湖南生物機電職業(yè)技術(shù)學院 畢 業(yè) 設(shè) 計 報 告 書 題目： 獼猴桃組培莖尖培育 方案設(shè)計 專 業(yè) 都 市 園 藝 班 級 園 藝 13327 班 姓 名 宋 和 美 指導(dǎo)教 師 蔡 冬 元 2016 年 6 月 1 日 目 錄 第一部分 設(shè)計任務(wù)與調(diào)研 第二部分 設(shè)計說明 第三部分 設(shè)計試驗 第四部分 參考文獻 第五部分 致謝 第一部分 設(shè)計任務(wù)與調(diào)研 一、主要任務(wù) 獲得 獼猴桃長勢良好莖尖 殖培養(yǎng)基配方以及最佳的生根培養(yǎng)基配方。 二、設(shè)計的思路、方法 設(shè)計不同的植物生長激素梯度組合，設(shè)計平行重復(fù)實驗，按照不同的配比設(shè)計愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)基。 三、 相關(guān)資料 獼猴桃的功效與作用有哪些 ?營養(yǎng)學家介紹獼猴桃是一種營養(yǎng)價值豐富的水果，具有多重功效和作用，被人們稱為果中之王。獼猴頭含有亮氨酸、苯丙氨酸、異亮氨酸、酪氨酸、丙氨酸等 10 多種氨基酸，以及豐富的礦物質(zhì)，包括豐富的鈣、磷、鐵，還含有胡蘿卜素和多種維生素，對保持人體健康具有重要的作用。 可以作為一種飲料治療壞血病。每天一杯獼猴桃飲料可以在一個月以內(nèi)很好的改善膚色和質(zhì)地。它含有的維生素 C 有助于降低血液中的膽固醇水平，起到擴張血管和降低血壓的作用。它還加強心臟肌肉。獼猴桃的功效還包括提升免疫功能，治 療肝臟疾病，消化不良，貧血，泌尿系統(tǒng)問題，呼吸系統(tǒng)疾病，腦疾病等。它還增加紅血球生產(chǎn)，加強牙齒和指甲。應(yīng)該記住的是，健康均衡的飲食，每日攝入大量的水，在加上使用獼猴桃可以治愈很多健康問題。 第二部分 設(shè)計說明 一、理論分析 猴桃的莖尖 為外植體 ,在 養(yǎng)基上 ,研究不同培養(yǎng)條件下植物生長調(diào)節(jié)劑對愈傷組織誘導(dǎo)及離體快繁的影響。結(jié)果表明 :養(yǎng)基附加 ,2, 都可使根、莖、葉誘導(dǎo)形成愈傷組織 ,其誘導(dǎo)效果根 莖 葉 ,且暗培養(yǎng)條件下的誘導(dǎo)率優(yōu)于自然條件下的培養(yǎng) ,并選出最佳培養(yǎng)基 1/2以 獼猴桃莖尖 的外植體 ,在自然光和暗培養(yǎng)條件下可一步成苗 ,其出芽率自然光下優(yōu)于暗培養(yǎng)條件下 ,最佳培養(yǎng)基為 1/2 猴桃的莖尖 為外植體 ,誘導(dǎo)出叢生芽 ,叢生芽經(jīng)切割后接種到繼代增殖培養(yǎng)基上 ,每月可增殖 5 8 倍 ,在含 1/2養(yǎng)上 ,試管苗生根率達到100%,試管苗移栽成活率達到 90%以上。 7 二、設(shè)計方案 選擇 獼猴桃莖尖 為實驗材料 ，以 養(yǎng)基為 基本 的 培養(yǎng)基 ；選擇組織培養(yǎng)常用的細胞分裂素 6生長素 行研究。設(shè)置植物生長調(diào)節(jié)物質(zhì)濃度梯度組合，并設(shè)置 平行重復(fù)實驗。 培養(yǎng)基的制作： 1/2代 ) 三、預(yù)期目標 從培養(yǎng)材料的優(yōu)選，培養(yǎng)條件的優(yōu)化，培養(yǎng)基的篩選等方面著手研究，利用組織培養(yǎng)技術(shù)獲得 無菌培養(yǎng)物，再進行繼代培養(yǎng)獲得 獼猴桃 最佳的 莖尖 增殖培養(yǎng)基配方以及最佳的生根培養(yǎng)基配方，最終獲得快速繁殖的流程 。 四、 資金使用情況 序號 開支科目 預(yù)算經(jīng)費（元） 主要用途 1 試劑費 1500 實驗研究所需的各種試劑 2 打印費 200 打印上交資料、研究資料 3 材料費 300 用來購置培養(yǎng)瓶 4 總額 2000 第三部分 設(shè)計試驗 一、 實驗?zāi)康模?通過實驗，初步掌握獼猴桃材料消毒、接種的無菌操作技術(shù)以及獼猴桃 初代培養(yǎng)的方法。 二、 實驗器材： 1、實驗材料：獼猴桃的莖尖 2、實驗試劑： 汞、吐溫 80、酒精 3、實驗設(shè)備 :初代培養(yǎng)基 47瓶、無菌水，滅菌工具、超凈工作臺，高壓滅菌鍋等 。 三、 實驗方法和步驟： 1、 培養(yǎng)基的制作： 1/2代 ) 2、 滅菌：配制好的培養(yǎng)基放入到滅菌高壓鍋中，大概在 121度滅菌 15分鐘到 30分鐘， 3、接種：在接種前，打開超凈工作臺紫外燈，照射約 15分鐘；然后關(guān)閉紫外燈，打開超凈工作臺的風機，并微啟超凈工作臺的玻璃擋板，通風 20，即可進行無菌操作。用 75%的酒精紗布擦拭 3、接種：在接種前，打開超凈工作臺紫外燈，照射約 15分超凈工作臺面，再將接種工具放進超凈工作臺中。 4、猴桃莖尖的處理： 到基地取一些長勢良好的獼猴桃莖尖 獼猴桃表面處理： 修剪 刷去表面的絨毛 用飽和洗衣粉浸泡 10分鐘 流水沖洗 60秒 瀝干水帶進接種室 用 70%精浸 30分鐘，倒出 用 汞 +吐溫 80浸泡 3秒鐘 用無菌水沖洗 5 5、 無菌操作：在超凈工作臺中，將滅好菌的獼猴桃莖尖放在接種工具上，清除沒有用的部位，將切好的的獼猴桃放進獼猴桃初代培養(yǎng)基上。 6、培養(yǎng)：將接種好的獼猴桃外植體控制在溫度 252 ，光照周期 12h/d,光照強度 2000養(yǎng) 20天。 員 分工 本組組員共 8 人，分工合理明確。 2 人清洗培養(yǎng)瓶， 2 人進行獼猴桃莖尖處理， 1 人準備所需材料， 2 人配制培養(yǎng)基， 1 人進行無菌操作接種。 四、數(shù)據(jù)統(tǒng)計與分析方法 試驗結(jié)束時，目測生長情況并用 5 級表示，分別記為“ +”表示長勢緩慢，沒有明顯變化；“ +”表示生長緩慢，新根少，葉片較黃 ,愈傷組織少；“ +”表示長勢一般，新根少，葉片較綠，狹窄，莖細，愈傷組織較少；“ +”表示長勢 較好，新根較多，根較短，葉片濃綠較寬，莖粗大，愈傷組織較多；“ +”表示長勢優(yōu)良，新根多且長，葉片濃綠較寬，莖粗節(jié)多，愈傷組織多。第 四 部分 參考文獻 1、 朱鴻云 猴桃 中國林業(yè)出版社 2、 張指南、候志潔 北京 3、 梁疇芬 ,福格遜 ;中華獼猴桃硬毛變種學名訂正 J;廣西植物 ;1984年 03期 4、 李思光 ,羅玉萍 ,陳萬秋 ,黃衛(wèi) ;獼猴桃基因組 J;南昌大學學報 (理科版 );2001年 03 第 五 部分 致謝 畢業(yè)設(shè)計已經(jīng)接近了尾聲，這也意味著我的大學生活就要結(jié)束了，學 習 生活一 晃而過 。首先，我要特別感謝我的指導(dǎo)老師 蔡冬元 老師。做設(shè)計的過程是艱辛的，但是在我的努力之下還是完成了。在這個過程中 蔡 老師給了我很大的的幫助， 沒有 她 的盡心指導(dǎo)和嚴格的要求，我也不會順利完成這次設(shè)計。每次遇到難題，我最先做的就是向 蔡 老師尋求幫助，而 蔡 老師每次不管忙或閑，總會抽空來找我面談，然后一起商量解決的辦法。 蔡 老師平日里工作繁多，但我做畢業(yè)設(shè)計的每個階段，從選題到查閱資料， 到之后設(shè)計報告 的修改，后期 畢業(yè)設(shè)計 格式調(diào)整等各個環(huán)節(jié)中都給予了我悉心的指導(dǎo)。這幾個月以來， 蔡 老師不僅在學業(yè)上給我以