、酵母、曲霉、毛霉等，其中起主要是毛霉；參與泡菜制作的微生物是乳酸菌?！驹斘觥緼、果酒制作主要用酵母菌（真核生物，有細(xì)胞核），腐乳用毛霉（真核生物，有細(xì)胞核），但泡菜用乳酸菌（原核生物，無(wú)細(xì)胞核），A錯(cuò)誤；B、腐乳制作中，毛霉分泌蛋白酶和脂肪酶分解蛋白質(zhì)和脂肪，而非淀粉酶分解淀粉，B錯(cuò)誤；C、泡菜“咸而不酸”可能因食鹽濃度過(guò)高抑制乳酸菌活動(dòng)，而非鹽過(guò)少導(dǎo)致雜菌增殖，C錯(cuò)誤；D、果酒發(fā)酵（酵母菌，20℃、無(wú)氧）轉(zhuǎn)果醋發(fā)酵（醋酸菌，30-35℃、有氧），需升高溫度并通氣，D正確。故選D。3.下列關(guān)于細(xì)胞工程的說(shuō)法，正確的是（）A.滅活的病毒失去了其抗原結(jié)構(gòu)，但保留感染能力，可用于誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合B.植物細(xì)胞培養(yǎng)的主要目的是獲得植物在生長(zhǎng)和生存過(guò)程中必需的次生代謝物C.囊胚從透明帶中伸展出來(lái)的過(guò)程稱為“孵化”D.源于自身的iPS細(xì)胞移植回患者后，患者需服用免疫抑制劑【答案】C〖祥解〗滅活病毒誘導(dǎo)細(xì)胞融合的原理是：病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能夠與細(xì)胞膜上的糖蛋白發(fā)生作用，使細(xì)胞互相凝聚，細(xì)胞膜上的蛋白質(zhì)分子和脂質(zhì)分子重新排布，細(xì)胞膜打開(kāi)，細(xì)胞發(fā)生融合。【詳析】A、滅活病毒是指用物理或化學(xué)手段使其失去感染能力，但保留其表面抗原結(jié)構(gòu)，從而誘導(dǎo)細(xì)胞膜融合，若仍保留感染能力，則滅活不徹底，無(wú)法安全使用，A錯(cuò)誤；B、植物細(xì)胞培養(yǎng)的主要目的包括快速繁殖和獲得次生代謝產(chǎn)物，但次生代謝物（如紫杉醇）并非植物生長(zhǎng)生存所必需，而是特定條件下產(chǎn)生的物質(zhì)，B錯(cuò)誤；C、囊胚發(fā)育到一定階段后，會(huì)突破透明帶并伸展出來(lái)，此過(guò)程稱為孵化，是胚胎著床前的必要步驟，C正確；D、iPS細(xì)胞由患者自身體細(xì)胞重編程獲得，移植后無(wú)免疫排斥反應(yīng)，無(wú)需使用免疫抑制劑，D錯(cuò)誤。故選C。4.下表是幾種限制酶的識(shí)別序列及切割位點(diǎn)。據(jù)表分析，下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（）限制酶HindIIAluIBamHISau3AI識(shí)別序列及切割位點(diǎn)5'-GTY↓RAC-3'5'-AG↓CT-3'5'-G↓GATCC-3'5'-↓GATC-3'（注：Y表示C或T，R表示A或G）A.限制酶作用于磷酸二酯鍵B.一種限制酶可識(shí)別不只一種核苷酸序列C.AluI切割后的DNA片段可用T4DNA連接酶連接D.將BamHI和Sau3AI切割形成的片段連接后，一定能被這兩種酶識(shí)別并切割【答案】D〖祥解〗限制酶的特點(diǎn)：作用于DNA鏈的磷酸二酯鍵，識(shí)別特定的脫氧核苷酸序列，并在特定的位點(diǎn)進(jìn)行切割，切割后可能形成黏性末端或平末端?！驹斘觥緼、限制酶作用于DNA鏈的磷酸二酯鍵，切割后形成黏性末端或平末端，A正確；B、HindII的識(shí)別序列為GTY↓RAC（Y為C或T，R為A或G），可識(shí)別多種序列（如GTCGAC、GTTAGA等），B正確；C、AluI切割后產(chǎn)生平末端，T4DNA連接酶既能連接黏性末端也能連接平末端，C正確；D、BamHI切割后產(chǎn)生黏性末端GATCC，Sau3AI切割后產(chǎn)生GATC。兩者連接可能形成新序列（如GATCGATC），但該序列可能不包含BamHI的完整識(shí)別位點(diǎn)（GGATCC），故將BamHI和Sau3AI切割形成的片段連接后，不能被BamHI識(shí)別并切割，D錯(cuò)誤。故選D。5.在微生物學(xué)中使用選擇培養(yǎng)基讓特定種類(lèi)的微生物生長(zhǎng)，同時(shí)抑制或阻止其他種類(lèi)微生物生長(zhǎng)的過(guò)程稱為選擇培養(yǎng)。在選擇培養(yǎng)基中添加一些特殊物質(zhì)，則可配制成鑒別培養(yǎng)基。下列說(shuō)法錯(cuò)誤的是（）A.培養(yǎng)乳酸桿菌時(shí)，需在培養(yǎng)基中添加維生素B.以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基分離出的細(xì)菌可能不止一種C.固氮菌能在不加氮源的培養(yǎng)基中生長(zhǎng)，說(shuō)明固氮菌為自養(yǎng)型生物D.在以纖維素為唯一碳源的培養(yǎng)基中加入剛果紅，可篩選纖維素分解菌【答案】C〖祥解〗選擇培養(yǎng)基的原理是：不同微生物在代謝過(guò)程中所需要的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和環(huán)境不同。有的適于酸性環(huán)境，有的適于堿性環(huán)境；如培養(yǎng)酵母菌和霉菌，可在培養(yǎng)基中加入青霉素；培養(yǎng)金黃色葡萄球菌，可在培養(yǎng)基中加入高濃度的食鹽?！驹斘觥緼、乳酸桿菌屬于異養(yǎng)型微生物，生長(zhǎng)需要維生素等生長(zhǎng)因子，因此培養(yǎng)基中需添加維生素以滿足其需求，A正確；B、以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基，但可能存在多種能分解尿素的細(xì)菌（如不同種類(lèi)的尿素分解菌），因此分離出的細(xì)菌可能不止一種，B正確；C、固氮菌能在無(wú)氮培養(yǎng)基中生長(zhǎng)是因?yàn)槠淠芄潭諝庵械腘?，但其碳源需依賴培養(yǎng)基中的有機(jī)物（如葡萄糖），屬于異養(yǎng)型而非自養(yǎng)型（自養(yǎng)型需以CO?為碳源），C錯(cuò)誤；D、以纖維素為唯一碳源的培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基，可篩選出纖維素分解菌；剛果紅的作用是鑒別（通過(guò)透明圈判斷是否分解纖維素），而非直接篩選，但選項(xiàng)描述“篩選”實(shí)為選擇培養(yǎng)基的功能，D正確。故選C。6.下列有關(guān)發(fā)酵工程的敘述，正確的是（）A.缺少糖源時(shí)，醋酸菌可將乙醇直接轉(zhuǎn)化為醋酸B.發(fā)酵結(jié)束后，可采用過(guò)濾、沉淀等方法獲得微生物代謝產(chǎn)物C.接種環(huán)可直接在酒精燈火焰的充分燃燒層灼燒，以達(dá)到徹底滅菌D.啤酒發(fā)酵過(guò)程中大部分糖的分解和代謝物的生成都在后發(fā)酵階段完成【答案】C【詳析】果醋制作的菌種是醋酸菌，代謝類(lèi)型是需氧型細(xì)菌，屬于原核細(xì)胞，條件是30～35℃、一直需氧。當(dāng)氧氣、糖源都充足時(shí)，醋酸菌將葡萄汁中的果糖分解成醋酸；當(dāng)缺少糖源時(shí)，醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰賹⒁胰┳優(yōu)榇姿??！枷榻狻紸、醋酸菌在缺少糖源時(shí)，需先將乙醇氧化為乙醛，再轉(zhuǎn)化為醋酸，并非直接轉(zhuǎn)化，A錯(cuò)誤；B、過(guò)濾、沉淀通常用于分離菌體，而代謝產(chǎn)物若為胞外產(chǎn)物（如酒精、抗生素）需通過(guò)蒸餾或萃取等方法從濾液中獲取，B錯(cuò)誤；C、接種環(huán)滅菌需在酒精燈火焰的充分燃燒層（外焰）灼燒至通紅，高溫可殺滅所有微生物（包括芽孢），達(dá)到徹底滅菌，C正確；D、啤酒發(fā)酵中，大部分糖的分解和代謝物生成發(fā)生在主發(fā)酵階段，后發(fā)酵主要用于澄清和風(fēng)味完善，D錯(cuò)誤。故選C。7.植物細(xì)胞工程在農(nóng)業(yè)、醫(yī)藥工業(yè)等方面有著廣泛應(yīng)用，下列敘述錯(cuò)誤的是（）A.利用植物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)生產(chǎn)紫草寧的主要原理是細(xì)胞增殖B.利用單倍體育種技術(shù)培育單育1號(hào)煙草大大縮短了育種年限C.利用植物組織培養(yǎng)技術(shù)進(jìn)行作物脫毒能獲得大量抗毒幼苗D.利用植物體細(xì)胞雜交技術(shù)培育雜種植株的過(guò)程體現(xiàn)了植物細(xì)胞的全能性【答案】C〖祥解〗植物細(xì)胞工程的實(shí)際應(yīng)用有快速繁殖、作物脫毒、單倍體育種、突變體的利用、細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)?！驹斘觥緼、紫草寧的生產(chǎn)屬于細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)，利用植物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)，其原理是細(xì)胞增殖（有絲分裂），通過(guò)細(xì)胞分裂增加細(xì)胞數(shù)量以產(chǎn)生更多次生代謝物，A正確；B、單倍體育種通過(guò)花粉離體培養(yǎng)獲得單倍體植株，再經(jīng)秋水仙素處理使其染色體加倍，直接得到純合體，無(wú)需多代自交，顯著縮短育種年限，B正確；C、作物脫毒采用莖尖等分生組織進(jìn)行組織培養(yǎng)，因分生區(qū)病毒極少，可獲得脫毒苗，但脫毒苗本身不具抗病毒能力，選項(xiàng)“抗毒”表述錯(cuò)誤，C錯(cuò)誤；D、植物體細(xì)胞雜交需將雜種細(xì)胞培育為植株，該過(guò)程依賴細(xì)胞的全能性，D正確。故選C。8.下列有關(guān)實(shí)驗(yàn)的相關(guān)說(shuō)法，正確的是（）A.瓊脂糖凝膠電泳時(shí)，DNA分子越大，遷移速率越快B.過(guò)濾液放入4℃冰箱或加入預(yù)冷的酒精都可抑制DNA酶的活性C.利用酒精初步分離DNA與蛋白質(zhì)的原理是DNA溶于酒精D.提取到的絲狀物與二苯胺溶液充分混勻后即可變?yōu)樗{(lán)色【答案】B〖祥解〗DNA不溶于酒精，而某些蛋白質(zhì)溶于酒精；鑒定DNA時(shí)，需要先將DNA溶解在NaCl溶液中，再與二苯胺溶液混合，并在水浴加熱條件下呈現(xiàn)藍(lán)色?！驹斘觥緼、瓊脂糖凝膠電泳中，DNA分子遷移速率與分子量成反比，分子量越大，遷移越慢，A錯(cuò)誤；B、低溫（4℃）可抑制DNA酶活性，預(yù)冷酒精能降低DNA溶解度并沉淀DNA，同時(shí)使蛋白質(zhì)（包括DNA酶）變性，從而抑制其活性，B正確；C、酒精用于沉淀DNA，原理是DNA不溶于高濃度酒精，而某些蛋白質(zhì)可溶，C錯(cuò)誤；D、二苯胺鑒定DNA需在沸水浴條件下顯藍(lán)色，常溫下無(wú)法直接顯色，D錯(cuò)誤。故選B。9.科學(xué)家利用食蟹猴的胚胎干細(xì)胞誘導(dǎo)形成了類(lèi)似囊胚的結(jié)構(gòu)（類(lèi)囊胚），進(jìn)一步培育形成食蟹猴個(gè)體，過(guò)程如圖所示。下列敘述正確的是（）A.過(guò)程Ⅰ類(lèi)似于植物的脫分化過(guò)程B.過(guò)程Ⅱ需經(jīng)過(guò)核移植和胚胎移植過(guò)程C.若要形成多個(gè)胚胎，則要注意將①均等分割D.胚胎干細(xì)胞存在于早期胚胎中，具有分化為所有組織、器官的潛能【答案】D〖祥解〗該過(guò)程利用胚胎干細(xì)胞創(chuàng)造出了類(lèi)胚胎結(jié)構(gòu)，并在體外培養(yǎng)至原腸胚時(shí)期，將類(lèi)囊胚移植進(jìn)雌猴體內(nèi)后，成功引起了雌猴的早期妊娠反應(yīng)有可能會(huì)產(chǎn)生新生個(gè)體，該過(guò)程屬于無(wú)性生殖?！驹斘觥緼、植物的脫分化是指已分化的細(xì)胞失去特有的結(jié)構(gòu)和功能，轉(zhuǎn)變?yōu)槲捶只?xì)胞的過(guò)程。而過(guò)程Ⅰ是胚胎干細(xì)胞誘導(dǎo)形成類(lèi)似囊胚的結(jié)構(gòu)，是細(xì)胞分化的過(guò)程，并非脫分化，A錯(cuò)誤；B、過(guò)程Ⅱ是將類(lèi)似囊胚的結(jié)構(gòu)培育形成食蟹猴個(gè)體，不需要經(jīng)過(guò)核移植過(guò)程，B錯(cuò)誤；C、圖中①為內(nèi)細(xì)胞團(tuán)，若要形成多個(gè)胚胎，需要將內(nèi)細(xì)胞團(tuán)均等分割，但題干說(shuō)的是“若要形成多個(gè)胚胎，則要注意將①均等分割”，沒(méi)有明確是在胚胎分割技術(shù)的情境下，表述不準(zhǔn)確，C錯(cuò)誤；D、胚胎干細(xì)胞存在于早期胚胎中，具有發(fā)育的全能性，即具有分化為所有組織、器官的潛能，D正確。故選D。10.下列有關(guān)基因工程的說(shuō)法，正確的是（）A.基因工程常以抗生素抗性基因作為目的基因B.限制酶只能切割雙鏈DNA片段，不能切割煙草花葉病毒的核酸C.質(zhì)粒是基因工程最常用的載體，從生物體內(nèi)獲取后可直接使用D.限制酶主要從原核生物中分離純化而來(lái)，所以也能剪切自身的DNA【答案】B〖祥解〗基因工程最基本的工具：①基因的"剪刀”限制性核酸內(nèi)切酶（簡(jiǎn)稱限制酶）；②基因的"針線”--DNA連接酶；③基因的運(yùn)載體質(zhì)粒、噬菌體、動(dòng)植物病毒等。【詳析】A、抗生素抗性基因常用作標(biāo)記基因，用于篩選含有重組質(zhì)粒的宿主細(xì)胞，而非目的基因。目的基因是需導(dǎo)入的特定基因（如胰島素基因），A錯(cuò)誤；B、限制酶識(shí)別并切割雙鏈DNA的特定位點(diǎn)，而煙草花葉病毒的核酸是單鏈RNA，無(wú)法被限制酶切割，B正確；C、天然質(zhì)粒需經(jīng)人工改造（如添加酶切位點(diǎn)、標(biāo)記基因等）后才能作為載體使用，不可直接使用，C錯(cuò)誤；D、原核生物通過(guò)甲基化酶修飾自身DNA，避免被限制酶剪切，因此限制酶不會(huì)切割自身DNA，D錯(cuò)誤。故選B。11.圖示植物原生質(zhì)體制備、分離和檢測(cè)的流程。下列敘述錯(cuò)誤的是（）A.步驟①可添加相關(guān)酶以去除細(xì)胞壁，需嚴(yán)格控制酶解液的濃度等條件B.原生質(zhì)體密度介于圖中甘露醇和蔗糖溶液密度之間C.步驟②吸取原生質(zhì)體放入無(wú)菌水中清洗D.臺(tái)盼藍(lán)檢測(cè)后應(yīng)選擇未被染成藍(lán)色的原生質(zhì)體繼續(xù)培養(yǎng)【答案】C〖祥解〗植物的體細(xì)胞雜交是將不同植物的細(xì)胞通過(guò)細(xì)胞融合技術(shù)形成雜種細(xì)胞，進(jìn)而利用植物的組織培養(yǎng)將雜種細(xì)胞培育成多倍體的雜種植株。植物體細(xì)胞雜交依據(jù)的原理是細(xì)胞膜的流動(dòng)性和植物細(xì)胞的全能性?！驹斘觥緼、植物細(xì)胞壁的主要成分是纖維素和果膠，在制備原生質(zhì)體時(shí)，步驟①可添加纖維素酶和果膠酶去除細(xì)胞壁，A正確；B、結(jié)合圖示可知原生質(zhì)體處于甘露醇和蔗糖溶液之間，因而可推測(cè)原生質(zhì)體的密度介于圖中甘露醇和蔗糖溶液密度之間，B正確；C、步驟②吸取原生質(zhì)體放入含有相同滲透壓的溶液中清洗，若放入無(wú)菌水中，由于原生質(zhì)體沒(méi)有細(xì)胞壁的保護(hù)，且細(xì)胞內(nèi)溶液濃度高于無(wú)菌水，根據(jù)滲透作用原理，水會(huì)進(jìn)入原生質(zhì)體，導(dǎo)致原生質(zhì)體因吸水過(guò)多而漲破，所以不能將原生質(zhì)體放入無(wú)菌水中清洗，C錯(cuò)誤；D、臺(tái)盼藍(lán)檢測(cè)后應(yīng)選擇未被染成藍(lán)色的原生質(zhì)體繼續(xù)培養(yǎng)，染成藍(lán)色的原生質(zhì)體活性差或死亡，D正確。故選C。12.PCR技術(shù)的每輪循環(huán)可以分為變性、復(fù)性、延伸三步。引物與其模板鏈形成的雜合分子的解鏈溫度稱為引物的Tm值。下列敘述正確的是（）A.PCR循環(huán)過(guò)程控制的溫度高低關(guān)系為變性>復(fù)性>延伸B.每次循環(huán)需要的兩種引物數(shù)量相同C.若設(shè)計(jì)的引物與模板不完全配對(duì)，可適當(dāng)提高復(fù)性溫度D.引物的Tm值越接近，引物之間越容易結(jié)合【答案】B〖祥解〗PCR全稱為聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)，是一項(xiàng)在生物體外復(fù)制特定DNA的核酸合成技術(shù)。其原理為DNA復(fù)制。PCR的前提條件：要有一段已知目的基因的核苷酸序以便合成一對(duì)引物。其過(guò)程為：①高溫變性：DNA解旋過(guò)程（PCR擴(kuò)增中雙鏈DNA解開(kāi)不需要解旋酶，高溫條件下氫鍵可自動(dòng)解開(kāi)）；②低溫復(fù)性：引物結(jié)合到互補(bǔ)鏈DNA上；③中溫延伸：合成子鏈?！驹斘觥緼、變性溫度（約95℃）用于打開(kāi)DNA雙鏈，復(fù)性溫度（約50-60℃）使引物結(jié)合模板，延伸溫度（約72℃）供Taq酶工作。溫度順序應(yīng)為變性>延伸>復(fù)性，而非選項(xiàng)中的變性>復(fù)性>延伸，A錯(cuò)誤；B、PCR反應(yīng)中引物一次性過(guò)量加入，后續(xù)循環(huán)無(wú)需補(bǔ)充，但每次循環(huán)消耗的兩種引物量相等（每條新鏈需一個(gè)引物），B正確；C、若引物與模板不完全配對(duì)，提高復(fù)性溫度會(huì)增強(qiáng)結(jié)合特異性，減少非特異性結(jié)合，但無(wú)法解決引物設(shè)計(jì)錯(cuò)誤的問(wèn)題，正確做法是重新設(shè)計(jì)引物，C錯(cuò)誤；D、引物間結(jié)合（二聚體）取決于序列互補(bǔ)性，與Tm值無(wú)關(guān)，Tm值反映引物與模板的結(jié)合溫度，D錯(cuò)誤。故選B。13.大麗花是多年生草本植物，除具觀賞價(jià)值外，還具有藥用價(jià)值。大麗花在栽培過(guò)程中易受病毒感染，造成品質(zhì)退化。研究小組嘗試通過(guò)植物組織培養(yǎng)技術(shù)獲得脫毒苗，操作流程如圖所示。下列相關(guān)敘述正確的是（）A.使用MS培養(yǎng)基時(shí)，應(yīng)將莖尖的形態(tài)學(xué)上端朝上，并完全插入到培養(yǎng)基中B.過(guò)程①為脫分化，該過(guò)程無(wú)需光照，期間可能會(huì)發(fā)生基因突變或基因重組C.過(guò)程②的實(shí)質(zhì)是基因選擇性表達(dá)，該過(guò)程只進(jìn)行有絲分裂不進(jìn)行細(xì)胞分化D.若取大麗花不同部位的細(xì)胞，則經(jīng)圖示培養(yǎng)獲得的植株染色體數(shù)目可能不同【答案】D〖祥解〗圖示分析，①為外植體脫分化形成愈傷組織過(guò)程，②為愈傷組織經(jīng)過(guò)再分化形成叢壯苗的過(guò)程，③為叢壯苗在生根培養(yǎng)基中形成試管苗過(guò)程?！驹斘觥緼、以莖尖作為外植體進(jìn)行接種時(shí)應(yīng)將其形態(tài)學(xué)上端朝上，形態(tài)學(xué)下端插入培養(yǎng)基中，但不是完全插入到培養(yǎng)基中，A錯(cuò)誤；B、過(guò)程①為外植體經(jīng)過(guò)脫分化過(guò)程形成愈傷組織，目的是使細(xì)胞失去原特有的結(jié)構(gòu)和功能，該過(guò)程不需要光照，期間可能會(huì)發(fā)生基因突變，但一般不發(fā)生基因重組，B錯(cuò)誤；C、過(guò)程②為再分化過(guò)程，實(shí)質(zhì)是基因選擇性表達(dá)，要進(jìn)行細(xì)胞分化，C錯(cuò)誤；D、若取大麗花不同部位的細(xì)胞，則經(jīng)圖示培養(yǎng)獲得的植株染色體數(shù)目可能不同，如取的花藥來(lái)培養(yǎng)就只有體細(xì)胞的染色體數(shù)目的一半，D正確。故選D。14.研究人員發(fā)現(xiàn)一種廣泛使用的除草劑在土壤中不易被降解，長(zhǎng)期使用會(huì)導(dǎo)致土壤被污染。為修復(fù)被該除草劑污染的土壤，可按下圖程序選育能降解該除草劑的細(xì)菌（已知該除草劑是一種含氮有機(jī)物，在水中溶解度低，含一定量該除草劑的培養(yǎng)基不透明）。下列相關(guān)敘述正確的是（）A.圖中所示接種方法都可用于分離微生物和活菌計(jì)數(shù)B.圖中操作Ⅰ用平板劃線法接種時(shí)，接種環(huán)至少需要灼燒6次C.培養(yǎng)基上形成的5個(gè)菌落中的細(xì)菌都能以該除草劑為氮源D.操作Ⅲ中透明圈越大的菌落降解該除草劑的能力一定越強(qiáng)【答案】B〖祥解〗微生物常用的接種方法?：1、平板劃線法?：這是最常用的接種方法之一。通過(guò)在固體培養(yǎng)基表面進(jìn)行平行劃線、扇形劃線或其他形式的連續(xù)劃線，使微生物在瓊脂平板表面分散開(kāi)來(lái)，形成單個(gè)菌落，從而達(dá)到分離純種的目的?；2、稀釋涂布平板法?：將待分離的菌液經(jīng)過(guò)大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個(gè)菌落?，可以對(duì)微生物進(jìn)行數(shù)量統(tǒng)計(jì)?！驹斘觥緼、平板劃線法無(wú)法用于計(jì)數(shù)，A錯(cuò)誤；B、平板劃線法接種時(shí)，每次劃線前后都要灼燒接種環(huán)，圖中操作Ⅰ進(jìn)行5次劃線操作，那么接種環(huán)需要灼燒6次（包括第一次劃線前和最后一次劃線后），B正確；C、培養(yǎng)基上形成的兩種菌落中的細(xì)菌所利用的氮源不同，有透明圈的，是能夠利用除草劑中的氮源，沒(méi)有透明圈的，不能利用除草劑中的氮源，C錯(cuò)誤；D、透明圈直徑與菌落直徑的比值越大，說(shuō)明該微生物降解除草劑的能力越強(qiáng)，而不是透明圈越大的菌落降解該除草劑的能力越強(qiáng)，D錯(cuò)誤。故選B。15.關(guān)于下圖所示模型，敘述正確的是（）A.若為植物體細(xì)胞雜交模型，則需對(duì)A、B脫分化后再誘導(dǎo)融合B.若為動(dòng)物體細(xì)胞核移植模型，則B可能為去核的卵母細(xì)胞C.若為制備單克隆抗體模型，則C→D的原理是動(dòng)物細(xì)胞核具有全能性D.若為哺乳動(dòng)物體外受精模型，則A、B細(xì)胞都需培養(yǎng)到MII期【答案】B〖祥解〗據(jù)圖可知，A和B可融合成為C，該過(guò)程體現(xiàn)了細(xì)胞膜具有一定的流動(dòng)性，C再經(jīng)過(guò)發(fā)育或培養(yǎng)可成為D?！驹斘觥緼、若為植物體細(xì)胞雜交模型，應(yīng)先去除細(xì)胞壁獲得原生質(zhì)體，然后誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合，而不是對(duì)A、B脫分化后再誘導(dǎo)融合，A錯(cuò)誤；B、若為動(dòng)物體細(xì)胞核移植模型，則B可能為去核卵母細(xì)胞，有利于體細(xì)胞核全能性的發(fā)揮，B正確；C、若為制備單克隆抗體模型，C為雜交瘤細(xì)胞，則C→D的過(guò)程是篩選出能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞，因此，原理是抗原抗體特異性結(jié)合的原理，沒(méi)有利用動(dòng)物細(xì)胞核具有全能性原理，C錯(cuò)誤；D、若為哺乳動(dòng)物體外受精模型，A為精子，需要獲能處理；B為卵子，需培養(yǎng)到MⅡ期，D錯(cuò)誤。故選B。16.下列關(guān)于發(fā)酵工程的敘述，正確的是（）A.發(fā)酵工程的中心環(huán)節(jié)是菌種的選育，優(yōu)良菌種可通過(guò)誘變育種獲得B.通過(guò)發(fā)酵獲得的單細(xì)胞蛋白，常用于生產(chǎn)微生物飼料C.利用發(fā)酵工程生產(chǎn)的微生物農(nóng)藥，作為化學(xué)防治的重要手段D.發(fā)酵工程的產(chǎn)品是人們利用微生物的細(xì)胞代謝獲得的代謝產(chǎn)物【答案】B〖祥解〗發(fā)酵工程是指采用現(xiàn)代工程技術(shù)手段，利用微生物的某些特定功能，為人類(lèi)生產(chǎn)有用的產(chǎn)品，或直接把微生物應(yīng)用于工業(yè)生產(chǎn)過(guò)程的一種新技術(shù)?！驹斘觥緼、發(fā)酵工程的中心環(huán)節(jié)是發(fā)酵罐內(nèi)的發(fā)酵過(guò)程，而非菌種選育。菌種選育是重要步驟，但非中心環(huán)節(jié)，A錯(cuò)誤；B、單細(xì)胞蛋白指通過(guò)發(fā)酵獲得的微生物菌體，富含蛋白質(zhì)，常用于微生物飼料的生產(chǎn)，B正確；C、微生物農(nóng)藥利用活體微生物或其代謝產(chǎn)物防治病蟲(chóng)害，屬于生物防治，而非化學(xué)防治，C錯(cuò)誤；D、發(fā)酵工程的產(chǎn)品包括微生物的代謝產(chǎn)物（如抗生素）和菌體本身（如單細(xì)胞蛋白），表述不全面，D錯(cuò)誤。故選B。17.在制備單克隆抗體的過(guò)程中HAT選擇培養(yǎng)基可以篩選出融合成功的雜交瘤細(xì)胞，一種雜交瘤細(xì)胞只能產(chǎn)一種抗體。科學(xué)家通過(guò)動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)，將兩株不同的雜交瘤細(xì)胞（A和B）融合形成雙雜交瘤細(xì)胞AB。雙雜交瘤細(xì)胞能夠懸浮在培養(yǎng)基中生長(zhǎng)繁殖，可以產(chǎn)生雙特異性抗體AB。據(jù)圖分析，下列說(shuō)法正確的是（）A.用抗原α和β處理雜交瘤細(xì)胞A、B后再誘導(dǎo)二者融合B.雜交瘤細(xì)胞A、B混合并誘導(dǎo)融合后，利用HAT選擇培養(yǎng)基篩選出雙雜交瘤細(xì)胞ABC.雙雜交瘤細(xì)胞同時(shí)識(shí)別α、β抗原后，才能產(chǎn)生雙特異性抗體D.對(duì)培養(yǎng)到一定密度的雙雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行傳代培養(yǎng)時(shí)，不需要使用蛋白酶使之分散【答案】D〖祥解〗單克隆抗體制備流程：先給小鼠注射特定抗原使之發(fā)生免疫反應(yīng)，之后從小鼠脾臟中獲取已經(jīng)免疫的B淋巴細(xì)胞；誘導(dǎo)B細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合，利用選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞；進(jìn)行抗體檢測(cè)，篩選出能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞；進(jìn)行克隆化培養(yǎng)，即用培養(yǎng)基培養(yǎng)和注入小鼠腹腔中培養(yǎng)；最后從培養(yǎng)液或小鼠腹水中獲取單克隆抗體。【詳析】A、雜交瘤細(xì)胞本身已經(jīng)是經(jīng)過(guò)免疫的B細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合形成的，能夠產(chǎn)生特異性抗體，不需要再用抗原α和β處理后才誘導(dǎo)融合，A錯(cuò)誤；B、單克隆抗體制備過(guò)程中，雜交瘤細(xì)胞需要進(jìn)行兩次篩選，第一次利用選擇培養(yǎng)基篩選出能在特定培養(yǎng)基生長(zhǎng)且能無(wú)限增殖的雜交瘤細(xì)胞，第二次篩選可用抗原-抗體雜交的方法篩選出產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞，雙雜交瘤細(xì)胞本身就是由兩個(gè)雜交瘤細(xì)胞融合而成，利用選擇培養(yǎng)基無(wú)法篩選出雙雜交瘤細(xì)胞AB，B錯(cuò)誤；C、分析題意可知，雜交瘤細(xì)胞是由已免疫的B細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合，無(wú)需接觸抗原就能產(chǎn)生抗體，C錯(cuò)誤；D、雙雜交瘤細(xì)胞能夠懸浮在培養(yǎng)基中生長(zhǎng)繁殖，若要傳代培養(yǎng)，細(xì)胞培養(yǎng)液直接離心，去除上清液培養(yǎng)基，加入新鮮培養(yǎng)基即可，不用胰蛋白酶處理，D正確。故選D18.目前，精子載體法逐漸成為最具誘惑力的制備轉(zhuǎn)基因動(dòng)物方法之一。該方法以精子作為外源基因的載體，使精子攜帶外源基因進(jìn)入卵細(xì)胞受精。如圖表示利用該方法制備轉(zhuǎn)基因鼠的基本流程。下列相關(guān)說(shuō)法正確的是（）A.經(jīng)過(guò)過(guò)程①獲得的精子可以直接和卵細(xì)胞發(fā)生受精作用B.為了獲得更多的早期胚胎，常用性激素對(duì)供體進(jìn)行處理，從而獲得更多的卵母細(xì)胞C.過(guò)程③至少培養(yǎng)到囊胚才能進(jìn)行胚胎移植到母鼠子宮D.為了提高轉(zhuǎn)化率，必須將外源基因?qū)刖拥念^部才有可能使外源基因進(jìn)入受精卵【答案】D〖祥解〗分析題圖：圖示首先通過(guò)轉(zhuǎn)基因技術(shù)將目的基因?qū)氲匠墒炀拥娜旧w中，再通過(guò)體外受精作用將目的基因移入到受精卵中，再通過(guò)早期胚胎培養(yǎng)和胚胎移植，最終獲得轉(zhuǎn)基因鼠。因此①是轉(zhuǎn)化目的基因進(jìn)入精子的染色體上，②是體外受精，③是早期胚胎培養(yǎng)，④是胚胎移植。【詳析】A、精子必須獲能才可以與卵細(xì)胞發(fā)生受精作用，A錯(cuò)誤；B、促進(jìn)雌性動(dòng)物產(chǎn)卵常用促性腺激素處理，以獲得更多的卵母細(xì)胞，B錯(cuò)誤；C、過(guò)程③是早期胚胎培養(yǎng)，一般培養(yǎng)到桑葚胚或囊胚階段就可以進(jìn)行胚胎移植到母鼠子宮，而不是至少培養(yǎng)到囊胚，C錯(cuò)誤；D、精子與卵細(xì)胞受精時(shí)，精子的頭部進(jìn)入卵細(xì)胞中，并釋放其細(xì)胞核進(jìn)入卵細(xì)胞，但細(xì)胞質(zhì)未進(jìn)入，所以為了提高轉(zhuǎn)化率，必須將外源基因整合到精子頭部的染色體中，才可以使外源基因進(jìn)入受精卵中，D正確。故選D。19.通過(guò)轉(zhuǎn)Bt基因技術(shù)獲得抗蟲(chóng)棉是我國(guó)科學(xué)家的重大科研成果。下列有關(guān)轉(zhuǎn)Bt基因技術(shù)的敘述，錯(cuò)誤的是（）A.將重組Ti質(zhì)粒導(dǎo)入農(nóng)桿菌前，用Ca2+處理農(nóng)桿菌可促進(jìn)轉(zhuǎn)化B.基因表達(dá)載體中啟動(dòng)子是RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位，驅(qū)動(dòng)轉(zhuǎn)錄過(guò)程C.可利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法，將插入T-DNA中的Bt基因轉(zhuǎn)移到棉花細(xì)胞染色體DNA上D.若某抗蟲(chóng)棉僅一條染色體上插入一個(gè)Bt基因，則該植株自交后代抗蟲(chóng)個(gè)體占1/2【答案】D〖祥解〗基因工程基本操作步驟主要包括四步：①目的基因的獲取，②基因表達(dá)載體的構(gòu)建，③將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞，④目的基因的檢測(cè)與鑒定。其中核心步驟為基因表達(dá)載體的構(gòu)建，其目的是使目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在，并且可以遺傳給下一代并表達(dá)和發(fā)揮作用?！驹斘觥緼、用Ca2+處理農(nóng)桿菌可使其處于感受態(tài)，便于吸收重組質(zhì)粒，這是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法常規(guī)步驟，A正確；B、啟動(dòng)子是RNA聚合酶識(shí)別并結(jié)合的位點(diǎn)，啟動(dòng)轉(zhuǎn)錄過(guò)程，屬于基因表達(dá)載體的必要組件，B正確；C、農(nóng)桿菌的T-DNA可轉(zhuǎn)移至宿主細(xì)胞并整合到染色體DNA中，插入T-DNA的Bt基因隨之轉(zhuǎn)移至棉花細(xì)胞，C正確；D、若抗蟲(chóng)棉為雜合體（僅一條染色體含Bt基因），自交后代中抗蟲(chóng)個(gè)體占3/4（顯性性狀），而非1/2，D錯(cuò)誤。故選D。20.若要通過(guò)PCR技術(shù)檢測(cè)轉(zhuǎn)基因柳枝稷草中是否含有正確插入的XplA和XplB基因，應(yīng)選擇的引物組合是（）A.引物1+引物3 B.引物1+引物2C.引物2+引物3 D.引物3+引物4【答案】A〖祥解〗引物是一小段能與DNA母鏈的一段堿基序列互補(bǔ)配對(duì)的短單鏈核酸。用于PCR的引物長(zhǎng)度通常為20~30個(gè)核苷酸，檢測(cè)所獲轉(zhuǎn)基因柳枝稷草中是否含有正確插入的XplA和XplB基因，應(yīng)該是擴(kuò)增包括XplA和XplB基因和兩側(cè)T-DNA基因片段?！驹斘觥扛鶕?jù)啟動(dòng)子的位置，若正確插入，模板鏈應(yīng)為題甲圖中下鏈，則引物1應(yīng)與下鏈的3'端結(jié)合，引物3可以結(jié)合題甲圖上鏈的3'端，若XplA和XplB基因正確插入，則使用引物1+引物3可通過(guò)PCR擴(kuò)增出XplA和XplB基因融合片段，若Xp1A和XplB基因其中一個(gè)基因反接或者兩個(gè)都基因反接，通過(guò)PCR均無(wú)法擴(kuò)增出Xp1A和XplB基因融合片段，因此，使用引物1+引物3通過(guò)PCR可檢測(cè)所獲轉(zhuǎn)基因柳枝稷草中是否含有正確插入的Xp1A和XplB基因，A正確，BCD錯(cuò)誤。故選A。第Ⅱ卷（共50分）二、非選擇題（本題共4小題，共50分）21.發(fā)酵工程在醫(yī)藥上的應(yīng)用非常廣泛，產(chǎn)黃青霉菌是一種廣泛存在于自然界中的霉菌，是生產(chǎn)青霉素的重要工業(yè)菌種。工業(yè)上生產(chǎn)青霉素的發(fā)酵工程流程如圖1所示。回答相關(guān)問(wèn)題：（1）接種之前的過(guò)程①、②都屬于______。在制備該培養(yǎng)基時(shí)，除了添加必要的營(yíng)養(yǎng)成分外，還需要將pH在滅菌______（填“前”或“后”）調(diào)至______性。（2）可采用______法對(duì)產(chǎn)黃青霉菌進(jìn)行分離純化并計(jì)數(shù)，在5個(gè)平板上各接種稀釋倍數(shù)為103的菌液樣品0.1mL，培養(yǎng)一段時(shí)間后，平板上的菌落數(shù)分別為48、50、54、56、52，則每升原菌液樣品中細(xì)菌數(shù)為_(kāi)_____個(gè)。該方法所統(tǒng)計(jì)的細(xì)菌數(shù)通常會(huì)比實(shí)際菌落數(shù)目偏______（填“大”或“小”），原因是______。（3）研究發(fā)現(xiàn)，某些青霉菌屬于維生素營(yíng)養(yǎng)缺陷型菌株，失去合成某種維生素的能力，只有在基本培養(yǎng)基中補(bǔ)充所缺乏的維生素后才能生長(zhǎng)。某研究小組篩選出某種維生素營(yíng)養(yǎng)缺陷型菌株，為了進(jìn)一步確定該菌株的具體類(lèi)型，他們把15種維生素按照不同組合分為5個(gè)小組，用5個(gè)濾紙片分別蘸取不同小組的維生素，然后覆于接種后的瓊脂平板上培養(yǎng)一段時(shí)間。結(jié)果如表：組別維生素組合1維生素A維生素B?維生素B2維生素B6維生素B122維生素C維生素B1維生素D2維生素E煙酰胺3葉酸維生素B2維生素D2膽堿泛酸鈣4對(duì)氨基苯甲酸維生素B維生素E膽堿肌醇5生物素維生素B12煙酰胺泛酸鈣肌醇實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示1組和2組濾紙片周?chē)a(chǎn)生生長(zhǎng)圈（圖2），則該營(yíng)養(yǎng)缺陷型大腸桿菌不能合成的維生素是______。若該菌株為葉酸和生物素的雙營(yíng)養(yǎng)缺陷型大腸桿菌，則其在培養(yǎng)基上形成菌落的位置是______?！敬鸢浮浚?）①.擴(kuò)大培養(yǎng)②.前③.酸（2）①.稀釋涂布平板②.5.2×108③.?、?當(dāng)兩個(gè)或者多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)，平板上觀察到的只是一個(gè)菌落（3）①.維生素B1②.3與5的交界處〖祥解〗微生物常見(jiàn)的接種的方法：①平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)。在線的開(kāi)始部分，微生物往往連在一起生長(zhǎng)，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個(gè)菌落；②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過(guò)大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個(gè)菌落?！窘馕觥浚?）發(fā)酵之前需要對(duì)菌種進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)，圖中過(guò)程①、②都屬于擴(kuò)大培養(yǎng)過(guò)程；在制備該培養(yǎng)基時(shí)，除了添加必要的營(yíng)養(yǎng)成分外，還需要將pH調(diào)至酸性，因?yàn)槊咕m宜在酸性條件下生存，且為實(shí)現(xiàn)無(wú)菌操作，應(yīng)在滅菌之前調(diào)節(jié)pH。（2）微生物的接種方法有平板劃線法和稀釋涂布平板法，其中能夠用于計(jì)數(shù)的是稀釋涂布平板法；在5個(gè)平板上各接種稀釋倍數(shù)為103的菌液樣品0.1

mL，菌落統(tǒng)計(jì)應(yīng)是30-300之間的進(jìn)行計(jì)數(shù)，培養(yǎng)一段時(shí)間后，平板上的菌落數(shù)分別為48、50、54、56、52，1升=1000mL，則每升原菌液樣品中細(xì)菌數(shù)為（48+50+54+56+52）÷5×103÷0.1×103=5.2×108個(gè)；由于當(dāng)兩個(gè)或者多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)，平板上觀察到的只是一個(gè)菌落，故該方法所統(tǒng)計(jì)的細(xì)菌數(shù)通常會(huì)比實(shí)際菌落數(shù)目偏小。（3）分析表格數(shù)據(jù)可知，實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示1組和2組濾紙片周?chē)a(chǎn)生生長(zhǎng)圈，比較表格中各種維生素組合，1組和2組含有而其他組不含有的維生素是維生素B1，所以該營(yíng)養(yǎng)缺陷型大腸桿菌不能合成的維生素是維生素B1；只有3組含有葉酸，只有5組含有生物素，所以若菌株為葉酸和生物素的雙營(yíng)養(yǎng)缺陷型大腸桿菌，則其在培養(yǎng)基上形成菌落的位置是3與5的交界處。22.甲植物細(xì)胞核基因具有耐鹽堿效應(yīng)，乙植物細(xì)胞質(zhì)基因具有高產(chǎn)效應(yīng)。某研究小組用甲、乙兩種植物細(xì)胞進(jìn)行體細(xì)胞雜交相關(guān)研究，基本過(guò)程包括獲取原生質(zhì)體、誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合、篩選融合細(xì)胞、雜種植株再生和鑒定，最終獲得高產(chǎn)耐鹽堿再生植株?；卮鹣铝袉?wèn)題：（1）獲取原生質(zhì)體時(shí)常選擇______酶去掉細(xì)胞壁，為了便于觀察細(xì)胞融合的狀況，通常用不同顏色的原生質(zhì)體進(jìn)行融合，若甲植物原生質(zhì)體采用幼苗的根為外植體，則乙植物可用幼苗的______為外植體。（2）在原生質(zhì)體融合前，需對(duì)原生質(zhì)體進(jìn)行處理，使甲原生質(zhì)體的______和乙原生質(zhì)體的______均失活。（3）人工誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合的化學(xué)法包括聚乙二醇融合法、______等，原生質(zhì)體融合完成的標(biāo)志是______，將融合原生質(zhì)體懸浮液和液態(tài)的瓊脂糖混合，在凝固前倒入培養(yǎng)皿，融合原生質(zhì)體分散固定在平板中，并獨(dú)立生長(zhǎng)、分裂形成愈傷組織。同一塊愈傷組織所有細(xì)胞源于______，下列各項(xiàng)中，得出上述結(jié)論的理由不包括______。A甲、乙原生質(zhì)體經(jīng)處理后失活，無(wú)法正常生長(zhǎng)、分裂B.同種融合的原生質(zhì)體因甲或乙原生質(zhì)體失活而不能生長(zhǎng)、分裂C.培養(yǎng)基含有抑制物質(zhì)，只有雜種細(xì)胞才能正常生長(zhǎng)、分裂D.雜種細(xì)胞由于結(jié)構(gòu)和功能完整可以生長(zhǎng)、分裂（4）用PCR技術(shù)鑒定再生植株。已知甲植物細(xì)胞核具有特異性DNA序列a，乙植物細(xì)胞質(zhì)具有特異性DNA序列b；M1、M2為序列a的特異性引物，N1、N2為序列b的特異性引物。完善實(shí)驗(yàn)思路：I.提取純化再生植株的______，作為PCR擴(kuò)增的模板。Ⅱ.將步驟Ⅰ的提取物加入PCR反應(yīng)體系，選擇______特異性引物，擴(kuò)增序列a；用同樣的方法擴(kuò)增序列b。Ⅲ.得到的2個(gè)PCR擴(kuò)增產(chǎn)物經(jīng)瓊脂糖凝膠電泳后，若每個(gè)PCR擴(kuò)增產(chǎn)物在凝膠中均出現(xiàn)了預(yù)期的______個(gè)條帶，則可初步確定再生植株來(lái)自于雜種細(xì)胞?！敬鸢浮浚?）①.纖維素酶和果膠酶②.葉（2）①.細(xì)胞質(zhì)（基因）②.細(xì)胞核（基因）（3）①.高Ca2+-高pH融合法②.再生出細(xì)胞壁③.同一個(gè)雜種融合原生質(zhì)體④.C（4）①.（總）DNA②.M1、M2③.1（或一）〖祥解〗植物體細(xì)胞雜交技術(shù)：（1）植物體細(xì)胞雜交技術(shù)：是將不同種的植物體細(xì)胞原生質(zhì)體在一定條件下融合成雜種細(xì)胞，并把雜種細(xì)胞培育成完整植物體的技術(shù)；（2）過(guò)程：①誘導(dǎo)融合的方法：物理法；化學(xué)法一般是用聚乙二醇（PEG）作為誘導(dǎo)劑；②細(xì)胞融合完成的標(biāo)志是新的細(xì)胞壁的生成；③植物體細(xì)胞雜交的終點(diǎn)是培育成雜種植株，而不是形成雜種細(xì)胞就結(jié)束；④雜種植株的特征：具備兩種植物的遺傳特征，原因是雜種植株中含有兩種植物的遺傳物質(zhì)；（3）意義：克服了遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙?！窘馕觥浚?）植物細(xì)胞壁的主要成分為纖維素和果膠，在獲取原生質(zhì)體時(shí)，常采用纖維素酶和果膠酶進(jìn)行去壁處理。若甲植物原生質(zhì)體采用幼苗的根（無(wú)色）為外植體，要用不同顏色的原生質(zhì)體進(jìn)行融合，則乙植物可用幼苗的葉片（含有葉綠體，是綠色）為外植體。（2）為使獲得的雜種細(xì)胞具有耐鹽堿效應(yīng)（甲植物的細(xì)胞核基因）和高產(chǎn)效應(yīng)（乙植物的細(xì)胞質(zhì)基因），在原生質(zhì)體融合前要分別使甲原生質(zhì)體的細(xì)胞質(zhì)和乙原生質(zhì)體的細(xì)胞核失活，融合后的原生質(zhì)體具有甲植物的細(xì)胞核基因和乙植物的細(xì)胞質(zhì)基因。（3）誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合的化學(xué)法包括聚乙二醇（PEG）融合法、高Ca2+—高pH融合法等。再生出細(xì)胞壁是原生質(zhì)體融合完成的標(biāo)志。只有雜種細(xì)胞才具備有活性的細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核，可以生長(zhǎng)、分裂，因此這些愈傷組織只能來(lái)自于雜種細(xì)胞或同一個(gè)雜種原生質(zhì)體或同一個(gè)融合原生質(zhì)體。A、由于甲的細(xì)胞質(zhì)失活，乙的細(xì)胞核失活，所以甲、乙原生質(zhì)體經(jīng)處理后失活，無(wú)法正常生長(zhǎng)、分裂，A不符合題意；B、同種融合的原生質(zhì)體因甲或乙原生質(zhì)體失活細(xì)胞結(jié)構(gòu)不完整，而不能生長(zhǎng)、分裂，B不符合題意；C、培養(yǎng)基中不含有抑制物質(zhì)，C符合題意；D、由于甲乙細(xì)胞都不完整，只有雜種細(xì)胞才具備有活性的細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核，可以生長(zhǎng)、分裂，因此這些愈傷組織只能來(lái)自雜種細(xì)胞，D不符合題意。故選C。（4）根據(jù)題干信息，完善實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)思路如下：①提取純化再生植株的總DNA，作為PCR擴(kuò)增的模板。②雜種細(xì)胞含有甲的細(xì)胞核，所以將DNA提取物加入PCR反應(yīng)體系，M1、M2為特異性引物，擴(kuò)增序列a；用同樣的方法擴(kuò)增序列b。③得到的2個(gè)PCR擴(kuò)增產(chǎn)物經(jīng)凝膠電泳后，若每個(gè)PCR擴(kuò)增產(chǎn)物在凝膠中均出現(xiàn)了預(yù)期的1個(gè)條帶，則可初步確定再生植株來(lái)自于雜種細(xì)胞。23.肌鈣蛋白I（cTnI）是人體心肌細(xì)胞中的肌鈣蛋白的一種亞基，其在血液中含量上升是心肌損傷的特異性指標(biāo)。為制備抗cTnI的單克隆抗體，科研人員完成了以下過(guò)程。請(qǐng)據(jù)圖分析回答下列問(wèn)題：（1）動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，培養(yǎng)基除了添加葡萄糖、氨基酸等必要的營(yíng)養(yǎng)成分外，往往還需加入一定量的______，以滿足動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的營(yíng)養(yǎng)需要?？刹捎胈_____的方法防止有害代謝物的積累。動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)應(yīng)在含5%CO2的恒溫培養(yǎng)箱中進(jìn)行，CO2的作用是______。（2）每隔2周用cTnI作為抗原注射小鼠1次，3次注射后的第3天，取______內(nèi)部分組織制成細(xì)胞懸液與骨髓瘤細(xì)胞誘導(dǎo)融合，需用特定的選擇培養(yǎng)基對(duì)融合細(xì)胞進(jìn)行篩選；甲、乙、丙中，只含雜交瘤細(xì)胞的是______，雜交瘤細(xì)胞的特點(diǎn)是______。（3）過(guò)程②表示將乙細(xì)胞接種到多孔培養(yǎng)板上，進(jìn)行抗體陽(yáng)性檢測(cè)，之后稀釋、培養(yǎng)、再檢測(cè)，并多次重復(fù)上述操作，檢測(cè)原理是______，其目的是篩選獲得______。（4）酶聯(lián)免疫吸附雙抗體夾心法是醫(yī)學(xué)上常用的定量檢測(cè)抗原的方法，具體原理如圖所示：據(jù)圖分析，固相抗體和酶標(biāo)抗體均能與抗原結(jié)合，這是由于不同抗體能與同一抗原表面的不同部位結(jié)合。該檢測(cè)方法中，酶標(biāo)抗體的作用是______，可通過(guò)測(cè)定產(chǎn)物量來(lái)判斷待測(cè)抗原量。（5）為鑒定單克隆抗體識(shí)別抗原的具體區(qū)域，可將抗原（cTnI）進(jìn)行逐步截短，分別與純化的單克隆抗體反應(yīng)，實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下圖所示（“+”表示有反應(yīng)，“-”表示無(wú)反應(yīng)，“aa”表示氨基酸）。結(jié)果證明該單克隆抗體識(shí)別抗原（cTnI蛋白）的區(qū)域大概為_(kāi)_____（填“40~50”、“40~55”或“40~60”）位氨基酸?！敬鸢浮浚?）①.血清②.定期更換培養(yǎng)液③.維持培養(yǎng)液pH（2）①.脾臟②.乙和丙③.既能迅速大量增殖，又能產(chǎn)生抗體（3）①.抗原抗體的特異性結(jié)合②.能產(chǎn)生抗cTnI（或所需）抗體的雜交瘤細(xì)胞（4）與待測(cè)抗原結(jié)合，并催化檢測(cè)底物生成產(chǎn)物（5）40~55〖祥解〗單克隆抗體的制備過(guò)程：首先用特定抗原注射小鼠體內(nèi)，使其發(fā)生免疫，小鼠體內(nèi)產(chǎn)生具有免疫能力的B淋巴細(xì)胞。利用動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)將B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合，單克隆抗體制備過(guò)程中的兩次篩選：第一次篩選：利用特定選擇培養(yǎng)基篩選，獲得雜交瘤細(xì)胞，即AB型細(xì)胞（A為B淋巴細(xì)胞，B為骨髓瘤細(xì)胞），不需要A、B、AA、BB型細(xì)胞。第二次篩選：利用多孔板法和抗原—抗體雜交法篩選，獲得產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞?！窘馕觥浚?）動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，培養(yǎng)基除了添加葡萄糖、氨基酸等必要的營(yíng)養(yǎng)成分外，往往還需加入一定量的動(dòng)物血清，以滿足動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的營(yíng)養(yǎng)需要。為了防止有害代謝物的積累，可采用定期更換培養(yǎng)液的方法，以便清除代謝物。動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)應(yīng)在含5%CO2的恒溫培養(yǎng)箱中進(jìn)行，CO2的作用是維持培養(yǎng)液的pH。（2）為了提高淋巴細(xì)胞的免疫能力，刺激小鼠機(jī)體產(chǎn)生更多的淋巴細(xì)胞，一般通過(guò)3次注射相應(yīng)抗原實(shí)現(xiàn)。最后一次免疫后第3天，取脾臟內(nèi)部分組織制成細(xì)胞懸液與骨髓瘤細(xì)胞誘導(dǎo)融合。由圖可知：雜交瘤細(xì)胞需要對(duì)甲篩選，因此乙和丙應(yīng)該是只含有雜交瘤細(xì)胞，其中雜交瘤細(xì)胞既能無(wú)限增殖，又能產(chǎn)生抗體。（3）②過(guò)程表示將乙細(xì)胞接種到多孔培養(yǎng)板上，利用抗原抗體的特異性結(jié)合的原理進(jìn)行抗體陽(yáng)性檢測(cè)，之后稀釋、培養(yǎng)、再檢測(cè)，并多次重復(fù)上述操作，其目的是篩選獲得能產(chǎn)生抗cTnI抗體的雜交瘤細(xì)胞。（4）酶標(biāo)抗體的作用是與待測(cè)抗原結(jié)合，并催化檢測(cè)底物生成產(chǎn)物，可通過(guò)測(cè)定特定底物分解產(chǎn)生產(chǎn)物的量來(lái)判斷待測(cè)抗原量。（5）根據(jù)圖可知，1～50氨基酸序列片段與抗體無(wú)反應(yīng)，而1～55氨基酸序列片段與抗體有反應(yīng)，說(shuō)明該單克隆抗體識(shí)別的區(qū)域大概為50～55位氨基酸。50～153氨基酸序列片段與抗體無(wú)反應(yīng)，而40～153氨基酸序列片段與抗體有反應(yīng)，說(shuō)明該單克隆抗體識(shí)別的區(qū)域大概為40～50位氨基酸。綜上分析可知，該單克隆抗體識(shí)別抗原（X蛋白）的區(qū)域大概為40～55位氨基酸。24.乳糖不耐受是機(jī)體乳糖酶分泌少，不能完全消化分解母乳或牛乳中的乳糖所引起的非感染性腹瀉?？茖W(xué)家將大腸桿菌中獲得的乳糖酶基因，利用基因工程技術(shù)導(dǎo)入奶?；蚪M中，獲得的轉(zhuǎn)基因牛分泌的乳汁中乳糖含量大大降低，用到的質(zhì)粒和目的基因的部分結(jié)構(gòu)如圖1和圖2所示，不同限制酶的識(shí)別序列及切割位點(diǎn)如表所示。請(qǐng)回答下列問(wèn)題：（1）用PCR技術(shù)從大腸桿菌基因組DNA中擴(kuò)增乳糖酶基因時(shí)，引物的作用是______，所用的引物越短，引物特異性就越______（填“高”或“低”）。（2）圖2中乳糖酶基因以______（填“a鏈”或“β鏈”）為模板進(jìn)行轉(zhuǎn)錄。（3）在構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)，為保證乳糖酶基因的正確復(fù)制以及與圖1質(zhì)粒的正確連接，在設(shè)計(jì)PCR引物時(shí)，應(yīng)在與β鏈結(jié)合的引物的______（填“3'”或“5'”）端添加______（填限制酶）的識(shí)別序列。根據(jù)圖2及表格信息，寫(xiě)出該引物的部分序列：5'-______3'（寫(xiě)出15個(gè)堿基即可）。（4）構(gòu)建重組質(zhì)粒需要使用DNA連接酶，下列屬于該酶催化底物的是______。（5）在基因表達(dá)載體中，為了使乳糖酶基因在牛體內(nèi)成功表達(dá)，應(yīng)將目的基因介于______（填“乳腺蛋白基因的啟動(dòng)子”或“大腸桿菌乳糖酶基因的啟動(dòng)子”）和______之間。（6）為獲得符合生產(chǎn)要求的轉(zhuǎn)基因牛，最常用的方法是利用______法將乳糖酶基因?qū)肱５氖芫阎?。【答案】?）①.使DNA聚合酶能夠從引物的3'端開(kāi)始連接脫氧核苷酸②.低（2）β鏈（3）①.5'②.KpnI③.GGTACCATGCCAATC（4）③（5）①.乳腺蛋白基因的啟動(dòng)子②.終止子（6）顯微注射法〖祥解〗基因工程技術(shù)的基本步驟：（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸?kù)中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等。（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣。（4）目的基因的檢測(cè)與鑒定?！窘馕觥浚?）引物是一小段能與DNA母鏈的一段堿基序列互補(bǔ)配對(duì)的短單鏈核酸，DNA聚合酶只能夠從脫氧核苷酸鏈的3'端開(kāi)始連接脫氧核苷酸，即延伸時(shí)需要一段已有的核苷酸鏈，因此需要加入引物；一般來(lái)說(shuō)，較短的引物更容易與非特定序列結(jié)合，從而導(dǎo)致非特異性擴(kuò)增，即引物的特異性越低。（2）轉(zhuǎn)錄時(shí)子鏈的延伸方向是從5'-3'，據(jù)圖2轉(zhuǎn)錄方向可知，轉(zhuǎn)錄從左向右進(jìn)行，據(jù)此判斷圖2中乳糖酶基因以β鏈為模板進(jìn)行轉(zhuǎn)錄。（3）分析題圖，選用HindⅢ會(huì)破壞質(zhì)粒上的標(biāo)記基因，選用SalⅠ、NheI會(huì)破壞目的基因，因此只能選用KpnI、SmaⅠ切割質(zhì)粒，則需要在目的基因的兩端分別添加KpnI、SmaⅠ的識(shí)別序列，為保證目的基因的正確復(fù)制和與載體的正確連接，應(yīng)在腸乳糖酶基因的左側(cè)添加KpnⅠ的識(shí)別序列，右側(cè)添加SmaⅠ的識(shí)別序列，據(jù)此推導(dǎo)，應(yīng)在與β鏈結(jié)合的引物的5′端添加KpnⅠ的識(shí)別序列，此后的堿基與模板的3'端堿基互補(bǔ)配對(duì)，則該引物可以確定的15個(gè)堿基的序列為5′-GGTACCATGCCAATC-3′。（4）DNA連接酶是可以催化DNA形成磷酸二酯鍵，而磷酸二酯鍵是在3'的羥基和5'的磷酸之間形成的，因此屬于DNA連接酶底物的是③。（5）在構(gòu)建的基因表達(dá)載體中，啟動(dòng)子和終止子分別是轉(zhuǎn)錄起始和終止的調(diào)控序列，目的基因需要插在啟動(dòng)子和終止子之間，故在基因表達(dá)載體中，為了使乳糖酶基因在牛體內(nèi)成功表達(dá)，應(yīng)將目的基因介于乳腺蛋白基因的啟動(dòng)子和終止子之間。（6）將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞的最常用方法是顯微注射法。天津市五區(qū)縣重點(diǎn)校聯(lián)考2024-2025學(xué)年高二下學(xué)期4月期中第Ⅰ卷（共50分）一、選擇題（本題共20小題，1~10每題2分，11~20每題3分，共50分，在每題列出的四個(gè)選項(xiàng)中，只有一項(xiàng)是最符合題目要求的。1.無(wú)菌操作是生物實(shí)驗(yàn)中一項(xiàng)重要的基本操作。下列過(guò)程不需要嚴(yán)格無(wú)菌操作的是（）A.傳統(tǒng)泡菜的制作 B.酵母菌的純培養(yǎng)C.動(dòng)物細(xì)胞的傳代培養(yǎng) D.花藥離體培養(yǎng)【答案】A〖祥解〗在傳統(tǒng)生物技術(shù)中，無(wú)需進(jìn)行嚴(yán)格滅菌，根據(jù)目的菌種的代謝特征設(shè)置相應(yīng)的培養(yǎng)條件?！驹斘觥吭趥鹘y(tǒng)生物技術(shù)中，如傳統(tǒng)泡菜的制作過(guò)程，不需要嚴(yán)格的無(wú)菌操作，通常是根據(jù)目的菌種的代謝特征設(shè)置相應(yīng)的培養(yǎng)條件進(jìn)行的，而實(shí)驗(yàn)室中的一些生物工程技術(shù)，如酵母菌的純培養(yǎng)、動(dòng)物細(xì)胞的傳代培養(yǎng)、花藥離體培養(yǎng)等需要嚴(yán)格的無(wú)菌操作，A正確，BCD錯(cuò)誤。故選A。2.利用傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)制作的果酒、腐乳、泡菜等極大地豐富了人們的飲食，它們是我國(guó)傳統(tǒng)飲食文化的重要組成部分。下列有關(guān)敘述正確的是（）A.制作果酒、腐乳和泡菜所利用的主要微生物均含有細(xì)胞核B.制作腐乳時(shí)主要利用了毛霉產(chǎn)生的淀粉酶將淀粉分解成單糖C.泡菜咸而不酸的原因可能是加入食鹽過(guò)少導(dǎo)致雜菌大量增殖D.在果酒發(fā)酵基礎(chǔ)上進(jìn)行果醋制作，需升高溫度、增加通氣性【答案】D〖祥解〗參與果酒制作的微生物是酵母菌；參與果醋制作的微生物是醋酸菌，醋酸菌能將糖或酒精轉(zhuǎn)變成醋酸；參與腐乳制作的微生物有多種，如青霉、酵母、曲霉、毛霉等，其中起主要是毛霉；參與泡菜制作的微生物是乳酸菌?！驹斘觥緼、果酒制作主要用酵母菌（真核生物，有細(xì)胞核），腐乳用毛霉（真核生物，有細(xì)胞核），但泡菜用乳酸菌（原核生物，無(wú)細(xì)胞核），A錯(cuò)誤；B、腐乳制作中，毛霉分泌蛋白酶和脂肪酶分解蛋白質(zhì)和脂肪，而非淀粉酶分解淀粉，B錯(cuò)誤；C、泡菜“咸而不酸”可能因食鹽濃度過(guò)高抑制乳酸菌活動(dòng)，而非鹽過(guò)少導(dǎo)致雜菌增殖，C錯(cuò)誤；D、果酒發(fā)酵（酵母菌，20℃、無(wú)氧）轉(zhuǎn)果醋發(fā)酵（醋酸菌，30-35℃、有氧），需升高溫度并通氣，D正確。故選D。3.下列關(guān)于細(xì)胞工程的說(shuō)法，正確的是（）A.滅活的病毒失去了其抗原結(jié)構(gòu)，但保留感染能力，可用于誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合B.植物細(xì)胞培養(yǎng)的主要目的是獲得植物在生長(zhǎng)和生存過(guò)程中必需的次生代謝物C.囊胚從透明帶中伸展出來(lái)的過(guò)程稱為“孵化”D.源于自身的iPS細(xì)胞移植回患者后，患者需服用免疫抑制劑【答案】C〖祥解〗滅活病毒誘導(dǎo)細(xì)胞融合的原理是：病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能夠與細(xì)胞膜上的糖蛋白發(fā)生作用，使細(xì)胞互相凝聚，細(xì)胞膜上的蛋白質(zhì)分子和脂質(zhì)分子重新排布，細(xì)胞膜打開(kāi)，細(xì)胞發(fā)生融合。【詳析】A、滅活病毒是指用物理或化學(xué)手段使其失去感染能力，但保留其表面抗原結(jié)構(gòu)，從而誘導(dǎo)細(xì)胞膜融合，若仍保留感染能力，則滅活不徹底，無(wú)法安全使用，A錯(cuò)誤；B、植物細(xì)胞培養(yǎng)的主要目的包括快速繁殖和獲得次生代謝產(chǎn)物，但次生代謝物（如紫杉醇）并非植物生長(zhǎng)生存所必需，而是特定條件下產(chǎn)生的物質(zhì)，B錯(cuò)誤；C、囊胚發(fā)育到一定階段后，會(huì)突破透明帶并伸展出來(lái)，此過(guò)程稱為孵化，是胚胎著床前的必要步驟，C正確；D、iPS細(xì)胞由患者自身體細(xì)胞重編程獲得，移植后無(wú)免疫排斥反應(yīng)，無(wú)需使用免疫抑制劑，D錯(cuò)誤。故選C。4.下表是幾種限制酶的識(shí)別序列及切割位點(diǎn)。據(jù)表分析，下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（）限制酶HindIIAluIBamHISau3AI識(shí)別序列及切割位點(diǎn)5'-GTY↓RAC-3'5'-AG↓CT-3'5'-G↓GATCC-3'5'-↓GATC-3'（注：Y表示C或T，R表示A或G）A.限制酶作用于磷酸二酯鍵B.一種限制酶可識(shí)別不只一種核苷酸序列C.AluI切割后的DNA片段可用T4DNA連接酶連接D.將BamHI和Sau3AI切割形成的片段連接后，一定能被這兩種酶識(shí)別并切割【答案】D〖祥解〗限制酶的特點(diǎn)：作用于DNA鏈的磷酸二酯鍵，識(shí)別特定的脫氧核苷酸序列，并在特定的位點(diǎn)進(jìn)行切割，切割后可能形成黏性末端或平末端?！驹斘觥緼、限制酶作用于DNA鏈的磷酸二酯鍵，切割后形成黏性末端或平末端，A正確；B、HindII的識(shí)別序列為GTY↓RAC（Y為C或T，R為A或G），可識(shí)別多種序列（如GTCGAC、GTTAGA等），B正確；C、AluI切割后產(chǎn)生平末端，T4DNA連接酶既能連接黏性末端也能連接平末端，C正確；D、BamHI切割后產(chǎn)生黏性末端GATCC，Sau3AI切割后產(chǎn)生GATC。兩者連接可能形成新序列（如GATCGATC），但該序列可能不包含BamHI的完整識(shí)別位點(diǎn)（GGATCC），故將BamHI和Sau3AI切割形成的片段連接后，不能被BamHI識(shí)別并切割，D錯(cuò)誤。故選D。5.在微生物學(xué)中使用選擇培養(yǎng)基讓特定種類(lèi)的微生物生長(zhǎng)，同時(shí)抑制或阻止其他種類(lèi)微生物生長(zhǎng)的過(guò)程稱為選擇培養(yǎng)。在選擇培養(yǎng)基中添加一些特殊物質(zhì)，則可配制成鑒別培養(yǎng)基。下列說(shuō)法錯(cuò)誤的是（）A.培養(yǎng)乳酸桿菌時(shí)，需在培養(yǎng)基中添加維生素B.以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基分離出的細(xì)菌可能不止一種C.固氮菌能在不加氮源的培養(yǎng)基中生長(zhǎng)，說(shuō)明固氮菌為自養(yǎng)型生物D.在以纖維素為唯一碳源的培養(yǎng)基中加入剛果紅，可篩選纖維素分解菌【答案】C〖祥解〗選擇培養(yǎng)基的原理是：不同微生物在代謝過(guò)程中所需要的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和環(huán)境不同。有的適于酸性環(huán)境，有的適于堿性環(huán)境；如培養(yǎng)酵母菌和霉菌，可在培養(yǎng)基中加入青霉素；培養(yǎng)金黃色葡萄球菌，可在培養(yǎng)基中加入高濃度的食鹽?！驹斘觥緼、乳酸桿菌屬于異養(yǎng)型微生物，生長(zhǎng)需要維生素等生長(zhǎng)因子，因此培養(yǎng)基中需添加維生素以滿足其需求，A正確；B、以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基，但可能存在多種能分解尿素的細(xì)菌（如不同種類(lèi)的尿素分解菌），因此分離出的細(xì)菌可能不止一種，B正確；C、固氮菌能在無(wú)氮培養(yǎng)基中生長(zhǎng)是因?yàn)槠淠芄潭諝庵械腘?，但其碳源需依賴培養(yǎng)基中的有機(jī)物（如葡萄糖），屬于異養(yǎng)型而非自養(yǎng)型（自養(yǎng)型需以CO?為碳源），C錯(cuò)誤；D、以纖維素為唯一碳源的培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基，可篩選出纖維素分解菌；剛果紅的作用是鑒別（通過(guò)透明圈判斷是否分解纖維素），而非直接篩選，但選項(xiàng)描述“篩選”實(shí)為選擇培養(yǎng)基的功能，D正確。故選C。6.下列有關(guān)發(fā)酵工程的敘述，正確的是（）A.缺少糖源時(shí)，醋酸菌可將乙醇直接轉(zhuǎn)化為醋酸B.發(fā)酵結(jié)束后，可采用過(guò)濾、沉淀等方法獲得微生物代謝產(chǎn)物C.接種環(huán)可直接在酒精燈火焰的充分燃燒層灼燒，以達(dá)到徹底滅菌D.啤酒發(fā)酵過(guò)程中大部分糖的分解和代謝物的生成都在后發(fā)酵階段完成【答案】C【詳析】果醋制作的菌種是醋酸菌，代謝類(lèi)型是需氧型細(xì)菌，屬于原核細(xì)胞，條件是30～35℃、一直需氧。當(dāng)氧氣、糖源都充足時(shí)，醋酸菌將葡萄汁中的果糖分解成醋酸；當(dāng)缺少糖源時(shí)，醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰?，再將乙醛變?yōu)榇姿??！枷榻狻紸、醋酸菌在缺少糖源時(shí)，需先將乙醇氧化為乙醛，再轉(zhuǎn)化為醋酸，并非直接轉(zhuǎn)化，A錯(cuò)誤；B、過(guò)濾、沉淀通常用于分離菌體，而代謝產(chǎn)物若為胞外產(chǎn)物（如酒精、抗生素）需通過(guò)蒸餾或萃取等方法從濾液中獲取，B錯(cuò)誤；C、接種環(huán)滅菌需在酒精燈火焰的充分燃燒層（外焰）灼燒至通紅，高溫可殺滅所有微生物（包括芽孢），達(dá)到徹底滅菌，C正確；D、啤酒發(fā)酵中，大部分糖的分解和代謝物生成發(fā)生在主發(fā)酵階段，后發(fā)酵主要用于澄清和風(fēng)味完善，D錯(cuò)誤。故選C。7.植物細(xì)胞工程在農(nóng)業(yè)、醫(yī)藥工業(yè)等方面有著廣泛應(yīng)用，下列敘述錯(cuò)誤的是（）A.利用植物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)生產(chǎn)紫草寧的主要原理是細(xì)胞增殖B.利用單倍體育種技術(shù)培育單育1號(hào)煙草大大縮短了育種年限C.利用植物組織培養(yǎng)技術(shù)進(jìn)行作物脫毒能獲得大量抗毒幼苗D.利用植物體細(xì)胞雜交技術(shù)培育雜種植株的過(guò)程體現(xiàn)了植物細(xì)胞的全能性【答案】C〖祥解〗植物細(xì)胞工程的實(shí)際應(yīng)用有快速繁殖、作物脫毒、單倍體育種、突變體的利用、細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)?！驹斘觥緼、紫草寧的生產(chǎn)屬于細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)，利用植物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)，其原理是細(xì)胞增殖（有絲分裂），通過(guò)細(xì)胞分裂增加細(xì)胞數(shù)量以產(chǎn)生更多次生代謝物，A正確；B、單倍體育種通過(guò)花粉離體培養(yǎng)獲得單倍體植株，再經(jīng)秋水仙素處理使其染色體加倍，直接得到純合體，無(wú)需多代自交，顯著縮短育種年限，B正確；C、作物脫毒采用莖尖等分生組織進(jìn)行組織培養(yǎng)，因分生區(qū)病毒極少，可獲得脫毒苗，但脫毒苗本身不具抗病毒能力，選項(xiàng)“抗毒”表述錯(cuò)誤，C錯(cuò)誤；D、植物體細(xì)胞雜交需將雜種細(xì)胞培育為植株，該過(guò)程依賴細(xì)胞的全能性，D正確。故選C。8.下列有關(guān)實(shí)驗(yàn)的相關(guān)說(shuō)法，正確的是（）A.瓊脂糖凝膠電泳時(shí)，DNA分子越大，遷移速率越快B.過(guò)濾液放入4℃冰箱或加入預(yù)冷的酒精都可抑制DNA酶的活性C.利用酒精初步分離DNA與蛋白質(zhì)的原理是DNA溶于酒精D.提取到的絲狀物與二苯胺溶液充分混勻后即可變?yōu)樗{(lán)色【答案】B〖祥解〗DNA不溶于酒精，而某些蛋白質(zhì)溶于酒精；鑒定DNA時(shí)，需要先將DNA溶解在NaCl溶液中，再與二苯胺溶液混合，并在水浴加熱條件下呈現(xiàn)藍(lán)色?！驹斘觥緼、瓊脂糖凝膠電泳中，DNA分子遷移速率與分子量成反比，分子量越大，遷移越慢，A錯(cuò)誤；B、低溫（4℃）可抑制DNA酶活性，預(yù)冷酒精能降低DNA溶解度并沉淀DNA，同時(shí)使蛋白質(zhì)（包括DNA酶）變性，從而抑制其活性，B正確；C、酒精用于沉淀DNA，原理是DNA不溶于高濃度酒精，而某些蛋白質(zhì)可溶，C錯(cuò)誤；D、二苯胺鑒定DNA需在沸水浴條件下顯藍(lán)色，常溫下無(wú)法直接顯色，D錯(cuò)誤。故選B。9.科學(xué)家利用食蟹猴的胚胎干細(xì)胞誘導(dǎo)形成了類(lèi)似囊胚的結(jié)構(gòu)（類(lèi)囊胚），進(jìn)一步培育形成食蟹猴個(gè)體，過(guò)程如圖所示。下列敘述正確的是（）A.過(guò)程Ⅰ類(lèi)似于植物的脫分化過(guò)程B.過(guò)程Ⅱ需經(jīng)過(guò)核移植和胚胎移植過(guò)程C.若要形成多個(gè)胚胎，則要注意將①均等分割D.胚胎干細(xì)胞存在于早期胚胎中，具有分化為所有組織、器官的潛能【答案】D〖祥解〗該過(guò)程利用胚胎干細(xì)胞創(chuàng)造出了類(lèi)胚胎結(jié)構(gòu)，并在體外培養(yǎng)至原腸胚時(shí)期，將類(lèi)囊胚移植進(jìn)雌猴體內(nèi)后，成功引起了雌猴的早期妊娠反應(yīng)有可能會(huì)產(chǎn)生新生個(gè)體，該過(guò)程屬于無(wú)性生殖?！驹斘觥緼、植物的脫分化是指已分化的細(xì)胞失去特有的結(jié)構(gòu)和功能，轉(zhuǎn)變?yōu)槲捶只?xì)胞的過(guò)程。而過(guò)程Ⅰ是胚胎干細(xì)胞誘導(dǎo)形成類(lèi)似囊胚的結(jié)構(gòu)，是細(xì)胞分化的過(guò)程，并非脫分化，A錯(cuò)誤；B、過(guò)程Ⅱ是將類(lèi)似囊胚的結(jié)構(gòu)培育形成食蟹猴個(gè)體，不需要經(jīng)過(guò)核移植過(guò)程，B錯(cuò)誤；C、圖中①為內(nèi)細(xì)胞團(tuán)，若要形成多個(gè)胚胎，需要將內(nèi)細(xì)胞團(tuán)均等分割，但題干說(shuō)的是“若要形成多個(gè)胚胎，則要注意將①均等分割”，沒(méi)有明確是在胚胎分割技術(shù)的情境下，表述不準(zhǔn)確，C錯(cuò)誤；D、胚胎干細(xì)胞存在于早期胚胎中，具有發(fā)育的全能性，即具有分化為所有組織、器官的潛能，D正確。故選D。10.下列有關(guān)基因工程的說(shuō)法，正確的是（）A.基因工程常以抗生素抗性基因作為目的基因B.限制酶只能切割雙鏈DNA片段，不能切割煙草花葉病毒的核酸C.質(zhì)粒是基因工程最常用的載體，從生物體內(nèi)獲取后可直接使用D.限制酶主要從原核生物中分離純化而來(lái)，所以也能剪切自身的DNA【答案】B〖祥解〗基因工程最基本的工具：①基因的"剪刀”限制性核酸內(nèi)切酶（簡(jiǎn)稱限制酶）；②基因的"針線”--DNA連接酶；③基因的運(yùn)載體質(zhì)粒、噬菌體、動(dòng)植物病毒等?！驹斘觥緼、抗生素抗性基因常用作標(biāo)記基因，用于篩選含有重組質(zhì)粒的宿主細(xì)胞，而非目的基因。目的基因是需導(dǎo)入的特定基因（如胰島素基因），A錯(cuò)誤；B、限制酶識(shí)別并切割雙鏈DNA的特定位點(diǎn)，而煙草花葉病毒的核酸是單鏈RNA，無(wú)法被限制酶切割，B正確；C、天然質(zhì)粒需經(jīng)人工改造（如添加酶切位點(diǎn)、標(biāo)記基因等）后才能作為載體使用，不可直接使用，C錯(cuò)誤；D、原核生物通過(guò)甲基化酶修飾自身DNA，避免被限制酶剪切，因此限制酶不會(huì)切割自身DNA，D錯(cuò)誤。故選B。11.圖示植物原生質(zhì)體制備、分離和檢測(cè)的流程。下列敘述錯(cuò)誤的是（）A.步驟①可添加相關(guān)酶以去除細(xì)胞壁，需嚴(yán)格控制酶解液的濃度等條件B.原生質(zhì)體密度介于圖中甘露醇和蔗糖溶液密度之間C.步驟②吸取原生質(zhì)體放入無(wú)菌水中清洗D.臺(tái)盼藍(lán)檢測(cè)后應(yīng)選擇未被染成藍(lán)色的原生質(zhì)體繼續(xù)培養(yǎng)【答案】C〖祥解〗植物的體細(xì)胞雜交是將不同植物的細(xì)胞通過(guò)細(xì)胞融合技術(shù)形成雜種細(xì)胞，進(jìn)而利用植物的組織培養(yǎng)將雜種細(xì)胞培育成多倍體的雜種植株。植物體細(xì)胞雜交依據(jù)的原理是細(xì)胞膜的流動(dòng)性和植物細(xì)胞的全能性?！驹斘觥緼、植物細(xì)胞壁的主要成分是纖維素和果膠，在制備原生質(zhì)體時(shí)，步驟①可添加纖維素酶和果膠酶去除細(xì)胞壁，A正確；B、結(jié)合圖示可知原生質(zhì)體處于甘露醇和蔗糖溶液之間，因而可推測(cè)原生質(zhì)體的密度介于圖中甘露醇和蔗糖溶液密度之間，B正確；C、步驟②吸取原生質(zhì)體放入含有相同滲透壓的溶液中清洗，若放入無(wú)菌水中，由于原生質(zhì)體沒(méi)有細(xì)胞壁的保護(hù)，且細(xì)胞內(nèi)溶液濃度高于無(wú)菌水，根據(jù)滲透作用原理，水會(huì)進(jìn)入原生質(zhì)體，導(dǎo)致原生質(zhì)體因吸水過(guò)多而漲破，所以不能將原生質(zhì)體放入無(wú)菌水中清洗，C錯(cuò)誤；D、臺(tái)盼藍(lán)檢測(cè)后應(yīng)選擇未被染成藍(lán)色的原生質(zhì)體繼續(xù)培養(yǎng)，染成藍(lán)色的原生質(zhì)體活性差或死亡，D正確。故選C。12.PCR技術(shù)的每輪循環(huán)可以分為變性、復(fù)性、延伸三步。引物與其模板鏈形成的雜合分子的解鏈溫度稱為引物的Tm值。下列敘述正確的是（）A.PCR循環(huán)過(guò)程控制的溫度高低關(guān)系為變性>復(fù)性>延伸B.每次循環(huán)需要的兩種引物數(shù)量相同C.若設(shè)計(jì)的引物與模板不完全配對(duì)，可適當(dāng)提高復(fù)性溫度D.引物的Tm值越接近，引物之間越容易結(jié)合【答案】B〖祥解〗PCR全稱為聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)，是一項(xiàng)在生物體外復(fù)制特定DNA的核酸合成技術(shù)。其原理為DNA復(fù)制。PCR的前提條件：要有一段已知目的基因的核苷酸序以便合成一對(duì)引物。其過(guò)程為：①高溫變性：DNA解旋過(guò)程（PCR擴(kuò)增中雙鏈DNA解開(kāi)不需要解旋酶，高溫條件下氫鍵可自動(dòng)解開(kāi)）；②低溫復(fù)性：引物結(jié)合到互補(bǔ)鏈DNA上；③中溫延伸：合成子鏈?！驹斘觥緼、變性溫度（約95℃）用于打開(kāi)DNA雙鏈，復(fù)性溫度（約50-60℃）使引物結(jié)合模板，延伸溫度（約72℃）供Taq酶工作。溫度順序應(yīng)為變性>延伸>復(fù)性，而非選項(xiàng)中的變性>復(fù)性>延伸，A錯(cuò)誤；B、PCR反應(yīng)中引物一次性過(guò)量加入，后續(xù)循環(huán)無(wú)需補(bǔ)充，但每次循環(huán)消耗的兩種引物量相等（每條新鏈需一個(gè)引物），B正確；C、若引物與模板不完全配對(duì)，提高復(fù)性溫度會(huì)增強(qiáng)結(jié)合特異性，減少非特異性結(jié)合，但無(wú)法解決引物設(shè)計(jì)錯(cuò)誤的問(wèn)題，正確做法是重新設(shè)計(jì)引物，C錯(cuò)誤；D、引物間結(jié)合（二聚體）取決于序列互補(bǔ)性，與Tm值無(wú)關(guān)，Tm值反映引物與模板的結(jié)合溫度，D錯(cuò)誤。故選B。13.大麗花是多年生草本植物，除具觀賞價(jià)值外，還具有藥用價(jià)值。大麗花在栽培過(guò)程中易受病毒感染，造成品質(zhì)退化。研究小組嘗試通過(guò)植物組織培養(yǎng)技術(shù)獲得脫毒苗，操作流程如圖所示。下列相關(guān)敘述正確的是（）A.使用MS培養(yǎng)基時(shí)，應(yīng)將莖尖的形態(tài)學(xué)上端朝上，并完全插入到培養(yǎng)基中B.過(guò)程①為脫分化，該過(guò)程無(wú)需光照，期間可能會(huì)發(fā)生基因突變或基因重組C.過(guò)程②的實(shí)質(zhì)是基因選擇性表達(dá)，該過(guò)程只進(jìn)行有絲分裂不進(jìn)行細(xì)胞分化D.若取大麗花不同部位的細(xì)胞，則經(jīng)圖示培養(yǎng)獲得的植株染色體數(shù)目可能不同【答案】D〖祥解〗圖示分析，①為外植體脫分化形成愈傷組織過(guò)程，②為愈傷組織經(jīng)過(guò)再分化形成叢壯苗的過(guò)程，③為叢壯苗在生根培養(yǎng)基中形成試管苗過(guò)程?！驹斘觥緼、以莖尖作為外植體進(jìn)行接種時(shí)應(yīng)將其形態(tài)學(xué)上端朝上，形態(tài)學(xué)下端插入培養(yǎng)基中，但不是完全插入到培養(yǎng)基中，A錯(cuò)誤；B、過(guò)程①為外植體經(jīng)過(guò)脫分化過(guò)程形成愈傷組織，目的是使細(xì)胞失去原特有的結(jié)構(gòu)和功能，該過(guò)程不需要光照，期間可能會(huì)發(fā)生基因突變，但一般不發(fā)生基因重組，B錯(cuò)誤；C、過(guò)程②為再分化過(guò)程，實(shí)質(zhì)是基因選擇性表達(dá)，要進(jìn)行細(xì)胞分化，C錯(cuò)誤；D、若取大麗花不同部位的細(xì)胞，則經(jīng)圖示培養(yǎng)獲得的植株染色體數(shù)目可能不同，如取的花藥來(lái)培養(yǎng)就只有體細(xì)胞的染色體數(shù)目的一半，D正確。故選D。14.研究人員發(fā)現(xiàn)一種廣泛使用的除草劑在土壤中不易被降解，長(zhǎng)期使用會(huì)導(dǎo)致土壤被污染。為修復(fù)被該除草劑污染的土壤，可按下圖程序選育能降解該除草劑的細(xì)菌（已知該除草劑是一種含氮有機(jī)物，在水中溶解度低，含一定量該除草劑的培養(yǎng)基不透明）。下列相關(guān)敘述正確的是（）A.圖中所示接種方法都可用于分離微生物和活菌計(jì)數(shù)B.圖中操作Ⅰ用平板劃線法接種時(shí)，接種環(huán)至少需要灼燒6次C.培養(yǎng)基上形成的5個(gè)菌落中的細(xì)菌都能以該除草劑為氮源D.操作Ⅲ中透明圈越大的菌落降解該除草劑的能力一定越強(qiáng)【答案】B〖祥解〗微生物常用的接種方法?：1、平板劃線法?：這是最常用的接種方法之一。通過(guò)在固體培養(yǎng)基表面進(jìn)行平行劃線、扇形劃線或其他形式的連續(xù)劃線，使微生物在瓊脂平板表面分散開(kāi)來(lái)，形成單個(gè)菌落，從而達(dá)到分離純種的目的?；2、稀釋涂布平板法?：將待分離的菌液經(jīng)過(guò)大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個(gè)菌落?，可以對(duì)微生物進(jìn)行數(shù)量統(tǒng)計(jì)?！驹斘觥緼、平板劃線法無(wú)法用于計(jì)數(shù)，A錯(cuò)誤；B、平板劃線法接種時(shí)，每次劃線前后都要灼燒接種環(huán)，圖中操作Ⅰ進(jìn)行5次劃線操作，那么接種環(huán)需要灼燒6次（包括第一次劃線前和最后一次劃線后），B正確；C、培養(yǎng)基上形成的兩種菌落中的細(xì)菌所利用的氮源不同，有透明圈的，是能夠利用除草劑中的氮源，沒(méi)有透明圈的，不能利用除草劑中的氮源，C錯(cuò)誤；D、透明圈直徑與菌落直徑的比值越大，說(shuō)明該微生物降解除草劑的能力越強(qiáng)，而不是透明圈越大的菌落降解該除草劑的能力越強(qiáng)，D錯(cuò)誤。故選B。15.關(guān)于下圖所示模型，敘述正確的是（）A.若為植物體細(xì)胞雜交模型，則需對(duì)A、B脫分化后再誘導(dǎo)融合B.若為動(dòng)物體細(xì)胞核移植模型，則B可能為去核的卵母細(xì)胞C.若為制備單克隆抗體模型，則C→D的原理是動(dòng)物細(xì)胞核具有全能性D.若為哺乳動(dòng)物體外受精模型，則A、B細(xì)胞都需培養(yǎng)到MII期【答案】B〖祥解〗據(jù)圖可知，A和B可融合成為C，該過(guò)程體現(xiàn)了細(xì)胞膜具有一定的流動(dòng)性，C再經(jīng)過(guò)發(fā)育或培養(yǎng)可成為D?！驹斘觥緼、若為植物體細(xì)胞雜交模型，應(yīng)先去除細(xì)胞壁獲得原生質(zhì)體，然后誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合，而不是對(duì)A、B脫分化后再誘導(dǎo)融合，A錯(cuò)誤；B、若為動(dòng)物體細(xì)胞核移植模型，則B可能為去核卵母細(xì)胞，有利于體細(xì)胞核全能性的發(fā)揮，B正確；C、若為制備單克隆抗體模型，C為雜交瘤細(xì)胞，則C→D的過(guò)程是篩選出能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞，因此，原理是抗原抗體特異性結(jié)合的原理，沒(méi)有利用動(dòng)物細(xì)胞核具有全能性原理，C錯(cuò)誤；D、若為哺乳動(dòng)物體外受精模型，A為精子，需要獲能處理；B為卵子，需培養(yǎng)到MⅡ期，D錯(cuò)誤。故選B。16.下列關(guān)于發(fā)酵工程的敘述，正確的是（）A.發(fā)酵工程的中心環(huán)節(jié)是菌種的選育，優(yōu)良菌種可通過(guò)誘變育種獲得B.通過(guò)發(fā)酵獲得的單細(xì)胞蛋白，常用于生產(chǎn)微生物飼料C.利用發(fā)酵工程生產(chǎn)的微生物農(nóng)藥，作為化學(xué)防治的重要手段D.發(fā)酵工程的產(chǎn)品是人們利用微生物的細(xì)胞代謝獲得的代謝產(chǎn)物【答案】B〖祥解〗發(fā)酵工程是指采用現(xiàn)代工程技術(shù)手段，利用微生物的某些特定功能，為人類(lèi)生產(chǎn)有用的產(chǎn)品，或直接把微生物應(yīng)用于工業(yè)生產(chǎn)過(guò)程的一種新技術(shù)。【詳析】A、發(fā)酵工程的中心環(huán)節(jié)是發(fā)酵罐內(nèi)的發(fā)酵過(guò)程，而非菌種選育。菌種選育是重要步驟，但非中心環(huán)節(jié)，A錯(cuò)誤；B、單細(xì)胞蛋白指通過(guò)發(fā)酵獲得的微生物菌體，富含蛋白質(zhì)，常用于微生物飼料的生產(chǎn)，B正確；C、微生物農(nóng)藥利用活體微生物或其代謝產(chǎn)物防治病蟲(chóng)害，屬于生物防治，而非化學(xué)防治，C錯(cuò)誤；D、發(fā)酵工程的產(chǎn)品包括微生物的代謝產(chǎn)物（如抗生素）和菌體本身（如單細(xì)胞蛋白），表述不全面，D錯(cuò)誤。故選B。17.在制備單克隆抗體的過(guò)程中HAT選擇培養(yǎng)基可以篩選出融合成功的雜交瘤細(xì)胞，一種雜交瘤細(xì)胞只能產(chǎn)一種抗體。科學(xué)家通過(guò)動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)，將兩株不同的雜交瘤細(xì)胞（A和B）融合形成雙雜交瘤細(xì)胞AB。雙雜交瘤細(xì)胞能夠懸浮在培養(yǎng)基中生長(zhǎng)繁殖，可以產(chǎn)生雙特異性抗體AB。據(jù)圖分析，下列說(shuō)法正確的是（）A.用抗原α和β處理雜交瘤細(xì)胞A、B后再誘導(dǎo)二者融合B.雜交瘤細(xì)胞A、B混合并誘導(dǎo)融合后，利用HAT選擇培養(yǎng)基篩選出雙雜交瘤細(xì)胞ABC.雙雜交瘤細(xì)胞同時(shí)識(shí)別α、β抗原后，才能產(chǎn)生雙特異性抗體D.對(duì)培養(yǎng)到一定密度的雙雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行傳代培養(yǎng)時(shí)，不需要使用蛋白酶使之分散【答案】D〖祥解〗單克隆抗體制備流程：先給小鼠注射特定抗原使之發(fā)生免疫反應(yīng)，之后從小鼠脾臟中獲取已經(jīng)免疫的B淋巴細(xì)胞；誘導(dǎo)B細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合，利用選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞；進(jìn)行抗體檢測(cè)，篩選出能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞；進(jìn)行克隆化培養(yǎng)，即用培養(yǎng)基培養(yǎng)和注入小鼠腹腔中培養(yǎng)；最后從培養(yǎng)液或小鼠腹水中獲取單克隆抗體?！驹斘觥緼、雜交瘤細(xì)胞本身已經(jīng)是經(jīng)過(guò)免疫的B細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合形成的，能夠產(chǎn)生特異性抗體，不需要再用抗原α和β處理后才誘導(dǎo)融合，A錯(cuò)誤；B、單克隆抗體制備過(guò)程中，雜交瘤細(xì)胞需要進(jìn)行兩次篩選，第一次利用選擇培養(yǎng)基篩選出能在特定培養(yǎng)基生長(zhǎng)且能無(wú)限增殖的雜交瘤細(xì)胞，第二次篩選可用抗原-抗體雜交的方法篩選出產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞，雙雜交瘤細(xì)胞本身就是由兩個(gè)雜交瘤細(xì)胞融合而成，利用選擇培養(yǎng)基無(wú)法篩選出雙雜交瘤細(xì)胞AB，B錯(cuò)誤；C、分析題意可知，雜交瘤細(xì)胞是由已免疫的B細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合，無(wú)需接觸抗原就能產(chǎn)生抗體，C錯(cuò)誤；D、雙雜交瘤細(xì)胞能夠懸浮在培養(yǎng)基中生長(zhǎng)繁殖，若要傳代培養(yǎng)，細(xì)胞培養(yǎng)液直接離心，去除上清液培養(yǎng)基，加入新鮮培養(yǎng)基即可，不用胰蛋白酶處理，D正確。故選D18.目前，精子載體法逐漸成為最具誘惑力的制備轉(zhuǎn)基因動(dòng)物方法之一。該方法以精子作為外源基因的載體，使精子攜帶外源基因進(jìn)入卵細(xì)胞受精。如圖表示利用該方法制備轉(zhuǎn)基因鼠的基本流程。下列相關(guān)說(shuō)法正確的是（）A.經(jīng)過(guò)過(guò)程①獲得的精子可以直接和卵細(xì)胞發(fā)生受精作用B.為了獲得更多的早期胚胎，常用性激素對(duì)供體進(jìn)行處理，從而獲得更多的卵母細(xì)胞C.過(guò)程③至少培養(yǎng)到囊胚才能進(jìn)行胚胎移植到母鼠子宮D.為了提高轉(zhuǎn)化率，必須將外源基因?qū)刖拥念^部才有可能使外源基因進(jìn)入受精卵【答案】D〖祥解〗分析題圖：圖示首先通過(guò)轉(zhuǎn)基因技術(shù)將目的基因?qū)氲匠墒炀拥娜旧w中，再通過(guò)體外受精作用將目的基因移入到受精卵中，再通過(guò)早期胚胎培養(yǎng)和胚胎移植，最終獲得轉(zhuǎn)基因鼠。因此①是轉(zhuǎn)化目的基因進(jìn)入精子的染色體上，②是體外受精，③是早期胚胎培養(yǎng)，④是胚胎移植?！驹斘觥緼、精子必須獲能才可以與卵細(xì)胞發(fā)生受精作用，A錯(cuò)誤；B、促進(jìn)雌性動(dòng)物產(chǎn)卵常用促性腺激素處理，以獲得更多的卵母細(xì)胞，B錯(cuò)誤；C、過(guò)程③是早期胚胎培養(yǎng)，一般培養(yǎng)到桑葚胚或囊胚階段就可以進(jìn)行胚胎移植到母鼠子宮，而不是至少培養(yǎng)到囊胚，C錯(cuò)誤；D、精子與卵細(xì)胞受精時(shí)，精子的頭部進(jìn)入卵細(xì)胞中，并釋放其細(xì)胞核進(jìn)入卵細(xì)胞，但細(xì)胞質(zhì)未進(jìn)入，所以為了提高轉(zhuǎn)化率，必須將外源基因整合到精子頭部的染色體中，才可以使外源基因進(jìn)入受精卵中，D正確。故選D。19.通過(guò)轉(zhuǎn)Bt基因技術(shù)獲得抗蟲(chóng)棉是我國(guó)科學(xué)家的重大科研成果。下列有關(guān)轉(zhuǎn)Bt基因技術(shù)的敘述，錯(cuò)誤的是（）A.將重組Ti質(zhì)粒導(dǎo)入農(nóng)桿菌前，用Ca2+處理農(nóng)桿菌可促進(jìn)轉(zhuǎn)化B.基因表達(dá)載體中啟動(dòng)子是RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位，驅(qū)動(dòng)轉(zhuǎn)錄過(guò)程C.可利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法，將插入T-DNA中的Bt基因轉(zhuǎn)移到棉花細(xì)胞染色體DNA上D.若某抗蟲(chóng)棉僅一條染色體上插入一個(gè)Bt基因，則該植株自交后代抗蟲(chóng)個(gè)體占1/2【答案】D〖祥解〗基因工程基本操作步驟主要包括四步：①目的基因的獲取，②基因表達(dá)載體的構(gòu)建，③將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞，④目的基因的檢測(cè)與鑒定。其中核心步驟為基因表達(dá)載體的構(gòu)建，其目的是使目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在，并且可以遺傳給下一代并表達(dá)和發(fā)揮作用?！驹斘觥緼、用Ca2+處理農(nóng)桿菌可使其處于感受態(tài)，便于吸收重組質(zhì)粒，這是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法常規(guī)步驟，A正確；B、啟動(dòng)子是RNA聚合酶識(shí)別并結(jié)合的位點(diǎn)，啟動(dòng)轉(zhuǎn)錄過(guò)程，屬于基因表達(dá)載體的必要組件，B正確；C、農(nóng)桿菌的T-DNA可