016食品安全國家標準食品添加劑 0161 食品安全國家標準食品添加劑 乳酸鏈球菌素1 范圍本標準適用于經(jīng)乳酸乳球菌(酵后提取而制得的食品添加劑乳酸鏈球菌素。2 分子式、子式141構式27位氨基酸為組氨酸(27位氨基酸為天冬酰胺(對分子質(zhì)量2013年國際相對原子質(zhì)量)2013年國際相對原子質(zhì)量)3 官要求感官要求應符合表1的規(guī)定。0162 表1 感官要求項目要求檢驗方法色澤淺棕色至乳白色狀態(tài)粉末將適量試樣均勻置于白瓷盤內(nèi),化指標理化指標應符合表2的規(guī)定。表2 理化指標項 目指 標檢驗方法效價/(IU/w/%w/%b)/(mg/品化的乳酸鏈球菌素產(chǎn)品應以符合本標準的乳酸鏈球菌素為原料,可添加氯化鈉、乳固體等輔料而制成,其效價符合聲稱。生物指標微生物指標應符合表3的規(guī)定。表3 微生物指標項 目指 標檢驗方法菌落總數(shù)/(g)g)g)0163 附 錄 般規(guī)定本標準除另有規(guī)定外,所用試劑的純度應為分析純,所用標準滴定溶液、雜質(zhì)測定用標準溶液、制劑及制品,應按601、602、603的規(guī)定制備,試驗用水應符合6682中三級水的規(guī)定。試驗中所用溶液在未注明用何種溶劑配制時,均指水溶液。酸溶液:。氧化鈉溶液:5。脂牛奶:脂肪含量1%。蕊牛奶培養(yǎng)基。測菌:乳酸乳球菌(樣儲備液制備取1于1液效價約為1000IU/酸溶液的穩(wěn)定性試驗用鹽酸溶液將試樣儲備液稀釋至約50IU/成試樣溶液。將該試樣溶液煮沸5效價測定方法測煮沸過的試樣溶液中算煮沸過的試樣中算結(jié)果在其效價值的(100%5%)內(nèi),表明無顯著活性損失。堿溶液的穩(wěn)定性試驗用鹽酸溶液將試樣儲備液稀釋至約50IU/成試樣溶液。將該試樣溶液煮沸5持30卻。效價測定方法測定最終溶液中按照上述操作處理后會出現(xiàn)抑菌活性的幾乎完全損失。酸乳球菌的培養(yǎng):乳酸乳球菌(工作菌株)(無菌脫脂牛奶中培養(yǎng),30培養(yǎng)18h。備1個或多個裝有100121滅菌150下培養(yǎng)24h。測菌(乳酸乳球菌)可在該效價的試樣(約1000IU/生長,但不能在相似濃度的其他抑菌物質(zhì)中生長。0164 酸鏈球菌素標準品(效價:1106IU/g)。酸溶液:。溫溶液:吐溫20水=11。養(yǎng)基(測菌:黃色微球菌(測菌(測菌的培養(yǎng)用無菌接種環(huán)從甘油管或凍干管中取一環(huán)檢測菌(接種在無菌的行自然分離,挑出飽滿、邊緣光滑的菌落,擴大,接在30恒溫箱中培養(yǎng)24h,放入25冰箱中。株懸浮液的制備取在冰箱中的檢測菌(用無菌生理鹽水洗脫下來,制成108用。板的制備配制比例先把瓊脂溶化,依次加入各組分溶解,磷酸氫二鈉溶解后加入),經(jīng)121、20冷至70左右,加入4分搖勻,等冷卻到5055左右,加入已制備好的菌株懸浮液適量,06個/勻,倒入水平放置的已滅菌的平板中,等完全凝固后,用直徑為7平板上打出所需的孔數(shù),小心挖掉孔內(nèi)瓊脂,風時間按空氣中的濕度大小而定,同時控制室內(nèi)溫度最低,盡量不要讓檢測菌生長),吹干后,置25冰箱中,到次日使用。準品溶液的制備準確稱取乳酸鏈球菌素標準品(溶于鹽酸溶液中,使最終濃度為2mg/000IU/搖勻,用鹽酸稀釋成300倍、600倍,即成高、低劑量標準溶液。樣溶液的制備稱取一定量的試樣(用鹽酸溶液溶解后,稀釋成高、低劑量試樣溶液,其乳酸鏈球菌素含量,按估計單位高、低劑量與標準品溶液大致相當。加溶液取出存放在冰箱中的平板,用移液器,取70L80機滴加在平板的孔中,滴6個孔,再取70L800165 孔中。試樣溶液和標準品溶液滴在同一平板上,其操作同標準品。溫培養(yǎng)等孔內(nèi)的溶液滲透完全后,移入30恒溫箱中培養(yǎng)16h24量抑菌圈直徑。果計算用卡尺測量抑菌圈直徑,取其平均值,按式(算效價:BHk(中:試樣溶液的效價,單位為國際單位每毫克(IU/標準溶液的效價,單位為國際單位每毫克(IU/高劑量試樣溶液所致的抑菌圈直徑,單位為毫米(低劑量試樣溶液所致的抑菌圈直徑,單位為毫米(高劑量標準溶液所致的