2026年生物技術專業(yè)測試：基因工程與細胞培養(yǎng)技術題庫一、單項選擇題（每題2分，共20題）1.基因工程中，限制性內切酶的主要作用是（）A.連接DNA片段B.切割DNA片段C.合成DNA片段D.轉錄RNA片段2.PCR技術中，引物的作用是（）A.催化DNA合成B.切割DNA片段C.模板鏈D.特異性結合目標序列3.基因克隆中，載體的主要功能是（）A.提供酶切位點B.攜帶外源基因C.促進DNA復制D.調控基因表達4.細胞培養(yǎng)中，完全培養(yǎng)基通常包含（）A.蛋白質和激素B.碳源和氮源C.無機鹽和維生素D.以上都是5.動物細胞培養(yǎng)中，常用的貼壁抑制因子是（）A.胰蛋白酶B.絲裂霉素CC.乳酸脫氫酶D.乙二醇6.細胞冷凍保存中，常用的保護劑是（）A.葡萄糖B.甘油C.氨基酸D.脂肪酸7.基因編輯技術中，CRISPR-Cas9系統(tǒng)的核心元件是（）A.gRNAB.Cas9蛋白C.限制性內切酶D.載體8.發(fā)酵過程中，無菌操作的主要目的是（）A.提高酶活性B.防止雜菌污染C.降低能耗D.增加產(chǎn)量9.細胞培養(yǎng)基中，L-谷氨酰胺的作用是（）A.提供能量B.促進增殖C.維持pH穩(wěn)定D.以上都是10.基因工程中，報告基因的作用是（）A.提示載體成功導入B.監(jiān)測基因表達C.提供酶切位點D.調控基因轉錄二、多項選擇題（每題3分，共10題）1.限制性內切酶的特點包括（）A.識別特異性序列B.切割DNA雙鏈C.需要輔因子參與D.在所有條件下均活性穩(wěn)定2.PCR反應體系中，必需的組分有（）A.模板DNAB.引物C.DNA聚合酶D.dNTPs3.細胞培養(yǎng)的基本要求包括（）A.無菌環(huán)境B.溫度控制C.pH調節(jié)D.氣體混合4.基因載體通常具備的功能有（）A.復制能力B.插入外源基因C.轉染宿主細胞D.表達調控元件5.細胞冷凍保存的步驟包括（）A.逐步降溫B.加入保護劑C.快速冷凍D.緩慢解凍6.基因編輯技術CRISPR-Cas9的優(yōu)勢包括（）A.高效性B.可編輯性C.經(jīng)濟性D.無脫靶效應7.發(fā)酵過程中，影響產(chǎn)量的因素有（）A.培養(yǎng)基成分B.溫度C.攪拌速度D.pH值8.細胞培養(yǎng)基中，常用的添加劑有（）A.胰蛋白酶B.絲裂霉素CC.L-谷氨酰胺D.胰島素9.基因工程中，常用的工具酶包括（）A.限制性內切酶B.DNA連接酶C.DNA聚合酶D.RNA聚合酶10.細胞培養(yǎng)的常見問題包括（）A.細胞污染B.細胞老化C.培養(yǎng)基不適宜D.工作臺振動三、填空題（每空1分，共20空）1.基因工程的核心工具是______和______。2.PCR技術中，退火溫度通?？刂圃赺_____℃左右。3.細胞培養(yǎng)中，完全培養(yǎng)基通常包含______、______和______。4.基因編輯技術CRISPR-Cas9中，gRNA的作用是______。5.細胞冷凍保存中，常用的保護劑是______和______。6.發(fā)酵過程中，無菌操作的主要目的是______。7.細胞培養(yǎng)基中，L-谷氨酰胺的作用是______。8.基因工程中，報告基因的作用是______。9.限制性內切酶的特點是______和______。10.PCR反應體系中，必需的組分包括______、______和______。四、簡答題（每題5分，共10題）1.簡述限制性內切酶的作用原理。2.解釋PCR技術的關鍵步驟。3.描述細胞培養(yǎng)的基本要求。4.說明基因載體的主要功能。5.闡述細胞冷凍保存的步驟。6.分析基因編輯技術CRISPR-Cas9的優(yōu)勢。7.討論發(fā)酵過程中影響產(chǎn)量的因素。8.解釋細胞培養(yǎng)基中L-谷氨酰胺的作用。9.說明基因工程中報告基因的應用。10.分析細胞培養(yǎng)的常見問題及解決方法。五、論述題（每題10分，共2題）1.結合實際應用，論述基因工程在生物醫(yī)藥領域的意義。2.結合行業(yè)發(fā)展趨勢，論述細胞培養(yǎng)技術在食品工業(yè)中的應用前景。答案與解析一、單項選擇題1.B限制性內切酶通過識別特異性DNA序列并切割雙鏈，實現(xiàn)基因片段的分離。2.D引物是短鏈DNA或RNA，特異性結合目標序列，為DNA聚合酶提供起始位點。3.B載體是基因工程中攜帶外源基因的工具，可進入宿主細胞并復制。4.D完全培養(yǎng)基包含蛋白質、激素、碳源、氮源、無機鹽和維生素等，滿足細胞生長需求。5.B絲裂霉素C可抑制細胞增殖，常用于制備單克隆細胞系。6.B甘油是常用的冷凍保護劑，可降低細胞內冰晶形成損傷。7.AgRNA是向導RNA，負責識別目標DNA序列，引導Cas9蛋白進行切割。8.B無菌操作可防止雜菌污染，確保發(fā)酵過程純凈。9.DL-谷氨酰胺是必需氨基酸，參與蛋白質合成和維持pH穩(wěn)定。10.B報告基因可監(jiān)測基因表達水平，用于評估載體功能。二、多項選擇題1.A、B限制性內切酶識別特異性序列并切割DNA雙鏈，但需特定條件下活性穩(wěn)定。2.A、B、C、DPCR體系需模板DNA、引物、DNA聚合酶和dNTPs共同作用。3.A、B、C、D細胞培養(yǎng)需無菌環(huán)境、溫度控制、pH調節(jié)和氣體混合等條件。4.A、B、C、D載體需具備復制能力、插入外源基因、轉染宿主細胞和表達調控元件。5.A、B、C、D細胞冷凍保存需逐步降溫、加入保護劑、快速冷凍和緩慢解凍。6.A、B、CCRISPR-Cas9高效、可編輯，但存在脫靶效應，經(jīng)濟性受技術成熟度影響。7.A、B、C、D發(fā)酵過程受培養(yǎng)基、溫度、攪拌速度和pH值等因素影響。8.C、DL-谷氨酰胺和胰島素是培養(yǎng)基添加劑，胰蛋白酶和絲裂霉素C不常用。9.A、B、C基因工程工具酶包括限制性內切酶、DNA連接酶和DNA聚合酶。10.A、B、C細胞培養(yǎng)常見問題包括污染、老化，培養(yǎng)基不適宜也會影響生長。三、填空題1.限制性內切酶，DNA連接酶2.55～653.蛋白質，激素，無機鹽和維生素4.識別目標DNA序列5.甘油，二甲亞砜6.防止雜菌污染7.提供能量，促進增殖，維持pH穩(wěn)定8.監(jiān)測基因表達9.識別特異性序列，切割DNA雙鏈10.模板DNA，引物，DNA聚合酶四、簡答題1.限制性內切酶的作用原理：通過識別DNA分子中特定的回文序列，并在特定位點切割雙鏈，實現(xiàn)基因片段的分離或連接。2.PCR技術的關鍵步驟：變性（高溫解開雙鏈）、退火（低溫引物結合）、延伸（DNA聚合酶合成新鏈）。3.細胞培養(yǎng)的基本要求：無菌環(huán)境、溫度（37℃）、pH（7.2-7.4）、氣體混合（95%空氣+5%CO2）和完全培養(yǎng)基。4.基因載體的主要功能：攜帶外源基因進入宿主細胞，實現(xiàn)基因復制、表達或整合。5.細胞冷凍保存的步驟：逐步降溫、加入保護劑、快速冷凍（-80℃或液氮）、緩慢解凍（37℃水浴）。6.基因編輯技術CRISPR-Cas9的優(yōu)勢：高效、可編輯、操作簡便，但存在脫靶效應，需進一步優(yōu)化。7.發(fā)酵過程中影響產(chǎn)量的因素：培養(yǎng)基成分、溫度、攪拌速度、pH值、無菌控制等。8.細胞培養(yǎng)基中L-谷氨酰胺的作用：參與蛋白質合成，維持細胞外液滲透壓和pH穩(wěn)定。9.基因工程中報告基因的應用：通過檢測報告基因的表達（如熒光或酶活性），評估外源基因是否成功導入和表達。10.細胞培養(yǎng)的常見問題及解決方法：-細胞污染：嚴格無菌操作，定期檢測；-細胞老化：定期傳代，優(yōu)化培養(yǎng)條件；-培養(yǎng)基不適宜：調整成分或更換培養(yǎng)基。五、論述題1.基因工程在生物醫(yī)藥領域的意義：-基因治療：修復或替換缺陷基因，治療遺傳?。ㄈ绲刂泻Ｘ氀?；-藥物開發(fā)：生產(chǎn)重組蛋白