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1、實(shí)驗(yàn)五葉綠體的分離與熒光觀察,一. 實(shí)驗(yàn)?zāi)康?1 通過植物細(xì)胞葉綠體的分離,了解細(xì)胞器分離的一般原理與方法;了解差速離心 Differential centrifugation特點(diǎn)與用途 2 了解菠菜葉綠體的形態(tài)、分布與數(shù)量。,二實(shí)驗(yàn)原理,采用差速離心分離細(xì)胞器; 沉降順序:核線粒體溶酶體與過氧化物酶體內(nèi)質(zhì)網(wǎng)與高基體核蛋白體; 葉綠體具有熒光現(xiàn)象,可利用熒光顯微鏡觀察。 菠菜葉富含葉綠體,可采用徒手切片觀察 其形態(tài)和分布;,Low speed,High speed,Differential centrifugation,三、實(shí)驗(yàn)用品,1器材 離心機(jī)、研缽或組織搗碎機(jī)、顯微鏡、天平、離心管、紗布
2、、燒杯、量筒、滴管、載玻片、蓋玻片 2材料 新鮮菠菜葉 3試劑 0.35mol/L氯化鈉溶液,四、實(shí)驗(yàn)方法,(一)葉綠體的分離與觀察 取新嫩菠菜葉,洗凈檫干、去梗,稱30g,分批放入研缽。 加入0.35mol/L氯化鈉溶液, 共150ml,研磨,制成勻漿; 將勻漿用層紗布過濾于燒杯中; 取濾液ml在1000r/min離心min,取上清; 上清液3000r/min離心min去上清,沉淀即為葉綠體; 加0.35mol/L氯化鈉溶液懸浮沉淀; 取葉綠體懸液滴于載玻片上,加蓋片: 普通光鏡下觀察;熒光顯微鏡下演示 (二)菠菜葉徒手切片觀察 新嫩菠菜葉斜切面片,0.35mol/L氯化鈉溶液滴;加蓋片輕壓:光鏡下觀察葉綠體在表皮細(xì)胞和保衛(wèi)細(xì)胞中的分布;熒光顯微鏡下演示。,五實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析,1簡(jiǎn)述:葉
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