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1、Tamoxifen作用后人乳腺癌 核基質(zhì)雌激素受體的變化特性 1盧漢平 2龍浩 2張旭 1高錦輝1 梁昌盛1中山大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)核醫(yī)學(xué)教研室 5100892中山大學(xué)腫瘤醫(yī)院胸科Email:廣東省自然科學(xué)基金資助(021877),Tamoxifen(三苯氧胺):乳腺癌內(nèi)分泌治療常用首選藥物,通過(guò)靶細(xì)胞的雌激素受體(estrogen receptor,ER)起作用。腫瘤組織雌激素受體陽(yáng)性的患者有效率為65%左右。,核基質(zhì)雌激素受體(nuclear matrix ER, EmR ):核基質(zhì)中與雌激素受體特異結(jié)合,調(diào)控靶細(xì)胞生物功能的接納體。 EmR含量尤其是相對(duì)含量( EmR/EnR)對(duì)反映機(jī)體激
2、素狀態(tài)有重要參考價(jià)值。,研究目的:通過(guò)體外實(shí)驗(yàn),觀察Tamoxifen對(duì)乳腺癌細(xì)胞EmR的影響,探討EmR在內(nèi)分泌治療中的作用,材料與方法標(biāo)本:新鮮手術(shù)切除標(biāo)本均取自中山大學(xué)腫瘤醫(yī)院,離體后置液氮保存,病理證實(shí)。主要試劑:3H-雌二醇(2,4,6,7-3H-estradiol,3H-E2),NEN產(chǎn)品,放化純度98%,SA為2.96 TBq/mmol)。tamoxifen,Sigma產(chǎn)品。,細(xì)胞培養(yǎng):將組織剪碎至1mm3,0.05%膠原酶 37消化30min, 750g離心5min,細(xì)胞尼龍網(wǎng)過(guò)濾,RPMI-1640(含10%小牛血清)培養(yǎng),細(xì)胞濃度為12105cell/ml.,Tamoxif
3、en體外作用:Tamoxifen作用的終濃度分別設(shè)0.2.、0.4.、1.0 ug/ml,培養(yǎng)24小時(shí).,胞核懸液制備及核基質(zhì)分離: 勻漿 離心 消化 提取,受體分析:采用放射配體結(jié)合分析法(單點(diǎn)飽和結(jié)合反應(yīng))。 3H-E2終濃度為5.0nmol/L,濾膜法分離結(jié)合與游離部分。PackardTri-carb2900TR測(cè)量放射性計(jì)數(shù).,數(shù)據(jù)處理:受體含量以fmol/100ugDNA表示,統(tǒng)計(jì)學(xué)處理采用t檢驗(yàn)。,結(jié) 果:,1.乳腺癌組織與癌周組織EnR、EmR含量,Tamoxifen不同劑量對(duì)EnR、EmR的影響,小 結(jié),Tamoxifen能影響核雌激素受體的表達(dá),在低劑量時(shí),EnR、EmR均有明顯升高,可能是和Tam
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