1、Chap9 生物堿類(lèi)藥物的分析,第一節(jié) 概述,第二節(jié) 鑒別試驗(yàn),第三節(jié) 含量測(cè)定,小練習(xí),第一節(jié) 概述,（二）形態(tài),（三）顏色,（五）旋光性,（四）溶解性,（一）堿性,定義,生物體內(nèi)一類(lèi)含氮的堿性有機(jī)化合物的總稱(chēng)，大都具有特殊而顯著的生理活性，治療劑量與中毒劑量較接近,植物 動(dòng)物,定義,分類(lèi),1. 堿性強(qiáng)弱取決于分子中氮 原子上所連接基團(tuán)的電效 應(yīng)及立體效應(yīng),3. 可用非水堿量法測(cè)定含量,2. 可與生物堿沉淀劑反應(yīng),（一）堿性,煙堿,（二）形態(tài),多數(shù)為結(jié)晶型固體 mp 有些小分子的呈液態(tài) 煙堿、檳榔堿,麻黃堿 揮發(fā)性 咖啡因 升華性,檳榔堿,共軛體系長(zhǎng)、有助色團(tuán)的可呈色 如 小檗堿黃色，藥根堿

2、紅色， 利血平雖無(wú)色，但有熒光,（三）顏色 多數(shù)無(wú)色,（四）溶解性,季銨型生物堿易溶于水,液體生物堿或小分子生物堿既溶 于水也溶于有機(jī)溶劑,含有酸性基團(tuán)或酯鍵的生物堿可 溶于堿,（五）旋光性 多數(shù)具有旋光性,多數(shù)為左旋，一般左旋體的 活性比右旋體強(qiáng),（l 或 -） 鹽酸麻黃堿、硫酸奎寧、 氫溴酸山莨菪堿,（d 或 +） 鹽酸偽麻黃堿、硫酸奎尼丁、硝酸毛果蕓香堿,（dl 或 ）硫酸阿托品,占絕大多數(shù),例 硫酸奎寧 ChP（2010） 【性狀】比旋度 取本品，精密稱(chēng)定，加0.1mol/L鹽酸溶液制成每1mL中含20mg的溶液，依法測(cè)定（附錄 E），比旋度為237至244。,第二節(jié) 鑒別試驗(yàn),一、熔

3、點(diǎn)測(cè)定法,二、紫外吸收光譜法,三、紅外光譜法,四、沉淀反應(yīng),五、顯色反應(yīng),六、TLC法,一、熔點(diǎn)測(cè)定法,測(cè)定游離堿 mp 測(cè)定衍生物 mp,常與生物堿沉淀試劑(如苦味酸)反應(yīng)的生成物,例 二羥丙茶堿 ChP（2010） 【性狀】熔點(diǎn) 本品的熔點(diǎn)（附錄 C）為160164。,例 己酮可可堿 ChP（2010） 【鑒別】（1）取本品約0.1g，加水10mL溶解，加二硝基苯肼試液5mL，即生成棕黃色沉淀，濾過(guò)，沉淀用水適量洗凈，在105干燥，依法測(cè)定（附錄 C），熔點(diǎn)約為204。,二、紫外吸收光譜法,* 與結(jié)構(gòu)有關(guān) * 與取代基有關(guān) * 與溶劑的種類(lèi)和pH有關(guān),延胡索乙素,UV全圖,小問(wèn)題哪種結(jié)構(gòu)具

4、紫外吸收?,答：具短的共軛體系的結(jié)構(gòu),例 丁溴東莨菪堿 ChP（2010） 【鑒別】（1）取本品，加0.01mol/L鹽酸溶液制成每1mL中含1mg的溶液，照分光光度法（附錄 A）測(cè)定，在252、257與264nm的波長(zhǎng)處有最大吸收。,例 秋水仙堿 ChP（2010） 【鑒別】（1）取含量測(cè)定項(xiàng)下的溶液，照分光光度法（附錄 A）測(cè)定，在243與350nm的波長(zhǎng)處測(cè)定吸收度，吸收度243nm與吸收度350nm的比值應(yīng)為1.702.00。,三、紅外光譜法,標(biāo)準(zhǔn)圖譜對(duì)照法 藥品紅外光譜集,例 二羥丙茶堿 ChP（2010） 【鑒別】（3）本品的紅外光吸收?qǐng)D譜應(yīng)與對(duì)照的圖譜（光譜集12圖）一致。,四、

5、沉淀反應(yīng),H+,常用生物堿沉淀劑 碘化汞鉀、碘化鉍鉀、碘-碘化鉀、 氯化金、氯化汞、鐵氰化鉀、 硅鎢酸、磷鎢酸、磷鉬酸、苦味酸(三硝基苯酚)、 四苯硼鈉、雷氏鹽（硫氰酸鉻鹽）等,沉淀劑 沉淀顏色 HgI22KI BiI3KI I2-KI H3PO412MoO3 苦味酸,橙,褐-暗褐,黃,例 罌粟堿 ChP（2010） 【鑒別】（2）取本品約10mg，加水10mL溶解后，加稀鹽酸3滴與鐵氰化鉀試液5滴，即生成淺黃色沉淀。,例 氯化琥珀膽堿 ChP（2010） 【鑒別】（1）取本品約0.1g，加水10mL溶解后，加稀硫酸10mL與硫氰酸鉻銨試液30mL，生成淡紅色沉淀。,五、顯色反應(yīng),常用顯色劑

6、硫酸、硝酸、甲醛硫酸、釩硫酸、 鉬硫酸、氯酸鉀、三氯化鐵、 香草醛、對(duì)二甲氨基苯甲醛等,例 二鹽酸奎寧 ChP（2010） 【鑒別】（1）取本品約20mg，加水20mL溶解后，分取溶液10mL，滴加稀硫酸，即顯藍(lán)色熒光。,例 馬來(lái)酸麥角新堿 ChP（2010） 【鑒別】（2）取本品約1mg，加水1mL溶解后，加對(duì)二甲氨基苯甲醛試液2mL，5分鐘 后，顯深藍(lán)色。,例 鹽酸麻黃堿 ChP（2010） 【鑒別】（1）取本品約10mg，加水1mL溶解后，加硫酸銅試液2滴與20%氫氧化鈉溶液1mL，即顯藍(lán)紫色；加乙醚1mL，振搖后，放置，乙醚層即顯紫紅色，水層變成藍(lán)色。 雙縮脲反應(yīng),例 丁溴東莨菪堿 C

7、hP（2010） 【鑒別】（3）本品顯托烷生物堿類(lèi)的鑒別反應(yīng)（附錄）Vitali反應(yīng),例 附錄 一般鑒別反應(yīng) ChP（2010） 取供試品約10mg，加發(fā)煙硝酸5滴，置水浴上蒸干，得黃色的殘?jiān)?，放冷，加乙?3滴濕潤(rùn)，加固體氫氧化鉀一小粒，即顯深紫色。,例 硫酸奎寧 ChP（2010） 【鑒別】（2）取本品約5mg，加水5mL溶解后，加溴試液3滴與氨試液1mL，即顯翠綠色。 綠奎寧反應(yīng),例 硫酸奎尼丁 ChP（2010） 【鑒別】（2）取本品約5mg，加水5mL溶解后，加溴試液12滴后，加氨試液1mL，即顯翠綠色。綠奎寧反應(yīng),例 鹽酸嗎啡 ChP（2010） 【鑒別】（1）取本品約1mg，加甲

8、醛硫酸試液1滴，即顯紫堇色。 Marquis反應(yīng),例 罌粟堿 ChP（2010） 【鑒別】（3）取本品5mg，加甲醛硫酸試液1mL，溶液應(yīng)無(wú)色或顯淡黃色，漸漸變成深玫瑰紅色，最后變成紫色。,例 阿片 ChP（2010） 【鑒別】（2）取本品約0.1g，加氯仿5mL與氨試液數(shù)滴，振搖10分鐘，分取氯仿液，置表面皿中，在水浴上蒸干，殘留物為灰白色結(jié)晶，加甲醛硫酸試液2滴，即顯深紅色。,例 茶堿 ChP（2010） 【鑒別】（1）取本品10mg，加鹽酸1mL與氯酸鉀0.1g，置水浴上蒸干，遺留淺紅色的殘?jiān)?，遇氨氣即變?yōu)樽仙?，再加氫氧化鈉試液數(shù)滴，紫色即消失。 紫脲酸銨反應(yīng),例 咖啡因 ChP（201

9、0） 【鑒別】（1）取本品約10mg，加鹽酸1mL與氯酸鉀0.1g，置水浴上蒸干，殘?jiān)霭睔饧达@紫色，再加氫氧化鈉試液數(shù)滴，紫色即消失。,小結(jié)生物堿特殊顯色反應(yīng),雙縮脲反應(yīng),芳環(huán)側(cè)鏈具氨基醇結(jié)構(gòu)藥物的特征反應(yīng),如麻黃堿、偽麻黃堿等,取供試品，加水溶解后，加CuSO42d，20%NaOH1mL，顯藍(lán)紫色，加乙醚1mL振搖，放置，醚層顯紫紅色，水層為藍(lán)色（CuSO4顏色）,Vitali反應(yīng),托烷類(lèi)B藥物中莨菪酸結(jié)構(gòu)的特征反應(yīng),如阿托品、山莨菪堿、東莨菪堿等,取供試品約10mg，加發(fā)煙硝酸5滴，置水浴上蒸干，得黃色的殘?jiān)爬?，加乙?3滴濕潤(rùn)，加固體氫氧化鉀一小粒，即顯深紫色。,綠奎寧反應(yīng),6位含

10、氧喹啉結(jié)構(gòu)藥物的特征反應(yīng),如奎寧、奎尼丁等,取本品約5mg，加水5mL溶解后，加溴試液12滴后，加氨試液1mL，即顯翠綠色。,紫脲酸銨反應(yīng),黃嘌呤生物堿藥物的特征反應(yīng),如咖啡因、茶堿、可可豆堿等,取本品約10mg，加鹽酸1mL與氯酸鉀0.1g，置水浴上蒸干，殘?jiān)霭睔饧达@紫色，再加氫氧化鈉試液數(shù)滴，紫色即消失。,Marquis反應(yīng),酚羥基異喹啉生物堿藥物的特征反應(yīng),如嗎啡、乙基嗎啡、可待因等,取供試品約1mg，加甲醛硫酸試液1滴，即顯具色醌式化合物。,六、TLC法,生物堿鹽 極性較大,游離生物堿 堿性,硅膠 弱酸性吸附劑,導(dǎo)致嚴(yán)重拖尾現(xiàn)象,1. 展開(kāi)劑中加入堿性試劑 （如氨水、二乙胺、吡啶）

11、2. 用硅膠中加堿液（如氫氧化鈉） 3. 改用其他吸附劑（如堿性氧化鋁）,防止斑點(diǎn)拖尾的措施,第四節(jié) 含量測(cè)定,一、非水堿量法二、提取中和法三、酸性染料比色法四、置換滴定法五、硫氰化鉻銨法,（一）測(cè)定方法,一、非水堿量法,1. 原理,2. 方法,（78mL）,（1030mL）,（0.1mol/L）,半微量滴定,終點(diǎn)指示 結(jié)晶紫 電位法,例 馬來(lái)酸麥角新堿 ChP（2010） 【含量測(cè)定】取本品約60mg，精密稱(chēng)定， 加冰醋酸20mL溶解后，加結(jié)晶紫指示液1滴， 用高氯酸滴定液（0.05mol/L）滴定，至溶液 顯藍(lán)綠色，并將滴定的結(jié)果用空白試驗(yàn)校正。 每1mL高氯酸滴定液（0.05mol/L）

12、相當(dāng)于 22.07mg的C19H23N3O2 C4H4O4 。,計(jì)算 咖啡因 ChP（2010） 【含量測(cè)定】精密稱(chēng)取本品0.1423g，加醋酐-冰醋酸（5:1）的混合液25mL，微熱使溶解，放冷，加結(jié)晶紫指示液1滴，用高氯酸滴定液（0.1036mol/L）滴定，至溶液顯黃色，消耗高氯酸滴定液（0.1036mol/L）7.09mL；并將滴定結(jié)果用空白試驗(yàn)校正，空白試驗(yàn)消耗高氯酸滴定液（0.1036mol/L）0.03mL。每1mL高氯酸滴定液(0.1mol/L)相當(dāng)于19.42mg的C8H10N4O2。,注意事項(xiàng),1. 水分對(duì)非水堿量法的影響,A. 高氯酸滴定液中水分的排除 加入計(jì)算量的醋酐,

13、水分亦消耗高氯酸滴定液,配制1000mL（0.1mol/L）HClO4滴定液所需HClO4溶液的體積,HClO4 （AR） 7072% 相對(duì)密度1.75,102.09,18.02,V1.0897.0%,8.530%1.75,計(jì)算配制1000mL（0.1mol/L）HClO4 滴定液所需醋酐的體積 （配制時(shí)規(guī)定取70% HClO4 8.5mL）,注意： HClO4溶液不能直接與醋酐接觸,配制方法 取無(wú)水冰醋酸750mL，加入高氯酸（7072%）8.5mL，搖勻，在室溫下緩緩加醋酐24mL，邊加邊搖，放冷，加適量無(wú)水冰醋酸使成1000mL，搖勻，放置24h。,原因：兩者混合，劇烈反應(yīng)，甚至引起爆炸

14、!,B. 冰醋酸中水分的排除 加入計(jì)算量的醋酐,102.09,18.02,V1.0897.0%,%水VHAc1.05,C. 試劑中微量水分,做空白試驗(yàn),VV樣V空,用高氯酸滴定液（0.1mol/L）滴定，至溶液顯藍(lán)綠色，并將滴定的結(jié)果用空白試驗(yàn)校正。,2. 溫度對(duì)非水堿量法的影響,冰醋酸 易揮發(fā)性、膨脹系數(shù)大,溫差10 重新標(biāo)定,溫差10 按校正公式重新計(jì)算 高氯酸滴定液濃度,HClO4 滴定液（0.1mol/L ） 標(biāo)定 24 0.1023mol/L 使用 30 ？,例,HClO4 滴定液（0.1mol/L ） 標(biāo)定 30 0.1023mol/L 使用 24 ？,例,3. 指示終點(diǎn)方法,（1

15、）電位法,（2）指示劑法常用結(jié)晶紫,指示電極 玻璃電極 參比電極 甘汞電極（飽和KCl 的無(wú)水甲醇溶液）,結(jié)晶紫 變色情況 紫深藍(lán)純藍(lán)藍(lán)綠綠黃綠黃,(堿式色),(酸式色),判斷何時(shí)為終點(diǎn)，先用電位法確定終點(diǎn)的顏色,滴定不同的堿性藥物的終點(diǎn)顏色不同,例 氫溴酸山莨菪堿 ChP（2010） 【含量測(cè)定】用高氯酸滴定液（0.1mol/L） 滴定，至溶液顯藍(lán)綠色，,例 丁溴東莨菪堿 ChP（2010） 【含量測(cè)定】用高氯酸滴定液（0.1mol/L） 滴定至溶液顯純藍(lán)色，,例 咖啡因 ChP（2010） 【含量測(cè)定】用高氯酸滴定液（0.1mol/L） 滴定，至溶液顯黃色，,例 鹽酸麻黃堿 ChP（201

16、0） 【含量測(cè)定】用高氯酸滴定液（0.1mol/L） 滴定至翠綠色，,（二）適用范圍,有機(jī)弱堿、有機(jī)堿的有機(jī)酸鹽、有機(jī)堿的氫鹵酸鹽、有機(jī)堿的硫酸鹽、有機(jī)堿的硝酸鹽、有機(jī)酸的堿金屬鹽,pKb813的溶劑的選擇 HAc Ac2O Kb 10-8 10 -10 冰醋酸 Kb 10-10 10 -12 冰醋酸醋酐 Kb 10 -12 醋酐,弱堿（Kb10-8）,小問(wèn)題當(dāng)Kb10-8時(shí)用何法測(cè)定?,答：直接酸堿中和法,（三）生物堿鹽的滴定,1. 有機(jī)酸鹽（置換反應(yīng)）,BH+ A- + HClO4 BH+ ClO4- + HA,或 BH A + HClO4 BHClO4 + HA,2. 氫鹵酸鹽（氫鹵酸酸

17、性較強(qiáng)）,BH+ X- + HClO4 BH+ ClO4- + HX,BH+ Cl- + HClO4 BH+ ClO4- + HCl,BH+ Br- + HClO4 BH+ ClO4- + HBr,冰醋酸中酸性強(qiáng)弱的比較 HClO4 HBr H2SO4 HCl HSO4- HNO3,排除干擾方法 ChP（2010） 加13倍量的醋酸汞的冰醋酸液,BH+ Ac - + HClO4 BH+ ClO4- +HAc,2BH+ X- + HgAc2 2BH+Ac - + HgX2,例 氫溴酸山莨菪堿 ChP（2010） 【含量測(cè)定】取本品約0.2g，精密稱(chēng)定， 加冰醋酸20mL溶解后（必要時(shí)微熱使溶解）

18、， 加醋酸汞試液5mL與結(jié)晶紫指示液1滴，用 高氯酸滴定液（0.1mol/L）滴定，至溶液顯 藍(lán)綠色，并將滴定的結(jié)果用空白試驗(yàn)校正。 每1mL的高氯酸滴定液（0.1mol/L）相當(dāng)于 38.63mg的C17H23NO4HBr。,例 二鹽酸奎寧 ChP（2010） 【含量測(cè)定】取本品約0.15g，精密稱(chēng)定， 加醋酐5mL與醋酸汞試液3mL溶解后，加結(jié)晶 紫指示液1滴，用高氯酸滴定液（0.1mol/L） 滴定至溶液顯藍(lán)綠色，并將滴定結(jié)果用空白試 驗(yàn)校正。每1mL高氯酸滴定液（0.1mol/L）相 當(dāng)于19.87mg的C20H24N2O22HCl。,3. 硫酸鹽（反應(yīng)摩爾比有差異）,（1）硫酸阿托品

19、 HClO4直接滴定,反應(yīng)摩爾比為11,另需注意結(jié)晶水的影響,（2）硫酸奎寧 HClO4直接滴定,反應(yīng)摩爾比為13,反應(yīng)摩爾比為14,（3）硫酸奎寧片 提取出奎寧后，直接用HClO4滴定,硫酸奎寧, 反應(yīng)摩爾比13,HClO4,3,HAc,硫酸奎寧片, 反應(yīng)摩爾比14,（4）加高氯酸鋇后，HClO4滴定,pKa=1.92(H2O),pKa=4.76( HAc),用高氯酸鋇沉淀硫酸鹽,反應(yīng)摩爾比為12,小結(jié)硫酸奎寧反應(yīng)摩爾比,高氯酸鋇的作用,消除硫酸根的干擾,BaSO4,排除方法 *改用電位法指示終點(diǎn) *加入還原劑VitC,4. 硝酸鹽的測(cè)定,計(jì)算 取硫酸奎寧片（規(guī)格0.3g/片）10片，除去

20、糖衣后，精密稱(chēng)定，重3.5201g ，研細(xì)，精密稱(chēng)取 0.4086g，置分液漏斗中，加氯化鈉0.5g與0.1mol/ L氫氧化鈉溶液10mL，混勻，精密加氯仿50.0mL振搖10分鐘，靜置，分取氯仿液，用干燥濾紙濾 過(guò)，棄去初濾液，精密量取續(xù)濾液25.0mL，加醋 酐5mL與二甲基黃指示液2滴，用高氯酸滴定液 （0.09932mol/L）滴定，至溶液顯玫瑰紅色，消 耗高氯酸滴定液（0.09932mol/L）8.97mL，,并將滴定結(jié)果用空白試驗(yàn)校正，空白試驗(yàn)消耗高氯酸滴定液（0.09932mol/L）0.04mL。求本片相當(dāng)于標(biāo)示量的百分含量。（硫酸奎寧M782.96）,小結(jié)各種鹽的非水堿量法

21、,二、提取中和法,生物堿鹽 易溶于水,游離生物堿 易溶于有機(jī)溶劑,（一）原理,（提?。?B,（二）方法,堿化試劑,1. 直接滴定法,2. 剩余滴定法,（Kb10-8）,3. 堿滴定液剩余滴定法,（Kb10-8）,溶解,定量過(guò)量,定量過(guò)量,（Kb10-8）,例 昆明山海棠片 ChP（2010） 【含量測(cè)定】 取本品60片，除去糖衣，精密稱(chēng)定，研細(xì)，精密稱(chēng)取適量（約相當(dāng)于25片），置200mL錐形瓶中，加適量硅藻土（每取本品1g，加硅藻土0.2g），混勻，加乙醇70mL，加熱回流40分鐘，放冷，濾過(guò)，濾渣中再加乙醇50mL，加熱回流30分鐘，放冷，濾過(guò)，合并濾液，置水浴上蒸干，殘?jiān)欲}酸溶液（11

22、00）30mL，置水浴上攪拌使溶解，放冷，濾過(guò)，,殘?jiān)儆名}酸溶液（1200）同法提取3次（20 mL、15mL、15mL），合并濾液于分液漏斗中，加氨試液使溶液呈堿性，用乙醚振搖提取4次（40mL、30mL、25mL、20mL），合并乙醚液，用水振搖洗滌2次，每次10mL，乙醚液用濾紙濾過(guò)，醚液置于已稱(chēng)定重量的蒸發(fā)皿中，在低溫水浴上蒸去乙醚，殘?jiān)屑尤肷僭S無(wú)水乙醇，蒸干，在100干燥至恒重，稱(chēng)定重量，計(jì)算，即得。本品每片含總生物堿不得少于1.0mg。,特點(diǎn) 堿性中等（pKb = 4.76）,（三）討論,1. 堿化試劑,優(yōu)點(diǎn) 能使大多數(shù)生物堿（pKb=69）游離 不易使酯類(lèi)水解 不易與酚類(lèi)成鹽

23、 不易使脂肪類(lèi)物質(zhì)形成乳化 易揮發(fā)除去,常用氨水,應(yīng)具備 不與水相混 沸點(diǎn)較低 對(duì)生物堿溶解度大 不與生物堿或堿化試劑反應(yīng),常用氯仿、乙醚,2. 提取溶劑,氯仿缺點(diǎn) 遇強(qiáng)堿或蒸干時(shí)會(huì)分解成HCl 可溶解某些生物堿的鹽酸鹽 易形成乳化 與某生物堿成不溶于水的分子結(jié)合體,乙醚缺點(diǎn) 水中溶解度較大 沸點(diǎn)太低 易氧化 醚溶性生物堿較少,提取次數(shù) 一般提取4次,例 二鹽酸奎寧注射液 ChP（2010） 【含量測(cè)定】精密量取本品適量，（約相當(dāng) 于二鹽酸奎寧0.15g），置分液漏斗中，加水使 成20mL，加氨試液使成堿性，用氯仿分次振搖 提取，第一次25mL，以后每次各10mL，至奎 寧提盡為止，每次得到的

24、氯仿液均用同一份水 洗滌2次，每次5mL，洗液用氯仿10mL振搖提 取，合并氯仿液，置水浴上蒸去氯仿，加無(wú)水 乙醇2mL，再蒸干，在105干燥1小時(shí)，,放冷，加醋酐5mL與冰醋酸10mL，溶解后，加 結(jié)晶紫指示液1滴，用高氯酸滴定液（0.1mol/L） 滴定至溶液顯藍(lán)色，并將滴定結(jié)果用空白試驗(yàn) 校正。每1mL高氯酸滴定液（0.1mol/L）相當(dāng) 于19.87mg的C20H24N2O22HCl。,生物堿 + 滴定液 強(qiáng)酸弱堿鹽,宜選酸性范圍變色的指示劑,奎寧類(lèi) pKb1=6， pKb210 溴甲酚紫（5.26.8） pKb 67 甲基紅（4.26.3） pKb 78 溴酚藍(lán)（2.84.6）,查文

25、獻(xiàn),3. 指示劑的選擇,乳化的消除 重新提取 破壞乳化平衡 靜置、攪拌、 熱敷、分離、過(guò)濾或加劑、 乙醇、酸、堿等,4. 乳化的預(yù)防和消除,三、酸性染料比色法,（一）原理,+,測(cè)定方法,*直接 (BH+ In-)有機(jī)相A有機(jī)相,A水相,A水相,*間接,（二）討論,pH H+ + In- HIn,*沒(méi)有足夠的In -與BH+結(jié)合,pH BH+ B H+,*沒(méi)有足夠的H+與B結(jié)合,*B進(jìn)入有機(jī)相,1. 水相的最適pH值,例 用溴麝香草酚藍(lán)作染料時(shí)（BTB）,一元堿與 BTB 分子結(jié)合比為1:1時(shí)，水相 大約 pH 5.2 6.4,二元堿與 BTB 分子結(jié)合比為1:2時(shí)，則應(yīng)在較低的 pH 3.0

26、5.8 提取離子對(duì)，以滿(mǎn)足第二元堿成鹽,應(yīng)具備 *能與有機(jī)堿定量結(jié)合 *生成的離子對(duì)在有機(jī)相中溶解度大 *染料在有機(jī)相中極少溶解 *A樣大，A空小,溴麝香草酚藍(lán)（BTB），logE=8.0，A空大 溴甲酚綠（BCG）、溴甲酚紫（BCP） 甲基橙，logE=5.47,2. 酸性染料,優(yōu)點(diǎn) *與離子對(duì)形成氫鍵，提取率高 *不與水相混溶 * A樣大,二氯甲烷、二氯乙烯、苯、甲苯、四氯化碳,3. 有機(jī)溶劑 常用氯仿,干擾 * 使有機(jī)相混濁，A * 帶入水相染料，A,排除 * 加脫水劑（無(wú)水Na2SO4） * 用濾紙過(guò)濾,4. 水分的影響,足量即可,5. 酸性染料的濃度,6. 有色雜質(zhì)的排除,非水堿量法

27、 適用于原料藥的測(cè)定 1. 準(zhǔn)確度、精密度高 2. 取樣量較大,提取酸堿滴定法 適用于制劑的測(cè)定 1. 適宜pKb69的藥物 2. 不適宜對(duì)熱不穩(wěn)定和揮發(fā)性的藥物,三種含量測(cè)定方法的比較,酸性染料比色法 1. 準(zhǔn)確度、靈敏度高，專(zhuān)屬性好 2. 適用于樣品少、制劑和體內(nèi)藥物的測(cè)定,例 硫酸阿托品注射液的含量測(cè)定 對(duì)照品溶液的制備 精密稱(chēng)取在120干燥至恒重的硫酸阿托品對(duì)照品(C17H23NO3)2 H2SO4 24.98mg ，置25mL量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻；精密量取5mL，置100mL量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，即得。 供試品溶液的制備 精密量取本品（規(guī)格1mL：0.5mg）5mL，

28、置50mL量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，即得。,測(cè)定法 精密量取對(duì)照品溶液與供試品溶液各2 mL，分別置預(yù)先精密加入氯仿10mL的分液漏斗中，各加溴甲酚氯溶液2.0mL，振搖提取2分鐘后，靜置使分層，分取澄清的氯仿液，照分光光度法，在420nm波長(zhǎng)處分別測(cè)定吸收度為0.428 和0.396 。計(jì)算注射液中C17H23NO3)2 H2SO4H2O含量。 (C17H23NO3)2H2SO4 =676.82 (C17H23NO3)2H2SO4H2O = 694.84,已知：(C17H23NO3)2H2SO4 =676.82 (C17H23NO3)2H2SO4H2O = 694.84測(cè)得：供試品溶液的

29、吸收度為0.396 對(duì)照品溶液的吸收度為0.428,95：111115可選擇的藥物 A、阿托品 B、嗎啡 C、兩者均可 D、兩者均不可 111、具有酯結(jié)構(gòu) 112、為兩性化合物 113、顯較強(qiáng)堿性 114、用提取容量法測(cè)定 115、用堿性染料比色法,D,C,A,B,A,96：77、酸件染料比色法中，水相的 pH值過(guò)小，則 A、能形成離子對(duì) B、有機(jī)溶劑提取能完全 C、酸性染料以陰離子狀態(tài)存在 D、生物堿幾乎全部以分子狀態(tài)存在 E、酸性染料以分子狀態(tài)存在,96：129、生物堿類(lèi)藥物制劑的測(cè)定方法 A、直接用有機(jī)溶劑提取后，用H2SO4標(biāo)準(zhǔn)液滴 B、堿化后用有機(jī)溶劑提取，再用NaOH溶液滴定 C、

30、堿化后用有機(jī)溶劑提取,蒸去有機(jī)溶劑后用中 性醇溶解,再用H2SO4標(biāo)準(zhǔn)液滴定 D、堿化后用有機(jī)溶劑提取, 蒸去有機(jī)溶劑再加入 定量的H2SO4，用NaOH標(biāo)準(zhǔn)液回滴 E、酸化后,用有機(jī)溶劑提取，采用適宜方法滴定,96：136、用非水溶液滴定法測(cè)定鹽 酸嗎啡含 量時(shí)，應(yīng)使用的試劑是 A、5醋酸汞冰醋酸液 B、鹽酸 C、冰醋酸 D、二甲基甲酰胺 E、高氯酸,97：130、非水溶液滴定法測(cè)定硫酸 奎寧含量的反應(yīng)條件為 A、冰醋酸一醋酐為溶劑 B、高氯酸滴定液（0.1mol/L）滴定 C、1mol高氯酸與1/3 mol硫酸奎寧 反應(yīng) D、僅用電位法指示終點(diǎn) E、溴酚藍(lán)為指示劑,99：78、非水溶液滴定

31、法測(cè)定硫酸奎寧原 料的含量時(shí)，可以用高氯酸直接 滴定冰醋酸介質(zhì)中的供試品，1 摩爾硫酸奎寧需要消耗高氯酸的 摩爾數(shù)為 A、1 B、2 C、3 D、4 E、5,例15 A、雙縮脲反應(yīng) B、Marquis反應(yīng) C、兩者皆是 D、兩者皆不是 26、鹽酸麻黃堿 27、某些生物堿類(lèi)藥物 28、鹽酸嗎啡 29、咖啡因 30、硫酸奎尼丁,D,D,B,C,A,例6、生物堿類(lèi)藥物一般鑒別試驗(yàn)包括 A、熔點(diǎn)測(cè)定 B、顯色反應(yīng) C、沉淀反應(yīng) D、光譜法（紫外、紅外） E、薄層色譜法,例7、能夠產(chǎn)生Vitali反應(yīng)的藥物是 A、鹽酸嗎啡 B、硫酸奎寧 C、磷酸可待因 D、鹽酸麻黃堿 E、硫酸阿托品,例8、酸性染料比色

32、法測(cè)定生物堿類(lèi)藥 物含量，主要的影響因素有 A、水相的pH B、氫鹵酸的干擾 C、酸性染料的選擇 D、有機(jī)溶劑的選擇 E、水分的干擾,例9、非水滴定法測(cè)定生物堿氫鹵酸 鹽時(shí)，要消除氫鹵酸鹽對(duì)滴定 的影響，須預(yù)先入 。,醋酸汞,例10、提取中和法測(cè)定生物堿類(lèi)藥物 含量是用 和 的 性質(zhì)進(jìn)行提取，而后滴定。最 常用的提取溶劑是 ，最 常用的堿化試劑是 。,生物堿鹽易溶于水,游離生物堿易溶于有機(jī)溶劑,氯仿,氨水,例11、（ ）生物堿類(lèi)藥物的堿性強(qiáng) 弱只與氮原子的個(gè)數(shù)有關(guān)，而與氮 原子在分子中結(jié)合狀態(tài)無(wú)關(guān)。,例12、（ ）生物堿的硝酸鹽在非 水溶劑中用高氯酸滴定時(shí)能置換 出硝酸，酸性太強(qiáng)，干擾滴定突 躍。,例13、如何才能使生物堿類(lèi)藥物在硅 膠薄層板上順利展開(kāi)？,1、在展開(kāi)劑中加入堿化試劑 如氨水、二乙胺或吡啶 2、用堿處理過(guò)的硅膠鋪制薄層板 3、改用堿性氧化鋁鋪板,關(guān)鍵問(wèn)題是克服色斑拖尾的問(wèn)題, 可采用以下方法加以克服： 1、在展開(kāi)劑中加入堿化試劑，如氨水 、二乙胺或吡啶 2、用堿處理過(guò)的硅膠鋪制薄層板 3、改用堿性氧化鋁鋪板,如何才能使生物堿類(lèi)藥物在薄層板上順利展開(kāi)？,取標(biāo)示量為0