1、銀杏葉提取物對小鼠離體小腸平滑肌收縮特性的影響,銀杏Ginkgo biloba Lin，別名公孫樹,系銀杏科。銀 杏屬落葉喬木，是中國的特種植物，70的銀杏資源產(chǎn)于中國。,銀杏提取物(Extract of Ginkgo biloba,Egb)作為一種天然藥物，其藥性溫和，療效肯定，毒副作用極小，其單體成分復雜，包括黃酮類化合物、銀杏內酯和白果內酯等，據(jù)報道有抑制血小板活化因子、擴張血管、抗氧化、調血脂等作用，對于心血管疾病、腎病綜合征、糖尿病、血管性癡呆等具有很好療效。,對小鼠離體腸管具有解痙攣作用，也可調節(jié)或對抗由內毒素引起的腸動力紊亂。目前Egb制劑已被廣泛應用于臨床。本實驗旨在通過Egb

2、灌流離體小腸標本，觀察記錄不同濃度Egb對小鼠離體腸道平滑肌的影響，探討銀杏黃酮對腸道平滑肌的作用機制。,【實驗原理】,胃腸道的運動受到自主神經(jīng)系統(tǒng)和分布于胃腸道管壁內神經(jīng)叢的支配，離體小腸平滑肌盡管失去了外來神經(jīng)的支配，但壁內神經(jīng)叢仍然存在，因此在一定程度上離體小腸段能獨立地進行胃腸功能的調控。 小腸平滑肌自動節(jié)律收縮活動就是由于位于縱行肌與環(huán)行肌之間的Cajal間質細胞(Interstitial Cell of Cajal,ICC)產(chǎn)生的慢波節(jié)律而起步的。而這種自發(fā)活動的產(chǎn)生和傳導易受到神經(jīng)遞質、離子環(huán)境、胃腸激素等生物活性物質和藥物的影響。,ICC產(chǎn)生一種起搏電流觸發(fā)的慢波電流，屬于L2

3、型Ca2+電流，因此平滑肌的舒縮依賴于細胞內Ca2+濃度的變化。 平滑肌收縮活動可因胞內Ca2+濃度的降低而減弱，反之增強。肌細胞內Ca2+濃度增加主要通過胞內鈣庫的釋放和胞外攝入兩個途徑。但Ca2+內流過量則會引發(fā)胞內鈣離子超負荷而導致細胞結構和功能的損害。,【實驗材料及方法】,1、實驗材料 1.1 動物；小鼠一只（由動物中心提供） 1.2 藥物；銀杏葉提取物用生理鹽水配置成1% 10% 25%三個濃度的溶液 1.3 儀器；常用手術器械 恒溫平滑肌槽 張力換能器 bl-420生物信號處理系統(tǒng) 1.4 試劑；臺式液, 試驗方法 2.1 小鼠離體小腸平滑肌標本的制備 取健康小鼠，禁食二十四小時，

4、敲死，沿腹部中線切開，取出小腸，置于盛有室溫臺式液的燒杯中，清除腸內容物，將其剪成2-3厘米的腸段作為實驗標本 2.2 收縮活動的記錄方法 將標本的一端固定于L型鉤上，置于盛有20ml臺式液的平滑肌槽中，另一端連接張力換能器，持續(xù)通混合氣體（0.95+0.05co2，每秒1-2個氣泡），溫度（37+0.5），張力負荷2g，,平衡0.5h,待系統(tǒng)穩(wěn)定后，開始試驗。 2.3 銀杏葉提取物對小腸平滑肌自主收縮活動的影響 待小腸收縮曲線穩(wěn)定后，依次加入銀杏葉提取物(1% 10% 25%)不同濃度的溶液，加藥間隔時間為5分鐘，觀察銀杏葉提取物對 小鼠小腸平滑肌自發(fā)收縮活動的影響并記錄每次加入銀杏葉提取物后平滑肌收縮曲線的變化,【預期實驗結果及討論】,不同濃度的銀杏葉提取物能夠不同程度的影響小腸平滑肌自發(fā)性收縮 低濃度和中濃度的EGB對離體小腸平滑肌有興奮作用，隨濃度增加，低濃度EGB的興奮程度成降低趨勢，中濃度的EGB的興奮程度呈升高趨勢;高濃度的EGB引發(fā)抑制效應，隨濃度增加抑制程度降低。,【注意事項】 加藥以前，應先準備好更換用的臺式液 上述藥