1、配制100ml 、100umol/L 的過氧化氫溶液需要多少30%的過氧化氫原液？請(qǐng)寫出計(jì)算過程。答：首先計(jì)算其摩爾濃度：若30%為其質(zhì)量百分?jǐn)?shù)雙氧水30%濃度的試劑（上海國藥集團(tuán)出品），室溫時(shí)實(shí)測(cè)密度為：1,122 g/L，所以，1L 30%含量的雙氧水中過氧化氫含量為：1122g/L 1L30%=337g又H2O2的分子量為34.0146，那么1L 30%含量的雙氧水中過氧化氫濃度為：337/34.0146=9.908 mol/L.100ml10-3100 umol/L10-6=9.908 mol/LVV=10-6L=1 ul若30%為體積分?jǐn)?shù)100% H2O2密度是1,440 g/L,

2、30 ml H2O2的質(zhì)量為1440 g/L 30 ml10-3=43.2g，30%含量的雙氧水中過氧化氫濃度為：43.2/34.0146/0.1=12.7 mol/L.100ml10-3100 umol/L10-6=12.7 mol/LVV=7.910-7L=0.79 ul植物組織中過氧化氫含量測(cè)定植物在逆境下或衰老時(shí)，由于體內(nèi)活性氧代謝加強(qiáng)而使H2O2發(fā)生累積。H2O2可以直接或間接地氧化細(xì)胞內(nèi)核酸，蛋白質(zhì)等生物大分子，并使細(xì)胞膜遭受損害，從而加速細(xì)胞的衰老和解體。過氧化氫酶可以清除H2O2，是植物體內(nèi)重要的酶促防御系統(tǒng)之一。因此，植物組織中H2O2含量和過氧化氫酶活性與植物的抗逆性密切相

3、關(guān)。本實(shí)驗(yàn)用分光光度法測(cè)定過氧化氫含量，利用高錳酸鉀滴定法和紫外吸收法測(cè)定過氧化氫酶活性。 【原理】H2O2與硫酸鈦（或氯化鈦）生成過氧化物鈦復(fù)合物黃色沉淀，可被HSO4溶解后，在415nm波長(zhǎng)下比色測(cè)定。在一定范圍內(nèi)，其顏色深淺與H2O2濃度呈線性關(guān)系?！緝x器和用具】研缽；移液管0.2ml2支，5ml1支；容量瓶10ml7個(gè)，離心管5ml8支；離心機(jī)；分光光度計(jì)?！驹噭?00mol/L H2O2丙酮試劑：取30%分析純H2O2 57l，溶于100ml，再稀釋100倍；2mol/L硫酸；5%（W/V）硫酸鈦；丙酮；濃氨水。 【方法】 1.制作標(biāo)準(zhǔn)曲線：取10ml離心管7支，順序編號(hào)，并按表加

4、入試劑。 測(cè)定H2O2濃度標(biāo)準(zhǔn)曲線配置表試劑（ml）離 心 管 號(hào)1234567100mol/L H2O200.10.20.40.60.81.04下預(yù)冷丙酮1.00.90.80.60.40.205%硫酸鈦0.10.10.10.10.10.10.1濃氨水0.20.20.20.20.20.20.23000r/min 離心10min，棄去上清夜，留沉淀2mol 硫酸5.05.05.05.05.05.05.0待沉淀完全溶解后，將其小心轉(zhuǎn)入10ml容量瓶中，并用蒸餾水少量多次沖洗離心管，將洗滌液合并后定容至10ml刻度，415nm波長(zhǎng)下比色。 2.樣品提取和測(cè)定：(1)稱取新鮮植物組織2g，按材料與提取

5、劑11的比例加入4下預(yù)冷的丙酮和少許石英砂研磨成勻漿后，轉(zhuǎn)入離心管3000 r/min下離心10min，棄去殘?jiān)锨逡杭礊闃悠诽崛∫骸?2)用移液管吸取樣品提取液1ml，按表1加入5%硫酸鈦和濃氨水，待沉淀形成后5000rpm/min離心10min，棄去上清液。沉淀用丙酮反復(fù)洗滌35次，直到去除植物色素。(3)向洗滌后的沉淀中加入2mol硫酸5ml，待完全溶解后，與標(biāo)準(zhǔn)曲線同樣的方法定容并比色。 3.結(jié)果計(jì)算： 植物組織中H2O2含量(mol/g Fw)= 式中 C標(biāo)準(zhǔn)曲線上查得樣品中H2O2濃度（mol）； Vt樣品提取液總體積（ml）； V1測(cè)定時(shí)用樣品提取液體積（ml）； FW植物組織鮮重（g）。 4、實(shí)驗(yàn)結(jié)果:1234567H2O2濃度00.10.20.40.60.81.0吸光度A00.0490.1260.3150.4250.6250.778得出標(biāo)準(zhǔn)曲線如下圖： 測(cè)定所得樣品的吸光度為0.188，帶入得0.2459，考慮到稱取鮮重2.116g 代入公式含量為H2O