1、實驗三 顯微鏡的使用、霉菌的形態(tài)及細菌三型的觀察,一、實驗目的,觀察霉菌的形態(tài)結(jié)構(gòu)特征 學習掌握霉菌水浸片制作的基本方法p74,實驗（一） 霉菌的形態(tài)觀察,霉菌：凡在營養(yǎng)基質(zhì)上形成絨毛狀、棉絮狀或蜘蛛網(wǎng)形絲狀菌體的真菌，統(tǒng)稱為霉菌。霉菌包括分類學上許多不同綱或類的真菌，它們分別屬于藻狀菌綱、子囊菌綱、擔子菌綱和半知菌類。霉菌菌絲分為有隔菌絲和無隔菌絲兩類.,二、實驗原理,黑曲霉,屬于半知菌亞門, 菌絲有隔,細胞多核；部分氣生菌絲細胞形成特化的厚壁、膨大的足細胞，由足細胞的中間稍呈垂直地向上延長，形成分生孢子梗。,青霉,屬于半知菌亞門,分生孢子梗基部無足細胞，孢子梗頂端不膨大成囊，而是多次分枝形

2、成掃帚狀，小梗末端形成分生孢子。,根霉,橫向生長的菌絲產(chǎn)生假根，附著在基質(zhì)上。 菌絲無隔、無性生殖產(chǎn)生孢囊孢子，有性生殖產(chǎn)生接合孢子。,三、實驗材料,真菌培養(yǎng)物 1. 黑曲霉、根霉、青霉的培養(yǎng)物。 2. 黑曲霉、根霉、青霉示范片。 顯微鏡、載玻片、接種環(huán)、解剖針、酒精燈、鑷子等。 50酒精、蒸餾水等。,四、實驗步驟：霉菌水浸片的制作和觀察：1、黑曲霉、青霉的水浸片的制作,取一塊干凈的載玻片，滴加50的乙醇一滴 用解剖針挑取少量有孢子的霉菌菌絲（注意曲霉和青霉需要適當挑取一點培養(yǎng)基）浸入乙醇洗滌 于另一干凈載玻片上加一滴蒸餾水，再將洗滌后的菌絲置于蒸餾水中，用解剖針將菌絲盡量分散， 蓋上蓋玻片，

3、用橡皮或塑料請輕輕敲擊。 鏡檢：10 x ，40 x物鏡觀察。,2、葡枝根霉水浸片的制作,先用 10 x 物鏡直接觀察生長在培養(yǎng)皿蓋上的根霉菌絲，因菌絲是立體形態(tài)，觀察時應將顯微鏡載物臺上下移動，以便看清菌絲全貌。 再取一載玻片，滴一滴蒸餾水，解剖針挑取少量根霉菌絲浸入水滴中，用解剖針將菌絲撥散、分開，蓋上蓋玻片。10 x 物鏡觀察菌絲、假根、孢子囊。,黑曲霉,觀察黑曲霉菌絲分隔情況和分生孢子著生情況（著重辨認分生孢子梗、足細胞和分生孢子）,青霉的帚狀枝與分生孢子,觀察青霉分生孢子著生情況（著重辨認分生孢子梗和分生孢子）,葡枝根霉,囊軸,觀察根霉菌絲情況和子囊孢子情況（著重辨認孢子囊、包囊梗、

4、假根）,五、實驗結(jié)果,繪制青霉 (40 x)、黑曲霉 (40 x)、根霉(10 x)的形態(tài)，注明各部分名稱。,六、思考題,你認為在顯微鏡下，細菌和霉菌的主要區(qū)別是什么？ 在霉菌的制片過程中，你覺得要注意哪些環(huán)節(jié)才能制得好的片子?,實驗(二) 油鏡的使用,學習并掌握普通光學顯微鏡的構(gòu)造和油鏡的使用技術(shù)及維護的基本知識 初步認識細菌的基本形態(tài),實驗目的,實驗原理,顯微鏡的構(gòu)造 1.光學部分:目鏡 、物鏡 、照明裝置(聚光鏡、虹彩光圈、反光鏡等)。它使檢視物放大，生成物象。,2.機械部分:鏡座、鏡臂、鏡筒、物鏡轉(zhuǎn)換器、載物臺、載物臺轉(zhuǎn)移器、粗調(diào)節(jié)器、細調(diào)節(jié)器等部件。它起著支持調(diào)節(jié) 固定等作用。,圖1

5、-1-2 光學顯微鏡的成像原理,油鏡使用的原理 油浸接物鏡。當光線由反光鏡通過玻片與鏡頭之間的空氣時，由于空氣與玻片的密度不同，使光線受到曲折，發(fā)生散射，降低了視野的照明度。若中間的介質(zhì)是一層油（其折射率與玻片的相近），則幾乎不發(fā)生折射，增加了視野的進光量，從而使物象更加清晰。,浸沒油與玻璃的折射率相近,很多原來由于在透鏡及載片表面的反射和折射而損失的 光線可以進入物鏡，使照明亮度提高，改善觀察效果。,二、顯微操作,現(xiàn)場演示,1.低倍鏡觀察：粗調(diào)、細調(diào)。依次再進行中倍、高倍觀察 2.油鏡觀察：高倍鏡下找到清晰的物象后，在標本中央滴一滴香柏油，使油鏡鏡頭浸入香柏油中，細調(diào)至看清物象為止。 3.換片：另換新片，必須從第1條開始操作。 4.用后復原：觀察完畢，上懸鏡筒，先用擦鏡紙擦去鏡頭上的油，然后再用擦鏡紙沾取少量二甲苯擦去殘留的油，最后用擦鏡紙擦去殘留的二甲苯，后將鏡體全部復原。注意：油鏡使用完畢后一定要用二甲苯擦拭鏡頭,用油鏡觀察細菌三型永久裝片。,1.不準擅自拆卸顯微鏡的任何部件，以免損壞。 2.鏡面只能用擦鏡紙擦，不能用手指或粗布，以保證光潔度 3.觀察標本時，必須依次用低、中、高倍鏡，最后用油鏡。當目視接目鏡時，特別在使用油鏡時，切不可使用粗調(diào)節(jié)器，以免壓碎玻片或損傷鏡面。 4.拿顯微鏡時，一定要右手拿鏡臂，左手托鏡座，不可單手拿，更不可傾斜拿。 5.顯微鏡應存放在