1、消毒與滅菌效果監(jiān)測(cè) 方法簡(jiǎn)介,在消毒與滅菌效果監(jiān)測(cè)方法中，研究最多、應(yīng)用較普遍的為壓力蒸汽、電離輻射與環(huán)氧乙烷三大滅菌技術(shù)滅菌效果的監(jiān)測(cè)方法。對(duì)紫外線與其它化學(xué)消毒劑消毒效果的監(jiān)測(cè)方法也有研究與應(yīng)用。除電離輻射外，其它方法消毒與滅菌效果的監(jiān)測(cè)，在醫(yī)院中較常見。,方法可歸納為4類： 1.儀表監(jiān)測(cè) 2.化學(xué)監(jiān)測(cè) 3.生物監(jiān)測(cè) 4.程序監(jiān)測(cè),1 儀表監(jiān)測(cè) 通過儀表測(cè)定有關(guān)參數(shù)，間接了解是否可達(dá)到消毒或滅菌的要求。,1.1 常用儀表,溫度計(jì)(留點(diǎn)溫度計(jì)) 壓力計(jì)(負(fù)壓壓力計(jì)) 濕度計(jì) 壓力、溫度、時(shí)間自動(dòng)記錄儀 紫外線強(qiáng)度計(jì),電離輻射強(qiáng)度計(jì) 電離輻射劑量?jī)x 乙醇水溶液比重計(jì) 水中臭氧檢測(cè)儀,1.2 注

2、意事項(xiàng) (1) 用前應(yīng)校正或定期校正 (2) 布放于有代表性部位,2 化學(xué)監(jiān)測(cè) 根據(jù)化學(xué)物質(zhì)的物理化學(xué)變化，測(cè)知?dú)⒕蜃拥膭┝?，間接判斷是否達(dá)到消毒或滅菌的效果。,2.1 監(jiān)測(cè)對(duì)象 壓力蒸汽滅菌 干熱滅菌 紫外線強(qiáng)度 電離輻射劑量 化學(xué)消毒劑,2.2 指示材料 2.2.1 壓力蒸汽滅菌常用指示材料 化學(xué)指示膠帶(簽) 化學(xué)指示卡(管) 綜合性化學(xué)指示劑 (移動(dòng)式化學(xué)指示劑) 化學(xué)指示試紙 BD試驗(yàn)指示圖,2.2.2 干熱滅菌常用指示材料 化學(xué)指示劑 移動(dòng)式化學(xué)指示劑,2.2.3 化學(xué)消毒劑常用指示材料 環(huán)氧乙烷指示卡 蒸汽-甲醛氣體滅菌化學(xué)指示劑 空氣臭氧濃度檢測(cè)儀(管) 消毒劑濃度試紙 戊二

3、醛濃度監(jiān)測(cè)卡(管),2.2.4 其它指示材料 紫外線強(qiáng)度指示卡 電離輻射指示劑,2.3 監(jiān)測(cè)方法 2.3.1 壓力蒸汽滅菌監(jiān)測(cè) 硫磺管、苯甲酸管不能用 BD試驗(yàn)每天一次，用30cm25cm 2528cm布巾包 每包外用膠帶、內(nèi)放卡,美國(guó)醫(yī)療器械改進(jìn)協(xié)會(huì)規(guī)定： 每包外用膠帶、內(nèi)放卡 每天第一次用預(yù)真空壓力蒸 汽滅菌器時(shí)，BD試驗(yàn),2.3.2 干熱或消毒劑氣體滅菌監(jiān)測(cè) 將化學(xué)指示劑放于包中央 布放于最難達(dá)到滅菌的部位 (或消毒器內(nèi)各層中央與四角),2.3.3 紫外線強(qiáng)度監(jiān)測(cè) 開燈照5 min后無(wú)異常 置卡于燈中央下方垂直1 m處 照射1 min 避免日光直射到卡,2.3.4 消毒液濃度監(jiān)測(cè) 試紙浸

4、濕后0.51.0 min比色,3 生物監(jiān)測(cè) 在監(jiān)測(cè)滅菌效果時(shí)，用菌的存活與否直接證明是否達(dá)到要求。在監(jiān)測(cè)消毒效果時(shí)，用測(cè)定對(duì)菌的殺滅率判斷是否達(dá)到要求。,3.1 基本要求 滅菌 用菌片(5105 5106cfu/片） 消毒 用菌片或菌懸液(菌藥混合液 中含菌量5105 5106cfu/ml),不同滅菌方法的效果監(jiān)測(cè)，應(yīng)采用不同的菌種， 并對(duì)其抗力有一定要求。 滅 菌 生 物 D值 存活時(shí)間 殺滅時(shí)間 方 法 指示劑 (min) (min) (min) 壓力蒸汽 嗜熱脂肪桿菌 (1210.5飽 滅菌 (ATCC 7953)芽胞 和蒸汽條件下) 1.31.9 3.9 19.0 干熱滅菌 枯草桿菌黑

5、色變種 (1605 (ATCC 9372) 芽胞 條件下) 1.31.9 3.9 19.0 環(huán)氧乙烷 枯草桿菌黑色變種 (EO 600mg/L30mg/L,54 滅菌 (ATCC 9372) 芽胞 2,RH60% 10%條件下) 2.55.8 7.5 58.0,3.2 監(jiān)測(cè)方法 3.2.1 壓力蒸汽滅菌監(jiān)測(cè) 單片菌片裝于牛皮紙袋中 放入標(biāo)準(zhǔn)測(cè)試包(30cm30cm25cm) 中央或最難透汽處(2片/包)，同時(shí) 放化學(xué)指示卡 置于滅菌器近排氣口處(上方) 滅菌后，接種于溴甲酚紫蛋白胨培養(yǎng) 液中，56培養(yǎng)7 d(24 h初步看) 設(shè)陰性、陽(yáng)性對(duì)照,美國(guó)醫(yī)療器械改進(jìn)協(xié)會(huì)規(guī)定生物指示劑應(yīng)在下列情況下使

6、用: (1)新滅菌器裝置后檢查 (2)滅菌器大修后驗(yàn)收 (3)常規(guī)監(jiān)測(cè) 每周(最好每天)1次 (4)滅菌人體移植器材(待培養(yǎng)結(jié)果陰性后， 器材才可使用) (5)周期性質(zhì)量檢測(cè),美國(guó)所用標(biāo)準(zhǔn)測(cè)試包分兩種： 吸水手術(shù)巾包 混裝包,吸水手術(shù)巾包： 含16條吸水手術(shù)巾，外包以雙層布 23cm23cm15cm(1.5 kg) 生物指示劑放于8與9條手術(shù)巾間中央 同時(shí)放化學(xué)指示卡于其側(cè),混裝包：含棉布手術(shù)衣3件以上，吸水手術(shù)巾12條，30個(gè)紗布方，5個(gè)紗布卷，一條手術(shù)大單，外以布包兩層。 30cm30cm50cm(4.55.5kg) 生物指示劑放于包中央 同時(shí)將化學(xué)指示卡放于其上方或下方隔一手術(shù)巾處,3.

7、2.2 干熱或消毒劑氣體滅菌監(jiān)測(cè) 干熱 菌片裝入無(wú)菌試管(1片/管) 布于消毒器內(nèi)各層對(duì)角線內(nèi)、外角(2管/點(diǎn)) 消毒劑 菌片裝入布(紙)袋 布于器內(nèi)各層最難達(dá)到滅菌處(或中央與 四角)的物品中間 滅菌后，接種于營(yíng)養(yǎng)肉湯中(消毒劑需含中和劑)， 37培養(yǎng)7 d(3 d初步看) 設(shè)陰性、陽(yáng)性對(duì)照,3.2.3 物品(手)表面消毒效果監(jiān)測(cè) 物品、手表面可染試驗(yàn)菌或用其含自然菌 (1)物理因子或消毒劑氣體： 菌片放入無(wú)菌平皿中(2片/皿)，小型染菌物品 直接布放 消毒器每層布放2份(內(nèi)、外)5份(中央、四角) (2)消毒液： 平皿或適當(dāng)容器盛消毒液 菌片或小型染菌物品(手)浸泡消毒液中 對(duì)大型染菌物品

8、表面噴消毒液 消毒后，對(duì)菌片或涂抹采樣作活菌計(jì)數(shù) 設(shè)陽(yáng)性(不消毒)、陰性對(duì)照,采樣、活菌計(jì)數(shù)： 菌片投入含10 ml采樣液試管中 物品、手在采樣部位用棉拭往返涂擦2次， 將棉拭頭放入含10 ml采樣液試管中 振打試管以洗脫菌 取洗脫液培養(yǎng)48 h 計(jì)數(shù)菌落數(shù) 計(jì)算殺滅率,3.2.4 空氣(自然菌)消毒效果監(jiān)測(cè) 消毒前、后分別用平板沉降15 min采樣 37培養(yǎng)48 h 平板直徑9 cm，距地面1.5 m 布于中央、四角(30 m2布中央與對(duì)角線二角) 有條件者可用FA-1型多級(jí)撞擊式采樣器,3.2.5 監(jiān)測(cè)消毒液微生物污染 取消毒液1.0 ml 加入含9.0 ml相應(yīng)中和劑試管中 混勻 取0.

9、2 ml涂抹平板或0.5 ml傾注瓊脂混勻 20培養(yǎng)7 d：霉菌 37培養(yǎng)72 h：細(xì)菌總數(shù) 細(xì)菌總數(shù)(cfu/ml)=平板菌落數(shù)20(或50),3.3 注意事項(xiàng) (1)檢測(cè)化學(xué)消毒劑效果要用中和劑 消毒 加于采樣液中 滅菌 加于培養(yǎng)基中 (2)復(fù)方中和劑應(yīng)注意成分間拮抗 (3)中和劑應(yīng)經(jīng)試驗(yàn)證明合適,附表 XXX中和劑試驗(yàn)結(jié)果 組 別 平均菌數(shù)(cfu/ml) 消毒劑+菌液(片) 0 4.5 0.5 消毒劑+菌液(片)+中和劑 20 0.5 4.5 中和劑+菌液(片) 204 000 (中和劑+消毒劑)+菌液(片) 168 000 正常菌液(片)對(duì)照 202 000 未接種菌培養(yǎng)基對(duì)照 0 （接種平皿0.5 ml，結(jié)果為3次試驗(yàn)平均）,4 程序監(jiān)測(cè) 依消毒或滅菌處理程序，作回顧性或前瞻性監(jiān)測(cè)。 回顧性 據(jù)儀表的自動(dòng)記錄或工作人員的現(xiàn)場(chǎng)記