2025年園藝植物育種學(xué)試題庫(kù)參考答案一、名詞解釋1.遠(yuǎn)緣雜交：指不同種、屬或更高分類單位的植物之間的雜交，其后代稱為遠(yuǎn)緣雜種。與近緣雜交相比，遠(yuǎn)緣雜交可打破物種間基因交流障礙，引入異源優(yōu)良性狀（如抗病、抗逆基因），但常面臨雜交不親和、雜種不育或后代瘋狂分離等問題，需通過染色體加倍、胚胎拯救等技術(shù)克服。2.分子標(biāo)記輔助選擇（MAS）：利用與目標(biāo)性狀緊密連鎖的分子標(biāo)記（如SSR、SNP）對(duì)育種材料進(jìn)行間接選擇的技術(shù)。通過檢測(cè)標(biāo)記基因型，可在早期（如苗期）準(zhǔn)確篩選出攜帶目標(biāo)性狀的個(gè)體，顯著提高選擇效率，尤其適用于隱性性狀、多基因控制性狀及受環(huán)境影響大的性狀選擇。3.自交不親和性：指兩性花植物自花授粉或同株異花授粉后，雌蕊不能接受自花花粉而無(wú)法受精結(jié)實(shí)的現(xiàn)象。自交不親和性由S基因控制，可分為配子體型（如茄科、薔薇科）和孢子體型（如十字花科）兩類，是雜種優(yōu)勢(shì)利用中簡(jiǎn)化制種程序的重要性狀（如甘藍(lán)、白菜的自交不親和系制種）。4.多倍體育種：通過人工誘導(dǎo)或自然變異獲得多倍體植株（如三倍體、四倍體），并篩選優(yōu)良性狀的育種方法。常用秋水仙素處理分生組織（如莖尖、萌動(dòng)種子）誘導(dǎo)染色體加倍，多倍體常表現(xiàn)為器官增大（如果實(shí)、花朵）、抗逆性增強(qiáng)，但部分類型（如三倍體）因減數(shù)分裂異常表現(xiàn)為不育（如無(wú)籽西瓜）。5.輪回選擇：一種多世代、多群體的群體改良方法，通過選擇優(yōu)良個(gè)體雜交重組，形成新群體，重復(fù)“選擇-雜交-重組”過程，逐步提高群體中有利基因頻率。適用于異花授粉植物（如玉米、南瓜）或自花授粉植物的群體改良，可同時(shí)改良多個(gè)數(shù)量性狀（如產(chǎn)量、品質(zhì)）。6.雄性不育系：指雌蕊正常、雄蕊發(fā)育異常（無(wú)花粉或花粉敗育）的品系，簡(jiǎn)稱“不育系”。在雜種優(yōu)勢(shì)利用中，不育系需與保持系（能使不育系后代保持不育性）和恢復(fù)系（能使不育系后代恢復(fù)可育性）配套使用（即“三系法”），避免人工去雄，降低制種成本（如水稻、辣椒的雄性不育系應(yīng)用）。7.芽變選種：利用植物芽的分生組織細(xì)胞發(fā)生遺傳變異（芽變），通過篩選、鑒定獲得新品種的方法。芽變可能表現(xiàn)為果實(shí)顏色、風(fēng)味、成熟期或抗性的改變（如紅富士蘋果的著色芽變），具有變異頻率低（10??~10??）、嵌合體常見等特點(diǎn)，需通過分離、純化（如嫁接、扦插）獲得穩(wěn)定株系。8.配合力：指親本通過雜交產(chǎn)生優(yōu)良后代的能力，分為一般配合力（GCA）和特殊配合力（SCA）。一般配合力反映親本加性效應(yīng)的平均值（由基因累加作用決定），特殊配合力反映親本非加性效應(yīng)（顯性、上位性）的組合效應(yīng)。配合力測(cè)定是雜交育種中親本選擇的核心依據(jù)（如番茄雜交組合選配）。9.加性效應(yīng)：指多個(gè)等位基因或非等位基因的效應(yīng)累加，其遺傳符合數(shù)量遺傳學(xué)規(guī)律（如多基因控制的產(chǎn)量、株高）。加性效應(yīng)可穩(wěn)定遺傳給后代，是選擇育種（如系統(tǒng)選種）和輪回選擇的主要利用對(duì)象；而非加性效應(yīng)（顯性、上位性）因基因互作無(wú)法穩(wěn)定遺傳，主要在雜種一代（F?）中表現(xiàn)（如雜種優(yōu)勢(shì)）。10.基因編輯育種：利用CRISPR/Cas9、TALEN等技術(shù)對(duì)目標(biāo)基因進(jìn)行定點(diǎn)編輯（敲除、插入、替換），獲得性狀改良材料的育種方法。與轉(zhuǎn)基因技術(shù)不同，基因編輯可實(shí)現(xiàn)內(nèi)源基因的精準(zhǔn)修飾（如敲除感病基因PDS獲得抗白粉病番茄），且無(wú)外源基因插入，部分國(guó)家（如美國(guó)、日本）將其視為非轉(zhuǎn)基因作物，具有廣闊應(yīng)用前景。二、簡(jiǎn)答題1.簡(jiǎn)述園藝植物雜種優(yōu)勢(shì)利用的主要途徑及適用條件。雜種優(yōu)勢(shì)利用的核心是獲得高純度、強(qiáng)優(yōu)勢(shì)的F?代，主要途徑包括：（1）人工去雄制種：適用于花器大、去雄容易的植物（如西瓜、南瓜），需確保父本花粉充足，制種成本較高。（2）雄性不育系制種（三系法）：利用不育系（A）、保持系（B）、恢復(fù)系（R）配套，不育系與保持系雜交繁殖不育系，不育系與恢復(fù)系雜交生產(chǎn)F?。適用于花器小、人工去雄困難的作物（如水稻、辣椒），需篩選穩(wěn)定的不育系和恢復(fù)系。（3）自交不親和系制種（兩系法）：利用自交不親和系（S）作為母本，與父本雜交生產(chǎn)F?，同時(shí)通過蕾期授粉繁殖自交不親和系。適用于十字花科植物（如甘藍(lán)、白菜），需解決自交不親和性的穩(wěn)定性及繁殖效率問題。（4）化學(xué)殺雄制種：利用化學(xué)藥劑（如乙烯利、殺雄劑1號(hào)）抑制雄蕊發(fā)育，母本噴藥后與父本雜交生產(chǎn)F?。適用于缺乏雄性不育系或自交不親和系的作物（如小麥、番茄），但需嚴(yán)格掌握藥劑濃度和處理時(shí)期，避免藥害。（5）標(biāo)記性狀制種：利用顯性標(biāo)記性狀（如葉色、花色）區(qū)分真假雜種，母本選擇隱性性狀，父本選擇顯性性狀，F(xiàn)?表現(xiàn)顯性性狀即可淘汰假雜種。適用于標(biāo)記性狀明顯、遺傳穩(wěn)定的作物（如黃瓜的黃綠葉標(biāo)記）。2.比較常規(guī)雜交育種與分子標(biāo)記輔助育種的異同點(diǎn)。相同點(diǎn)：均以基因重組為基礎(chǔ)，目標(biāo)是將優(yōu)良性狀整合到同一品種中；需經(jīng)過雜交、選擇、鑒定等環(huán)節(jié)；最終通過表型驗(yàn)證確定新品種。不同點(diǎn)：（1）理論基礎(chǔ)：常規(guī)雜交育種依賴表型選擇，基于孟德爾遺傳規(guī)律和數(shù)量遺傳學(xué)；分子標(biāo)記輔助育種（MAS）結(jié)合分子生物學(xué)，利用標(biāo)記與目標(biāo)基因的連鎖關(guān)系進(jìn)行選擇。（2）選擇效率：常規(guī)育種需等待性狀表達(dá)（如果實(shí)成熟）才能選擇，周期長(zhǎng)（5~8年）；MAS可在苗期（甚至種子階段）通過DNA檢測(cè)選擇，縮短育種周期（3~5年）。（3）準(zhǔn)確性：常規(guī)育種受環(huán)境影響大（如產(chǎn)量、品質(zhì)易受氣候干擾），選擇準(zhǔn)確性低；MAS直接檢測(cè)基因型，避免環(huán)境誤差，尤其適用于隱性性狀（如抗病基因）和多基因性狀（如抗逆性）的選擇。（4）技術(shù)要求：常規(guī)育種依賴育種家經(jīng)驗(yàn)；MAS需掌握分子標(biāo)記開發(fā)（如SSR、SNP）、PCR檢測(cè)等技術(shù)，需實(shí)驗(yàn)室支持。（5）應(yīng)用范圍：常規(guī)育種適用于所有園藝植物；MAS更適合目標(biāo)基因明確、標(biāo)記與性狀緊密連鎖（遺傳距離＜5cM）的性狀改良（如抗蟲、抗除草劑基因）。3.簡(jiǎn)述芽變選種的關(guān)鍵步驟及注意事項(xiàng)。關(guān)鍵步驟：（1）變異發(fā)現(xiàn)：在園藝植物生長(zhǎng)周期中（如果實(shí)成熟期、花期）觀察異常表現(xiàn)（如果色、果形、抗性改變），記錄變異部位（如某一枝條、花序）。（2）變異鑒定：①遺傳型變異與飾變區(qū)分：通過無(wú)性繁殖（嫁接、扦插）觀察變異是否穩(wěn)定遺傳（飾變不能遺傳）；②嵌合體分離：若為周緣嵌合體（如LⅠ、LⅡ?qū)蛹?xì)胞基因型不同），需通過多次無(wú)性繁殖或組織培養(yǎng)獲得純合體；③性狀對(duì)比：與原品種進(jìn)行多地點(diǎn)、多世代田間試驗(yàn)，比較目標(biāo)性狀（如果實(shí)品質(zhì)、產(chǎn)量）及非目標(biāo)性狀（如抗性、生育期）的差異顯著性。（3）繁殖與推廣：變異穩(wěn)定后，通過無(wú)性繁殖擴(kuò)大繁殖，進(jìn)行區(qū)域試驗(yàn)和生產(chǎn)試驗(yàn)，符合品種審定標(biāo)準(zhǔn)后推廣。注意事項(xiàng)：①重點(diǎn)關(guān)注經(jīng)濟(jì)性狀（如果實(shí)大小、風(fēng)味）和抗性（如抗病、抗寒）的正向變異；②注意芽變的多效性（如早熟芽變可能伴隨果個(gè)變?。?，需綜合評(píng)估；③嵌合體需及時(shí)分離，避免因細(xì)胞層競(jìng)爭(zhēng)導(dǎo)致變異丟失；④變異鑒定需排除病毒感染、栽培措施（如施肥、修剪）等環(huán)境因素的干擾。4.論述多倍體育種中染色體加倍的常用方法及鑒定技術(shù)。常用加倍方法：（1）化學(xué)誘導(dǎo)法：最常用秋水仙素處理分生組織（如莖尖、萌動(dòng)種子、側(cè)芽），濃度0.01%~0.4%，處理時(shí)間6~72小時(shí)（草本植物時(shí)間短，木本植物時(shí)間長(zhǎng)）。秋水仙素通過抑制紡錘體形成，使染色體復(fù)制后無(wú)法分離，導(dǎo)致細(xì)胞染色體加倍。（2）物理誘導(dǎo)法：包括高溫（35~40℃）、低溫（0~4℃）、射線（X射線、γ射線）處理，通過干擾細(xì)胞分裂誘導(dǎo)染色體加倍，但效率低于化學(xué)法，且易引發(fā)染色體斷裂等損傷。（3）生物誘導(dǎo)法：利用體細(xì)胞雜交（如原生質(zhì)體融合）獲得異源多倍體（如番茄+馬鈴薯的體細(xì)胞雜種），或通過未減數(shù)配子雜交（如二倍體×四倍體獲得三倍體）。鑒定技術(shù)：（1）形態(tài)學(xué)鑒定：多倍體常表現(xiàn)為葉片變厚、葉色加深、氣孔增大、花粉粒增大（可通過顯微鏡觀察），但需與環(huán)境飾變區(qū)分。（2）細(xì)胞學(xué)鑒定：①染色體計(jì)數(shù)法：取根尖、莖尖或幼葉，經(jīng)卡諾氏固定液固定、解離、染色（如醋酸洋紅）后壓片，在顯微鏡下統(tǒng)計(jì)染色體數(shù)目（如二倍體番茄2n=24，四倍體為2n=48）；②流式細(xì)胞術(shù)：提取細(xì)胞核DNA，用熒光染料（如PI）染色后通過流式細(xì)胞儀檢測(cè)DNA含量，快速判斷倍性（如四倍體細(xì)胞DNA含量是二倍體的2倍）。（3）分子標(biāo)記鑒定：利用SSR、AFLP等標(biāo)記檢測(cè)基因組大小變化，或通過定量PCR（qPCR）比較特定基因的拷貝數(shù)（如多倍體中基因拷貝數(shù)為二倍體的2倍）。5.簡(jiǎn)述基因編輯技術(shù)（CRISPR/Cas9）在園藝植物育種中的應(yīng)用策略。（1）目標(biāo)基因敲除：針對(duì)負(fù)向調(diào)控性狀的基因（如感病基因、抑制果實(shí)成熟的基因），設(shè)計(jì)sgRNA引導(dǎo)Cas9蛋白切割靶位點(diǎn)，通過非同源末端連接（NHEJ）修復(fù)引入移碼突變，使基因失活。例如，敲除番茄感病基因SlDMR6-1可顯著提高對(duì)葉霉病的抗性；敲除蘋果多酚氧化酶基因MdPPO可獲得抗褐變果實(shí)。（2）基因定點(diǎn)插入/替換：利用同源重組（HDR）修復(fù)機(jī)制，在靶位點(diǎn)插入目的基因或替換原有基因（如抗病基因、品質(zhì)相關(guān)基因）。例如，將番茄抗根結(jié)線蟲基因Mi-1插入感病品種基因組，獲得抗病新材料；替換草莓果實(shí)著色基因FaMYB1的啟動(dòng)子，增強(qiáng)花色苷合成，提高果實(shí)色澤。（3）基因表達(dá)調(diào)控：利用無(wú)核酸酶活性的dCas9（deadCas9）與轉(zhuǎn)錄激活/抑制結(jié)構(gòu)域融合（如dCas9-VP64、dCas9-Repressor），靶向調(diào)控目標(biāo)基因的表達(dá)水平（如激活番茄果實(shí)糖轉(zhuǎn)運(yùn)基因SlSWEET15，提高果實(shí)含糖量；抑制草莓乙烯合成基因FaACO，延長(zhǎng)果實(shí)保鮮期）。（4）多基因編輯：通過設(shè)計(jì)多個(gè)sgRNA，同時(shí)編輯多個(gè)基因（如多基因控制的抗逆通路）。例如，同時(shí)編輯番茄干旱響應(yīng)基因SlAREB1、SlDREB2和SlERF5，協(xié)同提高植株抗旱性；編輯菊花花型相關(guān)基因CmCYC2、CmTCP1和CmTCP3，培育重瓣新品種。三、論述題1.結(jié)合實(shí)例論述雜種優(yōu)勢(shì)的遺傳機(jī)制及在園藝植物育種中的應(yīng)用。雜種優(yōu)勢(shì)是指兩個(gè)遺傳背景不同的親本雜交產(chǎn)生的F?代在生長(zhǎng)勢(shì)、抗逆性、產(chǎn)量、品質(zhì)等方面優(yōu)于雙親的現(xiàn)象。其遺傳機(jī)制主要有以下假說：（1）顯性假說：認(rèn)為雜種優(yōu)勢(shì)是顯性有利基因互補(bǔ)的結(jié)果。例如，親本P?（AAbb）和P?（aaBB）雜交，F(xiàn)?（AaBb）同時(shí)攜帶顯性基因A和B，掩蓋了隱性不利基因（a、b）的效應(yīng)，表現(xiàn)出優(yōu)勢(shì)。番茄抗葉霉?。–f-9基因顯性）與高糖（Sucr基因顯性）親本雜交，F(xiàn)?同時(shí)表現(xiàn)抗病和高糖，驗(yàn)證了顯性互補(bǔ)的作用。（2）超顯性假說：認(rèn)為等位基因雜合（Aa）時(shí)的效應(yīng)超過純合（AA或aa），可能因基因互作產(chǎn)生新功能。例如，玉米的乙醇脫氫酶（Adh）基因雜合體（Adh1/Adh2）比純合體具有更高的酶活性，促進(jìn)代謝效率，提高產(chǎn)量；草莓的果實(shí)大小相關(guān)基因FaSIZ1雜合體（SIZ1/siz1）比純合體（SIZ1/SIZ1或siz1/siz1）表現(xiàn)出更大的果個(gè)，支持超顯性假說。（3）上位性假說：認(rèn)為非等位基因間的互作（上位效應(yīng)）是雜種優(yōu)勢(shì)的重要來(lái)源。例如，番茄的產(chǎn)量由多個(gè)數(shù)量性狀位點(diǎn)（QTL）控制，QTL1（AABB）和QTL2（CCDD）的互作效應(yīng)（AABBCCDD）大于各QTL單獨(dú)效應(yīng)之和，F(xiàn)?代因整合雙親QTL而表現(xiàn)高產(chǎn)。在園藝植物育種中的應(yīng)用：（1）蔬菜作物：十字花科（如結(jié)球甘藍(lán)）利用自交不親和系制種，F(xiàn)?代整齊度高、產(chǎn)量比常規(guī)品種提高30%~50%；葫蘆科（如西瓜）通過人工去雄或雄性不育系制種，三倍體無(wú)籽西瓜（二倍體×四倍體）因雜種優(yōu)勢(shì)表現(xiàn)出果大、抗枯萎病等特性。（2）果樹作物：柑橘通過“枳橙×甜橙”雜交獲得抗寒、抗裂皮病的砧木，F(xiàn)?代根系發(fā)達(dá)，適應(yīng)性強(qiáng)；蘋果的“嘎拉×富士”雜交后代（如“蜜脆”蘋果）果實(shí)風(fēng)味濃郁、耐貯運(yùn)，綜合雙親優(yōu)點(diǎn)。（3）花卉作物：矮牽牛利用雜種優(yōu)勢(shì)培育多倍體品種，F(xiàn)?代花徑增大、花色豐富（如“波浪”系列矮牽牛）；菊花通過“夏菊×秋菊”雜交，F(xiàn)?代花期延長(zhǎng)，適應(yīng)周年生產(chǎn)。需注意，雜種優(yōu)勢(shì)的表現(xiàn)受親本遺傳差異（一般差異越大，優(yōu)勢(shì)越強(qiáng)）、環(huán)境（如溫度、光照影響基因表達(dá)）及性狀類型（數(shù)量性狀優(yōu)勢(shì)顯著，質(zhì)量性狀優(yōu)勢(shì)有限）的影響。實(shí)際育種中需通過配合力測(cè)定（如頂交法、雙列雜交法）篩選強(qiáng)優(yōu)勢(shì)組合，并優(yōu)化制種技術(shù)（如不育系繁殖、自交不親和系蕾期授粉），確保F?代的純度和一致性。2.論述分子標(biāo)記輔助選擇（MAS）在園藝植物抗病育種中的應(yīng)用進(jìn)展及局限性。應(yīng)用進(jìn)展：（1）抗病基因的標(biāo)記開發(fā)與定位：通過圖位克隆、關(guān)聯(lián)分析等方法，已開發(fā)出多種園藝植物抗病基因的緊密連鎖標(biāo)記。例如，番茄抗根結(jié)線蟲基因Mi-1與SSR標(biāo)記CT220緊密連鎖（遺傳距離1.2cM），辣椒抗黃瓜花葉病毒（CMV）基因Cmr與SNP標(biāo)記CAPS101連鎖（距離0.8cM），可用于苗期抗病材料篩選。（2）回交育種中的MAS：利用MAS加速抗病基因的導(dǎo)入。例如，將野生番茄（Lycopersiconperuvianum）的抗葉霉病基因Cf-9導(dǎo)入栽培番茄品種“Moneymaker”，通過標(biāo)記篩選（如SCAR標(biāo)記SCAR10）在BC?代即可獲得背景回復(fù)率＞95%的抗病株系，比常規(guī)回交縮短2~3個(gè)世代。（3）多抗病基因聚合：通過MAS同時(shí)導(dǎo)入多個(gè)抗病基因（基因累加），培育廣譜抗病品種。例如，番茄育種中同時(shí)聚合抗葉霉?。–f-9）、抗枯萎?。↖-2）和抗根結(jié)線蟲（Mi-1）的標(biāo)記，篩選出多抗材料，田間表現(xiàn)對(duì)多種病害的抗性顯著高于單基因材料。（4）隱性抗病基因選擇：常規(guī)表型選擇難以區(qū)分顯性純合（RR）和雜合（Rr）個(gè)體，而MAS可通過標(biāo)記直接鑒定基因型。例如，黃瓜抗白粉病隱性基因pm-1的SSR標(biāo)記SSR123，可在苗期區(qū)分rr（感病）、Rr（雜合）和RR（抗?。苊庹`選雜合體。局限性：（1）標(biāo)記與目標(biāo)基因的連鎖不緊密：部分抗病基因（尤其是數(shù)量抗性基因QTL）的標(biāo)記與目標(biāo)基因遺傳距離較大（＞5cM），可能因重組導(dǎo)致標(biāo)記與性狀分離，降低選擇準(zhǔn)確性。（2）基因背景效應(yīng)：標(biāo)記在不同遺傳背景中可能出現(xiàn)多態(tài)性差異（如某些標(biāo)記僅在特定親本組合中適用），需進(jìn)行標(biāo)記驗(yàn)證和多群體測(cè)試。（3）技術(shù)成本與操作難度：MAS需實(shí)驗(yàn)室設(shè)備（PCR儀、電泳儀）和技術(shù)人員，中小型育種單位難以普及；大規(guī)模群體檢測(cè)（如萬(wàn)份材料）的成本較高（約0.5~2元/樣本）。（4）抗病基因的時(shí)效性：病原菌小種變異可能導(dǎo)致已聚合的抗病基因失效（如番茄葉霉病菌新小種克服Cf-9基因），需持續(xù)開發(fā)新抗病基因的標(biāo)記。未來(lái)發(fā)展方向：結(jié)合全基因組關(guān)聯(lián)分析（GWAS）和重測(cè)序技術(shù)開發(fā)高密度SNP標(biāo)記，提高標(biāo)記與目標(biāo)基因的連鎖強(qiáng)度；利用液相芯片（如KASP技術(shù)）實(shí)現(xiàn)高通量、低成本檢測(cè)；整合MAS與表型選擇（如高光譜成像），構(gòu)建“基因型+表型”的精準(zhǔn)育種體系。3.結(jié)合實(shí)例說明現(xiàn)代生物技術(shù)（如基因編輯、體細(xì)胞雜交）與傳統(tǒng)育種技術(shù)的協(xié)同應(yīng)用?，F(xiàn)代生物技術(shù)與傳統(tǒng)育種的協(xié)同應(yīng)用可突破傳統(tǒng)方法的瓶頸，加速育種進(jìn)程，以下為典型案例：（1）基因編輯+雜交育種：目標(biāo)：培育抗晚疫病、高維生素C的番茄新品種。傳統(tǒng)方法：需通過雜交將野生番茄（抗晚疫?。┑腞pi-vnt1.1基因與栽培番茄（高維生素C）的GGP基因整合，周期長(zhǎng)（8~10年），且可能引入野生種的不良性狀（如果小、風(fēng)味差）。協(xié)同應(yīng)用：①利用CRISPR/Cas9編輯栽培番茄的感病基因SlDMR6-1（負(fù)調(diào)控抗病性），獲得抗晚疫病材料（編輯株系）；②同時(shí)通過雜交將高維生素C基因GGP（來(lái)自櫻桃番茄）導(dǎo)入栽培番茄，利用SSR標(biāo)記（如SSR-GGP）輔助選擇；③將編輯株系與高維生素C株系雜交，獲得同時(shí)抗晚疫病、高維生素C的F?代；④通過自交和分子標(biāo)記篩選（檢測(cè)SlDMR6-1編輯位點(diǎn)和GGP基因），獲得穩(wěn)定株系；⑤田間試驗(yàn)驗(yàn)證性狀穩(wěn)定性，最終育成新品種。優(yōu)勢(shì)：基因編輯直接改良栽培種的抗病性，避免野生種不良性狀的連鎖累贅；雜交與MAS加速優(yōu)良性狀整合，周期縮短至4~5年。（2）體細(xì)胞雜交+多倍體育種：目標(biāo)：培育抗鹽堿、優(yōu)質(zhì)的柑橘砧木。傳統(tǒng)方法：柑橘屬間雜交（如枳×甜橙）存在雜交不親和性，胚敗育率高，難以獲得雜種植株。協(xié)同應(yīng)用：①分離枳（抗鹽堿，2n=18）的葉肉原生質(zhì)體和甜橙（優(yōu)質(zhì)，2n=18）的懸浮細(xì)胞原生質(zhì)體；②通過PEG誘導(dǎo)融合，獲得異源四倍體（2n=36）體細(xì)胞雜種；③利用流式細(xì)胞術(shù)鑒定倍性，染色體計(jì)數(shù)確認(rèn)雜種（含枳和甜橙的染色體）；④將雜種與二倍體甜橙回交，獲得三倍體（2n=27）砧木；⑤田間試驗(yàn)評(píng)估抗鹽堿能力（如NaCl脅迫下的存活率、離子吸收）和嫁接親和性（如接穗的生長(zhǎng)量、果實(shí)品質(zhì)）；⑥篩選出抗鹽堿（枳的耐鹽基因SOS1、NHX1）、嫁接后果實(shí)品質(zhì)優(yōu)良（甜橙的糖轉(zhuǎn)運(yùn)基因SWEET）的砧木品種。優(yōu)勢(shì)：體細(xì)胞雜交克服屬間雜交不親和，直接獲得異源多倍體，保留雙親優(yōu)良性狀；多倍體育種結(jié)合回交，降低雜種的遺傳復(fù)雜度，提高選擇效率。（3）分子標(biāo)記輔助選擇+輪回選擇：目標(biāo)：改良西瓜的抗枯萎病性和果實(shí)含糖量（多基因控制性狀）。傳統(tǒng)方法：輪回選擇需多代表型選擇，抗枯萎病性（受Foc1、Foc2等基因控制）和含糖量（受多個(gè)QTL控制）的選擇效率低。協(xié)同應(yīng)用：①構(gòu)建基礎(chǔ)群體（包含高抗枯萎病、低糖；低抗、高糖；中抗、中糖等類型）；②利用SSR標(biāo)記（如與Foc1連鎖的SSR-Foc1）和SNP標(biāo)記（如與含糖量QTL連鎖的SNP-SWC）進(jìn)行MAS，篩選同時(shí)攜帶抗病基因和高糖QTL的個(gè)體；③將篩選個(gè)體雜交重組，形成新群體；④重復(fù)“MAS選擇-雜交-重組”過程3~4輪，提高群體中抗病基因和高糖QTL的頻率；⑤從最終群體中選擇優(yōu)良單株，自交純化，獲得穩(wěn)定品系。優(yōu)勢(shì)：MAS解決多基因性狀選擇準(zhǔn)確性低的問題，輪回選擇擴(kuò)大基因重組范圍，協(xié)同提高群體改良效率，含糖量比原始群體提高20%~30%，枯萎病發(fā)病率降低50%以上。四、案例分析題案例：某公司擬培育抗根結(jié)線蟲的番茄新品種，現(xiàn)有資源包括高抗線蟲的野生番茄（P1，學(xué)名Solanumpennellii，2n=24，果小、味酸）和綜合性狀優(yōu)良但感病的栽培番茄（P2，學(xué)名Solanumlycopersicum，2n=24，果大、味甜、早熟）。請(qǐng)?jiān)O(shè)計(jì)育種方案并說明關(guān)鍵步驟。育種方案設(shè)計(jì)：采用“雜交育種+分子標(biāo)記輔助選擇（MAS）+回交轉(zhuǎn)育”技術(shù)路線，目標(biāo)是將P1的抗根結(jié)線蟲基因（假設(shè)為Mi-3，顯性）導(dǎo)入P2遺傳背景，同時(shí)保留P2的優(yōu)良性狀（果大、味甜、早熟）。關(guān)鍵步驟：1.親本鑒定與雜交組合配制（第1年）：（1）確認(rèn)P1的抗性：通過人工接種根結(jié)線蟲（Meloidogyneincognita）鑒定，P1發(fā)病率＜5%（高抗），P2發(fā)病率＞90%（高感）；（2）開發(fā)Mi-3基因的緊密連鎖標(biāo)記：查閱文獻(xiàn)或通過QTL定位，確定與Mi-3連鎖的SSR標(biāo)記（如SSR-Mi3，遺傳距離2cM）；（3）配制雜交組合：以P2為母本，P1為父本，雜交獲得F?代（P2×P1），F(xiàn)?理論基因型為Mi-3/mi-3（雜合，表現(xiàn)抗性）。2.回交轉(zhuǎn)育與MAS篩選（第2~4年）：（1）BC?代（第2年）：①F?（Mi-3/mi-3）與P2回交，獲得BC?群體；②利用SSR-Mi3標(biāo)記篩選攜帶Mi-3的單株（標(biāo)記陽(yáng)性），同時(shí)表型篩選接近P2的個(gè)體（如果形、果色、熟期）；③保留約20株標(biāo)記陽(yáng)性、表型優(yōu)良的BC?單株。（2）BC?代（第3年）：①選擇BC?中最優(yōu)單株（Mi-3/mi-3）與P2回交，獲得BC?群體；②再次用