課題1微生物的實驗室培養(yǎng)1.在微生物培養(yǎng)過程中,需要對培養(yǎng)基等進行滅菌,其標準是()A.殺死所有的病原微生物B.殺死所有的微生物的細胞C.殺死所有微生物的細胞、芽孢和孢子D.使病原菌不生長解析:滅菌是指利用強烈的理化因素殺死物體內(nèi)外所有的微生物,包括芽孢和孢子。答案:C2.下列有關(guān)倒平板的敘述,錯誤的是()A.在酒精燈的火焰旁進行操作B.將打開的錐形瓶瓶口迅速通過酒精燈的火焰C.將培養(yǎng)皿打開,培養(yǎng)皿蓋倒放在桌面上D.待平板冷卻凝固后需要倒過來放置解析:整個倒平板過程要防止外來雜菌的入侵,因此,應(yīng)在酒精燈的火焰旁進行操作,打開的錐形瓶瓶口應(yīng)迅速通過酒精燈的火焰。培養(yǎng)皿打開一條稍大于瓶口的縫隙進行操作,不能將培養(yǎng)皿蓋完全打開。平板冷卻凝固后需要倒過來放置。答案:C3.下列有關(guān)微生物培養(yǎng)的敘述,正確的是()A.培養(yǎng)基一般都含水、碳源、氮源和無機鹽 B.涂布接種時,涂布器應(yīng)在干熱滅菌箱中滅菌冷卻后再使用C.純化培養(yǎng)時,培養(yǎng)皿應(yīng)倒置放在恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)的搖床上培養(yǎng)D.觀察菌落時,應(yīng)將培養(yǎng)皿蓋拿掉后在顯微鏡下進行觀察計數(shù)解析:涂布接種時,涂布器應(yīng)在酒精燈火焰引燃滅菌,冷卻后再使用;用液體培養(yǎng)基培養(yǎng)微生物時,應(yīng)放在搖床上,培養(yǎng)皿中的是固體培養(yǎng)基,應(yīng)倒置放在恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng);菌落肉眼可見,不需要借助于顯微鏡。答案:A4.下列操作與消毒或滅菌無關(guān)的是()A.接種前用酒精燈的火焰灼燒接種環(huán)B.接種前用酒精擦拭雙手C.將平板倒置,放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng)D.接種在酒精燈的火焰旁完成解析:接種用具、器皿上以及空氣中都有微生物,都有導(dǎo)致污染的可能,必須嚴格消毒、滅菌。A、B、D三項都屬于實驗操作過程中的消毒或滅菌。將平板倒置,放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng)是為了防止雜菌污染,不屬于消毒或滅菌。答案:C5.微生物培養(yǎng)是微生物工程中的基礎(chǔ)技術(shù)。下列相關(guān)敘述正確的是()A.病毒和細菌的培養(yǎng)基成分相同B.平板劃線法中的劃線是連續(xù)進行的C.微生物培養(yǎng)基中并不都必須添加碳源或氮源D.在培養(yǎng)的過程中,細胞種類、數(shù)目都不斷地增加解析:病毒是寄生生物,在活細胞中才能進行生命活動;平板劃線法是為了稀釋細菌,劃線間斷進行;微生物培養(yǎng)基根據(jù)需要添加相應(yīng)的碳源和氮源;在培養(yǎng)的過程中,細胞的數(shù)目不斷地增加,種類不增加。答案:C6.防止雜菌入侵,獲得純凈的培養(yǎng)物,是研究和應(yīng)用微生物的前提。下列敘述錯誤的是()A.實驗室里可以用紫外線或化學(xué)藥物進行消毒B.接種環(huán)、接種針等金屬用具,直接在酒精燈火焰的內(nèi)焰部位灼燒滅菌C.在實驗室中,切不可吃東西、喝水,離開實驗室時一定要洗手,以防止被微生物感染D.使用后的培養(yǎng)基丟棄前一定要進行滅菌處理,以免污染環(huán)境解析:接種環(huán)等金屬用具應(yīng)放在酒精燈火焰的充分燃燒層即外焰處灼燒滅菌。答案:B7.下列關(guān)于菌種保藏的敘述,錯誤的是()A.菌種保藏的目的之一是保持菌種的純凈B.固體斜面培養(yǎng)基可用于菌種的臨時保藏C.菌種的長期保存一般采用甘油管藏法D.甘油管藏菌種在-20 條件下進行,因此對甘油可不必滅菌解析:采用甘油管藏法保存菌種時,需對甘油滅菌,以避免雜菌污染。答案:D8.下列是與微生物培養(yǎng)有關(guān)的問題,請回答下列問題。(1)某細菌固體培養(yǎng)基的組成成分是KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4、葡萄糖、尿素、瓊脂和蒸餾水,其中凝固劑是,碳源是,氮源是。從同化作用類型看,用該培養(yǎng)基培養(yǎng)的細菌屬于。(2)將少量細菌接種到一定體積的液體培養(yǎng)基中,適宜條件下培養(yǎng),定時取樣測定菌體數(shù)目,以時間為橫坐標,以菌體數(shù)目的對數(shù)為縱坐標,可以得到細菌的曲線。該曲線中以菌體數(shù)目的對數(shù)作為縱坐標的原因是。解析:(1)在該細菌固體培養(yǎng)基組成成分中,凝固劑是瓊脂,碳源是葡萄糖,氮源是尿素。由于該細菌以有機物(葡萄糖)作碳源,故從同化作用類型看,該細菌屬于異養(yǎng)型。(2)細菌的增長曲線反映了細菌群體從開始生長到死亡的動態(tài)變化過程。答案:(1)瓊脂葡萄糖尿素異養(yǎng)型(2)增長培養(yǎng)中的細菌數(shù)量以指數(shù)形式增長,取對數(shù)便于反映細菌群體的生長規(guī)律9.為了獲得純度高的大腸桿菌,需要對大腸桿菌進行培養(yǎng)和分離。培養(yǎng)大腸桿菌一般用牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基。(1)培養(yǎng)大腸桿菌時,配制固體培養(yǎng)基的基本步驟是計算稱量倒平板。(2)稱量時,牛肉膏由于比較黏稠,可以用挑取,放在上稱量。由于牛肉膏和蛋白胨,稱量時動作要迅速,稱后要及時蓋上瓶蓋。(3)在牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基上大腸桿菌能生長,說明培養(yǎng)基含有等大腸桿菌生長所需的營養(yǎng)要素。(4)微生物純化培養(yǎng)可以通過多種接種方法,如和等,使大腸桿菌在固體培養(yǎng)基上形成單個,從而獲得純菌株。答案:(1)溶化滅菌(2)玻璃棒稱量紙容易吸潮(3)碳源、氮源、無機鹽、水(4)平板劃線法稀釋涂布平板法菌落能力提升1.下列有關(guān)微生物培養(yǎng)的敘述,錯誤的是()A.獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是防止雜菌污染B.單菌落的分離是消除雜菌污染的一種方法C.培養(yǎng)基都必須使用高壓蒸汽滅菌法滅菌D.倒置平板可防止培養(yǎng)皿蓋上的冷凝水滴落解析:防止雜菌污染是獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵,A項正確;單菌落由一個微生物繁殖而來,因此分離單菌落可以消除雜菌,B項正確;培養(yǎng)基滅菌一般采用高壓蒸汽滅菌法,但是對于含有高溫易分解的營養(yǎng)物質(zhì)的培養(yǎng)基,就不能采用高壓蒸汽滅菌法進行滅菌,C項錯誤;倒置平板可以防止培養(yǎng)皿蓋上的冷凝水滴落到培養(yǎng)基表面污染培養(yǎng)基,D項正確。答案:C2.下列有關(guān)用平板劃線法和稀釋涂布平板法純化大腸桿菌的敘述,正確的是()都需要用固體培養(yǎng)基都需要使用接種針進行接種都需要在酒精燈火焰旁進行接種都可以用菌落數(shù)來計數(shù)活菌A.B.C.D.解析:平板劃線法和稀釋涂布平板法都是為了在培養(yǎng)基表面形成單個菌落,所以都需要用固體培養(yǎng)基,正確;稀釋涂布平板法不需要使用接種針進行接種,錯誤;為防止雜菌污染,操作時都需要在酒精燈火焰旁進行接種,正確;平板劃線法不能用于計數(shù)活菌,只能用于分離菌種,稀釋涂布平板法可以用來計數(shù)活菌,錯誤。答案:B3.金黃色葡萄球菌有很強的致病力,常引起骨髓炎等,還可能引起食物中毒。下列篩選金黃色葡萄球菌實驗結(jié)束后的做法,錯誤的是()A.對接種環(huán)進行灼燒處理B.帶菌培養(yǎng)基必須經(jīng)高壓蒸汽滅菌后才能倒掉C.帶菌培養(yǎng)基必須經(jīng)加熱后才能倒掉D.接種后雙手必須經(jīng)肥皂洗凈,再用體積分數(shù)為75%的酒精棉球擦拭解析:帶菌培養(yǎng)基必須經(jīng)高壓蒸汽滅菌后才能倒掉,不能經(jīng)簡單地加熱后就倒掉。答案:C4.下圖是微生物平板劃線示意圖,劃線的順序為1、2、3、4、5。下列敘述正確的是()A.操作前要將接種環(huán)放在酒精燈的火焰邊灼燒滅菌B.劃線操作應(yīng)在酒精燈的火焰上進行C.在5區(qū)域中才可以得到菌落D.在1、2、3、4、5區(qū)域中劃線前后都要對接種環(huán)滅菌解析:操作前要將接種環(huán)放在酒精燈的火焰上灼燒滅菌;劃線操作應(yīng)在酒精燈的火焰旁進行,而不是火焰上;所有的劃線區(qū)都有可能得到菌落,只是 5區(qū)域中菌落相對較純。答案:D5.下列關(guān)于倒平板及對菌種純化的說法,正確的是()A.倒平板時左手將滅過菌的培養(yǎng)皿蓋完全打開,右手將錐形瓶中培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿(1020 mL),左手立即蓋上培養(yǎng)皿蓋B.接種時,應(yīng)使用已滅菌的接種環(huán),培養(yǎng)基不需要滅菌C.平板冷凝后要將平板倒置,以防皿蓋上的冷卻水倒流入培養(yǎng)基D.涂布器直接在酒精燈的火焰上灼燒滅菌解析:倒平板時用左手的拇指和食指將培養(yǎng)皿打開一條稍大于瓶口的縫隙,而不是直接將蓋完全打開;接種時,應(yīng)使用已滅菌的接種環(huán),培養(yǎng)基仍需進行滅菌處理;涂布器滅菌時需蘸少量酒精并引燃。答案:C6.下列關(guān)于微生物的實驗室培養(yǎng)技術(shù)的表述,正確的是 ()A.溶化時將稱好的牛肉膏從稱量紙上直接倒入燒杯B.常見的消毒方法包括灼燒、煮沸、紫外線和噴灑化學(xué)試劑等C.配制固體培養(yǎng)基時加入瓊脂,其目的是為微生物生長提供碳源D.用移液管稀釋菌液時,吹吸三次的目的是使菌液與水充分混勻解析:稱好的牛肉膏要連同稱量紙一起放入燒杯,待牛肉膏與稱量紙分離后,用玻璃棒取出稱量紙;灼燒屬于滅菌方法,不屬于消毒方法;瓊脂可以作為固體培養(yǎng)基的凝固劑,而不能為微生物提供碳源;吹吸三次可以使菌液混合均勻,使實驗結(jié)果更加準確。答案:D7.(2018全國高考理綜)在生產(chǎn)、生活和科研實踐中,經(jīng)常通過消毒和滅菌來避免雜菌的污染?；卮鹣铝袉栴}。(1)在實驗室中,玻璃和金屬材質(zhì)的實驗器具(填“可以”或“不可以”)放入干熱滅菌箱中進行干熱滅菌。(2)牛奶的消毒常采用巴氏消毒法或高溫瞬時消毒法,與煮沸消毒法相比,這兩種方法的優(yōu)點是 。(3)密閉空間內(nèi)的空氣可采用紫外線照射消毒, 其原因是紫外線能。在照射前,適量噴灑,可強化消毒效果。(4)水廠供應(yīng)的自來水通常是經(jīng)過(填“氯氣”“乙醇”或“高錳酸鉀”)消毒的。(5)某同學(xué)在使用高壓蒸汽滅菌鍋時,若壓力達到設(shè)定要求,而鍋內(nèi)并沒有達到相應(yīng)溫度,最可能的原因是 。解析:實驗室中能耐高溫的、需要保持干燥的物品,如玻璃器皿和金屬用具等,可用干熱滅菌的方法滅菌。對于一些不耐高溫的液體,如牛奶,需采用巴氏消毒法和高溫瞬時消毒法消毒,這種消毒方法的優(yōu)點是可以殺死牛奶中的微生物,并且牛奶中的營養(yǎng)成分基本不被破壞。自來水通常用氯氣消毒,氯氣與水反應(yīng)生成次氯酸和氯化氫,次氯酸具有強氧化性,能殺死自來水中的微生物。用高壓蒸汽滅菌法滅菌,必須把鍋內(nèi)的冷空氣徹底排除后才能達到設(shè)定的壓力和相應(yīng)的溫度。答案:(1)可以(2)在達到消毒目的的同時,營養(yǎng)物質(zhì)損失較少(3)破壞DNA結(jié)構(gòu)消毒液(4)氯氣(5)未將鍋內(nèi)冷空氣排盡8.炭疽病是由炭疽桿菌引起的一種人畜共患傳染病。炭疽桿菌兩端截平,呈竹節(jié)狀排列,菌落呈卷發(fā)狀。對炭疽病疑似患者,可根據(jù)噬菌體的宿主專一性,通過實驗確診。(1)細菌培養(yǎng):采集疑似患者的樣本,分離培養(yǎng),獲得可疑菌落。(2)細菌鑒定:實驗流程如下圖所示。對配制的液體培養(yǎng)基等需采用法滅菌;實驗所用液體培養(yǎng)基的碳源為(填“無機碳”或“有機碳”)。挑選可疑菌落制片后,用觀察,可看到呈竹節(jié)狀排列的桿菌。接種可疑菌后,在溫度為35 的環(huán)境中培養(yǎng)24 h,液體培養(yǎng)基變渾濁,原因是。對照組試管中應(yīng)加入,與實驗組同時培養(yǎng)6 h后,若實驗組液體培養(yǎng)基的渾濁度比對照組(填“高”或“低”),則可確定疑似患者被炭疽桿菌感染;反之,則排除。對排除的疑似患者及易感人群,可接種炭疽桿菌疫苗,刺激機體產(chǎn)生相應(yīng)抗體。與產(chǎn)生抗體相關(guān)的細胞除T細胞、B細胞外,還有 。解析:(2)培養(yǎng)微生物的培養(yǎng)基常用高壓蒸汽滅菌法滅菌;由于炭疽桿菌是異養(yǎng)型微生物,培養(yǎng)基中應(yīng)加有機碳作碳源。炭疽桿菌呈竹節(jié)狀排列,需借