1、果蠅雜交實驗方案,匯報人：謝思駿、黃柏如、 黎宇航、楊文斌,1.實驗的目的： 1.1 驗證基因伴性遺傳 的規(guī)律 1.2 驗證基因連鎖與交 換規(guī)律并計算重組值,1.目的,黑腹果蠅， Drosophila melanogaster,1,黑腹果蠅生活史,2,黑腹果蠅的飼養(yǎng)方法,3,研究的性狀及顯隱性,4,2.實驗材料：,黑腹果蠅也稱黑尾果蠅（學名：Drosophila melanogaster），是被人類研究得最徹底的生物之一，為模式生物。其名字源于它喜好腐爛的水果以及發(fā)酵的果汁,黑腹果蠅,黑腹果蠅,科學分類： 界：動物界 Animalia 門：節(jié)肢動物門 Arthropoda 綱：昆蟲綱 Inse

2、cta 亞綱：有翅亞綱 Pterygota 目：雙翅目 Diptera 科：果蠅科 Drosophilidae 屬：果蠅屬 Drosophila 種：黑腹果蠅 D. melanogaster,第一季度,單擊編輯副標題,性別鑒別,1,黑腹果蠅雌性體長2.5毫米, 雄性較之要小。雄性腹部有黑斑 (black patch), 前肢有性梳 (sexcombs)，而雌性沒有, 可以此來作區(qū)別。,第一季度,單擊編輯副標題,突變形狀鑒別,1,黑腹果蠅生活史,2,果蠅的生活周期長短與溫度有密切的關系。 雌蠅可以一次產下5個0.5毫米大小的卵，總共約400個。它們有絨毛膜和一層卵黃膜包被，其發(fā)育速度受環(huán)境溫度影

3、響。,生活周期長短與飼養(yǎng)溫度的關系,黑腹果蠅生活史,2,果蠅在25C，從卵到成蠅需要十天左右，成蟲可活2633天。果蠅生活史如下圖：,黑腹果蠅的飼養(yǎng)方法,3,果蠅以酵母菌為主要食料，凡能發(fā)酵的基質都可做為果蠅飼料。實驗室里主要用玉米。 原種每2-4周換一次培養(yǎng)基，看到幼蟲后就將成蟲趕去。各品系之間避免雜交,研究的形狀及顯隱性,4,本次的研究 野生型黑腹果蠅： 紅眼、長翅、直剛毛（+、+、+） 突變型黑腹果蠅： 白眼、小翅、卷剛毛（ww、mm、snsn）,親本的純種培養(yǎng),1,遺傳式,2,果蠅雜交,3,3.實驗技術流程,P XwXw X XWY F1 XWXw X XwY F2 0.25 XWXw

4、：0.25 XwXw：0.25XWY：0.25 XwY,遺傳式-伴性遺傳,P wmsn/wmsn X +/Y F1 wmsn/+ X wmsn/Y F2 待測,遺傳式連鎖與交換,親本的純種培養(yǎng),1,伴性遺傳的觀察,2,伴性遺傳的進一步觀察,3,連鎖與交換的觀察,4,2.實驗步驟,親本的純種培養(yǎng)親本飼養(yǎng)瓶的準備,a. 飼料配制： 根據上表，取應加水量的一半，加入瓊脂，煮沸，待充分溶解后加糖煮沸溶解 取另一半水混合玉米粉，加熱，調成糊狀。 將上述兩者混合，煮沸。 待稍冷后加入酵母粉及丙酸，充分調勻分裝。,親本的純種培養(yǎng)親本飼養(yǎng)瓶的準備,b飼料瓶的準備 取中型指管，以紗布包的棉花球做瓶塞。消毒后加入

5、飼料，冷卻后用酒精棉花擦拭內壁，插入消毒過的吸水紙作為幼蟲化蛹的干燥場所。,親本的純種培養(yǎng)親本飼養(yǎng)瓶的準備,c. 親代果蠅挑選 將兩個品系的果蠅麻醉后挑選外觀完整健康的野生型果蠅4對，突變型8對，掃入準備好的飼養(yǎng)瓶中培養(yǎng)。 雌雄果蠅的區(qū)分：在肉眼看來,雄果蠅的尾部有黑點,較尖.雌果蠅的沒有,是白的,較圓顯微鏡下雄果蠅的第一對腹肢上有性梳,和梳子長得很像。,親本的純種培養(yǎng)果蠅的麻醉與轉瓶,先將長有果蠅的培養(yǎng)瓶在海綿墊上敲，使之全部震落在培養(yǎng)瓶底，然后迅速打開培養(yǎng)瓶塞，將果蠅倒入去蓋的麻醉瓶中，然后立即塞上棉塞。稍微打開棉塞，并在其上滴加23滴乙醚。待呈昏迷狀態(tài)（附肢收縮，雙翅緊貼背部）后將其倒到

6、干凈的濾紙上觀察。 觀察過程中如若果蠅醒來則可滴幾滴乙醚于濾紙上（不可直接滴在果蠅上），用麻醉皿立即扣住復蘇的果蠅，數秒鐘后繼續(xù)觀察。 觀察結束后，用毛筆將果蠅掃入平放的培養(yǎng)瓶中，待其醒來后才可將瓶豎起,伴性遺傳的觀察雜交用飼養(yǎng)瓶的準備,同4.1.1 a、b,伴性遺傳的觀察親本處女蠅的挑選,親本在25C下培養(yǎng)7天后，即第8天，待瓶中出現蛹并且呈黑色時，將親本果蠅麻醉棄去。 第9天將瓶中的成蠅麻醉并挑出雌性至另一培養(yǎng)瓶，此即處女蠅。此后每12小時挑選一次直至挑出10只處女蠅。,伴性遺傳的觀察雄性果蠅的挑選,麻醉野生型果蠅培養(yǎng)瓶中的果蠅，挑選出10只外觀完整健康的雄果蠅放入上述處女蠅培養(yǎng)瓶中。,伴性遺傳的觀察 F1代生長情況的觀察,伴性遺傳的觀察 F1代性狀的觀察記錄及統(tǒng)計,伴性遺傳的進一步觀察 雜交用飼養(yǎng)瓶的準備,同4.1.1 a、b,伴性遺傳的進一步觀察 雜交親本的挑選與轉瓶,子一代瓶中收集30對果蠅（不必再挑選處女蠅），注意區(qū)分雌雄，轉移至3個新的培養(yǎng)瓶中，每瓶10對，25培養(yǎng)。 轉瓶：同4.1.2,伴性遺傳的進一步觀察 F2代生長情況的觀察,伴性遺傳的進一步觀察 F2代性狀的觀察記錄及統(tǒng)計,連鎖與交換的觀察 雜交用飼養(yǎng)瓶的準備,同4.1.1 a、b,連鎖與交換的觀察 雜交用飼養(yǎng)瓶的準備,子一代瓶中收集30對果蠅（不必再挑選處女蠅