1、自身抗體檢測的臨床應用,自身免疫病的“病譜”,器官特異性 非器官特異性 橋本甲狀腺炎 類天皰瘡 自身免疫性腎小球腎炎 系統(tǒng)性紅斑狼瘡 原發(fā)性粘液水腫 惡性貧血 肺腎出血綜合征 干燥綜合征 甲狀腺機能亢進 自身免疫性萎縮性胃炎 絕經(jīng)過早（少數(shù)病例） 類風濕關節(jié)炎 Addisino病 自身免疫性肝炎 男性不育（少數(shù)病例） 硬皮病 1型糖尿病 原發(fā)性膽汁性肝硬化 潰瘍性結腸炎 多發(fā)性肌炎/皮肌炎 重癥肌無力 原發(fā)性硬化性膽管炎 克隆氏病 混合性結締組織病 多發(fā)性硬化癥 自身免疫性溶血性貧血 交感性眼炎 系統(tǒng)性血管炎 脫髓鞘疾病 特發(fā)性血小板減少性紫癜 晶狀體源性葡萄膜炎 抗磷脂綜合征 尋常天皰瘡 特

2、發(fā)性粒細胞減少癥 藥物性狼瘡,自身抗體,是指抗自身細胞內、細胞表面和細 胞外抗原的免疫球蛋白 是自身免疫和自身免疫病重要特征之一 某些自身免疫病伴有特征性的自身抗體(譜) 判斷疾病的活動性 預測疾病的預后 研究發(fā)病機制,自身抗體的分類,抗核抗體 抗胞漿成分抗體：如抗中性粒細胞抗體，抗線粒體抗體等 抗胞膜成分抗體：如抗心磷脂抗體 抗細胞外抗原的抗體：如類風濕因子,抗核抗體,指抗細胞核成分（DNA，RNA，蛋白質和酶）的抗體。ANA存在一個譜。 ANA新概念：抗核酸（Nucleic acid）和核蛋白（Nucleoprotein）抗體的總稱,ANA的粗篩,人類喉癌上皮細胞 (HEp-2 cells

3、)和靈長類肝臟的 聯(lián)合生物薄片 ：檢測抗核抗體的標準基質。 間接免疫熒光法（IFT）:HEp-2細胞/靈長類肝臟冰凍組織切片：完整的抗原譜 (細胞核、細胞漿) ；ANA檢測的金標準，具有最高的敏感性和特異性；質量控制容易；除ANA外，還可獲得一些對臨床醫(yī)生有用的其他信息 (如ANCA)。 ELISA:用高度純化的抗原來篩查ANAs：抗原譜比IIF窄；對所用的靶抗原具有很高的敏感性和特異性；操作簡便、快速,ANA分類,抗DNA（dsDNA,ssDNA) 抗組蛋白（Histone) 抗非組蛋白（Non-histone,Extractable Nuclear Antigen,ENA） 抗核仁（Nuc

4、leolus）,抗dsDNA：綠蠅短膜蟲,EUROIMMUN,抗雙鏈DNA抗體 （短膜蟲免疫熒光法 1:5）,HEp-2細胞/靈長類肝臟：抗組蛋白抗體,EUROIMMUN,抗組蛋白抗體 （酶聯(lián)免疫吸附法X2SD),系統(tǒng)性紅斑狼瘡 50% 其他結締組織病 23-30% 服異煙肼12月以上 53% 服苯妥因鈉6月以上 18% 服他巴唑6個月 0 活動期SLE 90.2%陽性,抗H1 H2A H2B H2A-H2B H3 H4 系統(tǒng)性紅斑狼瘡 + + + + + + 長期服異煙肼 + + + + + + 類風濕關節(jié)炎 + + + + + + SLE以IgG型抗組蛋白抗體為主，而長期服煙肼及RA病人以

5、IgM型為主,抗組蛋白抗體 （免疫印跡法）,抗ENA抗體譜,Sm：Smith， SLE標記性抗體（20%-30%） RNP: u1 RNP或nRNP Nuclear ，Ribonucleoprotein， MCTD 95 -100%（高滴度） SSA: RO Sjogrens syndrome A， PSS 60 -75%，其它CTD SSB: La, Ha, Sjogrens syndrome B， PSS 10 -40%，其它CTD Jo-1: John， PM/DM 25%，標記性抗體 ScL-70: Scleroderma， SSc 25 -75%, 標記性抗體 抗rRNP抗體： SL

6、E特異性抗體（10%-30%）,抗nRNP在多種結締組織病中存在，高滴度有利于MCTD的診斷。nRNP抗原與rRNP不同，前者是含尿嘧啶的核糖核蛋白，主要在核內，而rRNP是主要在胞漿內的磷酸蛋白，抗rRNP抗體與SLE 有關，尤其有精神神經(jīng)癥狀的SLE陽性率較高,抗核仁抗體 （底物HEP-2細胞，免疫光法）,病例數(shù) 陽性率 正常人 100 0 系統(tǒng)性紅斑狼瘡 90 6 類風濕關節(jié)炎 25 15 硬皮病 75 39 多發(fā)性肌炎 50 10 干燥綜合癥 60 9 非結締組織病 100 0,常見結締組織病的抗核抗體的陽性率,ANA dsDNA Histone Sm n RNP SSA SSB Sc

7、L-70 Jo-1 著絲點 核仁 SLE 90 （62） 50 （25）40 39 10 0 0 0 6 SS 50 15 30 0 14 （75）（59） 0 0 0 9 SD 75 5 27 0 12 19 5 ( 30) 0 （20）（39） PM/DM 50 13 0 5 0 0 0 (20) 0 10 RA 23 10 23 0 0 20 5 0 0 0 15+,+有指端硬化 ANA 1:40（+），抗dsDNA30%(或1：5）（+）,抗中性粒細胞胞漿抗體,ANCA是一組針對中性粒細胞許多胞漿抗原 所產(chǎn)生的自身抗體，其靶抗原實際為中性粒細胞胞漿中的顆粒蛋白酶。 1982年 Davi

8、es等首先報告節(jié)段性壞死性腎小球腎炎存在ANCA。 1985年 Van der Wonder等發(fā)現(xiàn)C-ANCA是Wegner 肉芽腫 （WG)）特異性抗體。 ANCA熒光染色模型：固定劑作用人為形成 胞漿型: C-ANCA (cytoplasmic pattern) 核周型: P-ANCA (perinuclear pattern) 非典型型: X-ANCA (atypical pattern),ANCA兩種熒光染色型,核周型ANCA（pANCA） 胞漿型ANCA（cANCA）,已知的抗中性粒細胞胞漿抗體靶抗原譜 蛋白酶 3（proteinase 3, PR3） 溶酶體（lysozyme, L

9、YS） 髓過氧化物酶 （myeloperoxidase, MPO） 天青殺素（azurocidin） 人白細胞彈性蛋白酶（human leukocyte elastase, HLE）防御素（defensin） 乳鐵蛋白（lacloferrin, LF） 烯醇化酶（-enolase） 組織蛋白酶G（cathepsin G, Cath G） -葡萄糖醛酸酶（-glucuronidase） 殺菌/通透性增高蛋白（bactericidal/permeability increasing protein, BPI） 人溶酶體相關膜蛋白2 （human lysosomal-associated membr

10、ane protein 2, H-LAMP 2）,PR3-ANCA /cANCA臨床意義 PR3-ANCA在臨床上與WG密切相關。cANCA診斷WG的特異性大于90%，外加PR3-ANCA可超過95% 敏感性取決于疾病活動性和病期階段，在初發(fā)不活動的WG中，陽性率只有50%，而活動性典型的WG，幾乎100%陽性。 雖然PR3-ANCA /cANCA陽性在WG活動期有很高的價值，但在其它原發(fā)性血管炎中也可被檢測到，仍然存在25%的陽性機會，如MPA、RPGN、PAN等 PR3-ANCA在臨床上另一重要應用價值在于該抗體滴度與病情活動一致，在WG等原發(fā)性血管炎患者，常被作為判斷療效、估計復發(fā)的指標

11、，從而指導臨床治療,MPO -ANCA臨床意義 主要與MPA、RPGN、CSS相關，其他疾病:PAN、抗GBM病、WG、SLE、RA、 DIL、Felty綜合征等 MPO-ANCA與疾病相關性不及PR3-ANCA與WG相關性緊密。MPO-ANCA陽性強烈提示原發(fā)性血管炎 MPO-ANCA偶見于 SLE，可能與慢性炎癥反應有關，如動脈炎，漿膜炎和C反應蛋白增高等 MPO-ANCA與RA的關節(jié)外損害及血管損害有相關性 MPO-ANCA與病情活動相關，也可用于判斷療效、估計復發(fā)和指導療效,與ANCA自身抗體譜相關的疾病 相關疾病 IIF染色模型 特異性靶抗原 韋格納氏肉芽腫 c, p(少見) PR3

12、(90%),MPO(10%) 顯微型多動脈炎 c, p PR3(45%),MPO(45%) 壞死性腎小球腎炎 p, c(少見) PR3(25%),MPO(65%) Charg-Straus綜合征 p, c(少見) PR3(10%),MPO(60%) 結節(jié)性多動脈炎 p, c(均少見) PR3( 5%),MPO(15%) 抗GBM病 P MPO(30%) 系統(tǒng)性紅斑狼瘡 P/ a LF,HEL,MPO(少見) 類風濕性關節(jié)炎 p, a LF,MPO(少見) 藥物性狼瘡 P/ a MPO(常見),LF,HEL Felty綜合征 p, a LF,MPO(少見) 潰瘍性結腸炎 P/ a（50-80%）

13、 LF,Cath G,LYS,其它 克羅恩病 p/a（10-20%） LF,Cath G,LYS,其它 原發(fā)性硬化性膽管炎 P/ a（26-87%） LF,Cath G,其它 原發(fā)性膽汁性肝硬化 P/ a（10%） LF,Cath G,LYS,HEL,其它 自身免疫性肝炎 P/ a（16-83% LF ,Cath G,LYS,HEL,其它 囊性纖維化 P/ a BPI（91%） 其它急性/慢性感染 c / a PR3,MPO,BPI,其它 （HIV、阿米巴等）,抗磷脂抗體譜及其臨床意義,aCL（抗心脂抗體） SLE，原發(fā)性抗磷脂綜合征 感染、腫瘤 抗2GP1(載脂蛋白) 是aCL與磷脂結合的輔

14、助因 子 LA（狼瘡抗凝物） SLE、感染、腫瘤 抗磷脂酰絲氨酸 抗磷脂酸,磷脂抗體是診斷磷脂抗體綜合征的必備條件之一，但并非有 磷脂抗體患者均屬該綜合征，必需同時有臨床癥狀（血栓、 血小板減少、反復自發(fā)性流產(chǎn)）,抗心磷脂（Cardiolipin）抗體,以牛心肌的乙醇浸出液提取酸性磷脂，用放射免疫或ELISA測定。50%SLE（患者陽性）。其他自身免疫性疾病，如RA、原發(fā)性血小板減少性紫癜及感染（尤在病毒）和藥物因素均可陽性（+）。 高滴度IgG抗心脂抗體的SLE 40%發(fā)生動、靜脈栓塞,類風濕因子 （Rheumatoid Factor）,抗人或動物的IgG的FC片段抗體。其本身是免疫球蛋白，

15、因此，RF有IgG、IgM、IgA型等。RF無種族和種屬特異性 與DNP及半抗原（二硝基苯）有交叉反應。7S IgM(IgG)-RF主要參與關節(jié)外癥狀的免疫復合物形成，且與疾病活動性有關,如何評價類風濕因子,是診斷RA的標準之一，不是唯一標準，更非RA特有。 作為血清陰性脊柱關節(jié)病區(qū)分標準 正常人2%陽性，老年人可達5%陽性 RF與其他蛋白、半抗原有交叉反應 多種結締組織?。⊿LE，SD，SS，PM/DM）感染疾?。⊿BE，TB，hepatitis）,肝硬化，彌漫性肺纖維化，結節(jié)病等均可陽性 病后半年才產(chǎn)生，有關節(jié)外表現(xiàn)者，滴度高。持續(xù)高滴度RF預示疾病嚴重，預后差,RA自身抗體譜及臨床意義,RF 60RA中出現(xiàn)，量與RA活 動性及嚴重性呈正相關。 亦在其它CTD出現(xiàn) 抗CCP 在50RA中出現(xiàn) （聚角蛋白微絲蛋白） 特異性高，95 AKA（抗角蛋白抗體） 在40RA陽性，特異性90% APF（抗核周因子） 在52RA陽性，特異性90% 抗RA33 RA陽性率為35 抗Sa 在部分RA陽性,以上抗體陽性有助于早期RA及不典型RA的診斷和早期開展 治療，改善預后,