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文檔簡介

1、背景資料,顯微鏡的發(fā)明和發(fā)展: 伽利略自己制造出了望遠鏡,也著手設(shè)計顯微鏡。并對小動物的感覺器官進行了觀察。 真正用顯微鏡發(fā)現(xiàn)有機體內(nèi)部世界的是馬爾比基、列文虎克、胡克和斯旺麥丹。 1660年,馬爾比基用顯微鏡發(fā)現(xiàn)了毛細血管,觀察了許多動物呼吸系統(tǒng),還發(fā)展了胚胎學(xué)研究。 1675年,列文虎克用自制的只有一個透鏡的顯微鏡觀察到了原生動物。他還最早發(fā)現(xiàn)了紅血球的存在。1683年,他還發(fā)現(xiàn)了細菌。 1665年,物理學(xué)家胡克用自己制造了復(fù)式的顯微鏡,觀察軟木塞薄片,將軟木上的那些小孔稱為“細胞”。 電子顯微鏡是利用高速運動的電子束代替光波的一種顯微鏡。大大提高了顯微鏡的分辨本領(lǐng),能觀察物質(zhì)極為微細的結(jié)

2、構(gòu)形態(tài)。,顯微鏡技術(shù),光學(xué)顯微鏡: -普通光學(xué)顯微鏡:分辨力0.2m,必須染色 -相差顯微鏡:利用細胞內(nèi)非均一性造成的光相位差,將其轉(zhuǎn)變?yōu)榱炼炔?,可觀察活細胞結(jié)構(gòu)及其內(nèi)部運動 -熒光顯微鏡:利用細胞內(nèi)不同物質(zhì)對紫外線產(chǎn)生不同顏色熒光的現(xiàn)象,可利用熒光染料 -暗視野顯微鏡:利用側(cè)向斜射光線,使之在物體上散射進入物鏡,可提高顯微鏡的分辨力達到0.20.04 m -偏光顯微鏡:利用偏振光對一定方向的物體照明,可觀察絲狀標本的細微結(jié)構(gòu)和鑒別細胞中化學(xué)成分,顯微鏡技術(shù)(2),電子顯微鏡 掃描電子顯微鏡:電子槍產(chǎn)生的電子在電磁透鏡中匯聚成電子束,由掃描線圈控制掃描樣品表面,分辨力610nm,立體感強,樣品

3、可移動,便于多向觀察 透射電子顯微鏡:分辨力0.20.25nm(見P11圖) 超高壓電子顯微鏡:電子束電壓500V,穿透力強,分辨力高可觀察較厚樣品 掃描隧道電子顯微鏡:利用真空隧道中的量子現(xiàn)象,顯示物體表面的原子結(jié)構(gòu),了解顯微鏡 的基本結(jié)構(gòu),1,10,11,4,2,3,7,6,9,8,5,目鏡,物鏡,鏡筒,鏡臂,鏡座,載物臺,壓片夾,反光鏡,遮光器,粗準焦螺旋,細準焦螺旋,轉(zhuǎn)換器,12,安裝 裝配適當(dāng)?shù)奈镧R和目鏡。 低倍鏡的使用 必須先用低倍鏡,視野大,容易發(fā)現(xiàn)目標和確定觀察部位。 (1)檢查 有無損壞。 (2)準備 前方略偏左側(cè)。將載物臺下降。再旋轉(zhuǎn)物鏡轉(zhuǎn)換器,將低倍鏡對準載物臺中央的通光

4、孔(可聽到“咔噠”聲)。 (3)對光 打開光圈,上升聚光器;用內(nèi)置光源時,使用光亮調(diào)節(jié)器調(diào)光。 (4)放標本片 標本片的蓋片朝上,觀察部分對準光孔的正中央。 (5)調(diào)節(jié)焦距 側(cè)面注視物鏡鏡頭,粗調(diào)節(jié)鈕,鏡臺上升,低倍鏡頭與玻片間的距離約5mm,從目鏡里觀察視野,左手慢慢轉(zhuǎn)動粗調(diào)節(jié)鈕,鏡臺緩緩下降,視野中出現(xiàn)物像。細調(diào)節(jié)鈕至物像清晰。 (6)計算倍數(shù),顯微鏡的安裝和使用,高倍鏡的用法,(1)低倍鏡找到清晰物像。 (2)將需要觀察的部分移到視野的中央。 (3)眼睛從側(cè)面注視物鏡,用手移動轉(zhuǎn)換器,換高倍鏡。 (4)眼睛向目鏡內(nèi)觀察,同時微微上下轉(zhuǎn)動細調(diào)節(jié)鈕,直至視野內(nèi)看到清晰的物像為止。,油鏡的使用

5、方法,(1) 先用低倍物鏡觀察標本的概況。 (2) 更換高倍物鏡,視野中央。 (3) 鏡臺緩緩下降約1.5 cm,再把油鏡轉(zhuǎn)到工作位置。 (4) 在蓋玻片上所要觀察的位置滴一小滴香柏油,細心擰動粗調(diào)螺旋,使鏡臺上升。從側(cè)面觀察物鏡前端與標本的距離,油滴接觸,慢慢提升鏡臺,至物鏡前端接近而沒有碰到蓋玻片為止。這步操作要特別小心,防止油鏡壓碎標本或損壞油鏡(油鏡的工作距離約0.2 mm)。 (5) 眼睛從目鏡中觀察,擰動細調(diào)螺旋,使鏡臺慢慢下降到能看清標本。這步操作要特別注意不要把細調(diào)螺旋的方向擰錯,以防壓碎標本。 (6) 觀察完畢后,下降鏡臺約1 cm,把油鏡轉(zhuǎn)離光軸,及時清潔。擦鏡紙擦12次,

6、去油,二甲苯滴濕的擦鏡紙擦2次,擦鏡紙擦1次。順鏡頭直徑方向,不圓周擦。 (7) 復(fù)原 聚光器下降約1 cm 。把物鏡轉(zhuǎn)離光軸。下降載物臺,載物臺上標本移動器移到適當(dāng)位置,關(guān)閉內(nèi)置光源。,是低倍鏡還是高倍鏡的視野大、視野明亮?為什么? 低倍鏡的視野大,通過的光多,教亮,放大的倍數(shù)??; 高倍鏡的視野小,通過的光少,較暗,放大的倍數(shù)大。 為什么要先用低倍鏡觀察清楚后,把要放大觀察的物像移至視野的中央,再換高倍鏡觀察? 如果直接用高倍鏡觀察,往往由于觀察的對象不在視野范圍內(nèi)而找不到。因此,需要先用低倍鏡觀察清楚,并把要放大觀察的物像移至視野的中央,再換高倍鏡觀察。 用轉(zhuǎn)換器轉(zhuǎn)過高倍鏡后,轉(zhuǎn)動粗準焦螺

7、旋行不行? 不行。用高倍鏡觀察,只需微調(diào)即可。轉(zhuǎn)動粗準焦螺旋,容易壓壞玻片。 如何判斷細胞和氣泡?,(一)顯微鏡的使用 1. 觀察前的準備工作 (1)觀察者要養(yǎng)成顯微鏡鏡檢的工作習(xí)慣,觀察時要雙 眼同時睜開,一邊觀察一邊進行記錄或描繪。 (2)觀察時所用的材料、藥品和各種器具要預(yù)先準備好。 (3)顯微鏡在使用之前應(yīng)檢查一下它的各個部件是否完整 和正常,并對載物臺、目鏡、物鏡以及聚光器上端透 鏡進行必要的清潔工作。然后進行合軸調(diào)節(jié)。,瞳 距 調(diào) 節(jié),2. 顯微鏡的調(diào)節(jié),屈 光 度 調(diào) 節(jié),粗 調(diào) 松 緊 調(diào) 節(jié) 旋 鈕,聚 光 鏡 中 心 調(diào) 節(jié),孔徑光欄調(diào)節(jié),N.A聚=(0.6-0.8)N.A

8、物,操作步驟如下: (1)可變光欄的中心對準聚光鏡的中心。如果可變光欄的水平是固定的,則裝配時已保證它與聚光鏡合軸,不必調(diào)整;如果可變光欄的水平位置可以移動,則應(yīng)把可變光欄關(guān)到最小,使它的中心孔對準聚光鏡下方的透鏡中心。 (2)載物臺上放置觀察標本,把聚光器上升到它上端透鏡平面稍低于載物臺平面的高度,并將它的可變光欄開到最大,用低倍物鏡,進行調(diào)焦到能看見標本,可調(diào)反射鏡使視野得到最亮和最均勻 的照明,或把光欄關(guān)小,最亮的照明區(qū)正處在視野的中央。 (3)轉(zhuǎn)到高倍鏡,并調(diào)焦到看清標本,然后去掉標本,拔出目鏡,眼睛直接向鏡筒觀察,并把可變 光欄關(guān)小,看其亮點是否在視野中心,如果不是,就要轉(zhuǎn)動聚光器的

9、調(diào)節(jié)螺旋,把亮點調(diào)到視野中 央,再慢慢開啟可變光欄,使視野看到光欄邊緣和聚光鏡的邊緣相接為止。,3. 觀察操作: (1) 低、高倍鏡的使用: 先把低倍的物鏡用粗調(diào)焦螺旋下降至離蓋玻片0.5cm處,然后一邊觀察視野一邊上升物鏡,直至看到圖像,再將標本移到視野中心,用細調(diào)焦螺旋把物鏡調(diào)至最清晰處,若要用高倍鏡觀察時,把所要進一步放大觀察的部位移至視野中央,直接順時針轉(zhuǎn)換成高倍物鏡,然后用細調(diào)焦螺旋調(diào)焦,至看清物像。,其他常用的探究器具,觀察器具:放大鏡等,其他常用的探究器具,解剖工具: 解剖盤 解剖剪 鑷 子 刀 片,其他常用的探究器具,計量器具: 量筒 天平,其他常用的探究器具,加熱器具: 酒精燈 三腳架 石棉網(wǎng),其他常用的探究器具,通用器具: 燒杯 試管 試劑瓶 培養(yǎng)皿 研缽 滴管 藥匙,使用常用探究器具注意事項,1、要注意安全,不要用手觸摸刀口,也不要碰到他人; 2、不要用手直接接觸被稱量的物體; 3、加熱時,不要離開加熱裝置,加熱結(jié)束后要及時、正確地切斷熱源,不要用手直接接觸被加熱的玻璃器具。; 4、實驗結(jié)束后,要及時作清理工作。,臨時裝片的制作,玻片標本,按保存時間長短 臨時玻片標本 永久玻片標本,按取材方式 切片 涂片 裝片,制作臨時裝片時,取了材料再滴清

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