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1、第3節(jié)DNA克隆,本節(jié)內(nèi)容:1,科學(xué)家對DNA分子的推測-2,復(fù)制DNA分子的過程(焦點(diǎn),困難),1,科學(xué)家對DNA分子的推測,沃森和克里克發(fā)表了DNA雙螺旋模型后,緊接著同一年發(fā)表了DNA自我克隆的假說DNA分子復(fù)制后,DNA分子的雙螺旋被解開,互補(bǔ)堿基之間的氫鍵被切斷,兩個松開的單鏈成為復(fù)制的模板,自由脫氧核苷酸根據(jù)堿基互補(bǔ)配對原則形成氫鍵,從而結(jié)合成柱狀的單鏈。每個新合成的DNA分子都保存著原始DNA分子中的一股,因此這種復(fù)制方法稱為半保存式復(fù)制。2,DNA復(fù)制過程主要分為三個過程:旋轉(zhuǎn)合成子鏈形成新分子,(1),旋轉(zhuǎn),雙螺旋結(jié)構(gòu)在旋轉(zhuǎn)酶的作用下分解成單鏈片段。雙螺旋結(jié)構(gòu),單鏈段,(2)
2、,合成新鏈條解開的每一片(母鏈)以模板,遵循基本互補(bǔ)配對原則,并與提供原料的物種核苷酸分別互補(bǔ),在聚合酶的作用下,連接成一個部分鏈。,、t 新合成的DNA分子中保留了原來的DNA鏈,因此,半保存克隆,基本互補(bǔ)配對原則,1,DNA克隆的特征,2,DNA克隆的原則,3,DNA分子克隆過程,1定義的2小時,地點(diǎn)3條件4過程5特征,原則6準(zhǔn)確克隆的原因和重要性,1 真核生物:核(州),葉綠體,線粒體原核:準(zhǔn)核,模板:親代DNA分子的雙鏈,條件:原料:自由4種脫氧核苷酸(a,g,c,t) 所以DNA復(fù)制的特征之一是通過DNA聚合酶,通過基本互補(bǔ)配對脫氧核苷酸,結(jié)合到母鏈中,已經(jīng)在復(fù)制了, 所以DNA復(fù)制
3、的特征之一是用于半保存復(fù)制的:DNA復(fù)制后生成的每個子代DNA分子中的一個鏈由原始DNA維持,另一個單鏈?zhǔn)切潞铣傻摹_@種復(fù)制方法稱為半保留復(fù)制。5,精確復(fù)制的原因,意義,意義:將遺傳信息從親戚傳遞到子代,遺傳信息的穩(wěn)定性,連續(xù)性裴珉姬,原因:DNA分子提供唯一正確的模板以確保復(fù)制。雙螺旋結(jié)構(gòu),基本互補(bǔ)配對,6,DNA復(fù)制過程中的等量關(guān)系,一個DNA復(fù)制n次,()獲得子DNA,(1)一個DNA分子連續(xù)復(fù)制4次,能得到多少個子DNA?其中有多少DNA分子包含原來的DNA鏈呢?16個,2個,2n,(2),1個DNA分子中有基本的A20個,占總堿基的20%。如果DNA連續(xù)復(fù)制兩次,基本c: a. 20
4、個B.30個C.90個D.120個d . 120個,響應(yīng):C,每個DNA分子中C=。將DNA分子增加2倍,(20/20%-20*2)/2,3,增加c堿總數(shù)。,3*30=90,(3),在沒有標(biāo)記的環(huán)境中培養(yǎng)的15N標(biāo)記DNA分子,克隆5次后,DNA分子占總DNA分子:a,1/10 B,1/5 C,1/16 D分解2。合成子鏈3。形成新的DNA,模板,原料,能量和各種酶,遺傳信息傳遞,C,1,DNA分子自我復(fù)制后形成兩個DNA分子,這兩個新的DNA分子()a .分別是兩個父鏈和兩個子鏈,b .將兩個父鏈和兩個子鏈隨機(jī)組合,C .分別是在解毒酶作用下,以癌鏈為主,堿基互補(bǔ)對和癌鏈可以抑制雙螺旋結(jié)構(gòu)A B C D,C,3,特定藥物對腫瘤細(xì)胞DNA的克隆,達(dá)到控制癌癥的目的。這些藥物作用的細(xì)胞細(xì)胞周期a. interval B .前c .中期d .不確定。如果a,4,1雙鏈DNA分子在分解過程
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