腫瘤干細(xì)胞干性維持的信號通路交叉演講人CONTENTS腫瘤干細(xì)胞干性的核心概念與生物學(xué)意義維持腫瘤干細(xì)胞干性的關(guān)鍵信號通路信號通路交叉網(wǎng)絡(luò)的構(gòu)建與調(diào)控機(jī)制交叉網(wǎng)絡(luò)失調(diào)與腫瘤惡性表型的關(guān)聯(lián)針對交叉通路的靶向治療策略與挑戰(zhàn)總結(jié)與展望目錄腫瘤干細(xì)胞干性維持的信號通路交叉在腫瘤研究的漫長歷程中，腫瘤干細(xì)胞（CancerStemCells,CSCs）的發(fā)現(xiàn)為我們理解腫瘤的異質(zhì)性、復(fù)發(fā)耐藥及轉(zhuǎn)移機(jī)制提供了全新的視角。CSCs憑借其強(qiáng)大的自我更新能力和多向分化潛能，被視為腫瘤發(fā)生、發(fā)展的“種子細(xì)胞”。而干性（Stemness）作為CSCs的核心屬性，其維持機(jī)制一直是腫瘤生物學(xué)領(lǐng)域的研究焦點(diǎn)。經(jīng)過多年探索，學(xué)界逐漸認(rèn)識到，CSCs干性的維持并非單一信號通路的獨(dú)立作用，而是多條信號通路在分子水平上精密交叉、協(xié)同調(diào)控的結(jié)果。這種復(fù)雜的交叉網(wǎng)絡(luò)如同一張無形的“調(diào)控網(wǎng)”，確保了CSCs干性的穩(wěn)定與動態(tài)平衡，也成為腫瘤治療中難以攻克的“堡壘”。作為一名長期致力于腫瘤微環(huán)境與干細(xì)胞調(diào)控研究的科研工作者，我將結(jié)合自身的研究實(shí)踐與領(lǐng)域進(jìn)展，系統(tǒng)闡述腫瘤干細(xì)胞干性維持的信號通路交叉機(jī)制，以期為破解腫瘤治療困境提供新的思路。01腫瘤干細(xì)胞干性的核心概念與生物學(xué)意義1CSCs的定義與核心特征01020304腫瘤干細(xì)胞是指存在于腫瘤組織中，具有自我更新能力、多向分化潛能，并能驅(qū)動腫瘤發(fā)生、異質(zhì)性形成及轉(zhuǎn)移復(fù)性的少量細(xì)胞亞群。其核心特征可概括為：-多向分化潛能：分化產(chǎn)生具有不同表型的腫瘤細(xì)胞，構(gòu)成腫瘤的異質(zhì)性；05-治療抵抗性：通過增強(qiáng)DNA修復(fù)、藥物外排、處于靜息狀態(tài)等機(jī)制抵抗放化療，導(dǎo)致腫瘤復(fù)發(fā)。-自我更新能力：通過不對稱分裂或?qū)ΨQ分裂維持自身數(shù)量，確保CSCs庫的穩(wěn)定；-腫瘤起始能力：在移植實(shí)驗(yàn)中，僅需少量CSCs即可在免疫缺陷小鼠體內(nèi)重建與原發(fā)腫瘤相似的異質(zhì)性腫瘤；這些特征決定了CSCs在腫瘤惡性進(jìn)展中的“主導(dǎo)地位”，而干性正是這些特征的分子基礎(chǔ)。062干性維持的生物學(xué)意義干性維持是CSCs發(fā)揮“種子細(xì)胞”作用的前提，其生物學(xué)意義貫穿腫瘤發(fā)生、發(fā)展、轉(zhuǎn)移及復(fù)發(fā)的全過程：1-腫瘤發(fā)生：CSCs通過異常激活干性相關(guān)通路，逃逸正常細(xì)胞增殖調(diào)控，形成腫瘤；2-異質(zhì)性形成：CSCs分化產(chǎn)生不同表型的子代細(xì)胞，導(dǎo)致腫瘤內(nèi)部細(xì)胞在形態(tài)、功能、治療敏感性上的差異；3-轉(zhuǎn)移與定植：CSCs通過上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化（EMT）獲得遷移能力，并在遠(yuǎn)端器官通過干性維持適應(yīng)微環(huán)境，形成轉(zhuǎn)移灶；4-治療抵抗與復(fù)發(fā)：殘留的CSCs在治療后通過重激活干性通路修復(fù)損傷，最終導(dǎo)致腫瘤復(fù)發(fā)。5因此，深入解析干性維持的分子機(jī)制，尤其是信號通路的交叉調(diào)控，對靶向清除CSCs、改善腫瘤預(yù)后具有重要價(jià)值。602維持腫瘤干細(xì)胞干性的關(guān)鍵信號通路維持腫瘤干細(xì)胞干性的關(guān)鍵信號通路在長期進(jìn)化過程中，CSCs“劫持”了正常干細(xì)胞的經(jīng)典信號通路，通過異常激活這些通路維持干性。目前已明確的核心通路包括Wnt/β-catenin、Hedgehog（Hh）、Notch、STAT3、PI3K/Akt/mTOR及NF-κB等，這些通路在CSCs中既獨(dú)立發(fā)揮調(diào)控作用，又通過交叉網(wǎng)絡(luò)形成精密的調(diào)控體系。2.1Wnt/β-catenin信號通路：干性維持的“經(jīng)典引擎”1.1通路分子組成與激活機(jī)制Wnt通路是進(jìn)化上高度保守的信號通路，其核心調(diào)控分子包括Wnt配體、Frizzled受體、LRP5/6共受體、β-catenin、APC/Axin/GSK-3β降解復(fù)合物及TCF/LEF家族轉(zhuǎn)錄因子。在無Wnt信號時(shí)，β-catenin與Axin、APC、GSK-3β等形成降解復(fù)合物，被磷酸化后經(jīng)泛素-蛋白酶體途徑降解；當(dāng)Wnt配體與受體結(jié)合后，抑制GSK-3β活性，β-catenin得以積累并入核，與TCF/LEF結(jié)合激活下游靶基因（如c-Myc、CyclinD1、Nanog等），促進(jìn)細(xì)胞增殖與干性維持。1.2在CSCs中的功能與調(diào)控靶點(diǎn)在多種腫瘤（如結(jié)直腸癌、乳腺癌、膠質(zhì)瘤）中，Wnt通路呈異常激活狀態(tài)，直接調(diào)控CSCs的自我更新與腫瘤起始能力。例如：01-在結(jié)直腸癌中，APC基因突變導(dǎo)致β-catenin降解障礙，持續(xù)激活下游干性基因，驅(qū)動CSCs擴(kuò)增；02-在乳腺癌中，Wnt3a配體通過自分泌方式激活CSCs的Wnt通路，上調(diào)Oct4、Sox2等干細(xì)胞轉(zhuǎn)錄因子，增強(qiáng)腫瘤球形成能力。03此外，Wnt通路還可與其他通路（如Notch、Hh）交叉，形成正反饋環(huán)路，進(jìn)一步強(qiáng)化干性維持。042.2Hedgehog（Hh）信號通路：胚胎發(fā)育程序的“重啟者”052.1通路分子組成與激活機(jī)制Hh通路由配體（Shh、Ihh、Dhh）、受體（Patched,Ptch）、共受體（Smoothened,Smo）及下游轉(zhuǎn)錄因子（Gli1/2/3）組成。在無配體時(shí)，Ptch抑制Smo活性，Gli蛋白被蛋白酶體降解；當(dāng)Hh配體與Ptch結(jié)合后，解除對Smo的抑制，激活Gli蛋白，入核后靶基因（如Gli1、Ptch1、Nanog）的表達(dá)，促進(jìn)細(xì)胞增殖與分化調(diào)控。2.2在CSCs中的功能與調(diào)控靶點(diǎn)03-在胰腺癌中，腫瘤微環(huán)境中的間質(zhì)細(xì)胞分泌Shh配體，通過旁分泌方式激活CSCs的Hh通路，增強(qiáng)其化療抵抗能力。02-在基底細(xì)胞癌中，Ptch或Smo基因突變導(dǎo)致Hh通路constitutive激活，驅(qū)動CSCs自我更新；01Hh通路在胚胎發(fā)育中調(diào)控細(xì)胞命運(yùn)決定，而在腫瘤中，其異常激活導(dǎo)致“胚胎發(fā)育程序重啟”，維持CSCs干性。例如：04值得注意的是，Hh通路與Wnt、Notch通路存在顯著交叉，如Gli可直接激活Wnt通路下游基因β-catenin，形成協(xié)同調(diào)控。3.1通路分子組成與激活機(jī)制Notch通路由Notch受體（Notch1-4）、配體（Jagged1/2、Delta-like1/3/4）、γ-分泌酶及下游轉(zhuǎn)錄因子（Hes/Hey家族）組成。配體與受體結(jié)合后，經(jīng)ADAM蛋白酶和γ-分泌酶兩步酶切，釋放Notch胞內(nèi)結(jié)構(gòu)域（NICD），入核后結(jié)合CSL蛋白（RBP-Jκ），激活下游靶基因（如Hes1、Hey1），調(diào)控細(xì)胞分化、增殖與凋亡平衡。3.2在CSCs中的功能與調(diào)控靶點(diǎn)Notch通路在CSCs中主要通過調(diào)控“自我更新-分化”平衡維持干性。例如：-在乳腺癌中，Notch1激活上調(diào)CSCs表面標(biāo)志物CD44，增強(qiáng)腫瘤起始能力；抑制Notch1可誘導(dǎo)CSCs分化，降低化療耐藥性；-在腦膠質(zhì)瘤中，Notch3信號通過激活Hes5，維持CD133+CSCs的干性，促進(jìn)腫瘤復(fù)發(fā)。此外，Notch通路與Wnt通路的交叉尤為密切：NICD可直接上調(diào)β-catenin表達(dá)，而β-catenin又可增強(qiáng)Notch配體Delta-like1的轉(zhuǎn)錄，形成“正反饋循環(huán)”。4.1通路分子組成與激活機(jī)制STAT3（SignalTransducerandActivatorofTranscription3）是JAK-STAT通路的重要成員，其激活依賴于酪氨酸磷酸化。生長因子（如EGF、IL-6）或細(xì)胞因子與受體結(jié)合后，激活JAK激酶，磷酸化STAT3單體，形成二聚體入核，結(jié)合靶基因啟動子，調(diào)控細(xì)胞增殖、存活及炎癥反應(yīng)。4.2在CSCs中的功能與調(diào)控靶點(diǎn)STAT3是腫瘤微環(huán)境中炎癥信號的核心效應(yīng)器，在CSCs干性維持中發(fā)揮“樞紐”作用。例如：-在肝癌中，腫瘤相關(guān)巨噬細(xì)胞（TAMs）分泌的IL-6激活CSCs的STAT3通路，上調(diào)Nanog、Oct4表達(dá)，增強(qiáng)自我更新能力；-在胰腺癌中，STAT3通過誘導(dǎo)EMT轉(zhuǎn)錄因子Snail，促進(jìn)CSCs的侵襲轉(zhuǎn)移，同時(shí)上調(diào)ABCG2藥物外排泵，介導(dǎo)吉西他濱耐藥。STAT3與多條通路存在交叉：可通過激活PI3K/Akt通路增強(qiáng)Survivin表達(dá)，抑制CSCs凋亡；也可與NF-κB協(xié)同上調(diào)IL-6，形成“炎癥-干性”正反饋環(huán)路。2.5PI3K/Akt/mTOR信號通路：細(xì)胞代謝與存活的“能量調(diào)節(jié)器”5.1通路分子組成與激活機(jī)制PI3K/Akt/mTOR通路是細(xì)胞內(nèi)重要的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路，上游接受生長因子、胰島素等刺激，PI3K激活后產(chǎn)生PIP3，招募Akt至細(xì)胞膜并激活，Akt通過磷酸化抑制TSC1/2復(fù)合物，激活mTORC1，促進(jìn)蛋白合成、細(xì)胞增殖及代謝重編程（如糖酵解增強(qiáng)）。5.2在CSCs中的功能與調(diào)控靶點(diǎn)CSCs通過激活PI3K/Akt/mTOR通路滿足其高代謝需求，維持干性。例如：-在乳腺癌中，PI3KCA突變激活A(yù)kt，通過磷酸化FoxO轉(zhuǎn)錄因子，抑制其促分化作用，維持CD44+/CD24-CSCs亞群；-在白血病中，mTORC1通過調(diào)節(jié)線粒體生物合成，維持CSCs的氧化磷酸化能力，抵抗化療藥物誘導(dǎo)的氧化應(yīng)激。該通路與STAT3、Wnt通路交叉顯著：Akt可直接磷酸化β-catenin，增強(qiáng)其穩(wěn)定性；STAT3也可通過上調(diào)PI3K表達(dá)，形成“STAT3-PI3K-Akt”信號軸。6.1通路分子組成與激活機(jī)制NF-κB家族包括RelA（p65）、RelB、c-Rel、p50/p52等亞型，通常與IκB蛋白結(jié)合存在于胞質(zhì)中。在炎癥、應(yīng)激刺激下，IKK復(fù)合物磷酸化IκB，促其降解，NF-κB二聚體入核，激活靶基因（如IL-6、TNF-α、Bcl-2），調(diào)控炎癥反應(yīng)、細(xì)胞凋亡及增殖。6.2在CSCs中的功能與調(diào)控靶點(diǎn)NF-κB通過介導(dǎo)炎癥反應(yīng)與抗凋亡信號維持CSCs干性。例如：-在結(jié)直腸癌中，NF-κB激活上調(diào)COX-2，促進(jìn)PGE2分泌，激活Wnt/β-catenin通路，協(xié)同維持CSCs干性；-在膠質(zhì)瘤中，NF-κB通過誘導(dǎo)Survivin表達(dá)，抑制CSCs凋亡，同時(shí)上調(diào)CD133表達(dá)，增強(qiáng)腫瘤球形成能力。NF-κB與STAT3存在“雙向激活”關(guān)系：STAT3可促進(jìn)NF-κB核轉(zhuǎn)位，而NF-κB又可上調(diào)IL-6表達(dá)，激活STAT3，形成“炎癥放大環(huán)路”。03信號通路交叉網(wǎng)絡(luò)的構(gòu)建與調(diào)控機(jī)制信號通路交叉網(wǎng)絡(luò)的構(gòu)建與調(diào)控機(jī)制上述信號通路并非孤立存在，而是在CSCs中通過分子水平的相互作用，形成復(fù)雜的交叉網(wǎng)絡(luò)。這種交叉調(diào)控既增強(qiáng)了干性維持的穩(wěn)定性，又賦予了CSCs對外界環(huán)境的適應(yīng)性，是腫瘤“難治性”的重要分子基礎(chǔ)。3.1轉(zhuǎn)錄因子協(xié)同：多通路信號的“整合中心”轉(zhuǎn)錄因子是信號通路交叉的核心節(jié)點(diǎn)，它們通過結(jié)合相同或相鄰的DNA序列，協(xié)同調(diào)控下游靶基因表達(dá)。例如：-β-catenin與Gli的協(xié)同：在基底細(xì)胞癌中，β-catenin與Gli1可直接結(jié)合，共同激活干性基因（如Nanog、Oct4）的轉(zhuǎn)錄，這種協(xié)同作用強(qiáng)任一單獨(dú)因子，是CSCs自我更新的關(guān)鍵；信號通路交叉網(wǎng)絡(luò)的構(gòu)建與調(diào)控機(jī)制-STAT3與NF-κB的協(xié)同：在肝癌CSCs中，STAT3（p65亞基）與RelA形成二聚體，共同結(jié)合到IL-6基因啟動子的κB位點(diǎn)，增強(qiáng)IL-6分泌，通過自分泌方式進(jìn)一步激活STAT3和NF-κB，形成“正反饋閉環(huán)”；-Notch與Hh的協(xié)同：在神經(jīng)膠質(zhì)瘤中，Notch1激活后上調(diào)Gli2表達(dá)，而Gli2又可增強(qiáng)Notch配體Jagged1的轉(zhuǎn)錄，兩條通路相互激活，共同維持CD133+CSCs的干性。這種轉(zhuǎn)錄因子間的協(xié)同作用，實(shí)現(xiàn)了多通路信號的“級聯(lián)放大”，確保干性相關(guān)基因的持續(xù)高表達(dá)。信號通路交叉網(wǎng)絡(luò)的構(gòu)建與調(diào)控機(jī)制3.2共享上游信號：生長因子與細(xì)胞因子的“多通路激活”CSCs微環(huán)境中豐富的生長因子和細(xì)胞因子可作為“共享上游信號”，同時(shí)激活多條通路。例如：-EGF的雙重激活：表皮生長因子（EGF）通過結(jié)合EGFR，一方面激活Ras/MAPK通路促進(jìn)增殖，另一方面激活PI3K/Akt通路抑制凋亡，同時(shí)PI3K/Akt可間接激活Wnt/β-catenin通路（通過抑制GSK-3β），實(shí)現(xiàn)“一石三鳥”的調(diào)控效果；-IL-6的多通路調(diào)控：白細(xì)胞介素-6（IL-6）通過gp130/JAK2激活STAT3，同時(shí)激活PI3K/Akt通路，并誘導(dǎo)NF-κB入核，三條通路協(xié)同上調(diào)Bcl-2、Survivin等抗凋亡基因及Nanog、Oct4等干性基因，增強(qiáng)CSCs的生存與自我更新能力；信號通路交叉網(wǎng)絡(luò)的構(gòu)建與調(diào)控機(jī)制-TGF-β的雙重角色：在CSCs中，TGF-β一方面通過Smad通路誘導(dǎo)EMT，促進(jìn)轉(zhuǎn)移；另一方面通過激活PI3K/Akt/mTOR通路，維持干性，并與Wnt通路交叉上調(diào)Snail、ZEB1等EMT轉(zhuǎn)錄因子。共享上游信號的存在，使得CSCs能夠?qū)ξh(huán)境中的單一刺激產(chǎn)生“多維度響應(yīng)”，增強(qiáng)其適應(yīng)性。3表觀遺傳調(diào)控：交叉網(wǎng)絡(luò)的“表觀開關(guān)”表觀遺傳修飾通過調(diào)控染色質(zhì)狀態(tài)，影響信號通路相關(guān)基因的表達(dá)，是交叉網(wǎng)絡(luò)動態(tài)調(diào)控的“開關(guān)”。例如：-組蛋白修飾的調(diào)控：在乳腺癌CSCs中，組蛋白乙基轉(zhuǎn)移酶EZH2通過催化H3K27me3修飾，抑制抑癌基因p16的表達(dá)，同時(shí)激活Wnt/β-catenin通路，促進(jìn)干性維持；而組蛋白去乙酰化酶（HDAC）抑制劑可通過增加組蛋白乙?；抡{(diào)Notch通路下游基因Hes1的表達(dá)，誘導(dǎo)CSCs分化；-非編碼RNA的介導(dǎo)：miR-34a可直接靶向Notch1和Sirt1，抑制Notch通路活性并增強(qiáng)p53功能，從而抑制CSCs干性；而lncRNAHOTAIR通過結(jié)合PRC2復(fù)合物，沉默Wnt通路拮抗劑DKK1，激活β-catenin，促進(jìn)CSCs自我更新；3表觀遺傳調(diào)控：交叉網(wǎng)絡(luò)的“表觀開關(guān)”-DNA甲基化的調(diào)控：在膠質(zhì)瘤CSCs中，啟動子區(qū)超甲基化沉默Wnt通路拮抗劑SFRP1，導(dǎo)致β-catenin持續(xù)激活，而DNA甲基化抑制劑5-Aza可恢復(fù)SFRP1表達(dá)，抑制干性。表觀遺傳修飾通過“可逆性”改變基因表達(dá)，使CSCs能夠根據(jù)外界環(huán)境動態(tài)調(diào)整交叉網(wǎng)絡(luò)的活性，維持干性的“可塑性”。4腫瘤微環(huán)境：交叉網(wǎng)絡(luò)的“外部調(diào)節(jié)器”腫瘤微環(huán)境（TME）中的間質(zhì)細(xì)胞、細(xì)胞外基質(zhì)（ECM）、缺氧及酸性代謝產(chǎn)物等，可通過旁分泌或直接接觸方式，調(diào)控CSCs信號通路交叉網(wǎng)絡(luò)。例如：-癌相關(guān)成纖維細(xì)胞（CAFs）的旁分泌：CAFs分泌的HGF通過激活c-Met/PI3K/Akt通路，上調(diào)NF-κB表達(dá)，促進(jìn)CSCs分泌IL-6，激活STAT3，形成“CAF-CSCs”旁分泌環(huán)路；-缺氧的誘導(dǎo)：缺氧誘導(dǎo)因子-1α（HIF-1α）在缺氧條件下激活，上調(diào)Notch配體Delta-like1和Hh配體Shh的表達(dá)，同時(shí)增強(qiáng)Wnt/β-catenin通路活性，協(xié)同維持CSCs干性；-ECM的重塑：纖維連接蛋白（FN）通過整合素α5β1激活FAK/Src通路，增強(qiáng)PI3K/Akt和ERK信號，同時(shí)誘導(dǎo)EMT轉(zhuǎn)錄因子Twist1表達(dá)，與Wnt/β-catenin通路交叉促進(jìn)CSCs侵襲與干性維持。12344腫瘤微環(huán)境：交叉網(wǎng)絡(luò)的“外部調(diào)節(jié)器”微環(huán)境的“生態(tài)調(diào)控”使得CSCs信號通路交叉網(wǎng)絡(luò)能夠響應(yīng)局部微環(huán)境變化，實(shí)現(xiàn)“局部適應(yīng)”，這也是腫瘤異質(zhì)性的重要來源。04交叉網(wǎng)絡(luò)失調(diào)與腫瘤惡性表型的關(guān)聯(lián)交叉網(wǎng)絡(luò)失調(diào)與腫瘤惡性表型的關(guān)聯(lián)信號通路交叉網(wǎng)絡(luò)的異常激活是CSCs惡性表型的重要驅(qū)動因素，其失調(diào)與腫瘤進(jìn)展、轉(zhuǎn)移、耐藥及復(fù)發(fā)密切相關(guān)。1促進(jìn)腫瘤起始與異質(zhì)性形成交叉網(wǎng)絡(luò)通過協(xié)同激活干性相關(guān)基因，增強(qiáng)CSCs的自我更新與分化能力，驅(qū)動腫瘤起始與異質(zhì)性形成。例如，在結(jié)直腸癌中，Wnt/β-catenin與Hh通路交叉激活，共同上調(diào)c-Myc和Nanog，促進(jìn)CSCs增殖，同時(shí)通過不對稱分化產(chǎn)生具有不同突變負(fù)荷的子代細(xì)胞，形成腫瘤異質(zhì)性，這解釋了為何單一靶向某一通路的療效有限——?dú)埩舻腃SCs可通過其他通路代償維持干性。2增強(qiáng)侵襲轉(zhuǎn)移能力交叉網(wǎng)絡(luò)通過誘導(dǎo)EMT、上調(diào)基質(zhì)金屬蛋白酶（MMPs）及促進(jìn)血管生成，增強(qiáng)CSCs的侵襲轉(zhuǎn)移能力。例如，在胰腺癌中，TGF-β/Smad與Wnt/β-catenin通路交叉激活Snail和ZEB1，誘導(dǎo)EMT，同時(shí)上調(diào)MMP-9降解ECM，促進(jìn)CSCs侵襲；而在轉(zhuǎn)移灶中，HIF-1α與Notch通路交叉上調(diào)CXCR4，引導(dǎo)CSCs向轉(zhuǎn)移器官定植，形成“轉(zhuǎn)移前微環(huán)境”。3介導(dǎo)治療抵抗與復(fù)發(fā)交叉網(wǎng)絡(luò)是CSCs治療抵抗的核心機(jī)制，其通過多重途徑增強(qiáng)CSCs的存活與修復(fù)能力。例如，在乳腺癌中，PI3K/Akt與STAT3通路交叉上調(diào)Survivin和Bcl-2，抑制化療藥物誘導(dǎo)的凋亡；而在放療后，NF-κB與Wnt通路交叉激活DNA修復(fù)基因（如BRCA1），促進(jìn)CSCs損傷修復(fù)，最終導(dǎo)致腫瘤復(fù)發(fā)。臨床研究顯示，多種腫瘤組織中多條通路同時(shí)激活的患者，其復(fù)發(fā)風(fēng)險(xiǎn)顯著高于單一通路激活者，這直接證明了交叉網(wǎng)絡(luò)在預(yù)后中的重要性。05針對交叉通路的靶向治療策略與挑戰(zhàn)針對交叉通路的靶向治療策略與挑戰(zhàn)鑒于信號通路交叉網(wǎng)絡(luò)在CSCs干性維持中的核心作用，針對交叉節(jié)點(diǎn)的靶向治療成為克服腫瘤耐藥、清除CSCs的新策略。然而，該領(lǐng)域仍面臨諸多挑戰(zhàn)。1雙重或多重通路抑制劑針對兩條及以上關(guān)鍵通路開發(fā)雙重抑制劑，是阻斷交叉網(wǎng)絡(luò)最直接的策略。例如：-Wnt/Notch雙重抑制劑：PRI-724（β-catenin抑制劑）與RO4929097（γ-分泌酶抑制劑）聯(lián)用，在膠質(zhì)瘤模型中協(xié)同抑制CSCs干性，延長生存期；-PI3K/Akt/STAT3三重抑制劑：如LY3023414（mTOR抑制劑）與Stattic（STAT3抑制劑）聯(lián)用，在肝癌中通過阻斷能量代謝與炎癥信號，清除CSCs；-Hh/Notch雙重抑制劑：Vismodegib（Smo抑制劑）與DAPT（γ-分泌酶抑制劑）聯(lián)用，在胰腺癌中顯著降低CD133+CSCs比例，抑制腫瘤生長。1雙重或多重通路抑制劑然而，雙重抑制劑面臨選擇性低、毒副作用大的問題，需通過優(yōu)化藥物結(jié)構(gòu)（如開發(fā)PROTAC降解劑）提高靶向性。2靶向交叉節(jié)點(diǎn)分子識別并抑制通路交叉的關(guān)鍵節(jié)點(diǎn)分子，可實(shí)現(xiàn)“精準(zhǔn)打擊”。例如：-β-catenin/Gli復(fù)合物抑制劑：在基底細(xì)胞癌中，阻斷β-catenin與Gli1的相互作用，可協(xié)同抑制下游干性基因表達(dá)，療效優(yōu)于單一通路抑制；-STAT3/NF-κB共抑制劑如JAK/IKK抑制劑，可同時(shí)阻斷兩條通路的激活，在肝癌中顯著抑制CSCs的炎癥與存活信號；-轉(zhuǎn)錄因子共抑制如利用小分子干擾RNA（siRNA）或CRISPR-Cas9技術(shù)敲除c-Myc（Wnt與Hh通路的共同下游靶點(diǎn)），可顯著降低CSCs的自我更新能力。交叉節(jié)點(diǎn)分子的發(fā)現(xiàn)依賴于蛋白質(zhì)組學(xué)、相互作用組學(xué)等高通量技術(shù)，未來需進(jìn)一步加強(qiáng)“節(jié)點(diǎn)圖譜”的繪制。3聯(lián)合常規(guī)治療與免疫治療將交叉通路靶向治療與化療、放療或免疫治療聯(lián)合，可發(fā)揮協(xié)同作用。例如：-靶向治療+化療：Wnt抑制劑（LGK974）聯(lián)合吉西他濱，在胰腺癌中通過清除CSCs減少復(fù)發(fā)；-靶向治療+免疫治療：STAT3抑制劑（napabucasin）聯(lián)合PD-1抗體，在肺癌中通過逆轉(zhuǎn)CSCs的免疫抑制微環(huán)境（如上調(diào)PD-L1），增強(qiáng)T細(xì)胞殺傷作用；-靶向治療+放療：Notch抑制劑（RO4929097）聯(lián)合放療，在膠質(zhì)瘤中通過抑制DNA修復(fù)增強(qiáng)放療敏感性，同時(shí)清除放療后殘留的CSCs。聯(lián)合治療需關(guān)注