實驗一 還原性糖、脂肪、蛋白質(zhì)的鑒定.ppt_第1頁
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文檔簡介

1、實驗一:可溶性還原糖、脂肪和蛋白質(zhì)的鑒定;實驗原理:可溶性還原糖、蛋白質(zhì)、脂肪、磚紅色沉淀、橙色、紅色和紫色、顏色反應(yīng);2:幾種重要試劑,費林試劑、縮二脲試劑、蘇丹()染液:用于鑒別脂肪的存在;4:實驗方法和步驟;1:溶解度(1)組織樣品溶液的制備:將蘋果洗凈,去皮,切塊,取5g,用少量石英砂研磨,加入5mL水,研磨漏斗墊紗布,過濾,得到樣品溶液;(2)樣品溶液的鑒別:取2mL樣品溶液,將2mL新制備的費林試劑注入試管中,搖勻(淺藍色),水浴煮沸約2分鐘,觀察溶液的顏色變化(先變棕色,后變磚紅色),制備生物組織樣品溶液。取樣,向試管內(nèi)注入2 ml組織樣品溶液,注入試劑,向試管內(nèi)注入2ml新制備

2、的費林試劑,加熱觀察,(向2ml甲液中滴加45滴乙液),2。脂肪的鑒別,(1)切片制作,(2)染色:將23滴蘇丹紅染料溶液滴在花生子葉切片上23分鐘后,染料滴的體積分數(shù)為50。加入12滴蒸餾水并用蓋玻片覆蓋。(3)顯微鏡檢查和鑒定:在低焦度物鏡下觀察,找到花生子葉切片的最薄部分,移動到視野中心,旋轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)換器,用高焦度物鏡觀察(脂肪滴:橙色圓形顆粒),準備實驗材料,去除種皮,切平面,切片和染色,用23滴蘇丹染料溶液染色23分鐘。洗掉浮色,做臨時包裝,放在顯微鏡下觀察(先低功率后高功率);2.蛋白質(zhì)的鑒定;(1)組織樣品溶液的制備:將大豆浸泡12天,去皮,切成薄片,加入少量石英砂和5mL水,研磨漏斗

3、墊上的紗布,過濾得到樣品溶液(用蛋清稀釋10倍以上,否則實驗后難以清洗試管壁);(2)樣品溶液的鑒別另外,取清水加入試管中,搖動變色。2ml,(液體a,液體b),無,對照,制備生物組織樣品溶液,研磨過濾或制備蛋清溶液,注射組織樣品溶液,取試管,注射2ml大豆組織溶液(或蛋清溶液),注射試劑a,加入2ml雙脲試劑a,加入雙脲試劑b,觀察顏色變化,5。注意事項,1費林試劑因此,費林試劑的第一溶液(0.1g/ml氫氧化鈉溶液)和第二溶液(0.05 g/ml硫酸銅溶液)應(yīng)分開制備和儲存,然后在使用時臨時制備。應(yīng)將45滴第二溶液滴入2 ml第一溶液中,然后在制備后立即使用。2.使用利尿劑時,先加入甲(0

4、.1克/毫升氫氧化鈉溶液)創(chuàng)造堿性反應(yīng)環(huán)境,然后加入乙溶液(0.01克/毫升硫酸銅溶液)。在脂肪鑒定實驗中,如果以花生為實驗材料,必須提前34小時浸泡。浸泡時間短,難以切片。如果浸泡時間太長,組織會太軟,切片不容易形成,染色時間也不會太長。在蛋白質(zhì)的鑒定試驗中,如果使用蛋白質(zhì)作為實驗材料,必須進行稀釋,以免實驗后粘在試管上,難以清洗。在鑒別可溶性還原糖的實驗中,當加熱試管中的溶液時,試管底部不應(yīng)接觸燒杯底部。此外,試管口不應(yīng)面向?qū)嶒炚撸悦夥序v的熔體沖出試管而造成燙傷。課堂練習:1。用費林試劑鑒別可溶性還原糖時,溶液顏色的變化過程為(甲),無色磚紅色(沉淀乙),淺藍色磚紅色(沉淀丙),淺藍色磚

5、紅色(沉淀丁),淺藍色棕磚紅色(沉淀丁),丁,二。當用雙脲試劑進行蛋白質(zhì)鑒定實驗時,正確的操作是()A. B .同時加入34滴0.01克/毫升硫酸銅溶液、0.1克/毫升氫氧化鈉溶液、2毫升蛋白質(zhì)稀釋液和34滴0.01克/毫升硫酸銅和0.1克/毫升氫氧化鈉混合物。d .在氫氧化鈉和硫酸銅的混合溶液中加入蛋白稀釋劑。,A,3。當用蘇丹紅染料溶液對脂肪組織進行染色時,可以用來洗去浮色的藥物有:(一)、鹽酸;H2奧;50%酒精;絕對酒精。4.下列實驗中哪一個使用了顯微鏡:(一)可溶性還原糖的鑒定;蛋白質(zhì)鑒定;脂肪的鑒定;d、鑒別淀粉。C,C,5。下列哪種試劑在使用過程中必須加熱()在用費林試劑鑒別可溶性還原糖的過程中;當蘇丹鑒定動物組織中的脂肪時;c .當?shù)鞍踪|(zhì)被縮二脲試劑鑒定時;當?shù)饣浫芤河糜阼b別淀粉時。6、下列能與費林試劑反應(yīng)生成磚紅色沉淀的糖是(a)淀粉;b、果糖;蔗糖;纖維素。在蛋白質(zhì)鑒定實驗中,液體甲必須先加入,液體乙必須先加入的原因是:為什么34滴液體乙不能過量添加?在堿性溶液中,

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