實(shí)驗(yàn)室生物安全試題及答案一、單項(xiàng)選擇題（每題2分，共40分）1.依據(jù)《病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全管理?xiàng)l例》，我國將病原微生物分為四類，其中第一類病原微生物是指（）A.能夠引起人類或動(dòng)物疾病，但一般情況下對(duì)人、動(dòng)物或環(huán)境不構(gòu)成嚴(yán)重危害，傳播風(fēng)險(xiǎn)有限的微生物B.能引起人類或動(dòng)物嚴(yán)重疾病，比較容易直接或間接在人與人、動(dòng)物與人、動(dòng)物與動(dòng)物間傳播的微生物C.能引起人類或動(dòng)物非常嚴(yán)重疾病，一般不能治愈，容易直接或間接傳播的微生物D.通常情況下不會(huì)引起人類或動(dòng)物疾病的微生物2.BSL-2實(shí)驗(yàn)室要求的基礎(chǔ)防護(hù)裝備不包括（）A.符合標(biāo)準(zhǔn)的生物安全柜B.高壓蒸汽滅菌器C.洗眼裝置D.正壓防護(hù)服3.關(guān)于實(shí)驗(yàn)室個(gè)人防護(hù)裝備（PPE）的使用，正確的操作是（）A.戴手套前無需清潔雙手，使用后直接丟棄B.防護(hù)服應(yīng)完全覆蓋個(gè)人衣物，袖口需緊束C.護(hù)目鏡可替代安全面罩用于潑濺風(fēng)險(xiǎn)操作D.離開實(shí)驗(yàn)室時(shí)，可將手套、口罩帶出實(shí)驗(yàn)室區(qū)域4.以下哪種操作不符合生物安全規(guī)范？（）A.使用移液管時(shí)禁止用口吸B.離心前對(duì)離心管進(jìn)行平衡，誤差不超過0.1gC.實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，用75%乙醇擦拭生物安全柜內(nèi)壁D.將未滅活的感染性樣本直接放入普通垃圾桶5.實(shí)驗(yàn)室廢棄物分類中，被病原體污染的培養(yǎng)基屬于（）A.化學(xué)性廢物B.感染性廢物C.病理性廢物D.損傷性廢物6.進(jìn)行BSL-2實(shí)驗(yàn)室操作時(shí)，若發(fā)生樣本潑濺至實(shí)驗(yàn)臺(tái)面，正確的處理流程是（）A.立即用紙巾擦拭，再用清水沖洗B.先用吸濕材料覆蓋，噴灑有效氯1000mg/L的含氯消毒液，作用30分鐘后清理C.直接用75%乙醇擦拭，無需等待D.用紗布包裹后放入感染性廢物袋7.以下關(guān)于生物安全柜的使用，錯(cuò)誤的是（）A.操作前需開機(jī)運(yùn)行10分鐘，確保氣流穩(wěn)定B.操作時(shí)手臂應(yīng)緩慢進(jìn)出，避免干擾氣流C.柜內(nèi)物品應(yīng)盡量靠后放置，避免遮擋回風(fēng)口D.柜內(nèi)同時(shí)放置清潔物品與污染物品時(shí)，應(yīng)將污染物品置于下風(fēng)側(cè)8.實(shí)驗(yàn)室人員發(fā)生皮膚被污染的銳器刺傷后，首先應(yīng)（）A.立即擠壓傷口，盡量擠出污血B.用大量清水沖洗傷口，再用碘伏消毒C.報(bào)告實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人，填寫暴露記錄D.注射相應(yīng)的疫苗或服用預(yù)防藥物9.根據(jù)《實(shí)驗(yàn)室生物安全通用要求》（GB19489-2008），BSL-3實(shí)驗(yàn)室的核心工作間應(yīng)維持（）A.正壓，與相鄰區(qū)域壓差≥10PaB.負(fù)壓，與相鄰區(qū)域壓差≥10PaC.正壓，與相鄰區(qū)域壓差≥50PaD.負(fù)壓，與相鄰區(qū)域壓差≥50Pa10.以下哪種微生物屬于第二類病原微生物？（）A.金黃色葡萄球菌（非耐藥株）B.結(jié)核分枝桿菌（人型）C.大腸桿菌（K12株）D.水痘-帶狀皰疹病毒11.實(shí)驗(yàn)室生物安全培訓(xùn)的重點(diǎn)不包括（）A.個(gè)人防護(hù)裝備的正確使用B.實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì)分析方法C.生物危害評(píng)估的基本流程D.應(yīng)急預(yù)案與暴露后處理12.關(guān)于實(shí)驗(yàn)室氣溶膠的控制，錯(cuò)誤的做法是（）A.避免劇烈震蕩或離心未密封的樣本管B.使用帶濾芯的吸頭C.在開放實(shí)驗(yàn)臺(tái)上進(jìn)行凍干樣本的復(fù)溶D.對(duì)可能產(chǎn)生氣溶膠的操作在生物安全柜內(nèi)進(jìn)行13.高壓蒸汽滅菌的有效性驗(yàn)證方法不包括（）A.化學(xué)指示卡（121℃，15分鐘后變色）B.生物指示劑（嗜熱脂肪芽孢桿菌）C.溫度記錄儀實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)D.觀察滅菌后物品是否干燥14.實(shí)驗(yàn)室感染的主要途徑不包括（）A.吸入含有病原體的氣溶膠B.皮膚或黏膜接觸污染的實(shí)驗(yàn)材料C.食入被污染的食物（如實(shí)驗(yàn)室內(nèi)存放的零食）D.通過完好皮膚的直接接觸15.以下哪種操作需要在BSL-3實(shí)驗(yàn)室中進(jìn)行？（）A.培養(yǎng)乙型肝炎病毒（HBV）B.檢測(cè)結(jié)核分枝桿菌的痰涂片C.研究嚴(yán)重急性呼吸綜合征冠狀病毒（SARS-CoV）D.分離流感病毒（季節(jié)性H3N2株）16.實(shí)驗(yàn)室生物安全管理體系的核心是（）A.購買高級(jí)防護(hù)設(shè)備B.建立完善的管理制度與操作規(guī)范C.增加實(shí)驗(yàn)室人員數(shù)量D.定期更換實(shí)驗(yàn)試劑17.關(guān)于實(shí)驗(yàn)室準(zhǔn)入制度，正確的要求是（）A.未經(jīng)培訓(xùn)的人員可在導(dǎo)師監(jiān)督下進(jìn)入BSL-2實(shí)驗(yàn)室B.所有進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室的人員需進(jìn)行健康狀況登記C.外部參觀人員無需了解實(shí)驗(yàn)室風(fēng)險(xiǎn)，由接待人員負(fù)責(zé)D.孕婦可自由進(jìn)入BSL-1實(shí)驗(yàn)室18.處理感染性廢液時(shí)，正確的消毒方法是（）A.加入1%次氯酸鈉溶液，作用30分鐘后排放B.直接倒入下水道，用大量清水沖洗C.冷凍保存，定期焚燒D.用75%乙醇浸泡2小時(shí)后排放19.以下哪項(xiàng)是BSL-1實(shí)驗(yàn)室的基本要求？（）A.配備獨(dú)立的通風(fēng)系統(tǒng)B.實(shí)驗(yàn)臺(tái)耐酸堿、易清潔C.核心區(qū)設(shè)置緩沖間D.安裝自動(dòng)閉門裝置20.實(shí)驗(yàn)室發(fā)生火災(zāi)時(shí)，若燃燒物為感染性材料，正確的滅火措施是（）A.立即使用水基滅火器噴射B.優(yōu)先確保人員撤離，關(guān)閉實(shí)驗(yàn)室門，啟動(dòng)自動(dòng)滅火系統(tǒng)C.用二氧化碳滅火器直接噴灑在燃燒的樣本上D.用沙土覆蓋燃燒區(qū)域二、判斷題（每題1分，共15分。正確填“√”，錯(cuò)誤填“×”）1.所有實(shí)驗(yàn)室操作都必須在生物安全柜內(nèi)進(jìn)行。（）2.實(shí)驗(yàn)室可以同時(shí)存放個(gè)人物品（如水杯、手機(jī)）和實(shí)驗(yàn)材料。（）3.感染性廢物袋需標(biāo)注“感染性廢物”，并雙層包裝。（）4.實(shí)驗(yàn)人員離開實(shí)驗(yàn)室前需用肥皂和流動(dòng)水洗手。（）5.BSL-2實(shí)驗(yàn)室的門應(yīng)保持常開，方便通風(fēng)。（）6.高壓蒸汽滅菌時(shí)，物品應(yīng)松散放置，確保蒸汽穿透。（）7.被污染的玻璃器皿可直接用清水沖洗后重復(fù)使用。（）8.實(shí)驗(yàn)室生物安全負(fù)責(zé)人需定期檢查生物安全操作的執(zhí)行情況。（）9.處理未知風(fēng)險(xiǎn)的樣本時(shí)，應(yīng)按最高生物安全等級(jí)防護(hù)。（）10.實(shí)驗(yàn)室內(nèi)的空氣可直接排放至外界環(huán)境。（）11.銳器盒裝滿3/4時(shí)需密封，按感染性廢物處理。（）12.進(jìn)行動(dòng)物實(shí)驗(yàn)時(shí)，無需考慮實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的生物安全風(fēng)險(xiǎn)。（）13.實(shí)驗(yàn)室應(yīng)急預(yù)案需定期演練，確保人員熟悉流程。（）14.可以用實(shí)驗(yàn)室的冰箱存放個(gè)人食品。（）15.生物安全柜的高效空氣過濾器（HEPA）無需定期檢測(cè)，損壞后更換即可。（）三、簡(jiǎn)答題（每題5分，共30分）1.簡(jiǎn)述生物安全實(shí)驗(yàn)室分級(jí)（BSL-1至BSL-4）的核心區(qū)別。2.列舉實(shí)驗(yàn)室個(gè)人防護(hù)裝備（PPE）的主要類型，并說明BSL-2實(shí)驗(yàn)室的基本配備要求。3.說明感染性廢物的處理原則及常用消毒方法（至少3種）。4.生物安全柜的主要功能是什么？按氣流模式可分為幾類？各自適用的操作場(chǎng)景是什么？5.實(shí)驗(yàn)室發(fā)生樣本泄漏（如離心管破裂導(dǎo)致含病原微生物的液體濺出）時(shí)，應(yīng)遵循哪些處理步驟？6.簡(jiǎn)述實(shí)驗(yàn)室人員暴露于病原微生物后的應(yīng)急處置流程（以皮膚刺傷為例）。四、案例分析題（共15分）案例：某高校BSL-2實(shí)驗(yàn)室中，研究生張某在進(jìn)行大腸桿菌（攜帶耐藥基因）培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)時(shí)，未關(guān)閉生物安全柜玻璃門，操作過程中不慎將裝有菌液的試管打翻，部分液體濺至手臂（未佩戴長(zhǎng)袖手套）及實(shí)驗(yàn)臺(tái)面。張某立即用紙巾擦拭臺(tái)面，用清水沖洗手臂后繼續(xù)實(shí)驗(yàn)。問題：1.分析案例中存在的生物安全違規(guī)操作（至少4項(xiàng)）。（6分）2.針對(duì)該泄漏事件，給出正確的處理流程。（9分）參考答案一、單項(xiàng)選擇題1.C2.D3.B4.D5.B6.B7.C8.B9.B10.B11.B12.C13.D14.D15.C16.B17.B18.A19.B20.B二、判斷題1.×2.×3.√4.√5.×6.√7.×8.√9.√10.×11.√12.×13.√14.×15.×三、簡(jiǎn)答題1.生物安全實(shí)驗(yàn)室分級(jí)的核心區(qū)別：BSL-1：操作低風(fēng)險(xiǎn)微生物（通常不致?。瑹o需特殊防護(hù)設(shè)施，基礎(chǔ)防護(hù)（實(shí)驗(yàn)室外套、手套）即可。BSL-2：操作中等風(fēng)險(xiǎn)微生物（可引起人類疾病，傳播風(fēng)險(xiǎn)有限），需生物安全柜、高壓滅菌器、洗眼裝置，實(shí)驗(yàn)室門可自動(dòng)關(guān)閉，限制無關(guān)人員進(jìn)入。BSL-3：操作高風(fēng)險(xiǎn)微生物（可引起嚴(yán)重疾病，通過氣溶膠傳播），核心區(qū)為負(fù)壓，配備Ⅱ級(jí)或Ⅲ級(jí)生物安全柜，人員需穿戴防護(hù)服，設(shè)置雙門緩沖間，空氣經(jīng)HEPA過濾后排放。BSL-4：操作極高風(fēng)險(xiǎn)微生物（無有效治療或疫苗，高度致命），核心區(qū)嚴(yán)格負(fù)壓（與相鄰區(qū)域壓差≥50Pa），人員需穿戴正壓防護(hù)服，配備獨(dú)立供氣系統(tǒng)，所有物品經(jīng)雙重滅菌后移出，空氣經(jīng)雙重HEPA過濾。2.個(gè)人防護(hù)裝備（PPE）類型及BSL-2配備要求：類型：一次性手套（丁腈或乳膠）、防護(hù)服（連體或分體，防液體滲透）、護(hù)目鏡/面罩、口罩（醫(yī)用外科口罩或N95）、鞋套。BSL-2基本配備：必須穿戴防護(hù)服（覆蓋所有個(gè)人衣物）、手套（實(shí)驗(yàn)前檢查無破損，不同操作更換）；涉及氣溶膠或潑濺風(fēng)險(xiǎn)時(shí)需佩戴護(hù)目鏡或面罩；口罩選擇至少醫(yī)用外科口罩；禁止穿戴PPE離開實(shí)驗(yàn)室區(qū)域。3.感染性廢物處理原則及消毒方法：原則：分類收集（感染性、損傷性、病理性）、專用容器（防刺、防漏）、標(biāo)識(shí)清晰（“感染性廢物”）、先消毒后處理（高壓滅菌或化學(xué)消毒）、記錄交接。常用方法：①高壓蒸汽滅菌（121℃，15-30分鐘，適用于耐濕熱物品）；②化學(xué)消毒（如含氯消毒液，有效氯1000-2000mg/L，作用30分鐘，適用于液體廢物或表面消毒）；③焚燒（適用于無法高壓滅菌的物品，需專業(yè)焚燒爐）；④紫外線照射（輔助方法，需直接照射且時(shí)間≥30分鐘）。4.生物安全柜的功能及分類：功能：保護(hù)操作人員、實(shí)驗(yàn)樣本及環(huán)境，通過定向氣流和HEPA過濾防止氣溶膠擴(kuò)散。分類及適用場(chǎng)景：Ⅰ級(jí)：部分保護(hù)人員和環(huán)境（氣流從前方吸入，經(jīng)HEPA過濾后排出），不保護(hù)樣本，適用于操作低至中等風(fēng)險(xiǎn)微生物（BSL-1至BSL-2）。Ⅱ級(jí)：-A1型：70%氣流循環(huán)，30%排出，適用于BSL-1至BSL-3，不處理揮發(fā)性化學(xué)試劑；-A2型：同上，但外排氣流≥30%，更安全；-B1型：50%氣流外排，需連接排風(fēng)系統(tǒng)，適用于同時(shí)操作微生物和少量揮發(fā)性化學(xué)物質(zhì)；-B2型：100%外排，無循環(huán)，適用于BSL-3至BSL-4，或需處理大量揮發(fā)性化學(xué)物質(zhì)的操作。Ⅲ級(jí)：全封閉負(fù)壓（-120Pa），人員通過手套操作，適用于BSL-4級(jí)高風(fēng)險(xiǎn)微生物。5.樣本泄漏處理步驟：①立即停止操作，標(biāo)記污染區(qū)域，限制人員移動(dòng)（避免氣溶膠擴(kuò)散）；②佩戴額外防護(hù)（如雙層手套、面罩、防護(hù)服）；③用吸濕材料（如紗布、紙巾）覆蓋泄漏物，上層噴灑有效氯2000mg/L的含氯消毒液（或70%乙醇，視病原微生物而定），作用30分鐘；④用鑷子將污染材料放入感染性廢物袋，再用消毒液擦拭污染區(qū)域（至少2次）；⑤清理工具（如鑷子、抹布）放入專用容器高壓滅菌；⑥記錄泄漏事件（時(shí)間、地點(diǎn)、涉及微生物、處理過程），報(bào)告實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人；⑦監(jiān)測(cè)污染區(qū)域（如必要時(shí)進(jìn)行環(huán)境采樣檢測(cè)）。6.皮膚刺傷暴露后的應(yīng)急處置流程：①立即停止操作，在流動(dòng)水下擠壓傷口（從近心端向遠(yuǎn)心端輕擠），盡可能排出污血，避免用力擠壓；②用肥皂水和大量清水沖洗傷口（至少15分鐘），再用0.5%碘伏或75%乙醇消毒；③用無菌紗布覆蓋傷口，必要時(shí)就醫(yī)處理；④立即報(bào)告實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人，填寫《實(shí)驗(yàn)室暴露事件記錄表》（記錄時(shí)間、地點(diǎn)、操作內(nèi)容、傷口情況等）；⑤實(shí)驗(yàn)室生物安全委員會(huì)評(píng)估暴露風(fēng)險(xiǎn)（如微生物致病性、暴露量、傷口深度）；⑥根據(jù)評(píng)估結(jié)果采取預(yù)防措施（如接種疫苗、服用抗病毒藥物或抗生素）；⑦跟蹤觀察暴露者健康狀況（如發(fā)熱、局部感染等），必要時(shí)進(jìn)行醫(yī)學(xué)檢測(cè)；⑧分析暴露原因，改進(jìn)操作規(guī)范（如加強(qiáng)培訓(xùn)、更換更安全的器材）。四、案例分析題1.違規(guī)操作：①未關(guān)閉生物安全柜玻璃門（影響氣流屏障，增加氣溶膠擴(kuò)散風(fēng)險(xiǎn)）；②未佩戴長(zhǎng)袖手套（手臂暴露，可能接觸污染液體）；③用紙巾直接擦拭泄漏物（未先消毒，可能導(dǎo)致二次污染）；④清水沖洗手臂不規(guī)范（應(yīng)使用肥皂水和消毒劑）；⑤未停止實(shí)驗(yàn)并報(bào)告（需完成泄漏處理后再繼續(xù)）；⑥未對(duì)污染臺(tái)面進(jìn)行有效消毒（僅用紙巾擦拭，未使用含氯消毒液等）。2.正確處理流程：①立即停止實(shí)驗(yàn)，保持冷靜，避免快速移動(dòng)（減少氣溶膠擴(kuò)散）；②關(guān)閉生物安全柜，標(biāo)記污染區(qū)域（實(shí)驗(yàn)臺(tái)面及手臂接觸部位）；③佩戴雙層手套、護(hù)目鏡、一次性防護(hù)服（若未穿戴）；④用紗布覆蓋泄漏的菌液，上層噴灑有效氯2000mg/L的