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1、臨床常見(jiàn)病原體檢查,壓電石英檢查醫(yī)學(xué)院溫壓電石英附一壓電石英實(shí)驗(yàn)診斷中心,臨床常見(jiàn)病原體檢查2009,主要是第一節(jié)標(biāo)本采集運(yùn)輸,實(shí)驗(yàn)室評(píng)價(jià)和檢查方法第二節(jié)病原體藥劑耐受力檢查第三節(jié)臨床感染常見(jiàn)病原體檢查第五節(jié)性傳染病病原體檢查第六節(jié)醫(yī)院感染常見(jiàn)病原體檢查,臨床常見(jiàn)抗生素發(fā)現(xiàn)和免疫策略實(shí)施以來(lái),嚴(yán)重危害人體健康的病原體大多已消滅或基本消滅了新傳染疾病,曾滅絕的部分舊傳染疾病復(fù)活。 條件致病菌的感染比例增加。 不斷出現(xiàn)多藥耐藥性菌株,真菌感染的概率逐年增高。 -臨床病原體檢查的重要性、臨床常見(jiàn)病原體檢查2009、臨床病原體檢查的目的:為確定感染的發(fā)生和性質(zhì)及早明確診斷提供治療方案防止感染傳播采取預(yù)
2、防措施。 臨床病原體實(shí)驗(yàn)診斷方法遵循的原則:正確規(guī)范的標(biāo)本預(yù)處理一般可以用幾個(gè)實(shí)驗(yàn)室的手,首先進(jìn)行初步診斷根據(jù)初步診斷進(jìn)行化學(xué)基確診,參與治療。 臨床常見(jiàn)的病原體檢查2009、第一節(jié)標(biāo)本的采集和運(yùn)輸、實(shí)驗(yàn)室評(píng)價(jià)和檢查方法、臨床常見(jiàn)的病原體檢查2009、標(biāo)本的正確采集和運(yùn)輸是實(shí)驗(yàn)室取得正確結(jié)果的前提和基本因素。 但由于標(biāo)本采集的方法和時(shí)間、標(biāo)本來(lái)源、實(shí)驗(yàn)室往往不能直接特羅爾,臨床醫(yī)師和護(hù)士對(duì)此應(yīng)予以重視。 臨床常見(jiàn)的病原體檢查2009,病原檢查標(biāo)本的采集和送檢的基本原則:標(biāo)本的采集應(yīng)選擇標(biāo)本的種類和采集部位,考慮有效的病程反應(yīng)。 盡量在使用抗生素前采集標(biāo)本。 采集標(biāo)本,必須嚴(yán)格執(zhí)行無(wú)菌操作,防止
3、污染。 標(biāo)本采集后,盡快送到實(shí)驗(yàn)室,床邊接種提高致病菌檢出率。 放標(biāo)本的容器必須滅菌處理,但使用使不得消毒劑。 處理后的標(biāo)本及容器根據(jù)生物安全要求進(jìn)行消毒處理。 臨床常見(jiàn)的病原體檢查2009,一、常見(jiàn)的檢查標(biāo)本的采集和運(yùn)送檢查方法: (一)血液和骨髓適應(yīng)證:疑菌血癥、敗血癥或膿毒血癥的患者。 1 .通常采血部位為肘中靜脈,感染灶附近的血管采血,可以提高陽(yáng)性率。 避免用靜脈滴注抗微生物劑采集血液標(biāo)本。 標(biāo)本采集過(guò)程必須嚴(yán)格無(wú)菌操作。 2、選擇體溫上升或峰值時(shí)間采血可提高陽(yáng)性率。 臨床常見(jiàn)病原體檢查2009,3、3、3,采血1次量為5-10(10-20)ml,乳嬰兒子1-5ml,培養(yǎng)基與血液之比為
4、10:1為宜。 稀釋血液中的抗生素、抗體等殺菌物質(zhì)。 4、各例至少采血2次,間隔時(shí)間由病情決定,有利于提高陽(yáng)性率和區(qū)分感染菌和皮膚污染菌。 臨床常見(jiàn)病原體檢查2009,1,1,中段尿采集:是臨床最常用的方法。 取樣前要用肥皂水和清水沖洗尿道口,拋棄排出的尿液前段,把中段或后段附近的尿液留在無(wú)菌容器中。 (二)尿液、臨床常見(jiàn)病原體檢查2009,2,2,尿?qū)Ч懿杉弘m然可以減少污染,但容易引起逆行感染,必要時(shí),應(yīng)避免該方法。 對(duì)于留置導(dǎo)尿管者,用碘酒消毒尿道口的導(dǎo)尿管壁,用無(wú)菌注射器斜穿管壁吸引尿,或消毒后取下接口,丟棄導(dǎo)尿管前段尿,留下沒(méi)有污染的膀胱內(nèi)尿進(jìn)行檢查。 從集尿袋下端的管口將標(biāo)本殘留使
5、不得。 臨床常見(jiàn)病原體檢查2009,3、3、3,膀胱穿刺取尿液:患者恥骨上皮膚消毒后,用無(wú)菌注射器進(jìn)行膀胱穿刺。 該方法主要用于尿液厭氧菌培養(yǎng)和中段尿采集困難的嬰兒子。 臨床常見(jiàn)的病原體檢測(cè)2009,(三)將糞便、1、去膿血黏液部分的新鮮糞便裝入約2-3克洗滌容器檢測(cè),也可以用雨刮器去糞便裝入運(yùn)輸培養(yǎng)基檢測(cè),提高致病菌檢出率.2 .糞便不易獲取者,如乳嬰兒子可使用直腸拭子進(jìn)行檢查。 臨床常見(jiàn)病原體檢查2009,(四)痰液最常見(jiàn)的呼吸道標(biāo)本,1、自然咳痰:清水反復(fù)漱口后用力咳嗽,從呼吸道深部咳出新鮮痰液后在無(wú)菌容器內(nèi)檢查。 痰量極少者可以用4510%氯化納金屬釷液霧化吸入導(dǎo)痰,一般早晨最初的痰較
6、好。 2 .氣管鏡下采集法、氣管穿刺法:可以減少污染,但患者有一定的痛苦,難以接受和普及。 (滿足要求的痰標(biāo)本低倍率視野下扁平上皮細(xì)胞球10個(gè),白細(xì)胞25個(gè)),臨床常見(jiàn)的病原體檢查2009,3,3 .痰標(biāo)本采集后應(yīng)立即進(jìn)行檢查和處理,最好在1小時(shí)以下,室溫下延長(zhǎng)數(shù)小時(shí),定植于口咽部的非致病菌呈過(guò)度增長(zhǎng),檢出率明顯降低。 此外,上呼吸道中還存在正常菌群,在標(biāo)本采集和結(jié)果分析時(shí)應(yīng)予以考慮。 臨床常見(jiàn)病原體為2009,(5)檢查腦脊液等無(wú)菌體液,1 .在嚴(yán)格的無(wú)菌條件下采集標(biāo)本。 2 .盡可能多地采集標(biāo)本進(jìn)行檢查。 3 .盡快檢查或接種床邊可提高陽(yáng)性率,特殊標(biāo)本需要保溫檢查。 臨床常見(jiàn)病原體檢查20
7、09、(6)創(chuàng)傷、組織和膿腫標(biāo)本:1、無(wú)菌生理鹽溶液清洗病灶表面后,用無(wú)菌雨刮器去除病灶深部膿液和分泌物。 2 .對(duì)未潰爛的膿腫直接用碘酒、酒精消毒皮膚后,用無(wú)菌注射器抽出膿液進(jìn)行檢查,排膿時(shí)也可在無(wú)菌雨刮器下采樣。 臨床常見(jiàn)的病原體檢查2009,二、標(biāo)本的素質(zhì)測(cè)評(píng)標(biāo)準(zhǔn):標(biāo)本及送檢單應(yīng)寫明被檢者姓名、性別、年齡、臨床診斷、標(biāo)本來(lái)源及檢查目的、抗生素使用情況等,不接受患者信息及標(biāo)識(shí)牌。 標(biāo)本必須立即送檢,逾期標(biāo)本不予接收。 送檢容器必須完整,容器破損或標(biāo)本泄漏時(shí)不予受理。 標(biāo)本保存、運(yùn)輸方式不當(dāng)?shù)?,不予接受?不接受明顯污染了的標(biāo)本。 標(biāo)本量明顯不足的標(biāo)本為不予受理。 在血培養(yǎng)以外的當(dāng)天反復(fù)申請(qǐng)
8、檢查的標(biāo)本被不予受理。 臨床常見(jiàn)的病原體檢查2009,3 .臨床病原體檢查方法,其主要手段是:1.直接顯微鏡檢查:是重要的基本方法,常作為初步診斷,陽(yáng)性率相對(duì)較低。 2 .專一性抗原檢測(cè):可作為早期快速診斷,但專一性至關(guān)重要。 例如免疫熒光技術(shù)、酶催化劑免疫技術(shù)、化學(xué)發(fā)光技術(shù)、乳膠凝集技術(shù)等。 3、核檢:近年來(lái)發(fā)展迅速,敏感性和專一性好。 例如,PCR、分子雜交、DNA序列等。 4、致病菌的分離培養(yǎng)和鑒定:雖然是確診的重要步驟,但往往需要時(shí)間。 5 .血清學(xué)檢查:通過(guò)檢查相應(yīng)的專一性抗體輔助診斷。 例如肥達(dá)氏試驗(yàn)、結(jié)賬臺(tái)軍團(tuán)菌抗體檢測(cè)等。 應(yīng)進(jìn)行2份血清檢查,2次抗體效價(jià)相差4倍以上有意義。臨
9、床常見(jiàn)病原體檢測(cè)2009,第二節(jié)病原體藥物耐受力檢測(cè)2009,臨床常見(jiàn)病原體檢測(cè)2009,抗微生物劑藥物治療現(xiàn)狀及存在問(wèn)題,使用增加,療效低下引起難以治療的感染,使細(xì)菌藥物耐受力惡化,引起菌群失調(diào),雙重感染濫用,污染引起危害,一方面,藥物耐受力和發(fā)生機(jī)制、 臨床常見(jiàn)病原體檢查2009 1 .重點(diǎn)監(jiān)測(cè)耐藥菌株(1)甲氧芐啶耐受力葡萄球菌(MRS )和萬(wàn)古霉素易感性降低葡萄球菌(VIS) (2)對(duì)高水平氨基糖苷類藥物腸球菌(HALR) (3)對(duì)萬(wàn)古霉素耐性腸球菌(VRE )、葡萄球菌(5) 產(chǎn)生超廣譜內(nèi)酰胺酶(extendedspectrumbetalactamasesesbls )的肺炎克雷伯菌
10、和大腸菌群(6)持續(xù)高產(chǎn)染色體型內(nèi)酰胺酶(AmpC )陰溝腸桿菌, 瓦斯氣體發(fā)生劑腸桿菌細(xì)菌水平與垂直傳播抗性基因的整合子系統(tǒng)是產(chǎn)生滅活抗生素的水解作用酶催化劑和鈍化酶催化劑細(xì)菌抗生素作用靶點(diǎn)的變化細(xì)菌膜外排泵系統(tǒng)細(xì)菌生物膜的形成,2 .產(chǎn)生抗藥性的主要機(jī)制,臨床常見(jiàn)的病原體檢查2009,(1)手動(dòng)試驗(yàn)1 .紙片擴(kuò)散法(s ), 分子試驗(yàn)分子試驗(yàn)分子試驗(yàn)分子試驗(yàn)分子試驗(yàn)分子試驗(yàn)分子試驗(yàn)分子試驗(yàn)分子試驗(yàn)分子試驗(yàn)分子試驗(yàn)分子試驗(yàn)分子試驗(yàn), 直接檢測(cè)臨床常見(jiàn)病原體檢查2009,K-B法,臨床常見(jiàn)病原體檢查2009,臨床常見(jiàn)病原體檢查2009,e試驗(yàn),臨床常見(jiàn)病原體檢查2009,(二)藥敏試驗(yàn)結(jié)果解釋
11、,最小抗菌濃度(MIC ) :抑制細(xì)菌生長(zhǎng)的臨床常見(jiàn)病原體檢測(cè)2009,敏感(s ) :檢測(cè)菌在常規(guī)接觸劑量用藥后可被體內(nèi)達(dá)到的血藥濃度抑制或殺菌,即該菌感染可通過(guò)推薦接觸劑量(常規(guī)接觸劑量)的該抗微生物劑治療。 其體外最低抑菌濃度(MIC )在臨床上應(yīng)低于該抗微生物劑的正常用量。 銅綠假單胞菌藥物易感性實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,s、s、臨床常見(jiàn)病原體檢查2009、中度易感性(I ) :測(cè)定菌在大量投用測(cè)定藥物后可被到達(dá)體內(nèi)的血藥濃度抑制,或在測(cè)定藥物濃集部位的體液中抑制。 該細(xì)菌對(duì)這種抗微生物劑的反應(yīng)性通常低于敏感菌,而中度敏感藥即使高于大姨媽濃集部位或常規(guī)接觸劑量,也有臨床治療效果。 銅綠假單胞菌藥物
12、易感性實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明:,臨床常見(jiàn)病原體檢測(cè)2009,藥物耐受力(r ) :檢測(cè)菌不受體內(nèi)感染部位可達(dá)抗微生物劑濃度的抑制,感染菌對(duì)該抗微生物劑的治療不反應(yīng),增加接觸劑量或藥物富集部位也不反應(yīng)。 銅綠假單胞菌藥物易感性實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示: r,臨床常見(jiàn)病原體檢測(cè)2009,對(duì)所有內(nèi)酰胺類及與酶催化劑阻化劑復(fù)方制劑耐受力及氨基糖苷類、大環(huán)內(nèi)脂質(zhì)、克林霉素和抗四環(huán)素等抗生素的耐藥性。 治療的優(yōu)先藥物是萬(wàn)古霉素。FOX,甲氧芐啶耐受力葡萄球菌(methecillinresistancestaphylococcus,MRS )的篩選試驗(yàn),(3) .重點(diǎn)耐藥菌株的監(jiān)測(cè)試驗(yàn),注:OX為苯并三氮唑。 FOX為頭孢替胺,
13、臨床常見(jiàn)的病原體檢測(cè)為2009,CTX/CA比CTX抗菌圈或CAZ/CA比CAX 5mm為陽(yáng)性2 .如果ESBLs為陽(yáng)性,對(duì)青霉素類、所有頭孢菌素類及單環(huán)類抗生素的耐受力為3 .主要是大腸菌群和克雷伯菌屬等腸桿菌科細(xì)菌CAZ/CA為頭孢他啶/阿米酸,產(chǎn)生超廣譜內(nèi)酰胺酶(extend spectum -lactamase,ESBL )的兩張紙片實(shí)證試驗(yàn),臨床常見(jiàn)病原體檢查2009,第三節(jié)臨床感染常見(jiàn)病原體檢查,臨床常見(jiàn)細(xì)菌感染1 .細(xì)菌或其抗原檢測(cè):直接涂片鏡檢測(cè)、培養(yǎng)、抗原檢測(cè)和分析2 .檢測(cè)抗體3 .細(xì)菌遺傳物質(zhì)檢測(cè),臨床常見(jiàn)病原體檢測(cè)2009,二.細(xì)小病毒感染:1.顯微鏡形態(tài)學(xué)檢測(cè):光鏡檢
14、測(cè)特征性細(xì)小病毒包涵體,電鏡檢測(cè)病毒粒子。 2、分離培養(yǎng):生細(xì)胞球培養(yǎng)臨床不常用。 3 .血清學(xué)檢查:臨床常用,如HIV檢查等。 4、核酸單孢雜交和PCR方法:近年來(lái)發(fā)展迅速。 臨床常見(jiàn)的病原體檢查2009,三.真菌感染:1.形態(tài)學(xué)檢查:重要手段。 2 .分離培養(yǎng)、鑒定。 3 .抗原檢查及血清學(xué)診斷:不常用。 4 .寄生蟲感染:1.涂膜檢查:在糞便中尋找網(wǎng)絡(luò)蠕蟲卵,外周血中尋找瘧原蟲等,是最確切的診斷方法。 2 .免疫學(xué)方法:廣泛應(yīng)用。 3.DNA探針及PCR技術(shù):近年來(lái)發(fā)展迅速。 臨床常見(jiàn)病原體檢查2009,5 .其他病原體感染檢查:1.支原體檢查:直接顯微鏡檢查無(wú)臨床意義,分離培養(yǎng)是確診的
15、依據(jù)。 2 .螺旋體檢查:暗視野顯微鏡檢查鉤端螺旋體是可培養(yǎng)的血清學(xué)診斷最主要的方法。 衣原體檢查:直接顯微鏡檢查是有參考價(jià)值的免疫學(xué)方法以檢測(cè)抗原或抗體為主要方法。 4 .立克次體檢查:直接檢測(cè)(免疫熒光、PCR等)動(dòng)物接種血清學(xué)診斷試驗(yàn)(外斐試驗(yàn)等)。 臨床常見(jiàn)病原體檢查2009、第五節(jié)性傳播疾病病原體檢查、臨床常見(jiàn)病原體檢查2009、性傳播疾病(STD )是以性行為為主的一種傳染病,通稱性病。 臨床常見(jiàn)病原體檢測(cè)2009、HIV感染檢測(cè)篩選試驗(yàn): ELISA法確診HIV抗體試驗(yàn):蛋白印跡試驗(yàn)RT-PCR篩選HIV-RNA梅毒螺旋體感染試驗(yàn): RPR快速血漿反應(yīng)素試驗(yàn)確診試驗(yàn): TPHA梅
16、毒螺旋體凝血試驗(yàn)臨床實(shí)驗(yàn)室常見(jiàn)的診斷方法:臨床常見(jiàn)的2.PCR方法:采用早期、快速、敏感的方法,不能區(qū)分活菌還是死菌。 3、分離培養(yǎng)和鑒定:專一性高,診斷“金標(biāo)準(zhǔn)”,可藥敏試驗(yàn)云同步。 臨床常見(jiàn)病原體檢查2009,非淋菌性尿道炎實(shí)驗(yàn)室檢查: 1、衣原體檢查:常用專一性抗原檢查、培養(yǎng)等。 2、支原體檢查:相關(guān)病原體主要為烏土衛(wèi)五等離子體和人型支原體,可培養(yǎng)。 臨床常見(jiàn)病原體檢查2009,第六節(jié)醫(yī)院感染常見(jiàn)病原體檢查2009,臨床常見(jiàn)病原體檢查2009,醫(yī)院感染是指患者住院時(shí)既無(wú)存在也無(wú)潛伏期,醫(yī)院內(nèi)發(fā)生的感染,包括在醫(yī)院內(nèi)獲得并出院后發(fā)病的感染。 醫(yī)院里發(fā)生的傳染病。 今天醫(yī)院的一個(gè)非常重要的問(wèn)題。 臨床常見(jiàn)的病原體檢查2009、傳染源和病原體:傳染源主要來(lái)自住院患者、醫(yī)療從業(yè)者、造訪者及醫(yī)院環(huán)境、醫(yī)療器械、血液制品的污染等。 最常見(jiàn)的病原體是細(xì)菌,多以革蘭氏陰性桿菌為主。 易感性高的人:常見(jiàn)于免疫力低下狀態(tài)的住院患者。常見(jiàn)臨床類型:下呼吸道感染是最常見(jiàn)的醫(yī)院感染類型,此外,也常見(jiàn)泌尿道感染、手術(shù)切口感染、胃腸感染、血液感染、皮膚和軟組織感染等。
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