1、第一，基本知識，(a)，PCR技術(shù)的概念是在體外快速擴增DNA片段的技術(shù)，可以使用很少的DNA作為模板，在幾小時內(nèi)復制數(shù)百份DNA拷貝(2)，PCR技術(shù)的應用遺傳疾病診斷，犯罪調(diào)查，古生物學，基因克隆，DNA。因此，DNA復制需要引物操作。2，DNA合成的方向，(1)DNA單鏈兩端的命名，基本單位脫氧核苷酸，1碳，5碳，3碳，在一個核苷酸上的磷酸基團的“OH”和另一個核苷酸分子的第三位碳原子的羥基之間失去了一個水分子，形成了數(shù)量龐大的4茄子脫氧核苷酸3，5-通常DNA的羥基“OH”端稱為3端，磷酸基團端稱為5端，在一個核苷酸上的磷酸基團的“OH”和另一個核苷酸分子的第三個碳原子上的羥基之間失去

2、一個水分子，形成3，5-磷酸二酯鍵。龐大數(shù)量的4茄子脫產(chǎn)核苷酸3，5-磷酸二酯鍵徐璐連接，形成脫產(chǎn)核苷酸鏈。一般來說，DNA的羥基“OH”端稱為3段，磷酸基團的末端通過5段、大量的4茄子脫產(chǎn)核苷酸3，5-磷酸酯鍵徐璐連接，形成脫產(chǎn)核苷酸鏈。一般來說，DNA的羥基“OH”端稱為3段，磷酸基團的端稱為5段，引物：單鏈DNA或RNA，通常2030個堿基與DNA母鏈的堿基序列互補配對。后續(xù)處理：DNA聚合酶I不僅可以引物切開，合成空處的DNA單鏈，然后連接到DNA連接酶不連續(xù)的DNA子鏈，促進DNA聚合酶形成磷酸二酯鍵，還具有校準功能。它每次引進一個核苷酸都要檢查一次，堿基對不能出錯才能收斂到繼續(xù)以下

3、。為什么DNA分子能夠準確地復制？DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)提供了模板。堿基互補配對；DNA聚合酶復查功能。DNA聚合酶不能從一開始合成DNA，只能用3段擴展DNA鏈。DNA合成的方向從子鏈延伸到5段到3段，DNA聚合酶不能從頭合成DNA，DNA鏈只能延伸到3段。DNA合成的方向從子鏈延伸到5段到3段，3，DNA復制的前提是_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _，雙鏈解鎖，溫度控制，DNA雙鏈，單鏈，變性(加熱80-100)，復性(緩慢冷卻)，4，DNA分子的熱變性原理：變性目的：復性目的：變性：高溫

4、聚合酶；調(diào)節(jié)溫度，但不需要海鮮酶。2，PCR的反應過程可以提高大分子模板DNA完全變性的概率。1，周期前一次字典變性，2，PCR通常需要30多次循環(huán)。(1)變性：溫度上升到90以上時，雙鏈DNA就會釋放。(2)復性：溫度下降到約50，兩個引物都通過堿基互補配對與兩個單鏈DNA結(jié)合。(3)延長：溫度上升到約72，溶液中4茄子脫酸核苷酸(A，T，C，G)根據(jù)DNA聚合酶的作用，根據(jù)堿基互補配對原則合成新的DNA鏈。第二，PCR的反應過程、第三，每個周期包括變性復性擴展、(1)PCR循環(huán)-變性、(95變性、(1)PCR循環(huán)-變性、95變性、(1)PCR循環(huán)。其他引物和引物，4，循環(huán)特性：最后一個循環(huán)

5、的產(chǎn)物是下一個循環(huán)的模板。結(jié)果第一個父鏈中有兩個不同的子DNA分子。兩個引物之間的DNA序列是金志洙生長2N，2，實驗階段：準備PCR反應系統(tǒng)的配方P62，使用手指輕輕彈回管壁，離心10分鐘，將離心管插入PCR儀，設定循環(huán)程序，傳記靈動檢測PCR結(jié)果，3，操作提示1，操作提示1使用前，取出所需的試劑冰箱，放在冰上，慢慢融化。3在微量離心管中添加反應成分時，每吸一種試劑，移動器的槍頭就必須更換。添加所有成分后，蓋上嚴密的離心管的蓋子，用手指輕輕彈出管的側(cè)壁，均勻混合反應液，將微量的離心管放在離心機上，離心管底部約10s，將反應液集中在離心管底部，然后放入PCR儀中反應。目的：避免外源性DNA的大

6、量擴增引起假陽性反應。視頻，實驗程序：(1)根據(jù)模板所需的試劑(準備)(2)根據(jù)微量移液器配方，在微量離心管上蓋上每一分鐘(流動液)(3)嚴格離心管的蓋子，然后利用手指(混合)(4) DNA的牙齒特征、四、結(jié)果分析和評價(理解)、二、具體方法如下：1)將樣品稀釋50倍。接受2LPCR反應液，加入98 L蒸餾水。2)將蒸餾水作為空白對照組，將波長260nm的紫外分光光度計(圖5-12)的讀數(shù)調(diào)節(jié)為0。3)將第一階段的DNA稀釋液100L放入比色杯中，測定260nm的光吸收值。4) DNA含量按以下公式計算：DNA含量(g/ml)=50 x(260nm讀數(shù))x稀釋倍數(shù)，理論上計算DNA擴增數(shù)，1個，1個DNA，復制N次，DNA 2 n次，2個，A個DNA，復制N次；快速、高效、靈活、易于操作?；仡櫍篜CR技術(shù)與體內(nèi)DNA復制的差異：1。PCR不需要降解酶。需要在體內(nèi)復制DNA，2 .PCR需要耐熱DNA聚合酶