生物學(xué)生物生物研發(fā)實(shí)習(xí)報(bào)告一、摘要2023年6月5日至8月22日，我在XX生物技術(shù)公司研發(fā)部門擔(dān)任助理研究員，參與抗體藥物開發(fā)項(xiàng)目。核心工作包括優(yōu)化細(xì)胞培養(yǎng)工藝，通過調(diào)整培養(yǎng)基成分與接種密度，使雜交瘤細(xì)胞表達(dá)量提升18%，達(dá)到1.2mg/mL的收獲水平；利用流式細(xì)胞術(shù)分析細(xì)胞活性，實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)顯示細(xì)胞存活率穩(wěn)定在92%以上。期間應(yīng)用了蛋白質(zhì)純化技術(shù)，采用親和層析柱純化抗體，純度達(dá)到98%；并通過WesternBlot驗(yàn)證了抗體特異性，靶蛋白識(shí)別效率提升至85%。掌握了細(xì)胞計(jì)數(shù)、酶標(biāo)儀檢測、數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析等專業(yè)方法，這些方法論可應(yīng)用于后續(xù)類似生物研發(fā)項(xiàng)目，有效縮短工藝優(yōu)化周期。二、實(shí)習(xí)內(nèi)容及過程2023年6月5日入職，在研發(fā)部跟著師兄做抗體藥物開發(fā)。主要任務(wù)是優(yōu)化雜交瘤細(xì)胞培養(yǎng)工藝，目標(biāo)提升表達(dá)量。剛開始用公司那套標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)基，細(xì)胞長得慢，上清里抗體濃度才0.8mg/mL。8月12日我嘗試調(diào)整培養(yǎng)基配方，加點(diǎn)了兩種新型生長因子，還把接種密度從5×10^5cells/mL提高到8×10^5cells/mL，結(jié)果第二周測到1.2mg/mL，提高了18%。流式細(xì)胞術(shù)數(shù)據(jù)分析顯示，新條件下細(xì)胞G0/G1期比例從65%降到58%，說明增殖加快了。項(xiàng)目里有個(gè)WesternBlot實(shí)驗(yàn)，初期靶蛋白條帶很淡，我懷疑是抗體特異性不行。8月18日換了個(gè)批次抗體，同時(shí)優(yōu)化了封閉條件，把封閉液里牛血清替換成5%脫脂奶粉，孵育時(shí)間從2小時(shí)改成1小時(shí)，最后靶蛋白識(shí)別效率提升到85%，背景也干凈多了。這些操作都是跟著SOP走的，但細(xì)節(jié)上得自己摸索。困難是初期對(duì)細(xì)胞計(jì)數(shù)和酶標(biāo)讀數(shù)不太熟練，有時(shí)候數(shù)據(jù)波動(dòng)大，師兄教我用Excel的線性回歸分析找規(guī)律，還給我看了公司內(nèi)部開發(fā)的細(xì)胞活性預(yù)測模型，感覺挺有意思。但有時(shí)候?qū)嶒?yàn)失敗，比如一次轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)細(xì)胞死亡率超50%，我也挺沮喪，后來發(fā)現(xiàn)是轉(zhuǎn)染試劑濃度沒控制好，得精確到0.1μL梯度實(shí)驗(yàn)。收獲是掌握了親和層析純化抗體流程，從粗提到超濾濃縮，純度能到98%。還用了UPLC檢測抗體純度，峰形對(duì)稱性要大于1.2才行。最大的改變是認(rèn)識(shí)到做研發(fā)不能只埋頭實(shí)驗(yàn)，得懂項(xiàng)目管理，比如8周里參與了兩個(gè)項(xiàng)目，一個(gè)抗體表達(dá)優(yōu)化，一個(gè)工藝放大，看師兄怎么寫報(bào)告、怎么跟生產(chǎn)部溝通，學(xué)到了不少東西。職業(yè)規(guī)劃上更清晰了，想往工藝開發(fā)方向發(fā)展，但覺得還得補(bǔ)點(diǎn)發(fā)酵工程和設(shè)備操作知識(shí)。單位培訓(xùn)機(jī)制有點(diǎn)欠缺，新員工沒系統(tǒng)教設(shè)備使用，都是看師兄操作自己摸索。建議可以搞個(gè)在線學(xué)習(xí)平臺(tái)，上傳操作視頻和常見問題解答。崗位匹配度上，我學(xué)到的實(shí)驗(yàn)技能挺多，但感覺項(xiàng)目周期太短，很難看到一個(gè)完整抗體從實(shí)驗(yàn)室到生產(chǎn)的過程，如果能參與更長期的課題就更好了。三、總結(jié)與體會(huì)這8周，從6月5日到8月22日，在研發(fā)部的經(jīng)歷讓我把書本里那些抗體純化、細(xì)胞計(jì)數(shù)，還有WesternBlot的圖，都變成了每天能摸到、看得見的東西。開始的時(shí)候，培養(yǎng)基配比調(diào)整后細(xì)胞表達(dá)量只提升了18%，從0.8mg/mL到1.2mg/mL，我覺得挺慢的，但師兄說工藝優(yōu)化就是個(gè)梯度實(shí)驗(yàn)，得一步步來，數(shù)據(jù)積累起來才有價(jià)值?，F(xiàn)在回頭看，這個(gè)0.4mg/mL的提升，就是我理解什么叫"研發(fā)就是不斷試錯(cuò)，用數(shù)據(jù)說話"最直接的體現(xiàn)。流式細(xì)胞術(shù)分析細(xì)胞周期的時(shí)候，發(fā)現(xiàn)G0/G1期比例變化跟抗體表達(dá)量正相關(guān)性，這個(gè)細(xì)節(jié)讓我意識(shí)到，做實(shí)驗(yàn)不能只盯著結(jié)果，過程參數(shù)其實(shí)都挺重要的。8月18日WesternBlot實(shí)驗(yàn)失敗，靶蛋白條帶很淡，我花了兩天重做，最后把封閉液換成5%脫脂奶粉，孵育時(shí)間縮短到1小時(shí)才成功，靶蛋白識(shí)別效率從之前的60%提升到85%。這個(gè)經(jīng)歷讓我明白，有時(shí)候解決問題就得從基礎(chǔ)條件抓起，不能想當(dāng)然。這段經(jīng)歷最大的收獲是，原來理論知識(shí)和實(shí)際操作之間隔著的，不是概念，而是無數(shù)個(gè)細(xì)節(jié)。比如親和層析，上樣流速、洗脫梯度，甚至緩沖液pH值都要精確控制，否則抗體活性會(huì)打折。8月15日我負(fù)責(zé)的純化實(shí)驗(yàn)，因?yàn)橄疵撘簆H沒調(diào)到3.0，最后純度只到95%，師兄讓我重新做的時(shí)候，我直接記下每次調(diào)整的參數(shù)和結(jié)果，現(xiàn)在那個(gè)小本本還留著。這種對(duì)細(xì)節(jié)的敏感，我覺得比單純會(huì)操作設(shè)備更重要。職業(yè)規(guī)劃上，之前覺得抗體研發(fā)就是細(xì)胞培養(yǎng)加純化，現(xiàn)在知道工藝開發(fā)還要考慮放大、成本、穩(wěn)定性，比如8月20日我去生產(chǎn)部看中試發(fā)酵罐，發(fā)現(xiàn)跟實(shí)驗(yàn)室的搖瓶差異好大。這讓我意識(shí)到，以后想進(jìn)工藝開發(fā)崗，光懂實(shí)驗(yàn)不行，還得補(bǔ)發(fā)酵工程和downstreamprocessing這塊。所以下學(xué)期打算報(bào)個(gè)PMP基礎(chǔ)班，看看能不能把項(xiàng)目管理知識(shí)也捎帶學(xué)點(diǎn)。行業(yè)趨勢上，現(xiàn)在抗體藥物這么火，但看8月15日公司內(nèi)部分享會(huì)，很多項(xiàng)目還在跟細(xì)胞活性、純度達(dá)標(biāo)斗智斗勇，沒聽說哪個(gè)公司說隨便做個(gè)抗體就能直接上市。這讓我覺得，基礎(chǔ)研究做得扎實(shí)太重要了。如果以后有機(jī)會(huì)，真想深入抗體表達(dá)優(yōu)化這塊，可能得先考個(gè)細(xì)胞工程或者生物化學(xué)方向的證書，把理論基礎(chǔ)再夯實(shí)。從學(xué)生到職場人的轉(zhuǎn)變，就是突然發(fā)現(xiàn)，實(shí)驗(yàn)失敗了不是完蛋，而是得趕緊找原因，然后像個(gè)真正的研發(fā)人員那樣去解決問題，這種責(zé)任感比在學(xué)校做實(shí)驗(yàn)報(bào)告要有壓力多了，但也讓人成長得更快。四、致謝在XX生物技術(shù)公司這8周的實(shí)習(xí)，確實(shí)收獲挺多的。特別感謝研發(fā)部的師兄帶我，細(xì)胞培養(yǎng)、WesternBlot這些操作都是他手把手教的，還給我看了不少項(xiàng)目文檔。比如8月12日我調(diào)整培養(yǎng)基配方那會(huì)兒，要不是他提醒加點(diǎn)新型生長因子，可能還得試好幾輪。還有流式細(xì)胞術(shù)分析細(xì)胞周期那塊，也是他教我怎么看G0/G1期比例變化跟表達(dá)量的關(guān)聯(lián)。同事們也挺好，尤其是負(fù)責(zé)設(shè)備維護(hù)的小張，每次有離心機(jī)、酶標(biāo)儀問題都幫我解決得挺快。8月18日WesternBlot實(shí)驗(yàn)失敗那會(huì)兒，也是大家一起想辦法重做方案。這種氛圍挺舒服的，感覺大家都在認(rèn)真