1、專題1 基因工程 1.1 DNA重組技術(shù)的基本工具（測）（滿分60分，40分鐘完成） 1圖1為某種質(zhì)粒簡圖，圖2表示某外源DNA上的目的基因，小箭頭所指分別為限制性核酸內(nèi)切酶EcoR、BamH、Hind 的酶切位點。下列有關(guān)敘述錯誤的是( )A. 在基因工程中若只用一種限制酶完成對質(zhì)粒和外源DNA的切割，則可選EcoRB. 如果將一個外源DNA分子和一個質(zhì)粒分別用EcoR酶切后，再用DNA連接酶連接，形成一個含有目的基因的重組DNA，此重組DNA中EcoR酶切點有1個C. 為了防止質(zhì)粒和含目的基因的外源DNA片段自身環(huán)化，酶切時可使用BamH和Hind 兩種限制酶同時處理D. 一個圖1所示的質(zhì)

2、粒分子經(jīng)EcoR切割后，含有2個游離的磷酸基團【答案】B2某環(huán)狀DNA分子共含2000個堿基，其中腺嘌呤占30%，用限制性核酸內(nèi)切酶BamHI（識別序列為）完全切割該DNA分子后產(chǎn)生2個片段，則下列有關(guān)敘述中，正確的是（ ）A一個該DNA分子連續(xù)復(fù)制2次，共需游離的胞嘧啶脫氧核苷酸1600個B含BamH I的溶液中加入雙縮脲試劑A震蕩后即出現(xiàn)紫色C一個該DNA分子含有2個BamHI的識別序列D一個該DNA分子經(jīng)BamHI完全切割后產(chǎn)生的核酸片段，共含有8個游離的磷酸基團【答案】C【解析】DNA分子共含2000個堿基，其中腺嘌呤占30%，則胞嘧啶=2000（1-30%2）/2=400個，則一個D

3、NA分子復(fù)制兩次得到4個DNA分子，所以需要游離的胞嘧啶脫氧核苷酸4003=1200個，A錯誤；BamHI的溶液中含有酶，化學(xué)本質(zhì)是蛋白質(zhì)，加入雙縮脲試劑A無色，再加3-4滴雙縮脲試劑B成紫色，B錯誤；環(huán)狀DNA分子被切成兩個DNA分子片段說明，含有2個BamHI的識別序列，C正確；兩個DNA分子片段4個磷酸二酯鍵斷裂，共有4個磷酸基團，D錯誤。3如圖為細胞內(nèi)某基因（15N標(biāo)記）局部結(jié)構(gòu)示意圖，A占全部堿基的20%，下列說法錯誤的是（ ）A維持該基因結(jié)構(gòu)穩(wěn)定的主要化學(xué)鍵有磷酸二酯鍵和氫鍵B在無變異條件下，該基因的堿基的比值為C限制性核酸內(nèi)切酶作用部位，DNA解旋酶作用于部位D將該基因置于15N

4、培養(yǎng)液中復(fù)制3次后,含15N的脫氧核苷酸鏈占【答案】D4與“限制性內(nèi)切酶”作用部位完全相同的酶是：（ ）A反轉(zhuǎn)錄酶 BRNA聚合酶 CDNA連接酶 D解旋酶【答案】C【解析】反轉(zhuǎn)錄酶能催化反轉(zhuǎn)錄過程，但其作用部位不是磷酸二酯鍵，A錯誤；RNA聚合酶的作用是催化轉(zhuǎn)錄形成RNA，能形成RNA上的磷酸二酯鍵，而限制酶是作用于DNA上的磷酸二酯鍵，故兩者不完全相同，B錯誤；DNA連接酶連接的是兩個DNA片段之間的磷酸二酯鍵，作用于與限制性核酸內(nèi)切酶相對的部位，C正確；DNA解旋酶能解開雙鏈DNA，破壞的是堿基對之間的氫鍵，D錯誤。5已知正常的珠蛋白基因(以A表示)經(jīng)Mst限制性核酸內(nèi)切酶切割后可得到長

5、度為1.15 kb和0.2 kb的兩個片段(其中0.2 kb的片段通常無法檢測到)，異常的珠蛋白基因(以S表示)由于突變恰好在Mst限制性核酸內(nèi)切酶切割點上，因而失去了該酶切位點，經(jīng)Mst限制性核酸內(nèi)切酶處理后只能形成一個1.35 kb的DNA片段，如圖1；現(xiàn)用Mst限制性核酸內(nèi)切酶對編號為1、2、3的三份樣品進行處理，并進行DNA電泳（電泳時分子量越小擴散越快），結(jié)果如圖2，則1、2、3號樣品所對應(yīng)個體的基因型分別是（以A、S表示相關(guān)的基因）（ ）A.SS、AS、AABAA、AS、SSCAS、SS、AADAS、AA、SS【答案】A6下列屬于基因工程工具酶的是（ ）限制性核酸內(nèi)切酶 DNA水解

6、酶 DNA聚合酶 DNA連接酶 RNA聚合酶 解旋酶A B C D【答案】A【解析】限制性核酸內(nèi)切酶在基因工程中用于切割目的基因和運載體，正確；DNA水解酶催化DNA水解，錯誤；解旋酶和DNA聚合酶均在DNA復(fù)制中發(fā)揮作用，錯誤；DNA連接酶在基因工程中用于連接目的基因和運載體，以構(gòu)建基因表達載體，正確；RNA聚合酶在轉(zhuǎn)錄過程中發(fā)揮催化作用，錯誤。綜上所述，A項正確，B、C、D三項均錯誤。7.下列關(guān)于哏制酶和DNA連接酶的描述，正確的是（ ）ADNA連接酶可以恢復(fù)DNA分子中的氫鍵B在基因工程中可以用DNA聚合酶代替DNA連接酶C它們的化學(xué)本質(zhì)都是蛋白質(zhì)D它們不能被反復(fù)利用【答案】C8.現(xiàn)有一

7、長度為1000堿基對（by）的DNA分子，用限制性核酸內(nèi)切酶Eco R1酶切后得 到的DNA分子仍是1000by，用Kpn1單獨酶切得到400by和600by兩種長度的DNA分子，用EcoR，Kpn同時酶切后得到200by和600by兩種長度的DNA分子該DNA分子的酶切圖譜正確的是（ ）A B. C D.【答案】D【解析】DNA用Kpnl單獨酶切會得到600by和200by兩種長度的DNA分子，與題意不符，A錯誤；DNA用EcoRI單獨酶切會得到800by和200by兩種長度的DNA分子，與題意不符，B錯誤；DNA用EcoR1酶切后得到200by和800by兩種長度的DNA分子，與題意不符，

8、C錯誤；DNA用EcoR1酶切后得到的DNA分子是1000by，用Kpn1單獨酶切得到400by和600by兩種長度的DNA分子，用EcoRI、Kpnl同時酶切后得到200by和600by兩種長度的DNA分子，與題意相符，D正確。9.科學(xué)家已能運用基因工程技術(shù)，讓羊合成并由乳腺分泌抗體。下列相關(guān)敘述中正確的是（ ）該技術(shù)將導(dǎo)致定向變異DNA連接酶把目的基因與運載體黏性末端的堿基對連接起來蛋白質(zhì)中的氨基酸序列可為合成目的基因提供資料受精卵是理想的受體細胞A B C D【答案】B【解析】基因工程的基本原理是將不同生物的基因進行重組，出可以說是定向的變異，正確；限制酶切割將目的基因和運載體切割的部位

9、都是相同的磷酸二酯鍵，而DNA連接酶是連接限制酶切割后形成的磷酸二酯鍵，錯誤；人工合成目的基因有兩種方法：一是通過mRNA單鏈 DNA雙鏈DNA；二是根據(jù)蛋白質(zhì)氨基酸序列mRNA序列推測出結(jié)構(gòu)基因核苷酸序列通過化學(xué)方法人工合成目的基因正確；將目的基因?qū)雱游锛毎畛Ｓ玫姆椒ㄊ秋@微注射技術(shù)此方法的受體細胞多是受精卵，正確。綜上所述，B正確。10.下列關(guān)于質(zhì)粒的敘述，正確的是（ ）A質(zhì)粒是廣泛存在于細菌細胞中的一種顆粒狀細胞器B細菌質(zhì)粒的復(fù)制過程一定是在宿主細胞外獨立進行的C質(zhì)粒只有在導(dǎo)入宿主細胞后才能在宿主細胞內(nèi)復(fù)制D質(zhì)粒是細菌細胞質(zhì)中能夠自主復(fù)制的小型環(huán)狀DNA分子【答案】D11.可作為“分子

10、運輸車”的是：（ ）天然質(zhì)粒 人工改造的質(zhì)粒 噬菌體的衍生物 動植物病毒A B C D【答案】C【解析】人工改造的質(zhì)粒、噬菌體的衍生物、動植物病毒都可以作為“分子運輸車”。天然質(zhì)粒必須經(jīng)過人工改造才能真正被用作載體，選C。12.對下圖所示粘性末端的說法錯誤的是（ ）A甲、乙、丙粘性末端是由各自不同的限制性核酸內(nèi)切酶催化產(chǎn)生的B甲、乙具相同的粘性末端可形成重組DNA分子，但甲、丙之間不能CDNA連接酶作用位點在b處，催化磷酸基團和脫氧核糖之間形成化學(xué)鍵D切割甲的限制性核酸內(nèi)切酶不能識別由甲、乙片段形成的重組DNA分子【答案】C【解析】甲、乙、丙粘性末端是由各自不同的限制性核酸內(nèi)切酶催化產(chǎn)生的，A

11、正確；甲、乙的粘性末端雖然不完全相同，但是其露出來的堿基是配對的，所以可形成重組DNA分子，但甲、丙之間不能，B正確；DNA連接酶作用位點在a處，催化磷酸基團和脫氧核糖之間形成化學(xué)鍵，C錯誤；甲的限制酶識別的是GAATTC，在GA之間切割；乙的限制酶識別的是CAATTG，在CA之間切割；由甲、乙片段形成的重組DNA分子的序列為CAATTC，所以切割甲的限制性核酸內(nèi)切酶不能識別由甲、乙片段形成的重組DNA分子，D正確。13.下列關(guān)于DNA連接酶的敘述，正確的是（ ）催化相同黏性末端的DNA片段之間的連接催化不同黏性末端的DNA片段之間的連接催化兩個黏性末端互補堿基間氫鍵的形成催化DNA分子兩條鏈

12、的脫氧核糖與磷酸間磷酸二酯鍵的形成A B C D【答案】D14.下面是3種限制性核酸內(nèi)切酶對DNA分子的識別序列和剪切位點圖（箭頭表示切點，切出的斷面為黏性末端）。相關(guān)敘述錯誤的是（ ）A. 不同的限制酶有不同的識別序列和切割位點，體現(xiàn)了酶的專一性B. 限制酶2和3識別的序列都包含6個堿基對C. 限制性酶1和酶3剪出的粘性末端相同D. 能夠識別和切割RNA分子內(nèi)一小段核苷酸序列的酶只有限制酶2【答案】D【解析】酶具有專一性，不同的限制酶有不同的識別序列和切割位點，A正確；圖中可得，限制酶2和3識別的序列分別是CCGCGG和GGATCC，均為6個堿基對，B正確；限制酶1和3剪出的粘性末端相同，均

13、為-GATC-，C正確；限制酶只能識別特定的DNA序列，因此三種限制酶均不能識別和切割RNA中核糖核苷酸序列，D錯誤。15.如表為幾種限制酶的切割位點，相關(guān)敘述不正確的是 （ ）A. 限制酶能夠水解DNA上特定的磷酸二酯鍵 B. BamH I切割的序列一定能被Sau3A I切割C. Bcl I切割的序列一定能被Sau3A I切割 D. 以上信息說明限制酶沒有特異性和專一性【答案】D16.作為基因的運輸工具運載體，必須具備的條件之一及理由是（ ）A. 能夠在宿主細胞中穩(wěn)定的保存下來并大量復(fù)制，以便提供大量的目的基因B. 具有多個限制酶切點，以便于目的基因的表達C. 具有某些標(biāo)記基因，以便目的基因

14、能夠與其結(jié)合D. 它的參與一定能夠使目的基因在宿主細胞中成功表達【答案】A【解析】作為運載體必須具備的條件之一是能夠在宿主細胞中穩(wěn)定地保存下來并大量復(fù)制，以便提供大量的目的基因，A正確；作為運載體必須具備的條件之一是具有多個限制酶切點，以便于目的基因的插入，B錯誤；作為運載體必須具備的條件之一是具有某些標(biāo)記基因，以便檢測目的基因是否導(dǎo)入了受體細胞，C錯誤；基因是選擇性表達的，所以目的基因?qū)胧荏w細胞后不一定能夠表達，D錯誤。17.EcoRI和Sma I限制酶識別的序列均由6個核苷酸組成，但切割后產(chǎn)生的結(jié)果不同，其識別序列和切割點（圖中箭頭處）分別如下圖所示，請據(jù)圖分析正確的是（ ）A所有限制酶

15、的識別位點均由6個核苷酸序列組成BSmaI限制酶切割后產(chǎn)生的是黏性末端C用連接酶連接平末端和黏性末端的連接效率一樣D細菌細胞內(nèi)限制酶可以切割外源DNA，防止外源DNA入侵【答案】D【解析】不是所有限制酶的識別序列均由6個核苷酸組成，也有少數(shù)限制酶的識別序列由4、5或8個核苷酸組成，A項錯誤；據(jù)圖可知，Sma酶在它識別序列的中心軸線處將DNA片段切開，產(chǎn)生的是平末端，B項錯誤；用DNA連接酶連接平末端的效率比較低，C項錯誤；細菌細胞內(nèi)的限制酶可以切割外源DNA，防止外源DNA入侵，是一套完善的防御體系，D項正確。18.下列有關(guān)限制性核酸內(nèi)切酶的敘述中錯誤的是（ ）A用限制酶從一個DNA分子中部獲

16、取一個目的基因時，4個磷酸二酯鍵斷裂B限制酶識別序列越短，則該序列在DNA中出現(xiàn)的幾率就越小CCATG和GGATCC序列被限制酶切出的黏性末端堿基數(shù)相同D用不同的限制酶處理含目的基因的片段和質(zhì)粒，也可能形成重組質(zhì)?！敬鸢浮緽19.下面是3種限制性核酸內(nèi)切酶對DNA分子的識別序列和剪切位點圖（箭頭表示切點，切出的斷面為黏性末端）。相關(guān)敘述錯誤的是（ ）限制酶1：GATC限制酶2：CCGCGG限制酶3：GGATCCA不同的限制酶有不同的識別序列和切割位點，體現(xiàn)了酶的專一性B限制酶2和3識別的序列都包含6個堿基對C限制酶1和酶3剪出的黏性末端相同D能夠識別和切割RNA分子內(nèi)一小段核苷酸序列的酶只有限制酶2【答案】D【解析】酶具有專一性，不同的限制酶有不同的識別序列和切割位點，A正確；限制酶2和3識別的序列分別是CCGCGG和GGATCC，均為6個堿基對，B正