1、主題1細(xì)胞工程突破1幾種重要酶的比較類型項目限制性內(nèi)切酶基因公司酶接枝脫氧核糖核酸聚合酶解旋酶作用底物脫氧核糖核酸脫氧核糖核酸碎片脫氧核糖苷酸脫氧核糖核酸分子的行動地點磷酸二酯鍵磷酸二酯鍵磷酸二酯鍵堿基對之間的氫鍵動作特征切割靶基因和載體可以特異性識別雙鏈DNA分子的特定核苷酸序列，并破壞每個鏈中特定位置的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵雙鏈DNA片段被“縫合”以恢復(fù)被限制性酶切割的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵脫氧核苷酸鏈上只能添加一個脫氧核苷酸打開兩條脫氧核糖核酸鏈之間的氫鍵行動結(jié)果形成粘性末端或扁平末端形成重組的脫氧核糖核酸分子形成新的脫氧核糖核酸分子形成單鏈DNA分子的請注意，逆轉(zhuǎn)錄酶常用于基因

2、工程。逆轉(zhuǎn)錄酶，也稱為核糖核酸導(dǎo)向的脫氧核糖核酸聚合酶，是一種以核糖核酸為模板合成脫氧核糖核酸的酶。逆轉(zhuǎn)錄酶催化的反應(yīng)稱為逆轉(zhuǎn)錄。在這一過程中，遺傳信息流的方向是從核糖核酸到脫氧核糖核酸，這與轉(zhuǎn)錄過程正好相反，所以它被稱為反轉(zhuǎn)錄。突破性體驗1.下圖顯示了不同酶作用下DNA分子的變化。限制性內(nèi)切酶、脫氧核糖核酸聚合酶、脫氧核糖核酸連接酶、解旋酶和核糖核酸聚合酶的正確作用順序是()A.b .C.d .答案三在分析圖中，是被限制性內(nèi)切酶切割的脫氧核糖核酸分子；脫氧核糖核酸連接酶縫合兩個脫氧核糖核酸分子之間的縫隙；(3)在解旋酶的作用下，雙鏈脫氧核糖核酸分子被解開成單鏈；(4)在脫氧核糖核酸復(fù)制過程中

3、，以解開的單鏈為模板，在脫氧核糖核酸聚合酶的作用下合成脫氧核苷酸亞鏈；以一條脫氧核糖核酸鏈為模板，在核糖核酸聚合酶的作用下轉(zhuǎn)錄核糖核酸。突破2中易混淆概念分析基因工程的基本操作程序中有多組令人困惑的概念，是學(xué)習(xí)的難點；只有弄清它們的區(qū)別和聯(lián)系，我們才能正確掌握基因工程基本操作程序的知識。下面是對一些令人困惑的概念的分析。1.基因文庫、基因組文庫和部分基因文庫(1)按定義區(qū)分基因庫：將含有某一生物體不同基因的許多DNA片段導(dǎo)入受體細(xì)菌群體中進行保存，每個受體細(xì)菌含有該生物體的不同基因，稱為基因庫。基因庫是指儲存某些生物基因的植物群的總稱?；蚪M文庫：如果一個基因庫包含一個生物體的所有基因，這個基

4、因庫被稱為基因組文庫。部分基因庫：指含有生物體部分基因的基因庫，如cDNA文庫。(2)范圍差異：基因庫包括基因組庫和部分基因庫?；蚪M文庫包含某一生物的所有基因，其范圍大于部分基因文庫。2.啟動子、終止子、起始密碼子和終止密碼子(1)按定義區(qū)分啟動子：位于編碼區(qū)上游，靠近轉(zhuǎn)錄起點。它的主要功能是引導(dǎo)核糖核酸聚合酶與基因的正確部分結(jié)合。只有當(dāng)啟動子存在時，核糖核酸聚合酶才能準(zhǔn)確地從轉(zhuǎn)錄起點開始，沿著編碼區(qū)正常轉(zhuǎn)錄。終止子：位于編碼區(qū)下游，靠近轉(zhuǎn)錄終點。其特殊的堿基序列可以阻礙核糖核酸聚合酶的運動，使其與脫氧核糖核酸模板鏈分離。密碼子：指信使核糖核酸上決定氨基酸的三個相鄰堿基。信使核糖核酸中有64

5、種堿基的組合，其中61種是決定氨基酸的密碼子，3種是終止密碼子。終止密碼子：是信使核糖核酸上可以終止蛋白質(zhì)合成的密碼子。起始密碼子：位于信使核糖核酸上，是蛋白質(zhì)合成開始的信號，有兩種：AUG和GUG。(2)本質(zhì)區(qū)別：啟動子和終止子是在脫氧核糖核酸分子中具有調(diào)節(jié)功能的脫氧核苷酸序列，而起始密碼子和終止密碼子位于信使核糖核酸上，分別是翻譯的起始和終止位置，終止密碼子不能決定任何氨基酸。對于相似或相關(guān)的概念，通過比較分析找出差異和聯(lián)系將加深對這些知識的理解和掌握。突破性體驗2.表達載體中啟動子的功能是()A.使得目標(biāo)基因的引入更加容易B.它有核糖核酸聚合酶的結(jié)合位點來啟動轉(zhuǎn)錄過程c .鑒定受體細(xì)胞是否導(dǎo)入了目的基因d .具有啟動復(fù)制過程的脫氧核糖核酸聚合酶的結(jié)合位點回