專題22克隆技術(shù)考點(diǎn)六十五 植物細(xì)胞工程高考試題 1.(2013年重慶理綜,T5,6分,)某興趣小組擬用組織培養(yǎng)繁殖一種名貴花卉,其技術(shù)路線為“取材消毒愈傷組織培養(yǎng)出芽生根移栽”。下列有關(guān)敘述,錯(cuò)誤的是()A.消毒的原則是既殺死材料表面的微生物,又減少消毒劑對(duì)細(xì)胞的傷害B.在愈傷組織培養(yǎng)中加入細(xì)胞融合的誘導(dǎo)劑,可獲得染色體加倍的細(xì)胞C.出芽是細(xì)胞再分化的結(jié)果,受基因選擇性表達(dá)的調(diào)控D.生根時(shí),培養(yǎng)基通常應(yīng)含萘乙酸等生長(zhǎng)素類調(diào)節(jié)劑點(diǎn)睛:本題考查植物組織培養(yǎng)相關(guān)知識(shí),涉及外植體的消毒、植物體細(xì)胞雜交、細(xì)胞分化及植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑對(duì)組織培養(yǎng)的影響等內(nèi)容,意在考查考生的理解能力以及運(yùn)用所學(xué)的知識(shí)分析問(wèn)題和解決問(wèn)題的能力。解析:消毒主要是既殺死材料表面的微生物,又減少消毒劑對(duì)細(xì)胞的傷害,A項(xiàng)正確;植物細(xì)胞融合是指經(jīng)纖維素酶和果膠酶處理后得到的原生質(zhì)體的融合,帶有細(xì)胞壁的愈傷組織細(xì)胞不能誘導(dǎo)融合形成染色體加倍的細(xì)胞,B項(xiàng)錯(cuò)誤;出芽和生根都是細(xì)胞再分化的結(jié)果,其實(shí)質(zhì)是基因的選擇性表達(dá),C項(xiàng)正確;萘乙酸為生長(zhǎng)素類似物,可誘導(dǎo)愈傷組織生根,D項(xiàng)正確。答案:B2.(2011年江蘇單科,T14,2分,)關(guān)于現(xiàn)代生物技術(shù)應(yīng)用的敘述,錯(cuò)誤的是()A.蛋白質(zhì)工程可合成自然界中不存在的蛋白質(zhì)B.體細(xì)胞雜交技術(shù)可用于克隆動(dòng)物和制備單克隆抗體C.植物組織培養(yǎng)技術(shù)可用于植物莖尖脫毒D.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)可用于轉(zhuǎn)基因動(dòng)物的培育點(diǎn)睛:本題考查了現(xiàn)代生物技術(shù)的應(yīng)用?？疾閷W(xué)生的綜合應(yīng)用能力。解析:體細(xì)胞雜交技術(shù)應(yīng)該屬于植物細(xì)胞工程,有兩步:先是植物細(xì)胞融合,再是植物組織培養(yǎng)。作為動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)可用于制備單克隆抗體,但不能用于克隆動(dòng)物,故B錯(cuò)誤。答案:B3.(2013年新課標(biāo)全國(guó)理綜,T40,15分,)甲、乙是染色體數(shù)目相同的兩種二倍體藥用植物,甲含有效成分A,乙含有效成分B。某研究小組擬培育同時(shí)含有A和B的新型藥用植物?；卮鹣铝袉?wèn)題:(1)為了培育該新型藥用植物,可取甲和乙的葉片,先用酶和酶去除細(xì)胞壁,獲得具有活力的,再用化學(xué)誘導(dǎo)劑誘導(dǎo)二者融合。形成的融合細(xì)胞進(jìn)一步培養(yǎng)形成組織,然后經(jīng)過(guò)形成完整的雜種植株。這種培育技術(shù)稱為 。(2)上述雜種植株屬于多倍體,多倍體是指。假設(shè)甲和乙有性雜交的后代是不育的,而上述雜種植株是可育的,造成這種差異的原因是 。(3)這種雜種植株可通過(guò)制作人工種子的方法來(lái)大量繁殖,經(jīng)植物組織培養(yǎng)得到的等材料用人工薄膜包裝后可得到人工種子。點(diǎn)睛:本題考查了植物體細(xì)胞雜交技術(shù)的應(yīng)用,涉及植物體細(xì)胞的雜交、植物組織培養(yǎng)、染色體數(shù)目的變異等。意在考查考生對(duì)植物體細(xì)胞雜交技術(shù)過(guò)程的識(shí)記和對(duì)多倍體是否可育的理解分析能力。解析:(1)植物體細(xì)胞的雜交過(guò)程包括植物細(xì)胞融合和植物組織培養(yǎng),其過(guò)程為先用酶解法即纖維素酶和果膠酶除去植物細(xì)胞壁,再用人工誘導(dǎo)方法誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合,雜種細(xì)胞再生細(xì)胞壁,雜種細(xì)胞經(jīng)植物組織培養(yǎng)(脫分化形成愈傷組織,再分化形成幼根和芽,進(jìn)而形成完整植株)培育成完整的植株。(2)多倍體是指由受精卵發(fā)育而來(lái),體細(xì)胞中含有三個(gè)或三個(gè)以上染色體組的個(gè)體。甲、乙都是二倍體植物,二者有性雜交的后代為異源二倍體,體細(xì)胞中無(wú)同源染色體,減數(shù)分裂時(shí)聯(lián)會(huì)紊亂,無(wú)法產(chǎn)生正常配子;而植物體細(xì)胞雜交產(chǎn)生的后代,細(xì)胞內(nèi)含有原物種體細(xì)胞內(nèi)的染色體,在減數(shù)第一次分裂過(guò)程能進(jìn)行同源染色體聯(lián)會(huì),產(chǎn)生可育配子。(3)經(jīng)植物組織培養(yǎng)得到的胚狀體、不定芽、頂芽、腋芽等,用人工薄膜包裝后可得到人工種子。答案:(1)纖維素果膠原生質(zhì)體愈傷再分化(或分化)植物體細(xì)胞雜交技術(shù)(2)體細(xì)胞中含有三個(gè)或三個(gè)以上染色體組的個(gè)體(其他合理答案也可)在減數(shù)分裂過(guò)程中,前者染色體聯(lián)會(huì)異常,而后者染色體聯(lián)會(huì)正常(其他合理答案也可)(3)胚狀體、不定芽、頂芽、腋芽(答對(duì)其中一個(gè)即可)4.(2013年天津理綜,T9,15分,)花椰菜易受黑腐病菌的危害而患黑腐病。野生黑芥具有黑腐病的抗性基因。用一定劑量的紫外線處理黑芥原生質(zhì)體可使其染色體片段化,并喪失再生能力。再利用此原生質(zhì)體作為部分遺傳物質(zhì)的供體與完整的花椰菜原生質(zhì)體融合,以獲得抗黑腐病雜種植株。流程如圖。據(jù)圖回答下列問(wèn)題:(1)過(guò)程所需的酶是。(2)過(guò)程后,在顯微鏡下觀察融合的活細(xì)胞中有供體的存在,這一特征可作為初步篩選雜種細(xì)胞的標(biāo)志。(3)原生質(zhì)體培養(yǎng)液中需要加入適宜濃度的甘露醇以保持一定的滲透壓,其作用是。原生質(zhì)體經(jīng)過(guò)再生,進(jìn)而分裂和脫分化形成愈傷組織。(4)若分析再生植株的染色體變異類型,應(yīng)剪取再生植株和植株的根尖,通過(guò)、染色和制片等過(guò)程制成裝片,然后在顯微鏡下觀察比較染色體的形態(tài)和數(shù)目。(5)采用特異性引物對(duì)花椰菜和黑芥基因組DNA進(jìn)行PCR擴(kuò)增,得到兩親本的差異性條帶,可用于雜種植株的鑒定。如圖是用該引物對(duì)雙親及再生植株14進(jìn)行PCR 擴(kuò)增的結(jié)果。據(jù)圖判斷,再生植株14中一定是雜種植株的有。(6)對(duì)雜種植株進(jìn)行接種實(shí)驗(yàn),可篩選出具有高抗性的雜種植株。點(diǎn)睛:本題以抗黑腐病花椰菜的培育為信息載體,綜合考查了植物體細(xì)胞雜交、植物組織培養(yǎng)、細(xì)胞分裂裝片的制作觀察、PCR圖譜的識(shí)別等相關(guān)內(nèi)容,意在考查考生識(shí)圖獲取信息、對(duì)知識(shí)的理解和綜合運(yùn)用能力。解析:(1)過(guò)程表示原生質(zhì)體的制備,用酶解法即纖維素酶和果膠酶去掉植物細(xì)胞的細(xì)胞壁。(2)用于融合的兩個(gè)細(xì)胞,一個(gè)是黑芥苗的葉肉細(xì)胞,一個(gè)是花椰菜的根部細(xì)胞,其中供體使用的葉肉細(xì)胞特有的結(jié)構(gòu)是葉綠體,可通過(guò)觀察葉綠體的有無(wú)作為初步篩選雜種細(xì)胞的標(biāo)志。(3)原生質(zhì)體沒(méi)有細(xì)胞壁的保護(hù),需要加入適宜濃度的甘露醇以保證一定的滲透壓,以避免原生質(zhì)體吸水或失水破壞原生質(zhì)體的完整性;原生質(zhì)體通過(guò)細(xì)胞壁再生形成雜種細(xì)胞,再經(jīng)過(guò)脫分化形成愈傷組織。(4)若要分析再生植株染色體變異類型,需要將再生植株細(xì)胞中染色體和黑芥苗與花椰菜細(xì)胞中的染色體制片觀察進(jìn)行比較,裝片制作的基本程序是解離、漂洗、染色、制片。(5)根據(jù)圖譜,花椰菜含有堿基對(duì)為300和600的DNA片段,黑芥含有堿基對(duì)為1 000、1 300和1 500的片段,再生植株3,只含有長(zhǎng)度為300和600的片段,與花椰菜一致,1、2、4既含有花椰菜DNA片段,又含有黑芥DNA片段,為雜種植株。(6)對(duì)雜種植株接種黑腐病菌,若不患黑腐病即為具有高抗性的雜種植株。答案:(1)纖維素酶和果膠酶(2)葉綠體(3)保持原生質(zhì)體完整性細(xì)胞壁(4)雙親(或花椰菜和黑芥)解離漂洗(5)1、2、4(6)黑腐病菌5.(2012年江蘇單科,T31,8分,)某研究組對(duì)秈稻開(kāi)展了組織培養(yǎng)及相關(guān)研究,請(qǐng)回答下列問(wèn)題:(1)2,4D常用于秈稻愈傷組織的誘導(dǎo),對(duì)形態(tài)的發(fā)生有一定的抑制作用。為促進(jìn)愈傷組織再分化,在配制分化培養(yǎng)基時(shí)需(填“升高”、“保持”或“降低”)2,4D的濃度。(2)當(dāng)秈稻愈傷組織在只含有細(xì)胞分裂素的培養(yǎng)基上培養(yǎng)時(shí),出現(xiàn)具有分生能力的綠色芽點(diǎn),但不能繼續(xù)出芽,通常在培養(yǎng)基中添加,以促進(jìn)幼苗形成。(3)研究中用顯微鏡可以觀察到的現(xiàn)象是(填下列序號(hào))。綠色芽點(diǎn)細(xì)胞排列松散剛?cè)诤系亩i稻和稗草雜交細(xì)胞發(fā)生質(zhì)壁分離胚狀體細(xì)胞中有葉綠體分化的愈傷組織內(nèi)各細(xì)胞的形態(tài)大小一致(4)經(jīng)組織培養(yǎng)篩選獲得的秈稻葉綠素突變體,其葉綠素a與葉綠素b的比值顯著大于對(duì)照,葉綠素總量不變。某同學(xué)用(填序號(hào):綠色;紅色色;藍(lán)紫色色;黃色)光照射突變體和對(duì)照葉片,檢測(cè)到兩者光合放氧速率差異不大。若取等量色素提取液進(jìn)行層析,會(huì)發(fā)現(xiàn)突變體第條色素帶(自上而下)窄于對(duì)照組。(5)胚乳(3n)由一個(gè)精子與兩個(gè)極核受精發(fā)育而成。若用秈稻種子的胚乳誘導(dǎo)愈傷組織,培育三倍體,需適時(shí)剔除胚,以免胚的存在影響愈傷組織細(xì)胞的,還可避免再生苗中混有。點(diǎn)睛:本題是對(duì)植物組織培養(yǎng)知識(shí)的考查,目的是考查學(xué)生的實(shí)踐應(yīng)用能力。解析:(1)2,4D是生長(zhǎng)素類似物,其含量高時(shí),有利于細(xì)胞脫分化,含量降低時(shí),有利于促進(jìn)愈傷組織再分化。(2)在植物組織培養(yǎng)中,培養(yǎng)基中細(xì)胞分裂素多時(shí),有利于誘導(dǎo)愈傷組織生芽,生長(zhǎng)素含量較多時(shí),有利于誘導(dǎo)愈傷組織生根,促進(jìn)幼苗形成。(3)用顯微鏡可以看到細(xì)胞內(nèi)的葉綠體,而胚狀體細(xì)胞內(nèi)含有葉綠體,故正確。(4)葉綠素主要吸收紅光和藍(lán)紫光,故在綠光和黃光的照射下,突變體和對(duì)照組的葉片光合作用無(wú)明顯差異。突變體的葉綠素a與葉綠素b的比值大于對(duì)照組,而葉綠素的總量不變,則葉綠素a的含量增多、葉綠素b的含量減少,故色素分離的結(jié)果是濾紙條自上而下的第4條色素帶窄于對(duì)照組。(5)剔除胚是防止影響愈傷組織細(xì)胞增殖分化,還可避免出現(xiàn)二倍體幼苗。答案:(1)降低(2)適量生長(zhǎng)素(3)(4)4(5)增殖與分化二倍體幼苗6.(2011年天津理綜,T8,14分,)絮凝性細(xì)菌分泌的具有絮凝活性的高分子化合物,能與石油污水中的懸浮顆粒和有機(jī)物等形成絮狀沉淀,起到凈化污水的作用。為進(jìn)一步提高對(duì)石油污水的凈化效果,將絮凝性細(xì)菌和石油降解菌融合,構(gòu)建目的菌株。其流程圖如下。據(jù)圖回答:(1)溶菌酶的作用是 。(2)PEG的作用是 。(3)經(jīng)處理后,在再生培養(yǎng)基上,未融合的A、B難以生長(zhǎng)。圖中AB融合菌能生長(zhǎng)和繁殖的原因是。(4)目的菌株的篩選:篩選既能分泌具有絮凝活性的化合物,又能在含有的培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的AB融合菌,選擇效果最好的作為目的菌株。(5)為探究目的菌株不同發(fā)酵時(shí)間發(fā)酵液的絮凝效果,將目的菌株進(jìn)行發(fā)酵培養(yǎng),定時(shí)取發(fā)酵液,加入石油污水中;同時(shí)設(shè)置為對(duì)照組。經(jīng)攪拌、靜置各3分鐘后,分別測(cè)定上層水樣的石油濃度和COD值(COD值越高表示有機(jī)物污染程度越高),計(jì)算石油去除率和COD去除率,結(jié)果如下圖。(6)目的菌的種群增長(zhǎng)曲線呈型。在4044小時(shí),發(fā)酵液對(duì)石油污水的凈化效果最好,其原因是 。點(diǎn)睛:本題以細(xì)菌的融合為背景,考查植物原生質(zhì)體雜交的過(guò)程、操作及應(yīng)用,是對(duì)知識(shí)遷移、應(yīng)用能力的考查。解析:(1)絮凝性細(xì)菌與石油降解菌融合時(shí),首先需要溶菌酶分解細(xì)胞壁獲得原生質(zhì)體。(2)原生質(zhì)體融合時(shí),常用PEG誘導(dǎo)融合。(3)兩種原生質(zhì)體A、B分別經(jīng)過(guò)熱處理和紫外線處理失活難以生長(zhǎng),但兩者失活部位不同,A、B融合后活性部位互補(bǔ),故仍可在再生培養(yǎng)基上生長(zhǎng)。(4)我們需要的目的菌株是既能分泌具有絮凝活性的化合物,又能在含有石油的培養(yǎng)基上生長(zhǎng)。(5)設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)探究目的菌株不同發(fā)酵時(shí)間發(fā)酵液的絮凝效果時(shí),實(shí)驗(yàn)變量是發(fā)酵液的有無(wú),對(duì)照組是不加發(fā)酵液的石油污水,實(shí)驗(yàn)組是添加發(fā)酵液的石油污水。(6)據(jù)圖知,目的菌株呈“S”型增長(zhǎng)。4044小時(shí),目的菌株及其產(chǎn)生的絮凝性高分子化合物的含量較高,發(fā)酵液對(duì)石油污水的凈化效果最好。答案:(1)分解細(xì)胞壁(2)誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合(3)兩親本失活部位不同,融合后活性部位互補(bǔ)(4)石油(5)不加發(fā)酵液的石油污水(6)S此期間,目的菌及其產(chǎn)生的絮凝活性高分子化合物的含量高模擬試題1.(2013寧波模擬)下列有關(guān)植物克隆技術(shù)的敘述中,錯(cuò)誤的是()A.誘導(dǎo)某些植物的愈傷組織能使其直接發(fā)育成花芽B.植物組織培養(yǎng)中通過(guò)調(diào)節(jié)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的配比可以實(shí)現(xiàn)器官發(fā)生和形態(tài)建成C.植物愈傷組織通過(guò)液體懸浮培養(yǎng)能分散成單細(xì)胞,這種單細(xì)胞能發(fā)育成胚狀體D.通過(guò)大量培養(yǎng)特定細(xì)胞系,可以克隆出大量能產(chǎn)生重要次生代謝產(chǎn)物的細(xì)胞解析:植物組織培養(yǎng)中通過(guò)調(diào)節(jié)植物激素的配比可以實(shí)現(xiàn)器官發(fā)生和形態(tài)建成,A正確、B錯(cuò)誤。幾乎所有的植物細(xì)胞都有全能性,可培養(yǎng)為胚狀體,進(jìn)而發(fā)育為完整植株,C正確。在一定的植物激素配比條件下,愈傷組織可只增殖不分化,從而克隆出大量能產(chǎn)生重要次生代謝產(chǎn)物的細(xì)胞,如紫草素的提取,D正確。答案:B2.(2013江蘇南京、鹽城一模)如圖為某二倍體植株花藥中未成熟花粉在適宜培養(yǎng)基上形成完整植株的過(guò)程。下列有關(guān)敘述正確的是()A.過(guò)程表示脫分化,過(guò)程表示再分化B.過(guò)程需要避光,過(guò)程需要照光C.過(guò)程說(shuō)明花粉細(xì)胞具有全能性D.過(guò)程獲得的完整植株自交后代不會(huì)發(fā)生性狀分離解析:過(guò)程表示脫分化,過(guò)程表示再分化,過(guò)程表示叢芽的發(fā)育過(guò)程;其中,過(guò)程需要避光,過(guò)程需要照光,A、B錯(cuò)誤。過(guò)程獲得了完整植株,說(shuō)明花粉細(xì)胞具有全能性,C正確。該過(guò)程獲得的植株為單倍體,高度不育,D錯(cuò)誤。答案:C3.(2013金華十校模擬)如圖表示利用植物細(xì)胞工程對(duì)棉花進(jìn)行改良的過(guò)程,據(jù)圖分析錯(cuò)誤的是()A.過(guò)程需在適宜條件下用纖維素酶和果膠酶處理B.過(guò)程定向改變?cè)|(zhì)體的遺傳特性C.過(guò)程需要通過(guò)液體懸浮培養(yǎng)D.過(guò)程需用適宜濃度的生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑處理解析:過(guò)程需用纖維素酶和果膠酶處理去掉細(xì)胞壁,獲得原生質(zhì)體,A正確。過(guò)程為轉(zhuǎn)基因技術(shù),能定向改變?cè)|(zhì)體的遺傳特性,B正確。過(guò)程需要在固體培養(yǎng)基上培養(yǎng),C錯(cuò)誤。過(guò)程需用適宜濃度的生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑處理,促進(jìn)根、芽的發(fā)育,D正確。答案:C4.(2011徐州模擬)下列關(guān)于植物體細(xì)胞雜交技術(shù)的敘述,錯(cuò)誤的是()A.獲得原生質(zhì)體的過(guò)程需要用到纖維素酶和果膠酶B.利用植物體細(xì)胞雜交可以獲得某種多倍體植株C.植物體細(xì)胞雜交過(guò)程就是原生質(zhì)體融合的過(guò)程D.可根據(jù)細(xì)胞中染色體數(shù)目和形態(tài)的差異來(lái)鑒定雜種細(xì)胞解析:利用纖維素酶和果膠酶去除細(xì)胞壁,才能獲得原生質(zhì)體;通過(guò)植物體細(xì)胞雜交可獲得多倍體,并可根據(jù)細(xì)胞中染色體數(shù)目和形態(tài)的差異來(lái)鑒定是否是雜種細(xì)胞。植物體細(xì)胞雜交過(guò)程包括原生質(zhì)體融合和植物組織培養(yǎng)過(guò)程。答案:C5.(2012廣州模擬)紅豆杉是瀕危植物,其樹(shù)皮產(chǎn)生的紫杉醇對(duì)癌癥有一定的療效。如圖是紅豆杉植株組織培養(yǎng)和細(xì)胞培養(yǎng)的流程圖。請(qǐng)據(jù)圖回答下列問(wèn)題。(1)圖中為愈傷組織,通過(guò)B過(guò)程可最終產(chǎn)生新的植株,通過(guò)C過(guò)程可產(chǎn)生大量細(xì)胞,則圖中A、B、C分別表示的過(guò)程為。其中B過(guò)程的實(shí)質(zhì)是 。(2)對(duì)的培養(yǎng)一般要采用培養(yǎng)基,且要不斷通入無(wú)菌空氣并進(jìn)行攪拌,其目的是 。(3)對(duì)的培養(yǎng)可獲得代謝產(chǎn)物紫杉醇,但培養(yǎng)后期紫杉醇產(chǎn)量下降,其原因包括等。(4)若是紅豆杉(基因型為DdTt)的花藥,可選用(填編號(hào))制成人工種子,該“種子”萌發(fā)的幼苗用處理,可快速獲得純種植株,該植株的基因型為。解析:圖中為紅豆杉離體的植物器官、組織或細(xì)胞(外植體),為愈傷組織,為試管苗(胚狀體),為植物體,為大量的紅豆杉細(xì)胞;再分化的實(shí)質(zhì)是細(xì)胞內(nèi)基因的選擇性表達(dá)。的培養(yǎng)目的是使細(xì)胞快速增殖,一般采用液體培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng),在培養(yǎng)過(guò)程中通入無(wú)菌空氣是為了保證細(xì)胞生長(zhǎng)過(guò)程中氧氣的供應(yīng),不斷攪拌的目的是讓細(xì)胞和培養(yǎng)液充分接觸;液體培養(yǎng)的后期,由于細(xì)胞代謝產(chǎn)物的積累,以及營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消耗,導(dǎo)致細(xì)胞數(shù)量減少,其代謝產(chǎn)物減少;紅豆杉的花藥經(jīng)培養(yǎng)可獲得單倍體,再經(jīng)秋水仙素處理,可使染色體加倍,快速獲得純種植株;如果親本的基因型為DdTt,則獲得的純種植株的基因型有DDTT、DDtt、ddTT、ddtt四種。答案:(1)脫分化、再分化、有絲分裂基因的選擇性表達(dá)(2)液體保證氧氣的供應(yīng)、使細(xì)胞和培養(yǎng)液充分接觸(3)活細(xì)胞數(shù)量減少,某些代謝產(chǎn)物的積累(4)秋水仙素DDTT、DDtt、ddTT、ddtt考點(diǎn)六十六 動(dòng)物細(xì)胞工程高考試題1.(2013年重慶理綜,T2,6分,)如圖是單克隆抗體制備流程的簡(jiǎn)明示意圖。下列有關(guān)敘述正確的是()A.是從已免疫的小鼠脾臟中獲得的效應(yīng)T淋巴細(xì)胞B.中使用胰蛋白酶有利于雜交瘤細(xì)胞的形成C.同時(shí)具有脾臟細(xì)胞和鼠骨髓瘤細(xì)胞的特性D.是經(jīng)篩選培養(yǎng)獲得的能分泌特異性抗體的細(xì)胞群點(diǎn)睛:本題聯(lián)系流程圖考查單克隆抗體制備過(guò)程,意在考查考生對(duì)單克隆抗體制備流程的識(shí)記能力和理解能力。解析:是獲得的已經(jīng)免疫的效應(yīng)B細(xì)胞,即漿細(xì)胞,A項(xiàng)錯(cuò)誤;中使用胰蛋白酶使組織塊分散為單個(gè)細(xì)胞,B項(xiàng)錯(cuò)誤;同時(shí)具有效應(yīng)B細(xì)胞和鼠骨髓瘤細(xì)胞的特性,C項(xiàng)錯(cuò)誤;是經(jīng)篩選后獲得的能夠分泌特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞,D項(xiàng)正確。答案:D2.(2013年浙江理綜,T6,6分,)實(shí)驗(yàn)小鼠皮膚細(xì)胞培養(yǎng)(非克隆培養(yǎng))的基本過(guò)程如圖所示。下列敘述錯(cuò)誤的是()實(shí)驗(yàn)小鼠皮膚組織皮膚細(xì)胞培養(yǎng)細(xì)胞1培養(yǎng)細(xì)胞2A.甲過(guò)程需要對(duì)實(shí)驗(yàn)小鼠進(jìn)行消毒B.乙過(guò)程對(duì)皮膚組織可用胰蛋白酶消化C.丙過(guò)程得到的細(xì)胞大多具有異倍體核型D.丁過(guò)程得到的細(xì)胞具有異質(zhì)性點(diǎn)睛:本題考查動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的相關(guān)知識(shí),意在考查考生對(duì)相關(guān)知識(shí)靈活運(yùn)用的能力。解析:圖示甲過(guò)程是進(jìn)行動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的第一步獲取動(dòng)物組織,為了避免雜菌的污染,應(yīng)進(jìn)行消毒處理,A項(xiàng)正確;乙過(guò)程表示將皮膚組織分散成單個(gè)細(xì)胞,可用胰蛋白酶消化,B項(xiàng)正確;丙過(guò)程表示由組織細(xì)胞培養(yǎng)到細(xì)胞系的過(guò)程,小鼠細(xì)胞是二倍體細(xì)胞,其細(xì)胞系大多數(shù)為有限細(xì)胞系,能繼續(xù)培養(yǎng)下去具有異倍體核型的連續(xù)細(xì)胞系很少,C項(xiàng)錯(cuò)誤;丁過(guò)程表示通過(guò)選擇或純化從細(xì)胞系中獲得具有特殊性質(zhì)的細(xì)胞株的過(guò)程,細(xì)胞株具有異質(zhì)性,D項(xiàng)正確。答案:C3.(2010年浙江理綜,T4,6分,)下列關(guān)于動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的敘述,正確的是()A.培養(yǎng)保留接觸抑制的細(xì)胞在培養(yǎng)瓶壁上可形成多層細(xì)胞B.克隆培養(yǎng)法培養(yǎng)過(guò)程中多數(shù)細(xì)胞的基因型會(huì)發(fā)生改變C.二倍體細(xì)胞的傳代培養(yǎng)次數(shù)通常是無(wú)限的D.惡性細(xì)胞系的細(xì)胞可進(jìn)行傳代培養(yǎng)點(diǎn)睛:本題考查動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的特點(diǎn),是對(duì)識(shí)記能力和理解能力的考查。解析:動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)可以分為原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng),原代培養(yǎng)到一定程度后要進(jìn)行傳代,因?yàn)榧?xì)胞有接觸抑制現(xiàn)象,當(dāng)細(xì)胞接觸時(shí)就會(huì)停止分裂。在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中細(xì)胞進(jìn)行有絲分裂,所以培養(yǎng)出來(lái)的多數(shù)細(xì)胞基因型相同。細(xì)胞在培養(yǎng)過(guò)程中,傳代次數(shù)也是有限的,一般為50次就會(huì)死亡,留下來(lái)的細(xì)胞就是發(fā)生了癌變的細(xì)胞,具有不死性,可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。答案:D4.(2009年浙江理綜,T1,6分,)用動(dòng)、植物成體的體細(xì)胞進(jìn)行離體培養(yǎng),下列敘述正確的是()A.都需要用CO2培養(yǎng)箱B.都需要用液體培養(yǎng)基C.都要在無(wú)菌條件下進(jìn)行D.都可體現(xiàn)細(xì)胞的全能性點(diǎn)睛:本題考查動(dòng)植物細(xì)胞培養(yǎng)的條件及比較,是對(duì)識(shí)記能力和比較、判斷能力的考查。解析:動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)需用CO2培養(yǎng)箱;動(dòng)物成體的體細(xì)胞離體培養(yǎng)用液體培養(yǎng)基,不能體現(xiàn)細(xì)胞的全能性;植物成體的體細(xì)胞離體培養(yǎng)一般用固體培養(yǎng)基,能體現(xiàn)細(xì)胞的全能性;動(dòng)、植物成體的體細(xì)胞進(jìn)行離體培養(yǎng)都要在無(wú)菌條件下進(jìn)行。答案:C5.(2013年福建理綜,T33,10分,)克隆豬成功率較低,與早期胚胎細(xì)胞的異常凋亡有關(guān)。Bcl2基因是細(xì)胞凋亡抑制基因,用PCR技術(shù)可以檢測(cè)該基因轉(zhuǎn)錄水平,進(jìn)而了解該基因與不同胚胎時(shí)期細(xì)胞凋亡的關(guān)系?？寺∝i的培育及該基因轉(zhuǎn)錄水平檢測(cè)流程如下圖。請(qǐng)回答:(1)圖中重組細(xì)胞的細(xì)胞核來(lái)自細(xì)胞,早期胚胎移入受體子宮后繼續(xù)發(fā)育,經(jīng)桑椹胚、囊胚和胚最終發(fā)育為克隆豬。(2)在PCR過(guò)程中可檢測(cè)出cDNA中Bcl2 cDNA的分子數(shù),進(jìn)而計(jì)算總mRNA中Bcl2 mRNA的分子數(shù),從而反映出Bcl2基因的轉(zhuǎn)錄水平。圖中X表示過(guò)程。從基因組數(shù)據(jù)庫(kù)中查詢Bcl2 mRNA的核苷酸序列,以便根據(jù)這一序列設(shè)計(jì)合成用于PCR擴(kuò)增,PCR過(guò)程第一輪循環(huán)的模板是 。點(diǎn)睛:本題綜合考查PCR技術(shù)、細(xì)胞工程和早期胚胎發(fā)育等相關(guān)知識(shí),意在考查考生從材料中獲取信息并進(jìn)行分析的能力及結(jié)合已有知識(shí)解決相關(guān)問(wèn)題的能力。解析:(1)重組細(xì)胞的細(xì)胞核來(lái)自具有優(yōu)良性狀的親本,據(jù)圖知,應(yīng)由良種豬提供細(xì)胞核,所以細(xì)胞核來(lái)自良種豬的體細(xì)胞;早期胚胎發(fā)育經(jīng)過(guò)桑椹胚、囊胚和原腸胚等階段,最終發(fā)育為個(gè)體。(2)圖中X過(guò)程是由mRNA得到cDNA,屬于反轉(zhuǎn)錄。利用PCR技術(shù)獲取目的基因的前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列,以便根據(jù)這一序列合成引物,用于PCR擴(kuò)增。模板是目的基因,即Bcl2 cDNA。答案:(1)體原腸(2)反轉(zhuǎn)錄引物Bcl2 cDNA6.(2009年山東理綜,T35,8分,)人類在預(yù)防與診療傳染性疾病過(guò)程中,經(jīng)常使用疫苗和抗體。已知某傳染性疾病的病原體為RNA病毒,該病毒表面的A蛋白為主要抗原,且疫苗生產(chǎn)和抗體制備的流程之一如下圖:請(qǐng)回答:(1)過(guò)程代表的是。(2)過(guò)程構(gòu)建A基因表達(dá)載體時(shí),必須使用和兩種工具酶。(3)過(guò)程采用的實(shí)驗(yàn)技術(shù)是,獲得的X是。(4)對(duì)健康人進(jìn)行該傳染病免疫預(yù)防時(shí),可選用圖中基因工程生產(chǎn)的所制備的疫苗。對(duì)該傳染病疑似患者確診時(shí),可從疑似患者體內(nèi)分離病毒,與已知病毒進(jìn)行比較;或用圖中的進(jìn)行特異性結(jié)合檢測(cè)。點(diǎn)睛:本題以流程圖展示了疫苗的生產(chǎn)和單克隆抗體的制備的過(guò)程,考查了基因工程、動(dòng)物細(xì)胞工程等現(xiàn)代生物科技及其應(yīng)用,是對(duì)識(shí)記能力和識(shí)圖、分析能力的考查。解析:(1)圖中過(guò)程表示以RNA為模板合成DNA的過(guò)程,代表的是逆轉(zhuǎn)錄的過(guò)程。(2)構(gòu)建基因表達(dá)載體中需要限制酶來(lái)切割以獲取目的基因,同時(shí)需要相同的限制酶切割運(yùn)載體以獲取與目的基因相同的黏性末端,再通過(guò)DNA連接酶連接目的基因和運(yùn)載體。(3)過(guò)程是將骨髓瘤細(xì)胞與B淋巴細(xì)胞融合的過(guò)程,獲得的是雜交瘤細(xì)胞,其具備了骨髓瘤細(xì)胞的無(wú)限增殖的特性和B淋巴細(xì)胞的產(chǎn)生抗體的特性,從而制備單克隆抗體。(4)本題中提示該RNA病毒表面的A蛋白為主要的抗原,故而可選用通過(guò)基因工程生產(chǎn)的A蛋白制備疫苗;確診時(shí)為判斷該病毒是否為題目中的RNA病毒,可以進(jìn)行核酸序列的比對(duì);也可以利用單克隆抗體具備特異性,利用抗A蛋白單克隆抗體進(jìn)行特異性結(jié)合檢測(cè),判斷病毒表面是否有A蛋白的存在,進(jìn)一步進(jìn)行檢測(cè)是否為目的RNA病毒。答案:(1)逆轉(zhuǎn)錄(2)限制性核酸內(nèi)切酶(限制酶、限制性內(nèi)切酶)DNA連接酶(兩空可以互換)(3)細(xì)胞融合雜交瘤細(xì)胞(4)A蛋白核酸(基因)序列抗A蛋白的單克隆抗體模擬試題1.(2013杭州一檢)以下有關(guān)動(dòng)物細(xì)胞、組織培養(yǎng)的表述中正確的是()A.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)中,含5%CO2的恒溫培養(yǎng)箱用來(lái)調(diào)控pH和溫度B.動(dòng)物組織培養(yǎng)過(guò)程中不會(huì)出現(xiàn)組織分化C.傳代培養(yǎng)的細(xì)胞因最接近于體內(nèi)細(xì)胞的生長(zhǎng)特性,常用于藥物測(cè)試研究D.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中,首先要用胃蛋白酶處理部分組織使細(xì)胞分散獲得單個(gè)細(xì)胞解析:在適宜的條件下,培養(yǎng)的動(dòng)物細(xì)胞可發(fā)生分化,也可能只增殖不分化,B錯(cuò)誤。傳代培養(yǎng)的細(xì)胞中遺傳物質(zhì)可能會(huì)發(fā)生變化,因此與體內(nèi)細(xì)胞不接近,C錯(cuò)誤。胃蛋白酶作用的最適pH為2.0左右,而動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的適宜pH為7.27.4,所以不能用胃蛋白酶處理動(dòng)物組織,D錯(cuò)誤。答案:A2.(2013揚(yáng)州質(zhì)檢)下列方案中不能制備出抗H1N1流感病毒單克隆抗體的是()A.將H1N1流感病毒抗原的基因?qū)牍撬枇黾?xì)胞,并使該基因表達(dá)B.將抗H1N1流感病毒抗體的基因?qū)牍撬枇黾?xì)胞,并使該基因表達(dá)C.將產(chǎn)生抗H1N1流感病毒抗體的B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合,篩選出雜交瘤細(xì)胞并進(jìn)行體外大規(guī)模培養(yǎng)D.將骨髓瘤細(xì)胞中的癌基因?qū)肽墚a(chǎn)生抗H1N1流感病毒抗體的B淋巴細(xì)胞中,并使癌基因表達(dá)解析:抗體是由抗體基因編碼的,而非抗原基因編碼的,因此A錯(cuò)誤、B正確。將骨髓瘤細(xì)胞中的癌基因?qū)肽墚a(chǎn)生抗H1N1流感病毒抗體的B淋巴細(xì)胞中,并使癌基因表達(dá),可使B淋巴細(xì)胞獲得無(wú)限增殖能力,相當(dāng)于雜交瘤細(xì)胞,可用于制備抗H1N1流感病毒單克隆抗體,C、D正確。答案:A3.(2012北京東城區(qū)模擬)下列與細(xì)胞工程技術(shù)相關(guān)的表述中,不正確的是()A.植物體細(xì)胞雜交技術(shù)可以克服常規(guī)的遠(yuǎn)緣雜交不親和障礙B.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)與植物組織培養(yǎng)所用的培養(yǎng)基成分基本相同C.動(dòng)物細(xì)胞融合與植物原生質(zhì)體融合的基本原理相同D.植物組織培養(yǎng)技術(shù)的理論基礎(chǔ)是細(xì)胞的全能性解析:植物體細(xì)胞雜交可以把來(lái)自不同植物細(xì)胞融合在一起,克服了自然狀態(tài)下植物間遠(yuǎn)緣雜交不親和障礙,A正確。植物細(xì)胞培養(yǎng)基除基本成分