016    前  言本標(biāo)準(zhǔn)代替008肉與肉制品 葡萄糖酸本標(biāo)準(zhǔn)與008相比,主要變化如下:標(biāo)準(zhǔn)名稱修改為“食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品中葡萄糖酸增加了第一法的檢出限、定量限;增加了“第二法 高效液相色譜法”。0161    食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)食品中葡萄糖酸圍本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了食品中葡萄糖酸標(biāo)準(zhǔn)第一法適用于肉與肉制品、豆制品、飲料中葡萄糖酸二法適用于食品中葡萄糖酸一法 分光光度計(jì)法2 原理用沸水提取試樣中的葡萄糖酸濾上清液,在氫氧化鉀作用下葡萄糖酸萄糖酸鹽通過(guò)葡萄糖酸激酶和6生5原。用分光光度計(jì)測(cè)量還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸的吸光度,然后計(jì)算出葡萄糖酸萄糖酸鹽+腺嘌呤核苷三磷酸葡萄糖酸激酶6磷酸腺苷6+3 試劑和材料除非另有說(shuō)明,本方法所用試劑均為分析純,水為6682規(guī)定的三級(jí)水。水乙醇(油醚:沸程3060。氧化鉀(甘氨肽(化鎂(酸氫鈉(酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸鈉鹽(嘌呤核苷三磷酸鈉鹽(力,110U/萄糖酸激酶(活力,13U/氧化鉀溶液(2):水溶解后轉(zhuǎn)移至1000162    定容。沖液:容到200在4下保存4周)。酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸鹽(液(10mg/稱取煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸鈉鹽50在4下保存4周)。嘌呤核苷三磷酸(液(50mg/稱取腺嘌呤核苷三磷酸鈉鹽250在4下保存4周)。液(每毫升6可在4下保存6個(gè)月)。 萄糖酸激酶(液(每毫升葡萄糖酸激酶(可在4下保存6個(gè)月)。4 外可見分光光度計(jì)。析天平:質(zhì)機(jī)。5 與肉制品、豆制品等固體樣品取有代表性的樣品不少于200g,用勻質(zhì)機(jī)制成勻漿。制成后的試樣應(yīng)盡快分析,若不立即分析,應(yīng)密封冷凍貯存。貯存的試樣在啟用時(shí)應(yīng)重新混勻。料等液體樣品搖勻后直接取樣。取肉制品:稱取2g10g(樣于50入10玻璃棒攪拌均勻,靜置15干燥濾紙過(guò)濾,重復(fù)洗滌三次。再用10后將濾紙上殘?jiān)D(zhuǎn)移至原小燒杯中,加30冷卻后用氫氧化鉀溶液(2)調(diào)至溶液水定容至100濾,濾液待上機(jī)用。豆制品:稱取2g10g(樣于5030沸,冷卻后用氫氧化鉀溶液(2)水定容至100濾,濾液待上機(jī)用。飲料:過(guò)濾,準(zhǔn)確吸取30)調(diào)至溶液水定容至100上機(jī)用。定取兩個(gè)1個(gè)為試驗(yàn)皿,一個(gè)為空白皿。分別按序加入緩沖液(0mg/0mg/蓋混勻;蓋混勻。再分別加入60163    勻后放置5空白為參比在3651試驗(yàn)溶液的吸光度值;空白溶液的吸光度值。取即混勻。10s15后每隔2到吸光度恒定為止。繪制出吸光度值與時(shí)間的關(guān)系曲線,并查出吸光度最大值。試驗(yàn)溶液的吸光度最大值;空白溶液的吸光度最大值。6 分析結(jié)果的表述試樣中葡萄糖酸)計(jì)算:X=0001001000100m=.2m(1)式中:X 試樣中葡萄糖酸;葡萄糖酸)A(比色液總體積,單位為毫升()摩爾吸光系數(shù),在365=340=制備比色液所用提取液的體積,單位為毫升(1000單位換算系數(shù);100提取液的定容體積,單位為毫升(100小數(shù)與百分?jǐn)?shù)之間的換算系數(shù);m試樣質(zhì)量,單位為克(g)。計(jì)算結(jié)果保留三位有效數(shù)字。7 精密度在重復(fù)性條件下獲得的兩次獨(dú)立測(cè)定結(jié)果的絕對(duì)差值不得超過(guò)算術(shù)平均值的10%。8 其他當(dāng)稱樣量為10第二法 高效液相色譜法9 原理葡萄糖酸樣經(jīng)水煮沸、提取、定容、過(guò)濾,用高效液相色譜分離。0164    酯標(biāo)準(zhǔn)水解為葡萄糖酸的峰面積比較,采用外標(biāo)法定量計(jì)算試樣中的葡萄糖酸0 試劑和材料除非另有說(shuō)明,本方法所用試劑均為分析純,水為6682規(guī)定的一級(jí)水。酸二氫鉀(酸(劑配制磷酸二氫鉀準(zhǔn)品葡萄糖酸60純度>98%。萄糖酸用水加熱煮沸提取,冷卻后定容至50磷酸二氫鉀1 效液相色譜儀,配示差折光檢測(cè)器。平:質(zhì)機(jī)。12 樣制備固體或半固體樣品使用勻質(zhì)機(jī)粉碎,液體樣品用勻漿機(jī)打成勻漿。制成后的試樣應(yīng)盡快分析,若不立即分析,應(yīng)密封冷凍貯存。貯存的試樣在啟用時(shí)應(yīng)重新混勻。取稱取2g10g(樣于5030卻后用磷酸二氫鉀液待上機(jī)用。0165    譜柱:有機(jī)酸柱,徑250厚5m,或分離效果相當(dāng)?shù)钠渌枘z鍵合柱。溫:30。差檢測(cè)器檢測(cè)池溫度:35。動(dòng)相:磷酸二氫鉀速:樣量:10L。準(zhǔn)曲線的制作將標(biāo)準(zhǔn)系列工作液分別注入高效液相色譜儀中,測(cè)定相應(yīng)的葡萄糖酸峰面積,以標(biāo)準(zhǔn)系列工作液的濃度為橫坐標(biāo),以峰面積為縱坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。樣溶液的測(cè)定將試樣溶液注入高效液相色譜儀中,得到葡萄糖酸峰面積,與葡萄糖酸據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線得到待測(cè)液中的葡萄糖酸3 分析結(jié)果的表述試樣中葡萄糖酸)計(jì)算:X=m100(2)式中:X試樣中葡萄糖酸;試樣溶液中葡萄糖酸位為毫克每毫升(mg/V提取液的定容體積,單位為毫升(m試樣的質(zhì)量,單位為克(g)。計(jì)算結(jié)果保留三位有效