2026屆重慶銅梁縣第一中學(xué)生物高三上期末檢測試題注意事項(xiàng)1．考生要認(rèn)真填寫考場號和座位序號。2．試題所有答案必須填涂或書寫在答題卡上，在試卷上作答無效。第一部分必須用2B鉛筆作答；第二部分必須用黑色字跡的簽字筆作答。3．考試結(jié)束后，考生須將試卷和答題卡放在桌面上，待監(jiān)考員收回。一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個(gè)選項(xiàng)符合題目要求）1．下列不屬于次生演替實(shí)例的是（）A．原始森林演變?yōu)榇紊?B．廢棄的農(nóng)田雜草叢生形成草地C．過度放牧的草原演變?yōu)榛哪?D．溫帶草原面貌從夏季到冬季發(fā)生改變2．下圖為膝跳反射示意圖，以下敘述不正確的是A．完成該反射活動的反射弧由三個(gè)神經(jīng)元構(gòu)成B．興奮在傳入神經(jīng)纖維上以電信號的形式傳導(dǎo)C．反射過程中興奮在神經(jīng)纖維上的傳導(dǎo)是單向的D．神經(jīng)支配伸肌收縮和屈肌舒張協(xié)調(diào)完成膝跳反射3．ATP稱為細(xì)胞中的“能量通貨”，下列關(guān)于ATP的敘述正確的是（）A．ATP的形成一定伴隨著有機(jī)物的分解B．細(xì)胞的某些生命活動不以ATP為直接能源C．消耗ATP的物質(zhì)運(yùn)輸一定是主動轉(zhuǎn)運(yùn)D．細(xì)胞呼吸的每個(gè)階段均能產(chǎn)生ATP4．某同學(xué)進(jìn)行了2，4-D對插枝生根作用的實(shí)驗(yàn)，用不同濃度的2，4-D溶液浸泡枝條適宜時(shí)間后的實(shí)驗(yàn)結(jié)果如圖所示，其中a、b、d組為實(shí)驗(yàn)組，c組為空白對照組。下列敘述中與該實(shí)驗(yàn)相符的是（）A．本實(shí)驗(yàn)的自變量一定是2，4-D的濃度B．a(chǎn)組2，4-D的濃度一定大于b組C．d組2，4-D的濃度一定大于b組D．各組所用的枝條上一定要沒有芽5．某小島上生活著兩種棕櫚科植物，研究認(rèn)為：200萬年前，它們的共同祖先遷移到該島時(shí)，一部分生活在pH較高的石灰?guī)r上，開花較早；另一部分生活在pH較低的火山灰上，開花較晚。由于花期不同，經(jīng)過長期演變，最終形成兩個(gè)不同的物種。根據(jù)現(xiàn)代生物進(jìn)化理論分析，正確的是（）A．土壤酸堿度的選擇作用誘發(fā)個(gè)體產(chǎn)生不同的變異B．兩個(gè)種群的基因庫形成了明顯差異且兩者間已經(jīng)不能進(jìn)行基因交流C．基因突變產(chǎn)生新的等位基因，導(dǎo)致種群基因頻率定向改變D．該事例說明物種形成的必要環(huán)節(jié)有：地理隔離、變異、自然選擇、生殖隔離6．下列有關(guān)生物多樣性和進(jìn)化的敘述中，不正確的是（）A．新物種的形成通常要經(jīng)過突變和基因重組、自然選擇及隔離三個(gè)基本環(huán)節(jié)B．自然選擇能定向改變種群的基因頻率，決定了生物進(jìn)化的方向C．種群是生物進(jìn)化的基本單位，物種是群落的基本單位D．禁止濫殺捕獵野生動物是保護(hù)生物多樣性的有效措施二、綜合題：本大題共4小題7．（9分）某農(nóng)場生態(tài)系統(tǒng)主要包括甲~戊5個(gè)生物種群（不含分解者），每個(gè)種群的生物都只占有一個(gè)營養(yǎng)級，且這5個(gè)種群共有4個(gè)營養(yǎng)級，其能量值如下表所示，請回答下列問題：種群甲乙丙丁戊能量（×103kJ·m-2）4050023512（1）根據(jù)以上信息，繪出該農(nóng)場生態(tài)系統(tǒng)中由這5個(gè)種群生物構(gòu)成的食物鏈（食物網(wǎng)）________。（2）該生態(tài)系統(tǒng)中，能量在第二和第三營養(yǎng)級之間的傳遞效率是________。若人類大量捕殺丙，則甲種群的數(shù)量變化趨勢是________。（3）流經(jīng)該農(nóng)場生態(tài)系統(tǒng)的能量部分來自生產(chǎn)者固定的________，無機(jī)環(huán)境中的碳主要以________形式進(jìn)入生物群落。該農(nóng)場生態(tài)系統(tǒng)容易遭遇病蟲害，原因是________________。8．（10分）某科研小組進(jìn)行了不同碘攝入水平對Wistar大鼠甲狀腺功能影響的實(shí)驗(yàn)，步驟如下：第一步：取Wistar大鼠，隨機(jī)分為六組。即低碘組、正常碘組、5倍、10倍、50倍、100倍高碘組；第二步：低碘組飼喂低碘飼料、正常碘組飼喂等量正常飼料、后四組飼喂等量飼料且飼料中碘含量分別為正常組的5倍、10倍、50倍、100倍；第三步：將六組Wistar大鼠在適宜條件下飼養(yǎng)6、12個(gè)月后分別測定各組鼠的甲狀腺激素含量并記錄?；卮鹣铝袉栴}：（1）甲狀腺激素具有_________________________（最少答出兩點(diǎn)）的功能，正常Wistar大鼠體內(nèi)甲狀腺激素濃度不會持續(xù)升高，主要原因是甲狀腺激素過多會抑制下丘腦和垂體對TRH和TSH的分泌，這屬于______________________調(diào)節(jié)。（2）改正實(shí)驗(yàn)步驟中的兩處不妥當(dāng)之處：①__________________；②_______________。（3）實(shí)驗(yàn)結(jié)果：與正常組相比較，低碘組大鼠血清甲狀腺激素水平明顯降低，而高碘組大鼠隨著飼喂時(shí)間的延長和攝入碘量的增加，血清甲狀腺激素水平出現(xiàn)逐漸降低趨勢。實(shí)驗(yàn)結(jié)論：_____________________________。9．（10分）乙烯具有促進(jìn)果實(shí)成熟的作用，ACC氧化酶和ACC合成酶是番茄細(xì)胞合成乙烯的兩個(gè)關(guān)鍵酶。利用反義DNA技術(shù)（原理如圖1），可以抑制這兩個(gè)基因的表達(dá)，從而使番茄具有耐儲存、宜運(yùn)輸?shù)膬?yōu)點(diǎn)。圖2為融合ACC氧化酶基因和ACC合成酶基因的反義表達(dá)載體的結(jié)構(gòu)示意圖。（1）圖2中的2A11為特異性啟動子，則2A11應(yīng)在番茄的____________（器官）中表達(dá)。（2）從番茄成熟果實(shí)中提取___________為模板，利用反轉(zhuǎn)錄法合成ACC氧化酶基因和ACC合成酶基因，以進(jìn)行拼接構(gòu)成融合基因并擴(kuò)增。（3）合成出的ACC氧化酶基因兩端分別含限制酶BamHⅠ和XbaⅠ的酶切位點(diǎn)，ACC合成酶基因兩端含SacⅠ和XbaⅠ的酶切位點(diǎn)，用限制酶____________對上述兩個(gè)基因進(jìn)行酶切，再串聯(lián)成融合基因，相應(yīng)的Ti質(zhì)粒應(yīng)用限制酶_______________進(jìn)行切割，確保融合基因能夠插入載體中。（4）為了實(shí)現(xiàn)圖1中反義基因的效果，應(yīng)將融合基因_______（正向/反向）插入在啟動子2A11的下游即可構(gòu)成反義融合基因。將表達(dá)載體與農(nóng)桿菌菌液混合后，接種在含有___的培養(yǎng)基中，可篩選出含有反義融合基因的農(nóng)桿菌，再利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法獲得轉(zhuǎn)基因番茄。（5）在檢測番茄細(xì)胞中是否存在反義融合基因時(shí)，____________（填“能”/“不能”）用放射性物質(zhì)標(biāo)記的ACC氧化（合成）酶基因片段做探針進(jìn)行檢測，理由是____________。10．（10分）研究人員利用基因工程借助大腸桿菌生產(chǎn)人的生長激素。回答下列問題。（1）借助PCR技術(shù)可在短時(shí)間內(nèi)大量擴(kuò)增目的基因，原因之一是利用了____酶。（2）要使目的基因在大腸桿菌細(xì)胞內(nèi)穩(wěn)定存在并表達(dá)，需要借助質(zhì)粒載體，原因是______。將目的基因?qū)氪竽c桿菌，常用____處理細(xì)胞，使其成為感受態(tài)。（3）研究人員在大腸桿菌提取液中未能檢測到生長激素，但在細(xì)胞中檢測到生長激素基因，推測可能是轉(zhuǎn)錄或翻譯過程出錯(cuò)，通過實(shí)驗(yàn)進(jìn)行判斷的方法及預(yù)期結(jié)果是________。（4）能否利用基因工程通過大腸桿菌直接生產(chǎn)人體細(xì)胞膜上的糖蛋白？請做出判斷并說明理由_________。11．（15分）下表為某種微生物培養(yǎng)基的配方。成分KH3PO3Na3HPO3MgSO3．7H3O葡萄糖尿素瓊脂含量3．3g3．3g4．3g34．4g3．4g35．4g請回答相關(guān)問題：（3）培養(yǎng)基中的KH3PO3和Na3HPO3的作用有____（答出兩點(diǎn)即可）。（3）依物理性質(zhì)，該培養(yǎng)基屬于____培養(yǎng)基，依功能看，該培養(yǎng)基屬于____培養(yǎng)基。（3）分解尿素的細(xì)菌才能在該培養(yǎng)基上生長，原因是____。（3）甲、乙兩名同學(xué)分別用不同方法對某一土壤樣品中的尿素分解菌進(jìn)行分離純化，結(jié)果如下圖。①甲同學(xué)在平板劃線操作的第一步之前、每次劃線之前、劃線結(jié)束時(shí)都要灼燒接種環(huán)，請問每次劃線之前灼燒接種環(huán)的原因是____。②乙同學(xué)采用的方法是___，接種時(shí)操作的失誤可能是___。

參考答案一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個(gè)選項(xiàng)符合題目要求）1、D【解析】

群落演替：隨著時(shí)間的推移，一個(gè)群落被另一個(gè)群落代替的過程。初生演替指在一個(gè)從來沒有植被覆蓋的地面，或者原來存在植被，但是被徹底消滅了的地方發(fā)生的演替，如在沙丘、火山巖、冰川泥進(jìn)行的演替。次生演替指在原有植被雖已不存在，但原有土壤條件基本保留，甚至還保留了植物的種子或其他繁殖體（如能發(fā)芽的地下莖）的地方發(fā)生的演替，如火災(zāi)后的草原、過量砍伐的森林、棄耕的農(nóng)田上進(jìn)行的演替?！驹斀狻緼、原始森林演變?yōu)榇紊质菑挠猩锏娜郝溟_始的演替，屬于次生演替，A不符合題意；B、廢棄的農(nóng)田中保留有原有土壤條件、含有生物的種子等，故廢棄的農(nóng)田中雜草叢生形成草地屬于次生演替，B不符合題意；C、過度放牧的草原演變?yōu)榛哪矊儆谑菑挠猩锏娜郝溟_始的演替，屬于次生演替，C不符合題意；D、溫帶草原面貌從夏季到冬季發(fā)生改變屬于群落的時(shí)間結(jié)構(gòu)，不屬于次生演替，D符合題意。故選D。【點(diǎn)睛】本題考查群落演替的相關(guān)知識，要求考生識記演替的類型及實(shí)例，屬于考綱識記層次的考查。2、A【解析】

反射的結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)是反射弧，反射弧由感受器、傳入神經(jīng)、神經(jīng)中樞、傳出神經(jīng)和效應(yīng)器組成。興奮在神經(jīng)纖維上以電信號傳導(dǎo)，在突觸間以化學(xué)信號傳遞?！驹斀狻恳粋€(gè)神經(jīng)元一般一個(gè)胞體，由圖中胞體的個(gè)數(shù)可知，完成該反射活動的反射弧由四個(gè)神經(jīng)元構(gòu)成，A錯(cuò)誤；興奮在傳入神經(jīng)纖維上以電信號的形式傳導(dǎo)，電信號也叫神經(jīng)沖動，B正確；反射的結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)是反射弧，由于興奮在反射弧的突觸處是單向傳遞的，故反射過程中興奮在神經(jīng)纖維上的傳導(dǎo)是單向的，C正確；由圖中興奮和抑制的信號可知，當(dāng)敲擊韌帶時(shí)，伸肌收縮，同時(shí)屈肌舒張，才能完成小腿前踢動作，D正確。故選A。3、B【解析】

ATP中文名叫三磷酸腺苷，結(jié)構(gòu)式簡寫A-P～P～P，其中A表示腺嘌呤核苷，T表示三個(gè)，P表示磷酸基團(tuán)。幾乎所有生命活動的能量直接來自ATP的水解，由ADP合成ATP所需能量，動物來自呼吸作用，植物來自光合作用和呼吸作用，ATP可在細(xì)胞器線粒體或葉綠體中和在細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)中合成?！驹斀狻緼、光合作用的光反應(yīng)階段有ATP的合成，但是沒有有機(jī)物的分解，A錯(cuò)誤；B、ATP是細(xì)胞內(nèi)主要的直接能源物質(zhì)，UTP、GTP也可作為細(xì)胞內(nèi)某些生命活動的直接能源物質(zhì)，B正確；C、胞吞和胞吐兩種運(yùn)輸方式也消耗ATP，C錯(cuò)誤；D、無氧呼吸的第二階段不能產(chǎn)生ATP，D錯(cuò)誤。故選B。【點(diǎn)睛】本題考查ATP的化學(xué)組成和特點(diǎn)、ATP與ADP相互轉(zhuǎn)化的過程，要求考生識記ATP的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)，識記產(chǎn)生ATP的途徑和場所，再對選項(xiàng)作出正確的判斷，屬于考綱識記和理解層次的考查。4、C【解析】

從圖表信息可知，該實(shí)驗(yàn)的自變量是2，4-D濃度，因變量是根的總長度。以2，4-D溶液濃度為c作為對照組，其他組為實(shí)驗(yàn)組。從根的總長度可知，a、b濃度的2，4-D對植物生根具有明顯促進(jìn)作用，而d濃度的2，4-D對植物生根有抑制作用，能體現(xiàn)生長素作用的兩重性?！驹斀狻緼、據(jù)分析可知，本實(shí)驗(yàn)的自變量是2，4-D的濃度和作用時(shí)間，A錯(cuò)誤；B、由于生長素具有兩重性的特點(diǎn)，因此a組2，4-D的濃度不一定大于b組，B錯(cuò)誤；C、高濃度抑制扦插枝條的生根，圖中d濃度的2，4-D作用下，生根作用抑制，b濃度的2，4-D促進(jìn)生恨，因此d組2，4-D的濃度一定大于b組，C正確；D、各組所用的枝條上要保留部分幼芽，D錯(cuò)誤。故選C。5、B【解析】

現(xiàn)代生物進(jìn)化理論的主要內(nèi)容：種群是生物進(jìn)化的基本單位，生物進(jìn)化的實(shí)質(zhì)在于種群基因頻率的改變。突變和基因重組、自然選擇及隔離是物種形成過程的三個(gè)基本環(huán)節(jié)，通過它們的綜合作用，種群產(chǎn)生分化，最終導(dǎo)致新物種的形成．其中突變和基因重組產(chǎn)生生物進(jìn)化的原材料，自然選擇使種群的基因頻率發(fā)生定向的改變并決定生物進(jìn)化的方向，隔離是新物種形成的必要條件?！驹斀狻緼、土壤酸堿度對個(gè)體產(chǎn)生的不同變異有選擇作用，而不是誘導(dǎo)作用，A錯(cuò)誤；B、題意顯示兩種群已經(jīng)進(jìn)化成了兩個(gè)不同的物種，顯然它們之間已經(jīng)產(chǎn)生了生殖隔離，即兩個(gè)種群已經(jīng)不能進(jìn)行基因交流，B正確；C、基因突變產(chǎn)生新的等位基因，但由于基因突變時(shí)不定向的，故不會導(dǎo)致種群基因頻率定向改變，C錯(cuò)誤；D、突變和基因重組、自然選擇、隔離是物種形成的三個(gè)環(huán)節(jié)，D錯(cuò)誤。故選B。6、C【解析】

1、現(xiàn)代生物進(jìn)化理論的主要內(nèi)容：種群是生物進(jìn)化的基本單位，生物進(jìn)化的實(shí)質(zhì)在于種群基因頻率的改變；突變和基因重組產(chǎn)生生物進(jìn)化的原材料；自然選擇決定生物進(jìn)化的方向；隔離是新物種形成的必要條件。2、生物與生物之間，生物與無機(jī)環(huán)境之間的共同進(jìn)化導(dǎo)致生物多樣性的形成?！驹斀狻緼、變異（突變和基因重組）、自然選擇和隔離是物種形成的三個(gè)基本環(huán)節(jié)，A正確；B、自然選擇能定向改變種群的基因頻率，決定生物進(jìn)化的方向，B正確；C、種群是生物進(jìn)化的基本單位，種群也是生物群落的基本單位，C錯(cuò)誤；D、禁止濫殺捕獵野生動物是保護(hù)生物多樣性的有效措施，D正確。故選C。二、綜合題：本大題共4小題7、16%先減少后維持穩(wěn)定太陽能CO2農(nóng)場生態(tài)系統(tǒng)生物多樣性低導(dǎo)致抵抗力穩(wěn)定性低【解析】

分析題表可知，根據(jù)五個(gè)種群的能量大小和能量在生態(tài)系統(tǒng)中隨食物鏈傳遞逐級遞減的特點(diǎn)可推斷，乙為第一營養(yǎng)級，甲和丁為第二營養(yǎng)級，戊為第三營養(yǎng)級，丙為第四營養(yǎng)級?！驹斀狻浚?）由題表可知，乙為第一營養(yǎng)級，甲和丁為第二營養(yǎng)級，戊為第三營養(yǎng)級，丙為第四營養(yǎng)級，故這5個(gè)種群構(gòu)成的食物鏈為；（2）能量在第二與第三營養(yǎng)級之間的傳遞效率為12/（40+35）×100%=16%；人類大量捕殺種群丙，會使種群戊的天敵減少導(dǎo)致種群數(shù)量增加，種群戊以種群甲、丁為食，則種群甲、丁的數(shù)量減少，但種群戊的數(shù)量受環(huán)境容納量影響不會無限增加，之后種群甲、丁的數(shù)量會趨于穩(wěn)定，所以甲種群的數(shù)量變化趨勢為先減少后維持穩(wěn)定；（3）流經(jīng)該農(nóng)場生態(tài)系統(tǒng)的能量部分來自生產(chǎn)者固定的太陽能；無機(jī)環(huán)境中的碳元素以CO2的形式進(jìn)入生物群落；該農(nóng)場生態(tài)系統(tǒng)由于種群數(shù)量少，生物多樣性低導(dǎo)致生態(tài)系統(tǒng)穩(wěn)定性低，易遭遇病蟲害侵襲。【點(diǎn)睛】本題考查種群與生態(tài)系統(tǒng)之間的關(guān)系。要求學(xué)生結(jié)合能量傳遞的特點(diǎn)和題表信息首先判斷各個(gè)種群所處的營養(yǎng)級并判斷各個(gè)種群之間的關(guān)系，再結(jié)合題意分析種群數(shù)量變化的影響因素。需要注意生態(tài)系統(tǒng)中種群即使不存在天敵，其數(shù)量仍受環(huán)境容納量的影響而不會無限制的增加。8、促進(jìn)生長發(fā)育，特別是神經(jīng)系統(tǒng)的發(fā)育，促進(jìn)細(xì)胞代謝，提高神經(jīng)系統(tǒng)興奮性負(fù)反饋取性別、年齡、體重和生理狀況相同的Wistar大鼠（生理狀況相同的Wistar大鼠）飼養(yǎng)3個(gè)月，每周測定各組Wistar大鼠的甲狀腺激素含量，記錄并計(jì)算平均值碘缺乏或碘過量均可導(dǎo)致大鼠甲狀腺功能下降，分泌甲狀腺激素減少【解析】

甲狀腺激素的分泌調(diào)節(jié)過程是：下丘腦可以分泌促甲狀腺激素釋放激素作用于垂體，促進(jìn)垂體分泌促甲狀腺激素作用于甲狀腺，促進(jìn)甲狀腺分泌甲狀腺激素增加，血液中甲狀腺激素增加后通過負(fù)反饋調(diào)節(jié)影響下丘腦和垂體的分泌，使二者的分泌減少?！驹斀狻浚?）甲狀腺激素具有促進(jìn)生長發(fā)育，特別是神經(jīng)系統(tǒng)的發(fā)育，促進(jìn)細(xì)胞代謝，提高神經(jīng)系統(tǒng)興奮性的功能。正常Wistar大鼠體內(nèi)甲狀腺激素分泌增多，可抑制下丘腦和垂體的分泌活動，導(dǎo)致促甲狀腺激素釋放激素和促甲狀腺激素分泌減少，從而減少甲狀腺激素的分泌，此為負(fù)反饋調(diào)節(jié)。（2）本實(shí)驗(yàn)的自變量是碘的含量不同，因變量為甲狀腺激素的分泌量，鼠的生長狀況為無關(guān)變量，各組應(yīng)保證無關(guān)變量相同，實(shí)驗(yàn)步驟中沒有強(qiáng)調(diào)鼠的生長狀況相同，不能保證無關(guān)變量相同。實(shí)驗(yàn)觀察周期太長，且檢測甲狀腺激素每組只有兩次，存在的偶然性較大。故上述不妥之處應(yīng)改正為：①取性別、年齡、體重和生理狀況相同的Wistar大鼠（生理狀況相同的Wistar大鼠）。②飼養(yǎng)3個(gè)月，每周測定各組Wistar大鼠的甲狀腺激素含量，記錄并計(jì)算平均值。（3）甲狀腺激素是由甲狀腺合成并分泌的，碘是合成甲狀腺激素的原料，血清甲狀腺激素水平低，說明甲狀腺合成甲狀腺激素的能力下降，所以可推測碘缺乏或碘過量均可導(dǎo)致大鼠甲狀腺功能下降，從而分泌甲狀腺激素減少?！军c(diǎn)睛】本題考查了甲狀腺激素分級調(diào)節(jié)以及實(shí)驗(yàn)分析的相關(guān)知識，要求考生能夠識記分級調(diào)節(jié)的過程，利用單一變量和對照性原則設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)，并且能解釋實(shí)驗(yàn)結(jié)果。9、果實(shí)RNAXbalBamHl和Sacl反向卡那霉素不能番茄細(xì)胞內(nèi)本來存在ACC合成酶基因，能與ACC合成酶基因探針發(fā)生分子雜交【解析】

分析題意和題圖：番茄細(xì)胞中原有靶基因控制合成的ACC氧化酶和ACC合成酶是番茄細(xì)胞合成乙烯的兩個(gè)關(guān)鍵酶。圖1所示為反義基因轉(zhuǎn)錄成的RNA可與靶基因轉(zhuǎn)錄出的mRNA形成RNA雙鏈，使靶mRNA不能與核糖體結(jié)合或被RNA酶降解，從而阻止了ACC氧化酶和ACC合成酶的合成，影響細(xì)胞中乙烯的合成，使番茄具有耐儲存、宜運(yùn)輸?shù)膬?yōu)點(diǎn)。圖2所示的基因表達(dá)載體的組成包括復(fù)制原點(diǎn)、啟動子、終止子、標(biāo)記基因和目的基因，目的基因插入點(diǎn)在啟動子和終止子之間?！驹斀狻浚?）乙烯具有促進(jìn)果實(shí)成熟的作用，因此圖2中的2A11為特異性啟動子，則2A11應(yīng)在番茄的果實(shí)中表達(dá)。（2）從番茄成熟果實(shí)中提取RNA為模板，利用反轉(zhuǎn)錄法合成ACC氧化酶基因和ACC合成酶基因，以進(jìn)行拼接構(gòu)成融合基因并擴(kuò)增。（3）合成出的ACC氧化酶基因兩端分別含限制酶BamHⅠ和XbaⅠ的酶切位點(diǎn)，ACC合成酶基因兩端含SacⅠ和XbaⅠ的酶切位點(diǎn)，要將兩個(gè)基因融合，需用同一種限制酶即XbaⅠ酶對上述兩個(gè)基因進(jìn)行酶切，再用DNA連接酶串聯(lián)成融合基因，這樣融合基因上有三個(gè)限制酶切點(diǎn)：BamHⅠ、XbaⅠ、SacⅠ，其中限制酶BamHⅠ、SacⅠ分別位于融合基因的兩端，因此相應(yīng)的Ti質(zhì)粒應(yīng)用限制酶BamHl和Sacl進(jìn)行切割，確保融合基因能夠插入載體中。（4）反義融合基因是由番茄果實(shí)細(xì)胞中的靶基因轉(zhuǎn)錄出的mRNA反轉(zhuǎn)錄形成的，因此為了實(shí)現(xiàn)圖1中反義基因的效果，應(yīng)將融合基因反向插入在啟動子2A11的下游即可構(gòu)成反義融合基因。將表達(dá)載體與農(nóng)桿菌菌液混合后，接種在含有卡那霉素的培養(yǎng)基中，可篩選出含有反義融合基因的農(nóng)桿菌，再利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法獲得轉(zhuǎn)基因番茄。（5）在檢測番茄細(xì)胞中是否存在反義融合基因時(shí)，因?yàn)榉鸭?xì)胞內(nèi)本來存在ACC合成酶基因，能與ACC合成酶基因探針發(fā)生分子雜交，所以不能用放射性物質(zhì)標(biāo)記的ACC氧化（合成）酶基因片段做探針進(jìn)行檢測?！军c(diǎn)睛】解答本題的關(guān)鍵是：1.讀取題干信息，結(jié)合題圖1，弄清反義基因是如何形成的。2.反義mRNA和靶mRNA實(shí)質(zhì)上是分別由靶基因的兩條鏈為模板轉(zhuǎn)錄而來。3.結(jié)合題圖和題意分析融合基因?yàn)楹问欠聪虿迦朐趩幼?A11的下游。10、Taq（耐高溫的DNA聚合）重組質(zhì)粒能在宿主細(xì)胞中不被分解，有復(fù)制原點(diǎn)和啟動子，目的基因能被復(fù)制和表達(dá)Ca2+使用分子雜交技術(shù)檢測相應(yīng)的mRNA是否存在，若有雜交條帶出現(xiàn)說明翻譯出錯(cuò)；若無雜交條帶出現(xiàn)，則說明轉(zhuǎn)錄出錯(cuò)不能，因?yàn)榇竽c桿菌無內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基體，無法對蛋白質(zhì)進(jìn)行進(jìn)一步加工【解析】

基因工程技術(shù)的基本步驟：

1、目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。

2、基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動子、終止子和標(biāo)記基因等。

3、將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱游锛?xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法。

4、目的基因的檢測與鑒定：（1）分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)。（2）個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等?！驹斀狻浚?）PCR技術(shù)可在短時(shí)間內(nèi)大量擴(kuò)增目的基因，是因?yàn)槭褂昧藷岱€(wěn)定性DNA聚合酶，即Taq酶。（2）質(zhì)粒在宿主細(xì)胞中不被分解，有復(fù)制原點(diǎn)和啟動子，用質(zhì)粒做載體可使目的基因在受體細(xì)胞內(nèi)復(fù)制和表達(dá)；將目的基因?qū)氪竽c桿菌，可將大腸桿菌經(jīng)過鈣離子處理，使其成為感受態(tài)細(xì)胞，易于吸收外源DNA。（3）