實驗室生物安全考試試題和答案一、單項選擇題（每題2分，共30題，合計60分）1.根據(jù)《病原微生物實驗室生物安全管理條例》，我國將病原微生物分為四類，其中能夠引起人類或動物非常嚴重疾病，且目前尚無有效預防和治療方法的病原微生物屬于（）A.第一類B.第二類C.第三類D.第四類2.二級生物安全實驗室（BSL-2）的核心工作區(qū)域必須配備的基本防護設備是（）A.正壓防護服B.生物安全柜C.通風櫥D.高壓蒸汽滅菌器3.處理含有高濃度結(jié)核分枝桿菌的臨床樣本時，正確的個人防護裝備（PPE）配置應為（）A.普通工作服+一次性手套+醫(yī)用外科口罩B.實驗服+雙層手套+N95口罩+護目鏡C.正壓防護服+全面型呼吸防護器D.隔離衣+單層手套+一次性帽子4.實驗室廢棄物分類中，被HBV陽性血清污染的離心管應歸為（）A.化學性廢棄物B.病理性廢棄物C.感染性廢棄物D.放射性廢棄物5.進行細胞培養(yǎng)操作時，若生物安全柜突然斷電，正確的應急處理流程是（）A.立即關閉安全柜玻璃門，停止操作，記錄斷電時間，待恢復供電后繼續(xù)實驗B.迅速取出培養(yǎng)瓶轉(zhuǎn)移至其他安全柜，避免細胞失活C.保持安全柜玻璃門開啟狀態(tài)，通知維修人員D.用75%乙醇噴灑操作區(qū)域后繼續(xù)實驗6.關于實驗室菌（毒）種管理，下列描述錯誤的是（）A.高致病性病原微生物菌（毒）種需雙人雙鎖保存B.領用和銷毀記錄需保存至少20年C.運輸?shù)谝活惒≡⑸镄杞?jīng)省級衛(wèi)生行政部門批準D.實驗剩余菌（毒）種應及時滅活后按感染性廢物處理7.實驗室發(fā)生布魯氏菌培養(yǎng)物潑灑事故后，正確的消毒方法是（）A.立即用干毛巾擦拭，再用5%次氯酸鈉溶液覆蓋污染區(qū)域30分鐘B.直接用75%乙醇噴灑污染區(qū)域，作用10分鐘C.用紙巾包裹污染物后投入感染性廢物袋D.先覆蓋2%戊二醛溶液30分鐘，再清理污染物8.三級生物安全實驗室（BSL-3）的氣流組織要求是（）A.清潔區(qū)→緩沖區(qū)→核心工作區(qū)，壓力依次遞減B.核心工作區(qū)→緩沖區(qū)→清潔區(qū)，壓力依次遞減C.清潔區(qū)與核心工作區(qū)壓力相同，緩沖區(qū)為正壓D.核心工作區(qū)保持正壓，防止污染擴散9.進行PCR擴增時，若樣本管意外破裂導致核酸氣溶膠擴散，應采取的首要措施是（）A.立即開啟紫外燈照射30分鐘B.用0.5%過氧乙酸溶液噴霧消毒C.關閉實驗室門窗，佩戴N95口罩后清理污染物D.通知所有人員撤離實驗室，啟動通風系統(tǒng)運行1小時10.實驗室工作人員被HIV陽性血污染的針頭刺傷后，暴露后預防（PEP）的最佳用藥時間是（）A.2小時內(nèi)B.24小時內(nèi)C.48小時內(nèi)D.72小時內(nèi)11.關于實驗室生物安全手冊的編制要求，錯誤的是（）A.應包含本實驗室涉及的所有病原微生物的生物危害評估B.需明確各崗位的生物安全職責C.每年至少修訂一次D.所有工作人員需接受培訓并簽署知情同意書12.處理朊病毒污染的實驗器械時，正確的消毒方法是（）A.121℃高壓蒸汽滅菌30分鐘B.1mol/L氫氧化鈉溶液浸泡1小時后高壓滅菌C.75%乙醇浸泡30分鐘D.0.5%次氯酸鈉溶液擦拭表面13.二級生物安全實驗室的人員準入要求不包括（）A.具備基礎生物學知識培訓記錄B.完成本實驗室生物安全操作培訓并考核合格C.持有有效的健康證明（含乙肝抗體檢測）D.具有碩士及以上學歷14.實驗室發(fā)生烈性傳染病樣本泄漏時，應急響應的第一步驟是（）A.啟動實驗室應急預案B.封鎖污染區(qū)域，限制人員進出C.對暴露人員進行醫(yī)學觀察D.向上級主管部門報告15.關于實驗室通風系統(tǒng)的維護，錯誤的做法是（）A.每年至少進行一次氣流流向檢測B.高效空氣過濾器（HEPA）需定期更換C.通風系統(tǒng)故障時可繼續(xù)進行高風險實驗D.維護記錄應存檔至少3年16.進行動物實驗時，感染性動物尸體的處理應（）A.直接投入普通生活垃圾袋B.裝入防滲漏的專用塑料袋，-20℃冷凍保存后統(tǒng)一焚燒C.用10%福爾馬林溶液浸泡后深埋D.經(jīng)高壓蒸汽滅菌后與普通醫(yī)療廢物一起處理17.實驗室生物安全柜的日常使用中，錯誤的操作是（）A.操作前開啟安全柜運行10分鐘B.物品擺放時保持前窗開口處氣流不受阻擋C.操作完成后立即關閉安全柜電源D.每周對安全柜內(nèi)表面進行消毒18.下列屬于高致病性病原微生物的是（）A.大腸埃希菌（非致病性菌株）B.麻疹病毒C.結(jié)核分枝桿菌（牛型）D.流感病毒（季節(jié)性H1N1）19.實驗室工作人員出現(xiàn)發(fā)熱伴不明原因出血癥狀時，應（）A.自行服用退燒藥后繼續(xù)工作B.立即停止工作，佩戴口罩并到指定醫(yī)院就診，同時報告實驗室負責人C.請假回家休息，待癥狀緩解后返崗D.向同事說明情況后繼續(xù)完成實驗20.關于實驗室消毒效果監(jiān)測，錯誤的是（）A.高壓蒸汽滅菌效果需用生物指示劑（如嗜熱脂肪芽孢桿菌）監(jiān)測B.紫外線燈輻照強度每半年檢測一次C.化學消毒劑濃度每天使用前監(jiān)測D.生物安全柜的沉降菌檢測每季度進行一次21.運輸?shù)诙惒≡⑸飿颖緯r，包裝系統(tǒng)應符合（）A.A類包裝（UN2814）B.B類包裝（UN3373）C.普通紙箱包裝D.泡沫箱加冰袋包裝22.實驗室發(fā)生感染性液體濺入眼睛的應急處理是（）A.用手揉擦眼睛后用生理鹽水沖洗B.立即到洗眼器處用大量清水沖洗15分鐘，隨后就醫(yī)C.滴入抗生素眼藥水后繼續(xù)實驗D.用75%乙醇擦拭眼周皮膚23.三級生物安全實驗室的工作人員進入核心區(qū)前必須經(jīng)過（）A.一次更鞋更衣B.二次更鞋更衣（緩沖間）C.淋浴D.穿戴正壓防護服24.關于實驗室菌（毒）種領用記錄，必須包含的信息不包括（）A.領用人員姓名、職稱B.菌（毒）種的來源、編號C.實驗項目名稱D.領用人員的家庭住址25.處理含有炭疽芽孢的樣本時，最有效的消毒方法是（）A.10%甲醛溶液浸泡24小時B.121℃高壓蒸汽滅菌30分鐘C.0.5%過氧乙酸溶液擦拭D.紫外線照射60分鐘26.實驗室生物安全風險評估的核心內(nèi)容是（）A.評估實驗人員的操作技能B.分析病原微生物的危害等級、實驗活動的風險及防控措施C.檢查實驗室設施設備的完整性D.統(tǒng)計過往事故發(fā)生頻率27.二級生物安全實驗室的環(huán)境參數(shù)要求中，錯誤的是（）A.溫度18-26℃，相對濕度30-70%B.每小時換氣次數(shù)≥12次C.與相鄰區(qū)域的壓差≥5Pa（核心區(qū)負壓）D.照明強度≥300lx28.實驗室工作人員在操作過程中懷疑被污染，正確的做法是（）A.繼續(xù)操作至完成實驗后再處理B.立即停止操作，脫去手套并消毒雙手，更換防護裝備C.用75%乙醇噴灑手套表面后繼續(xù)操作D.向同事求助，由他人完成剩余操作29.關于實驗室應急預案，下列描述錯誤的是（）A.應明確事故報告的流程和責任人B.需定期進行應急演練（至少每年一次）C.包含暴露后預防的具體方案D.僅針對已知病原微生物設計，無需考慮未知病原30.實驗室感染性廢物的高壓蒸汽滅菌效果驗證應（）A.每次滅菌時放置化學指示卡，每月進行生物監(jiān)測B.每周進行一次生物監(jiān)測即可C.僅使用化學指示卡作為記錄D.由實驗室工作人員自行判斷二、判斷題（每題1分，共20題，合計20分）1.一級生物安全實驗室（BSL-1）可以處理所有非致病性微生物。（）2.實驗室生物安全柜的HEPA過濾器需要定期更換，更換前無需進行消毒。（）3.高致病性病原微生物實驗活動結(jié)束后，樣本和廢棄物必須在本實驗室就地消毒處理。（）4.實驗室工作人員可以在實驗室內(nèi)飲水、進食。（）5.運輸?shù)谝活惒≡⑸锉仨毷褂脤Ｓ眠\輸容器，并由2名以上專業(yè)人員護送。（）6.實驗室發(fā)生樣本泄漏時，應立即用大量清水沖洗污染區(qū)域，防止擴散。（）7.二級生物安全實驗室的門應保持常開，以保證良好通風。（）8.處理完感染性樣本后，應先脫去外層手套，再摘護目鏡，最后脫去實驗服。（）9.實驗室生物安全管理體系應包含文件控制、人員培訓、監(jiān)督檢查等要素。（）10.結(jié)核分枝桿菌屬于第二類病原微生物，必須在BSL-3實驗室中進行培養(yǎng)操作。（）11.實驗室的廢棄化學試劑可以與感染性廢物混合處理。（）12.紫外線燈的有效殺菌距離為1-2米，照射時間應≥30分鐘。（）13.實驗室工作人員的健康檔案應至少保存至其離崗前2年。（）14.進行銳器操作（如接種環(huán)使用）時，應在生物安全柜內(nèi)完成，禁止徒手傳遞。（）15.實驗室的應急藥品（如急救包、暴露后預防藥物）應存放在核心工作區(qū)方便取用。（）16.菌（毒）種的銷毀必須經(jīng)實驗室負責人批準，并做好詳細記錄。（）17.實驗室的通風系統(tǒng)應設置備用電源，確保斷電時仍能維持負壓。（）18.處理未知病原微生物樣本時，應按照BSL-3實驗室的防護要求進行操作。（）19.實驗室的生物安全自查應每月至少一次，檢查內(nèi)容包括PPE使用、廢棄物處理、設施運行等。（）20.發(fā)生實驗室感染事件后，應立即隱瞞不報，待調(diào)查清楚后再向上級報告。（）三、簡答題（每題5分，共6題，合計30分）1.簡述生物安全實驗室分級的依據(jù)及各級實驗室的主要操作對象。2.列舉實驗室感染的主要途徑，并說明針對銳器傷的預防措施。3.闡述實驗室感染性廢物的處理原則及常用消毒方法。4.說明生物安全柜的分類（按氣流方向）及各自適用的實驗場景。5.簡述高致病性病原微生物實驗活動的審批流程（以第二類病原為例）。6.實驗室發(fā)生埃博拉病毒樣本泄漏事故時，應采取哪些應急處理措施？四、案例分析題（每題10分，共2題，合計20分）案例1：某高校分子生物學實驗室，研究生張某在進行HBV陽性血清離心操作時，未關閉離心機蓋即啟動設備，導致離心管破裂，血清濺出至離心機內(nèi)部及操作臺面。張某未佩戴護目鏡，僅用紙巾擦拭后繼續(xù)實驗。問題：指出案例中的違規(guī)操作，并提出正確的處理流程。案例2：某疾控中心BSL-2實驗室，工作人員李某在處理霍亂弧菌培養(yǎng)物時，誤將污染的接種環(huán)直接放入銳器盒（未灼燒滅菌）。次日，清潔人員在整理垃圾時被接種環(huán)刺傷手指，3日后出現(xiàn)腹瀉癥狀，確診為霍亂。問題：分析事故原因，提出改進措施。參考答案一、單項選擇題1.A2.B3.B4.C5.A6.C7.A8.A9.C10.A11.C12.B13.D14.B15.C16.B17.C18.C19.B20.D21.A22.B23.B24.D25.B26.B27.C28.B29.D30.A二、判斷題1.×（BSL-1處理已知無或極低致病性微生物）2.×（更換前需對過濾器進行消毒）3.√4.×（禁止在實驗室內(nèi)飲食）5.√6.×（應先覆蓋消毒劑，再清理）7.×（門應常閉，維持負壓）8.√9.√10.×（結(jié)核分枝桿菌培養(yǎng)需在BSL-3實驗室，其他操作可在BSL-2）11.×（化學廢物與感染性廢物需分類處理）12.√13.×（應保存至離崗前5年）14.√15.×（應急藥品應存放在清潔區(qū)）16.√17.√18.×（按BSL-2或更高防護操作）19.√20.×（必須立即報告）三、簡答題1.分級依據(jù)：根據(jù)實驗室所處理的病原微生物的危害程度、實驗活動的性質(zhì)、實驗室的設計和防護能力。-BSL-1：處理已知無或極低致病性微生物（如非致病性大腸埃希菌）；-BSL-2：處理具有中等危害、能引起人類或動物疾病但不導致嚴重危害的病原（如HBV、結(jié)核分枝桿菌的非培養(yǎng)操作）；-BSL-3：處理能引起嚴重或致死性疾病、通過呼吸傳播的病原（如結(jié)核分枝桿菌培養(yǎng)、炭疽芽孢操作）；-BSL-4：處理目前無有效預防和治療方法的高致死性病原（如埃博拉病毒、馬爾堡病毒）。2.主要感染途徑：-呼吸道（氣溶膠吸入）；-消化道（誤吞污染物品）；-皮膚/黏膜（直接接觸、銳器傷、濺入眼鼻）；-節(jié)肢動物媒介（蚊蠅叮咬）。銳器傷預防措施：-使用防刺手套；-禁止徒手傳遞銳器；-銳器使用后立即放入防刺容器；-禁止回套針帽（如必須回套，使用單手操作法）；-在生物安全柜內(nèi)進行銳器操作。3.處理原則：-分類收集（感染性、病理性、化學性等）；-及時消毒（實驗室內(nèi)部預處理）；-專用包裝（防滲漏、防刺破）；-規(guī)范運輸（固定路線、專用容器）；-集中處理（符合環(huán)保要求的機構(gòu)）。常用消毒方法：-高壓蒸汽滅菌（121℃，30分鐘，適用于耐濕熱物品）；-化學消毒（2%戊二醛、5%次氯酸鈉，適用于表面或液體廢物）；-焚燒（適用于動物尸體、一次性物品）；-紫外線照射（輔助消毒，需直接照射且時間≥30分鐘）。4.生物安全柜分類（按氣流方向）：-Ⅰ級：從實驗室環(huán)境吸入空氣（經(jīng)HEPA過濾）進入工作區(qū)，污染空氣經(jīng)HEPA過濾后排出，保護人員和環(huán)境，不保護樣本；-Ⅱ級：-ⅡA1型：70%氣流循環(huán)，30%排出，適用于低風險微生物操作；-ⅡA2型：70%循環(huán)，30%排出（經(jīng)HEPA過濾），適用于BSL-1至BSL-3的樣本保護；-ⅡB1型：30%循環(huán)，70%排出（需連接排風系統(tǒng)），適用于揮發(fā)性化學試劑與微生物同時操作；-ⅡB2型：100%外排，無循環(huán)，適用于高風險微生物和揮發(fā)性化學物質(zhì)；-Ⅲ級：全封閉負壓系統(tǒng)，人員通過手套操作，保護人員、樣本和環(huán)境，用于BSL-4操作。5.審批流程（以第二類病原為例）：-實驗室具備BSL-3及以上資質(zhì)；-實驗活動開展前，進行生物安全風險評估并形成報告；-向省級衛(wèi)生行政部門提交申請（包括實驗室資質(zhì)、風險評估報告、實驗方案等材料）；-省級衛(wèi)生行政部門組織專家評審，20個工作日內(nèi)作出審批決定；-獲得批準文件后，在批準的實驗項目和范圍內(nèi)開展活動；-實驗結(jié)束后，向?qū)徟块T提交總結(jié)報告。6.應急處理措施：-立即停止實驗，封鎖污染區(qū)域，限制人員進出；-所有在場人員佩戴正壓呼吸防護器，穿防滲透防護服；-用0.5%過氧乙酸溶液覆蓋污染區(qū)域（至少30分鐘），再用吸水材料清理污染物（放入雙層防滲漏袋）；-對污染的設備（如離心機、生物安全柜）進行熏蒸消毒（甲醛+高錳酸鉀）；-暴露人員立即進行全身淋浴，更換衣物，記錄暴露時間和部位；-啟動暴露后預防（PEP）方案（如抗病毒藥物），并進行21天醫(yī)學觀察；-2小時內(nèi)向?qū)俚匦l(wèi)生行政部門和疾控中心報告；-事故調(diào)查（原因分析、責任認定），修訂應急預案。四、案例分析題案例1：違規(guī)操作：-未關閉離心機蓋啟動設備（違反離心機安全操作規(guī)范）；-未佩