附2： 本科畢業(yè)論文（設(shè)計(jì)）工作記錄學(xué) 院 化學(xué)化工學(xué)院專 業(yè) 09級(jí)制藥工程 學(xué) 號(hào) 200908120212指導(dǎo)教師 李文麗 附3：畢業(yè)論文（設(shè)計(jì)）選題申請(qǐng)表（學(xué)生用表）學(xué)院： 時(shí)間： 年 月 日選題情況選題名稱菌菇多糖提取及體外抗氧化性研究學(xué)生姓名陳博學(xué)號(hào)200908120212專業(yè)09級(jí)制藥工程選題來(lái)源導(dǎo)師推薦 學(xué)生自擬 其它選擇本題目原因菌菇多糖作為“生物反應(yīng)調(diào)節(jié)劑”，具有調(diào)節(jié)機(jī)體免疫力、抗腫瘤、抗病毒、健胃護(hù)肝、降血脂、血糖和膽固醇、抗血栓、抗衰老、抗輻射、祛痰鎮(zhèn)咳等多種藥理作用。此外，菌菇多糖還可以迅速修復(fù)破損的細(xì)胞組織。食用真菌有一種成份被稱為粘多糖，它有兩大特點(diǎn)，一是親和力好；二是滲透力強(qiáng)，這兩大特點(diǎn)決定了它會(huì)很快被人體細(xì)胞吸收。同時(shí)菌菇多糖具有極高的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值。比如，猴頭菇，其蛋白質(zhì)含量高達(dá)26.3%，金針菇的蛋白質(zhì)含量高達(dá)16.3%，這兩種食用菌中所含蛋白質(zhì)是我們平時(shí)所攝取蛋白質(zhì)的二到三倍，直接補(bǔ)充人體對(duì)蛋白質(zhì)的需求，滿足細(xì)胞對(duì)蛋白質(zhì)的營(yíng)養(yǎng)需要。基于以上菌菇多糖特點(diǎn)，所以選擇本題目。指導(dǎo)教師意見(jiàn)指導(dǎo)教師簽字: 年 月 日學(xué)院意見(jiàn)院長(zhǎng)簽字： 年 月 日附4：畢業(yè)論文（設(shè)計(jì)）任務(wù)下達(dá)書(shū)學(xué)生陳博（學(xué)號(hào)200908120212）:現(xiàn)將畢業(yè)論文（設(shè)計(jì)）任務(wù)下達(dá)書(shū)發(fā)給你。畢業(yè)論文（設(shè)計(jì)）任務(wù)下達(dá)書(shū)內(nèi)容如下：一、畢業(yè)論文（設(shè)計(jì)）題目菌菇多糖提取及體外抗氧化性研究二、主要內(nèi)容香菇和雞腿菇分別經(jīng)熱水浸提, 反復(fù)醇提、洗滌、真空干燥后得到兩種多糖提取物。通過(guò)多糖抗食用油脂的氧化作用、利用Fenton 反應(yīng)檢測(cè)對(duì)羥基自由基( OH) 的清除作用、對(duì)鄰苯三酚自氧化系統(tǒng)產(chǎn)生的超氧陰離子自由基( O2- ) 的清除作用以及在模擬胃液條件下清除NO2- 的作用, 對(duì)這兩種不同來(lái)源的食用真菌多糖的體外抗氧化活性進(jìn)行了研究。結(jié)果表明:兩種多糖提取物都具有體外抗氧化性能, 香菇多糖提取物的抗活性氧自由基能力和清除NO- 的能力優(yōu)于雞腿菇多糖提取物。三、基本要求通過(guò)查閱相關(guān)文獻(xiàn)資料，設(shè)計(jì)好具體的研究方案，經(jīng)過(guò)大量和細(xì)致的實(shí)驗(yàn)工作，可得到系列實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。四、主要參考文獻(xiàn) 1 Marx J L. Ox ygen f ree radicals linked t o many d iseases J .S cien ce, 1987, 235: 529-531. 2 Yang J H, Linb H C, Mau b J L. Ant iox idant propert ies of s ever al com mercial mus hrooms J . Food Ch emis t ry, 2002,77: 229-235. 3 Makot o Miyauch i, Hideaki Nakamura, Fumio Furukaw a, e tal . Promoting ef f ects of combined an tiox idant and s od iumnit rit e t reatmen t on f or est omach carcinogenesis in rat s af terinit iat ion w ith N -m ethyl-N-nit ro-N-nit ros o-guan idine J .Cancer Let t er s, 2002, 178: 19-24. 4 Mats umura Y, Egamia M, S at akea C, e t al . Inhib itoryef f ect s of pept ide-bound polys accharides on lipid oxidation inemu lsions J . Food Ch emis t ry, 2003, 83: 107-119. 5 Liu F, Ooi V E C, Chang S T . Free radical scavenging act ivitiesof mu shroom polysaccharide ex tract J . Lif e Sci ences ,1997, 60: 763-771. 6 Lee B C, Bae J T , Pyo H B. Biological act ivit ies of thepolysaccharides pr od uced f rom su bmer ged cu lture of th e edible Basidiomycet e Grif oal f r ond osa J . En zyme and Micr obial T echnology, 2003, 32: 574-581. 7 梅盛華. 碘量比色法測(cè)定食品油脂中過(guò)氧化值的研究 J . 海峽預(yù)防醫(yī)學(xué)雜志, 2000, 6( 2) : 48. 8 李平. 山茱萸多糖PFCC 抗氧化性能研究 J . 食品工業(yè)科技, 2003, 24( 5) : 36-39. 9 張宏. 四種鄰苯三酚自氧化法測(cè)定超氧化物歧化酶活性方法的比較 J . 內(nèi)蒙古大學(xué)學(xué)報(bào), 2002, 33 ( 6) : 677-681.五、進(jìn)程安排階 段起 止 日 期主 要 內(nèi) 容12012年9月10日2012年10月31日論文選題，開(kāi)題，開(kāi)展實(shí)驗(yàn)2 2012年11月1日2013年2月23日查資料，寫(xiě)畢業(yè)論文提綱32013年2月24日2013年4月15日完成論文初稿42013年4月16日2013年5月6日論文修改，定稿，答辯六、本畢業(yè)設(shè)計(jì)（論文）任務(wù)下達(dá)書(shū)于201*年*月*日發(fā)出。畢業(yè)設(shè)計(jì)（論文）應(yīng)于*年*月*日前完成后交指導(dǎo)教師，由指導(dǎo)教師評(píng)閱后提交畢業(yè)論文（設(shè)計(jì)）答辯委員會(huì)。 指導(dǎo)教師（簽名）： 學(xué)生（簽名）： 注：畢業(yè)設(shè)計(jì)（論文）任務(wù)下達(dá)書(shū)一式兩份，一份給學(xué)生，一份留學(xué)院存檔。 附5：本科畢業(yè)論文（設(shè)計(jì)）文獻(xiàn)綜述（學(xué)生用表）學(xué)生姓名陳博學(xué)號(hào)200908120212題目菌菇多糖提取及體外抗氧化性研究生物體內(nèi)的有氧代謝過(guò)程不斷地產(chǎn)生自由基,當(dāng)它的存在超出機(jī)體防護(hù)系統(tǒng)所具有的清除能力,就會(huì)直接或間接地引起蛋白質(zhì)變性、酶失活、多糖降解、DNA 鏈斷裂、生物膜結(jié)構(gòu)損傷、細(xì)胞解體乃至機(jī)體病變和死亡 1 。許多抗氧化補(bǔ)充劑或食品中包含的抗氧化物質(zhì)將對(duì)減少機(jī)體的損傷提供幫助 2 。選擇水溶性的多糖或蛋白類, 且有溫和的抗氧化作用的物質(zhì), 更是生產(chǎn)安全食品包括油脂所期待的4 。而且許多研究已經(jīng)證明菇類食品中的多糖是有效的, 沒(méi)有毒性的, 具有清除自由基和代謝調(diào)節(jié)作用的天然物質(zhì) 56 。目前關(guān)于香菇多糖和雞腿菇多糖生物活性的研究主要集中于免疫調(diào)節(jié)作用, 抗腫瘤活性, 關(guān)于它們的體外抗氧化活性研究未見(jiàn)報(bào)道。因此, 本文將研究香菇和雞腿菇兩種食用菇多糖提取物的體外抗氧化作用, 為多糖抗氧化作用的進(jìn)一步研究和利用提供科學(xué)依據(jù)。實(shí)驗(yàn)的基本步驟如下；香菇和雞腿菇分別經(jīng)熱水浸提, 反復(fù)醇提、洗滌、真空干燥后得到兩種多糖提取物。通過(guò)多糖抗食用油脂的氧化作用、利用Fenton 反應(yīng)檢測(cè)對(duì)羥基自由基( OH) 的清除作用、對(duì)鄰苯三酚自氧化系統(tǒng)產(chǎn)生的超氧陰離子自由基( O2- ) 的除作用以及在模擬胃液條件下清除NO2- 的作用, 對(duì)這兩種不同來(lái)源的食用真菌多糖的體外抗化活性進(jìn)行了研究。實(shí)驗(yàn)方法多糖提取物的制備將已干燥的香菇與雞腿菇粉碎, 過(guò)40 目篩, 加入10 倍體積的蒸餾水,80 C 下攪拌提取5 h, 濃縮提取液。濃縮液用流水透析48 h, 適當(dāng)濃縮, 然后加入3 倍體積= 0. 95 的乙醇沉淀, 靜置過(guò)夜, 離心收集沉淀。沉淀物依次用無(wú)水乙醇、丙酮、乙醚洗滌, 抽濾瓶抽干。然后再將沉淀物溶于水, 重復(fù)醇提、洗滌, 50 C 真空干燥后分別得到淺褐色香菇多糖提取物和雞腿菇多糖提取物。多糖提取物的化學(xué)分析采用3, 5-二硝基水楊酸法( DNS 試劑法) 測(cè)定多糖提取物中的多含量; 凱氏定氮法測(cè)定多糖提取物中的蛋白質(zhì)含量;用烏氏粘度計(jì)測(cè)定多糖提取物的特性粘度; 并將多糖提取物進(jìn)行紅外光譜分析。抗油脂氧化性能分析取新煉制的豬油和豆油若干份, 每份10 mL, 分別加入一定量的Vc、香菇多糖提取物和雞腿菇多糖提取物, 置于( 601)C恒溫振蕩器中, 強(qiáng)化氧化, 與空白對(duì)照, 每隔一定時(shí)間取樣檢測(cè)豬油和豆油的過(guò)氧化值( POV 值) 。以POV 值來(lái)表示油脂的氧化速度, 進(jìn)而衡量抗氧化劑的活性。POV 值測(cè)定采用碘量分光光度法 7 。抗活性氧自由基能力分析超氧陰離子自由基( O2- ) 和羥基自由基( OH) 是生物體內(nèi)存在的主要活性氧自由基, 活性氧自由基與生命現(xiàn)象的關(guān)系最為密切。因此, 通過(guò)測(cè)定OH 和O2- 的清除率來(lái)評(píng)價(jià)多糖提取物抗活性氧自由基的能力。( 1) 清除羥基自由基的分析方法: 利用Fenton反應(yīng), 檢測(cè)各種自由基清除劑對(duì)OH 的清除作用 8 。由于OH 可特異地使藩紅花的紅色褪色, 根據(jù)褪色程度用比色法來(lái)衡量OH 的含量, 采用固定反應(yīng)時(shí)間法, 在波長(zhǎng)520 nm 處測(cè)量含被測(cè)物反應(yīng)液的吸光度, 并與空白液比較, 從而測(cè)定被測(cè)物對(duì)OH 的清除作用。( 2) 清除超氧陰離子自由基的分析方法: 利用鄰苯三酚自氧化反應(yīng)測(cè)定自由基清除劑對(duì)其產(chǎn)生的超氧陰離子自由基的清除作用。實(shí)驗(yàn)按照改進(jìn)的鄰苯三酚自氧化法( 簡(jiǎn)稱325 nm 法) 9 進(jìn)行。體外模擬胃液的NO2- 清除反應(yīng)取不同濃度的多糖提取物溶液1 mL, 加入5 ug / mL 的NaNO2 標(biāo)準(zhǔn)液0. 6 mL, 用檸檬酸緩沖液調(diào)pH= 3,混勻后加塞置37 C 恒溫水浴中避光反應(yīng)30 min,準(zhǔn)時(shí)取出各管 10 。用鹽酸萘乙二胺比色法測(cè)定各管結(jié)果表明: 兩種多糖提取物都具有體外抗氧化性能, 香菇多糖提取物的抗活性氧自由基能力和清除NO2- 的能力優(yōu)于雞腿菇。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明兩種食用菇類多糖提取物具有相當(dāng)顯著的抗氧化活性, 并且香菇多糖提取物的作用好于雞腿菇多糖提取物。值得注意的是香菇多糖提取物中的蛋白質(zhì)/ 多糖比率和平均分子量均高于雞腿菇多糖提取物。紅外光譜分析結(jié)果表明香菇多糖提取物為a-吡喃多糖, 雞腿菇多糖提取物為b-吡喃多糖。香菇和雞腿菇多糖提取物都具有較明顯的抗氧化活性, 可開(kāi)發(fā)為抗衰老保健食品輔料或功能因子。兩種多糖提取物都為混合物, 進(jìn)一步的分離純化和探討多糖抗氧化作用的機(jī)制仍需要進(jìn)行。不夠可加附頁(yè)附6：本科畢業(yè)論文（設(shè)計(jì)）開(kāi)題報(bào)告書(shū)（學(xué)生用表）學(xué)生姓名陳博學(xué)號(hào)200908120212題目菌菇多糖提取及體外抗氧化性研究1.選題意義及可行性分析菌菇多糖作為“生物反應(yīng)調(diào)節(jié)劑”，具有調(diào)節(jié)機(jī)體免疫力、抗腫瘤、抗病毒、健胃護(hù)肝、降血脂、血糖和膽固醇、抗血栓、抗衰老、抗輻射、祛痰鎮(zhèn)咳等多種藥理作用。此外，菌菇多糖還可以迅速修復(fù)破損的細(xì)胞組織。食用真菌有一種成份被稱為粘多糖，它有兩大特點(diǎn)，一是親和力好；二是滲透力強(qiáng)，這兩大特點(diǎn)決定了它會(huì)很快被人體細(xì)胞吸收。同時(shí)菌菇多糖具有極高的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值。比如，猴頭菇，其蛋白質(zhì)含量高達(dá)26.3%，金針菇的蛋白質(zhì)含量高達(dá)16.3%，這兩種食用菌中所含蛋白質(zhì)是我們平時(shí)所攝取蛋白質(zhì)的二到三倍，直接補(bǔ)充人體對(duì)蛋白質(zhì)的需求，滿足細(xì)胞對(duì)蛋白質(zhì)的營(yíng)養(yǎng)需要?；谝陨暇蕉嗵翘攸c(diǎn)，所以選擇本題目。2.研究現(xiàn)狀目前關(guān)于香菇多糖和雞腿菇多糖生物活性的研究主要集中于免疫調(diào)節(jié)作用, 抗腫瘤活性, 關(guān)于它們的體外抗氧化活性研究未見(jiàn)報(bào)道。因此, 本文將研究香菇和雞腿菇兩種食用菇多糖提取物的體外抗氧化作用, 為多糖抗氧化作用的進(jìn)一步研究和利用提供科學(xué)依據(jù)。3.可行性分析香菇和雞腿菇多糖提取物進(jìn)行紅外光譜掃描把香菇和雞腿菇多糖提取物在5004 000 cm- 1進(jìn)行IR 掃描，香菇和雞腿菇多糖提取物的圖譜非常相似, 且都具有多糖類物質(zhì)的一般特征 11 。在3 4003 200 cm- 1譜帶對(duì)應(yīng)于締合羥基的伸縮振動(dòng), 表明存在分子間和分子內(nèi)氫鍵; 2 9402 915 cm- 1有一弱峰為次甲基( CH2) 中CH 伸縮振動(dòng), 是糖類CH 伸縮振動(dòng); 1 6651 635 cm- 1的較寬吸收峰為糖的水合物所特有的; 1 4001 200 cm- 1的峰為糖類CH的變角振動(dòng); 1 250950 cm- 1之間的一組峰是兩種CO 的伸縮振動(dòng)引起的、一種是吡喃糖環(huán)的醚鍵COC, 另一種是羥基的吸收峰。研究的主要問(wèn)題和重點(diǎn)、難點(diǎn)油脂的抗氧化性能實(shí)驗(yàn)以抗氧化劑Vc 作為對(duì)比組, 不加任何抗氧化劑的油脂作為對(duì)照組, 檢測(cè)各種抗氧化劑對(duì)食用油脂氧化的抑制作用,由實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知, Vc 對(duì)豆油的抗氧化能力最強(qiáng), 多糖提取物對(duì)豆油的抗氧化能力稍弱于Vc, 兩種多糖提取物對(duì)豆油的的抗氧化能力十分接近。從結(jié)果可知, 多糖提取物和Vc 對(duì)豬油的抗氧化能力的趨勢(shì)接近, 但總的來(lái)說(shuō)Vc 的抗氧化能力強(qiáng)于多糖提取物, 而兩種多糖提取物對(duì)豬油的抗氧化能力也十分接近。從實(shí)驗(yàn)結(jié)果可以看出, 加入多糖提取物的油脂。主要參考文獻(xiàn) 1 Marx J L. Ox ygen f ree radicals linked t o many d iseases J .S cien ce, 1987, 235: 529-531. 2 Yang J H, Linb H C, Mau b J L. Ant iox idant propert ies of s ever al com mercial mus hrooms J . Food Ch emis t ry, 2002,77: 229-235. 3 Makot o Miyauch i, Hideaki Nakamura, Fumio Furukaw a, e tal . Promoting ef f ects of combined an tiox idant and s od iumnit rit e t reatmen t on f or est omach carcinogenesis in rat s af terinit iat ion w ith N -m ethyl-N-nit ro-N-nit ros o-guan idine J .Cancer Let t er s, 2002, 178: 19-24. 4 Mats umura Y, Egamia M, S at akea C, e t al . Inhib itoryef f ect s of pept ide-bound polys accharides on lipid oxidation inemu lsions J . Food Ch emis t ry, 2003, 83: 107-119. 5 Liu F, Ooi V E C, Chang S T . Free radical scavenging act ivitiesof mu shroom polysaccharide ex tract J . Lif e Sci ences ,