藥物分析的試題及答案一、單項選擇題（每題2分，共20分）1.采用高效液相色譜法（HPLC）測定某藥物含量時，若流動相比例改變導(dǎo)致保留時間顯著縮短，最可能的原因是（）A.流動相極性降低B.流動相極性升高C.固定相粒徑增大D.柱溫降低2.紅外光譜法（IR）鑒別藥物時，主要依據(jù)的特征是（）A.吸收峰的位置與強(qiáng)度B.吸收峰的面積C.吸收峰的半峰寬D.吸收峰的對稱性3.中國藥典中“恒重”的定義是指兩次稱量的質(zhì)量差不超過（）A.0.1mgB.0.2mgC.0.3mgD.0.5mg4.檢查藥物中的氯化物雜質(zhì)時，加入硝酸的目的是（）A.調(diào)節(jié)pH值B.消除其他陰離子的干擾C.增強(qiáng)氯化銀的穩(wěn)定性D.促進(jìn)氯化銀沉淀的生成5.手性藥物分析中，若目標(biāo)藥物為R-構(gòu)型，需控制S-構(gòu)型的限量，最常用的方法是（）A.高效液相色譜法（手性固定相）B.紫外-可見分光光度法C.薄層色譜法（普通硅膠板）D.氣相色譜法（非手性柱）6.采用銀量法測定巴比妥類藥物含量時，滴定終點(diǎn)的指示方法是（）A.電位法B.酚酞指示劑C.鉻酸鉀指示劑D.鐵銨礬指示劑7.維生素C含量測定時，需加入稀醋酸的主要原因是（）A.防止維生素C氧化B.調(diào)節(jié)溶液pH至酸性，抑制其水解C.增強(qiáng)維生素C的還原性D.與維生素C發(fā)生顯色反應(yīng)8.有關(guān)物質(zhì)檢查中，若雜質(zhì)與主成分結(jié)構(gòu)相似但極性略低，優(yōu)先選擇的色譜條件是（）A.反相HPLC（C18柱），梯度洗脫B.正相HPLC（硅膠柱），等度洗脫C.離子交換色譜D.尺寸排阻色譜9.氣相色譜法（GC）測定藥物中殘留溶劑時，若待測溶劑為甲醇（沸點(diǎn)64.7℃），最適宜的檢測器是（）A.火焰離子化檢測器（FID）B.電子捕獲檢測器（ECD）C.熱導(dǎo)檢測器（TCD）D.質(zhì)譜檢測器（MS）10.原子吸收分光光度法常用于測定藥物中的（）A.重金屬雜質(zhì)B.有機(jī)殘留溶劑C.蛋白質(zhì)類雜質(zhì)D.多糖類成分二、填空題（每空1分，共20分）1.藥物分析中，“限度檢查”是指對藥物中存在的（）進(jìn)行限量控制，通常不要求準(zhǔn)確測定其含量。2.高效液相色譜的系統(tǒng)適用性試驗中，分離度（R）的計算公式為（），一般要求R≥（）。3.紫外-可見分光光度法的定量依據(jù)是（）定律，其表達(dá)式為（）。4.紅外光譜中，特征區(qū)的波數(shù)范圍是（）cm?1，主要反映分子中（）的振動信息。5.藥物中的一般雜質(zhì)包括（）、（）（至少列舉2種），特殊雜質(zhì)是指（）。6.采用碘量法測定藥物含量時，若滴定液為碘滴定液，需加入（）作為指示劑；若為硫代硫酸鈉滴定液，指示劑應(yīng)在（）時加入。7.氣相色譜的固定相分為（）和（）兩類，前者適用于分離（），后者適用于分離（）。8.中國藥典規(guī)定，原料藥的含量測定若未規(guī)定上限，均指不超過（）%。三、簡答題（每題8分，共40分）1.簡述高效液相色譜法（HPLC）與氣相色譜法（GC）在藥物分析中的主要區(qū)別（從適用范圍、流動相、檢測器、樣品處理4個方面回答）。2.舉例說明藥物鑒別試驗中“專屬鑒別試驗”與“一般鑒別試驗”的區(qū)別。3.簡述藥物中“有關(guān)物質(zhì)”的定義及常用檢查方法（至少列舉3種），并說明梯度洗脫在有關(guān)物質(zhì)檢查中的優(yōu)勢。4.維生素B?（鹽酸硫胺）的含量測定常用非水溶液滴定法，簡述其原理及操作要點(diǎn)（包括溶劑選擇、指示劑、終點(diǎn)判斷）。5.原子吸收分光光度法測定重金屬雜質(zhì)時，為何需進(jìn)行“標(biāo)準(zhǔn)加入法”？與“外標(biāo)法”相比，其優(yōu)勢是什么？四、綜合分析題（20分）某化學(xué)藥物為“苯甲酰基-L-脯氨酸乙酯”（結(jié)構(gòu)如下），分子式為C??H??NO?，分子量247.29，白色結(jié)晶性粉末，易溶于甲醇，微溶于水，在酸性條件下易水解為苯甲酰基-L-脯氨酸和乙醇。該藥物為手性藥物，S-構(gòu)型為無效異構(gòu)體，需控制其限量；合成工藝中可能引入的雜質(zhì)包括未反應(yīng)的原料苯甲酰氯、中間體苯甲?；?L-脯氨酸，以及殘留溶劑甲醇（沸點(diǎn)64.7℃）、二氯甲烷（沸點(diǎn)39.8℃）。請設(shè)計該藥物的質(zhì)量研究方案（包括性狀、鑒別、檢查、含量測定4個部分），要求：（1）每部分選擇至少1種具體方法，并說明選擇依據(jù)；（2）有關(guān)物質(zhì)檢查需明確色譜條件（固定相、流動相、檢測器）；（3）手性雜質(zhì)檢查需說明方法原理；（4）殘留溶劑檢查需說明色譜類型及檢測器選擇。藥物分析試題答案一、單項選擇題1.B（流動相極性升高，對極性藥物的洗脫能力增強(qiáng)，保留時間縮短）2.A（IR鑒別依據(jù)特征吸收峰的位置與強(qiáng)度）3.C（中國藥典規(guī)定恒重為兩次稱量差≤0.3mg）4.B（硝酸可消除碳酸根、磷酸根等陰離子的干擾）5.A（手性固定相HPLC是手性藥物對映體分離的常用方法）6.A（巴比妥類藥物銀量法終點(diǎn)用電位法指示更準(zhǔn)確）7.A（稀醋酸可抑制維生素C的氧化）8.A（反相HPLC適用于極性差異小的物質(zhì)，梯度洗脫可優(yōu)化分離）9.A（FID對含碳有機(jī)物響應(yīng)靈敏，適合甲醇檢測）10.A（原子吸收用于重金屬如鉛、鎘等的測定）二、填空題1.雜質(zhì)（或特定雜質(zhì)）2.R=2(tR2-tR1)/(W1+W2)；1.53.朗伯-比爾；A=εcl4.4000~1300；官能團(tuán)5.氯化物、硫酸鹽（或鐵鹽、重金屬等）；與特定藥物生產(chǎn)工藝或結(jié)構(gòu)相關(guān)的雜質(zhì)6.淀粉指示液；近終點(diǎn)（或滴定至淡黃色）7.固體固定相（吸附劑）、液體固定相（固定液）；氣體及低沸點(diǎn)有機(jī)物；高沸點(diǎn)有機(jī)物8.101.0三、簡答題1.HPLC與GC的主要區(qū)別：-適用范圍：HPLC適用于高沸點(diǎn)、熱不穩(wěn)定、大分子藥物（如蛋白質(zhì)、多肽）；GC適用于低沸點(diǎn)、熱穩(wěn)定的小分子藥物（如揮發(fā)性成分、殘留溶劑）。-流動相：HPLC流動相為液體（如甲醇-水），可調(diào)節(jié)極性；GC流動相為惰性氣體（如氮?dú)猓瑹o化學(xué)相互作用。-檢測器：HPLC常用紫外檢測器（UV）、熒光檢測器（FLD）；GC常用FID、ECD。-樣品處理：HPLC樣品通常無需氣化，可直接進(jìn)樣；GC需將樣品氣化，對熱不穩(wěn)定藥物需衍生化。2.專屬鑒別與一般鑒別：一般鑒別試驗是對某一類藥物的共同官能團(tuán)進(jìn)行鑒別（如丙二酰脲類藥物的銀鹽反應(yīng)）；專屬鑒別試驗是針對特定藥物的特殊結(jié)構(gòu)設(shè)計的鑒別方法（如腎上腺素的三氯化鐵反應(yīng)，因其含鄰二酚羥基）。例如，巴比妥類藥物的一般鑒別為與硝酸銀生成白色沉淀，而苯巴比妥的專屬鑒別為與亞硝酸鈉-硫酸反應(yīng)生成橙黃色產(chǎn)物（因含苯環(huán)）。3.有關(guān)物質(zhì)定義及檢查方法：有關(guān)物質(zhì)指藥物中存在的合成副產(chǎn)物、降解產(chǎn)物等，可能影響療效或安全性的雜質(zhì)。常用方法：HPLC（反相或手性柱）、TLC（薄層色譜）、GC（揮發(fā)性有關(guān)物質(zhì)）。梯度洗脫優(yōu)勢：通過改變流動相比例，可同時分離極性差異大的雜質(zhì)與主成分，提高分離效率，縮短分析時間。4.維生素B?非水滴定原理及要點(diǎn)：原理：維生素B?分子中含兩個堿性基團(tuán)（嘧啶環(huán)和噻唑環(huán)），在冰醋酸中堿性增強(qiáng)，可用高氯酸滴定。操作要點(diǎn)：溶劑選擇冰醋酸（增強(qiáng)堿性），加入醋酸汞試液（消除鹽酸鹽干擾），指示劑為結(jié)晶紫；終點(diǎn)時溶液由紫色變?yōu)樗{(lán)綠色（或綠色）。5.標(biāo)準(zhǔn)加入法的原因及優(yōu)勢：原因：藥物基質(zhì)復(fù)雜，可能存在基體效應(yīng)（如共存離子干擾），外標(biāo)法無法消除；標(biāo)準(zhǔn)加入法通過向樣品中加入已知量標(biāo)準(zhǔn)溶液，可校正基體干擾。優(yōu)勢：無需嚴(yán)格控制樣品與標(biāo)準(zhǔn)溶液的基體一致，適用于復(fù)雜樣品（如中藥、生物樣品）的重金屬測定，結(jié)果更準(zhǔn)確。四、綜合分析題質(zhì)量研究方案1.性狀：-方法：觀察外觀（白色結(jié)晶性粉末）、溶解度（易溶于甲醇，微溶于水）。-依據(jù)：中國藥典對原料藥性狀的基本要求，通過直觀描述和溶劑溶解性初步判斷物理特性。2.鑒別：-方法：紅外光譜法（IR）。取樣品與對照品，采用溴化鉀壓片法測定IR圖譜，比對特征吸收峰（如苯環(huán)的1600cm?1、酯羰基的1735cm?1、酰胺鍵的1650cm?1）。-依據(jù)：IR可反映分子官能團(tuán)信息，專屬性強(qiáng)，適用于結(jié)構(gòu)確認(rèn)。3.檢查：（1）有關(guān)物質(zhì)：-方法：HPLC（反相C18柱）。色譜條件：固定相為十八烷基硅烷鍵合硅膠（C18）；流動相A為0.1%磷酸水溶液（pH3.0），流動相B為乙腈，梯度洗脫（0-10min，10%B→30%B；10-20min，30%B→50%B）；檢測器為紫外檢測器（檢測波長254nm，因苯環(huán)有吸收）。-依據(jù)：雜質(zhì)（苯甲酰氯、苯甲?；?L-脯氨酸）與主成分極性差異較大，梯度洗脫可優(yōu)化分離；C18柱對中等極性化合物保留合適，UV檢測器對含苯環(huán)的物質(zhì)響應(yīng)靈敏。（2）手性雜質(zhì)（S-構(gòu)型）：-方法：HPLC（手性固定相）。采用纖維素-三（3,5-二甲基苯基氨基甲酸酯）鍵合硅膠柱（CHIRALPAKAD-H），流動相為正己烷-異丙醇（90:10），檢測波長254nm。-原理：手性固定相通過氫鍵、π-π作用等與R/S-構(gòu)型藥物產(chǎn)生不同親和力，實現(xiàn)對映體分離，外標(biāo)法計算S-構(gòu)型限量（如≤0.5%）。（3）殘留溶劑：-方法：GC（頂空進(jìn)樣）。色譜柱為毛細(xì)管柱（如DB-624，6%氰丙基苯基-94%二甲基聚硅氧烷），檢測器為FID（對甲醇、二氯甲烷響應(yīng)靈敏）；柱溫采用程序升溫（初始40℃保持5min，以10℃/m