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實(shí)驗(yàn)十一:觀察根尖分生組織細(xì)胞的有絲分裂一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?、制作洋蔥根尖細(xì)胞有絲分裂裝片。2、觀察植物細(xì)胞有絲分裂的過程,識別有絲分裂的不同時(shí)期,比較細(xì)胞周期不同時(shí)期的時(shí)間長短。3、繪制植物細(xì)胞有絲分裂簡圖。二、實(shí)驗(yàn)原理:1、高等植物的分生組織有絲分裂較旺盛。2、有絲分裂各個(gè)時(shí)期細(xì)胞內(nèi)染色體的形態(tài)和行為變化不同,可用高倍顯微鏡根據(jù)各個(gè)時(shí)期內(nèi)染色體的變化情況,識別該細(xì)胞處于那個(gè)時(shí)期。3、細(xì)胞核內(nèi)的染色體易被堿性染料(如龍膽紫)染成深色。三、程序設(shè)計(jì)思路1、洋蔥根尖的培養(yǎng)在上實(shí)驗(yàn)課之前的3-4天,取洋蔥一個(gè),放在廣口瓶上。瓶內(nèi)裝滿清水,讓洋蔥的底部接觸到瓶內(nèi)的水面。把這個(gè)裝置放在溫暖的地方培養(yǎng)。待根長約5cm,取生長健壯的根尖制成臨時(shí)裝片觀察。2、裝片的制作制作流程為:解離漂洗染色制片解離上午10時(shí)至下午2時(shí),剪去洋蔥根尖2-3mm,立即放入盛入有鹽酸和酒精混合液(1:1)的玻璃皿中,在溫室下解離。3-5min用藥液使組織中的細(xì)胞相互分離開來漂洗待根尖酥軟后,用鑷子取出,放入盛入清水的玻璃皿中漂洗。約10min洗去藥液,防止解離過度染色把根尖放進(jìn)盛有質(zhì)量濃度為0.01g/ml或0.02g/ml的龍膽紫溶液(或醋酸洋紅液)的玻璃皿中染色。3-5min染料能使染色體著色。制片用鑷子將這段根尖取出來,放在載玻片上,加一滴清水,并用鑷子尖把根尖能碎,蓋上蓋玻片,在蓋玻片上再加一片載玻片。然后,用拇指輕輕的按壓載玻片。使細(xì)胞分散開來,有利于觀察3、觀察a低倍鏡觀察:找到分生區(qū)細(xì)胞,其特點(diǎn)是細(xì)胞呈正方形,排列緊密,有的細(xì)胞正在分裂b高倍鏡觀察:在低倍鏡觀察的基礎(chǔ)上換高倍鏡,直到看清細(xì)胞的物象為止c仔細(xì)觀察:先到中期,再找其余各期,注意染色體的特點(diǎn)d移動觀察:慢慢移動裝片,完整地觀察各個(gè)時(shí)期(如果自制裝片效果不太理想,可以觀察洋蔥根尖固定裝片)4、繪圖5、記錄四、分析1、取材分析(1)取材及用具:a,取材:洋蔥(可用蔥.蒜代替),質(zhì)量分?jǐn)?shù)為15%的鹽酸,體積分?jǐn)?shù)為95%的酒精,質(zhì)量濃度為0.01g/ml或0.02g/ml的龍膽紫溶液(將龍膽紫溶解在質(zhì)量分?jǐn)?shù)2%的醋酸溶液中配制而成)或醋酸洋紅液,洋蔥根尖細(xì)胞有絲分裂固定裝片。b、實(shí)驗(yàn)用具:顯微鏡,載玻片,蓋玻片,玻璃皿,剪子,鑷子,滴管。c、取材分析:取材應(yīng)為洋蔥根尖分生區(qū)細(xì)胞根尖2-3mm,而且洋蔥的根必須有活性。(2)藥品用法用量分析:解離液應(yīng)為質(zhì)量分?jǐn)?shù)為15%的鹽酸和體積分?jǐn)?shù)為95%的酒精按照1:1比例混合,而且解離時(shí)間要控制在3min-5min(3)過程分析:實(shí)驗(yàn)核心內(nèi)容必須嚴(yán)格按照解離漂洗染色制片四步進(jìn)行(4)實(shí)驗(yàn)結(jié)論分析:前期:出現(xiàn)染色體核膜核仁消失紡錘絲出現(xiàn)中期:著絲粒位于赤道面紡錘體明顯后期:染色體分裂成兩組子染色體向相反兩極運(yùn)動末期:紡錘體出現(xiàn)核膜核仁出現(xiàn)(5)、學(xué)生自我問題記錄剖析(注明失敗原因分析及反思)五、實(shí)驗(yàn)練習(xí)題(根據(jù)試驗(yàn)現(xiàn)象完成以下各題)(1)、取材應(yīng)取洋蔥根尖哪一部位( )甲、根尖1-3mm 乙、根尖5-7mm 丙、根尖1-3cm(2)、解離液的目的是( )(3)、制片時(shí)應(yīng)注意的是( )(4)、是用顯微鏡觀察是先用高倍鏡還是先用低倍鏡?
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