Cyclin E 在子宮內(nèi)膜癌中的表達(dá)及其臨床意義【摘要】 目的：探討 Cyclin E 在子宮內(nèi)膜癌中的表達(dá)及其臨床意義。方法：采用免疫組織化學(xué) S-P 法測(cè)定 16 例正常子宮內(nèi)膜、18 例子宮內(nèi)膜不典型增生及 50 例子宮內(nèi)膜癌中的 Cyclin E 蛋白的表達(dá)情況。結(jié)果： Cyclin E 蛋白在正常子宮內(nèi)膜中的表達(dá)率為 18.75%，明顯低于在子宮內(nèi)膜不典型增生中的表達(dá)（61.11%）及在子宮內(nèi)膜癌中的表達(dá)（66.00%，P < 0.05）。50 例子宮內(nèi)膜癌中，Cyclin E 蛋白在 G2、G3 中的表達(dá)率（87.10%）明顯高于 G1（31.57%，P < 0.05）；在臨 床分期中的表達(dá)率（93.33%）亦高于期者（54.29%，P < 0.05）。結(jié)論：Cyclin E 的過(guò)度表達(dá)可能與子宮內(nèi)膜癌的發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)，并提示可能與患者的預(yù)后有關(guān)。 【關(guān)鍵詞】 子宮內(nèi)膜癌；Cyclin E；免疫組織化學(xué) Abstract Objective To investigate the expression of Cyclin E in endometrial carcinoma and its relationship to clinic pathological features and prognosis of endometrial carcinoma. Methods An immunohistochemical S-P assay was used to detect the expression of Cyclin E in specimens of 50 cases with endometrial carcinoma、16 normal endometrium and 18 atypical hyperplasia. Results The positive immunostaining rate of cyclin E in endometrial carcinoma (66.00%) was significantly higher than that in normal endometrium (18.75%). In 50 cases with endometrial carcinoma, the expression of cyclin E in moderately-poorly differentiated (G2-G3) and stage cases was significantly higher than that in well differentiated (G1) and stage cases, P < 0.05. Conclusion The results suggest that cyclin E expression is closely related to the occurrence and development of endometrial carcinoma, and the aberrant expression of cyclin E may act as a predicator of poorer prognosis of endometrial carcinoma. Key Words Endometrial carcinoma; Cyclin E; Immunohistochemistry 細(xì)胞周期調(diào)控系統(tǒng)的紊亂與細(xì)胞癌變密切相關(guān)，Cyclin E 作為一種細(xì)胞周期正向調(diào)節(jié)因子已被證實(shí)是一種癌基因，在許多實(shí)驗(yàn)性腫瘤的發(fā)生發(fā)展過(guò)程中起重要作用1。本研究采用免疫組化方法，探討Cyclin E 蛋白表達(dá)與子宮內(nèi)膜癌生物學(xué)行為關(guān)系。 1 資料與方法 1.1 一般資料 從 2001 - 2007 年的存檔蠟塊中，隨機(jī)抽取正常子宮內(nèi)膜 16 例、子宮內(nèi)膜不典型增生 18 例及子宮內(nèi)膜腺癌 50 例。子宮內(nèi)膜癌按FIGO（1988 年）手術(shù)分期，其中期 35 例，期 11 例，期 4 例；病理分級(jí) G1 19 例， G2 27 例，G3 4 例。術(shù)前均未作化療或放療。 1.2 試劑 鼠抗人 Cyclin E 單克隆抗體，免疫組化 S-P 試劑盒，DAB 均由福州邁新生物技術(shù)開(kāi)發(fā)公司提供。 1.3 方法 石蠟包埋組織連續(xù)切片厚約 5 m，采用免疫組化 S-P 方法進(jìn)行染色，染色步驟按試劑盒要求進(jìn)行。陽(yáng)性對(duì)照：已知 Cyclin E 表達(dá)陽(yáng)性的大腸癌組織；陰性對(duì)照：PBS 代替一抗。 1.4 結(jié)果判斷 以腫瘤細(xì)胞核或細(xì)胞質(zhì)中出現(xiàn)棕黃色顆粒作為陽(yáng)性細(xì)胞，根據(jù)陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)判斷結(jié)果，陰性（-）：無(wú)陽(yáng)性細(xì)胞或陽(yáng)性細(xì)胞 < 5%，染色強(qiáng)度較淺；陽(yáng)性（+）：陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)5%，染色強(qiáng)度中等以上2。 1.5 統(tǒng)計(jì)方法 采用 檢驗(yàn)和 Fishers 確切檢驗(yàn)。 2 結(jié) 果 2.1 正常子宮內(nèi)膜、子宮內(nèi)膜不典型增生和子宮內(nèi)膜癌中 Cyclin E 蛋白的表達(dá) 見(jiàn)表 1。 Cyclin E 蛋白在正常子宮內(nèi)膜中表達(dá)率明顯低于不典型增生及子宮內(nèi)膜癌中的表達(dá)率，差異均有顯著性意義（P < 0.05）；子宮內(nèi)膜不典型增生中 Cyclin E 蛋白表達(dá)率稍低于子宮內(nèi)膜癌中的表達(dá)率，但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P > 0.05）。 2.2 Cyclin E 蛋白表達(dá)與子宮內(nèi)膜癌臨床病理特征的關(guān)系 見(jiàn)表 2。 Cyclin E 蛋白在子宮內(nèi)膜癌期中的表達(dá)率低于期，比較差異有顯著意義（ =7.13，P < 0.01）；Cyclin E 蛋白在內(nèi)膜癌 G2G3 中的表達(dá)則高于 G1，差異有顯著性意義（ =16.18，P < 0.05）；肌層浸潤(rùn) > 1/2 或有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組 Cyclin E 蛋白表達(dá)率亦高于于肌層浸潤(rùn)1/2 組，但差別無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（ = 1.26，P > 0.1）。 2.3 Cyclin E 蛋白表達(dá)與子宮內(nèi)膜癌復(fù)發(fā)的關(guān)系 見(jiàn)表 3。 50 例子宮內(nèi)膜癌患者，隨訪 3 年，失訪 12 例，失訪 率24%。余 38 例中未復(fù)發(fā)者 27 例。 3 討論 腫瘤的發(fā)生是一個(gè)多步驟、多階段逐步演進(jìn)的 過(guò)程。近年來(lái)的研究表明，細(xì)胞周期失控是細(xì)胞癌變重要原因。真核生物細(xì)胞周期的調(diào)控有賴(lài)于細(xì)胞周期蛋白依賴(lài)性激酶（cyclin dependent kinase, CDK）的活化，周期蛋白（cyclin）是 CDK 的正調(diào)節(jié)因子，活化 CDK 的活性。Cyclin E 基因定位于19q12-133，轉(zhuǎn)錄 2.2 kb 的 mRNA，編碼 395 個(gè)氨基酸的蛋白質(zhì)。作為 G1 期核內(nèi)蛋白，它結(jié)合并激活 CDK2 而直接促進(jìn)細(xì)胞周期 G1/S 轉(zhuǎn)換4。目前，在多種腫瘤中均可發(fā)現(xiàn) Cyclin E 的基因擴(kuò)增和蛋白表達(dá)失調(diào)2，5-6，Cyclin E 的異常表達(dá)可促進(jìn)腫瘤的發(fā)展，并具有早期診斷和預(yù)后判斷價(jià)值7。Marone 等8研究結(jié)果表明，卵巢癌的 Cyclin E 的擴(kuò)增和過(guò)度表達(dá)率分別為 21% 和 29.5%。本組研究顯示，50 例子宮內(nèi)膜癌中，Cyclin E 蛋白陽(yáng)性表達(dá) 33 例（66.00%），而正常組織中，只有 3 例（18.75%）陽(yáng)性，子宮內(nèi)膜不典型增生與正常內(nèi)膜組織比較，Cyclin E 的表達(dá)率亦明顯增高（P < 0.05）。本研究還顯示 Cyclin E 在子宮內(nèi)膜癌臨床期中的表達(dá)率為 54.29%，低于期的 93.33%，差異有顯著性意義（P < 0.01），在高分化中的表達(dá)率為 31.57%，顯著低于中、低分化的內(nèi)膜癌的 87.10%（P < 0.05），但與肌層浸潤(rùn)深度無(wú)關(guān)。我們的資料還顯示，38 例子宮內(nèi)膜癌中有 11 例復(fù)發(fā)，其中 9 例 Cyclin E 陽(yáng)性表達(dá)（81.82%）高于未復(fù)發(fā)組（48.15%），但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，與 Kiyoshi 等9報(bào)道相似。本研究提示 Cyclin E 作為細(xì)胞周期正調(diào)節(jié)因子，當(dāng)其過(guò)度表達(dá)時(shí)，可加速細(xì)胞增殖，導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞異常增生，惡性程度增高。因此，臨床上檢測(cè)子宮內(nèi)膜癌中 Cyclin E 的表達(dá)情況，可能有助于判斷腫瘤的預(yù)后。【參考文獻(xiàn)】 1Haas K , Staller P, Geisen C, et al. Mutual requirement of CDK4 and Myc in malignant transformation : evidence for cyclin D1/CDK4 and p16INK4A as upstream regulators of MycJ. Oncogene, 1997, 15:179-1922Sakaguchi T, Watamabe A, Sawada H, et al. Prognostic value of cyclin E and p53 expression in gastric carcinomaJ. Cancer, 1998, 82:1238-12433Geng Y, Eaton EN, Picon M, et al. Regulation of cyclin E transcription by E2Fs and retinoblastoma proteinJ. Oncogene, 1996,12(6):1173-11804Pardee AB. G1 events and regulation of cell proliferationJ. Science, 1989, 24:603-6085Scuderi R, Palucka KA, Pokrovskaja K, et al. Cyclin E overexpression in relapsed adult acute lymphoblastic leukemias of B-cell lineageJ. Blood, 1996, 87(8):3360-33676Akama Y, Yasui W, Yokozaki H, et al. Frequent amplification of the cyclin E gene in human gastric carcinomasJ. Japn J Cancer Res, 1995, 86:617-6217Erlanson M, Portin C, Linderholm B, et al. Expression of cyclin E and the cyclin-dependent kinase inhibitor p27 in malignant lymphomas - prognostic implicationsJ. Blood, 1998, 92, 770-7778Marone M, Scambia G, Giannitelli C, et al. Analysis of cyclin E and CDK2in ovarian cancer: gene amplification and