海帶多糖L01對腎T腺素直接損傷血L管內(nèi)皮細(xì)胞的干預(yù)作用2007級碩士研究生學(xué)位論文海帶多糖L01對腎上腺素直接損傷內(nèi)皮細(xì)胞的干預(yù)作用摘要目的建立腎上腺素直接損傷家兔股動脈內(nèi)皮細(xì)胞的血栓模型，研究海帶多糖L01對腎上腺素致血管內(nèi)皮細(xì)胞C損傷的干預(yù)作用，從VEC形態(tài)學(xué)結(jié)構(gòu)和抗凝血功能兩方面探討海帶多糖L01對VEC的保護(hù)作用。方法將實驗家兔分成五組生理鹽水組、腎上腺素組、海帶多糖低劑量組、海帶多糖高劑量組和依諾肝素組，通過插管于股動脈游離段分別注入生理鹽水、生理鹽水一腎上腺素液、低劑量海帶多糖一腎上腺素液，高劑量海帶多糖一腎上腺素液和依諾肝素一腎上腺素液，保留25MIN后，動脈插管連接生物信號記錄系統(tǒng)BL系統(tǒng)，觀察血壓曲線，當(dāng)曲線變?yōu)橹本€即為血栓形成，記錄血栓形成時間，以此來評估內(nèi)皮細(xì)胞抗凝血功能的改變。取與藥物接觸的股動脈段，用4多聚甲醛固定，切片HE染色，觀察血管內(nèi)皮層的完整情況，以此來評估內(nèi)皮細(xì)胞結(jié)構(gòu)損傷程度。同時將標(biāo)本作TF蛋白免疫組化，以未脫落棕色內(nèi)皮層長度與血管內(nèi)壁總長的比值表示內(nèi)皮細(xì)胞層的完整程度，以血管平均灰度值表示TF在內(nèi)皮層和內(nèi)皮下組織的表達(dá)情況，從另一方面來評價內(nèi)皮細(xì)胞功能受損程度。結(jié)果腎上腺素組1999A192MIN血栓形成時間顯著短于其它各組PO05，海帶多糖低劑量組血栓形成時間3304士305MIN較海帶多糖高劑量組469釷43LMINBY顯縮短PO05。病理圖像分析儀檢測內(nèi)皮層完整程度顯示，海帶多糖高劑量組6435339與海帶多糖低劑量組內(nèi)皮細(xì)胞51774239的完整度均高于腎上腺素組38134340PO05THEOCCLUSIONTIMEINTHELOWDOSEGROUPS3304J305MINARESHORTERTHANHI曲DOSEGROUPS4694士431MINP005THEINTEGRATEDDEGREEOFVASCULARENDOTHELIALLAYERMEASUREDBYPATHOLOGYANALYZERDISPLAYEDTHATTHEINTEGRATEDDEGREEINHIGLL64354339ANDLOWDOSELAMINARANLO151774239GROUPSAREHIGHERTHANTHEADRENALINGROUP38134340PO05。表15組動脈血栓形成時間比較工趣，NLO組別平均血栓形成時間MIN生理鹽水組腎上腺素組海帶多糖低劑量組海帶多糖高劑量組依諾肝素組5738士3851999士192330443054694士43L5469A435單因素方差分析ANOVA，方差齊，SNK法比較兩組間的差異性。腎上腺素組較其它各組明顯縮短P005其余各組，P005，其余各組兩兩比較，P001，差別有統(tǒng)計學(xué)意義。圖35組血管內(nèi)膜完整程度比較FI03COMPARATIONOFTHEINTEGRITYDEGREEINTHEVECOF5GROUPS18加如約加O海帶多塘L01對腎F偶索直接損偽M管內(nèi)皮自Q胞曲F頂作用2007級顧L研究生學(xué)位論史ADRENALINGROUPENOXAPARINGROUPLL01GROUPHL01GROUP圖4股動脈病理組織切片既染色，X40FI94N曲OL雌JCLISET,ONOFFRMORALARTERYHESTAINING，X40THEMORPHOLOGICOBSERVATIONOFFRMOLARTERYENDOTHELIALD卻LAYSTHATTHEENDOTHELIUMALEINTACTANDSMOOTHINSALINE,ENDOTHELIUMRUPTARAADBREAKSONINADRENALINEGROUP,ADTHEENDOTHERLALAREPARTLYAMOTIEINLOWDEINMINARALL01GROUP，THEENDOTHELINMINH唔HANDLOWD嘴EOFINMINARALL01GROUPSAREINTEGRATEDANDCADSEESEPARATIONFROMTHEHYPEDERMIS，WHILEC02PSESURFACEAPPEARSHUTNOTBR曲BOFFINEUOXAPARINGROUP海帶多略LOI對忖L。脾索直接損傷M管內(nèi)皮自腿的十預(yù)作川2007級L。QF究生學(xué)位論文“2薄IJO_、，7，亨JVFTLL01GROEPHL01GROUP用5肢動脈TF免疫組化X40FI95LMMUNOHISTHCHEMICAILYSTAINOFFEMORALARTERYWITHTFANTIGENX40THEIMMUNOBISTOCHEMICAILYSTAINOF缸MO憎IAHERYWITHTFANTIGENDBPBYSTHATTHEENDOTHEFIUMANDSUBENDOTHELIALTISSUEAREDYEDBROWNINADRENALINEGROUP,ANDTHEENDOTHELIALATEDYEDBROWNMADDERINLOWDOSELAMINARALLOIGROUP,THEENDOTHELIALA陀DYEDLIGHTYELLOWINOTHERSGROUP曼_海帶多糖L01對腎上腺素直接損傷血管內(nèi)皮細(xì)胞的干預(yù)作用討論血管內(nèi)皮細(xì)胞VEC是一個多功能內(nèi)分泌器官，能分泌多種因子如血管舒張物質(zhì)和血管收縮物質(zhì)、促凝物質(zhì)和抗凝物質(zhì)、炎性物質(zhì)和抗炎物質(zhì)、纖溶和抗纖溶物質(zhì)、氧化和抗氧化物質(zhì)等，調(diào)節(jié)血管張力、血小板功能、血漿促凝因子激活、活化凝血因子的清除以及纖溶過程，介導(dǎo)炎癥和促進(jìn)血管修復(fù)等，使機(jī)體處于穩(wěn)態(tài)。內(nèi)皮細(xì)胞能同時釋放舒縮血管物質(zhì)，雙向調(diào)節(jié)血管張力。舒血管物質(zhì)主要有內(nèi)皮依耐性舒張因子NO、PGL2、內(nèi)皮依耐的超極化因子；縮血管物質(zhì)主要有血栓素AZTXA2、血管緊張素ANGII以及內(nèi)皮素ET。內(nèi)皮細(xì)胞釋放的NO被認(rèn)為是一個重要的抗粥樣硬化分子【71。它可以減少單核細(xì)胞和淋巴細(xì)胞趨化因子MCP及粘附分子的合成【8】，抑制促炎因子和促粥樣硬化的形成。同時，內(nèi)皮細(xì)胞釋放的ET1能夠增加誘導(dǎo)單核細(xì)胞，激活巨噬細(xì)胞，促進(jìn)粘附分子，從而加劇粥樣硬化【9】。VEC還能感知血流力度，血液中物理、化學(xué)、體液因素等變化，通過合成和分泌各種生物活性物質(zhì)做出不同的應(yīng)答。同時還是多個配體的靶器官，感受血管內(nèi)不同的生理或化學(xué)刺激，調(diào)節(jié)細(xì)胞和機(jī)體的生理活性，干預(yù)多種與血管有關(guān)的生理和病理生理過程。VEC的完整性是預(yù)防血栓形成的一個重要基礎(chǔ)，其抗血栓功能是VEC在生理狀態(tài)下最基本的功能。在生理條件下，VEC通過抗血小板、抗凝血和促纖溶來抑制血栓形成【LO】。內(nèi)皮細(xì)胞合成和釋放前列環(huán)素PGL2，內(nèi)皮衍生松弛因子EDI強(qiáng)來抑制血小板聚集；分泌抗凝血酶I、分泌肝素樣粘多糖、參與蛋白C系統(tǒng)的抗凝來抑制血液凝固；合成和釋放纖溶酶原活化劑來激活血栓溶化【L。在病理因素刺激下，內(nèi)皮細(xì)胞做出適應(yīng)性改變，持續(xù)過度的改變即為內(nèi)皮功能紊亂，具體表現(xiàn)為屏障作用減弱、內(nèi)分泌功能紊亂、內(nèi)皮抗凝特性改變等。一方面，它可合成血管性假血友病因子VWF，VWF在調(diào)節(jié)血海帶多糖L01對腎上腺素直接損傷血管內(nèi)皮細(xì)胞的干預(yù)作用2007級碩士研究生學(xué)位論文小板粘附到血管壁的過程中起著重要的作用。同時，還合成血小板活化因子PAF、血栓素A2TXA2等，促進(jìn)血小板向受損血管壁的粘附和聚集；另一方面，它可表達(dá)組織因子研、凝血因子V、X等，促進(jìn)血液凝固；此外，VEC還可分泌和釋放纖溶酶原激活物抑制物PAIPAI通過與TPA結(jié)合而抑制血栓的溶解【121。實驗結(jié)果表明，腎上腺素能夠直接損傷血管內(nèi)皮結(jié)構(gòu)，促使動脈血栓形成。我們在過去的研究中也發(fā)現(xiàn)，于人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)液中加入腎上腺素，可使培養(yǎng)液中的血管血友病因子VWF的水平呈明顯上升的趨勢【13】，組織途徑纖溶酶原激活物TPA與組織途徑纖溶酶原激活物抑制物TPAI比值含量下降141。由此說明腎上腺素既能夠損傷VEC結(jié)構(gòu)，也能夠破壞VEC調(diào)節(jié)促凝與抗血栓平衡功能。這與實驗結(jié)果相符。已有研究揭示腎上腺素對VEC的損傷作用與其代謝產(chǎn)物有關(guān)，腎上腺素在A型單胺氧化酶作用下，脫氨生成23，4二羥苯基一2羥基乙醛、過氧化氫和甲胺MA，后者在氨基脲敏感胺氧化酶SSAO作用下生成甲醛、過氧化氫和氨【51，YOSHIRO等【151認(rèn)為甲醛與自由基可通過產(chǎn)生活性氧而致細(xì)胞損傷，并呈協(xié)同作用。過氧化氫是SSAO氧化脫氨反應(yīng)產(chǎn)物之一。在FE2存在時，由FENTON反應(yīng)轉(zhuǎn)變?yōu)槎拘愿蟮牧u自由基，破壞細(xì)胞膜屏障【L6】。由此可見，腎上腺素過度脫氨是VEC損傷的一個危險因素。機(jī)體在應(yīng)激狀態(tài)，腎上腺髓質(zhì)釋放大量腎上腺素，繼而產(chǎn)生過量的脫氨產(chǎn)物，對VEC生成損傷，因此我們的研究也為進(jìn)一步研究腎上腺素?fù)p傷機(jī)制和防護(hù)打下了實驗基礎(chǔ)。在體內(nèi)，生理性止血與血栓形成的凝血過程基本上都是通過組織因子TF與凝血因子VIIAFVIIA形成復(fù)合物而啟動的。FALATI17】等采用共聚焦廣視野顯微鏡實時監(jiān)測活體小鼠微循環(huán)中血栓形成過程，發(fā)現(xiàn)TF不僅參與血栓形成的始動過程，而且還參與血栓的不斷增大以及血栓形成的整個過程，即血栓形成是循環(huán)中的TF不斷覆蓋在血栓表面，反復(fù)啟動凝血，最終使血海帶多糖L01對腎上腺素直接損傷血管內(nèi)皮細(xì)胞的干預(yù)作用2007級碩士研究生學(xué)位論文栓不斷增加的過程，因此，對于TF的研究是醫(yī)學(xué)科研熱點。TF是正常止血和血栓形成過程中的一個主要調(diào)節(jié)因子，它是一個單鏈跨膜的糖蛋白，屬于細(xì)胞因子超家族?；蚓幋a的前體蛋白為295個氨基酸，經(jīng)過加工剪掉32個氨基酸后成為含263個氨基酸的TF蛋白。TF的結(jié)構(gòu)包含3個有明顯特征的區(qū)域組成部分細(xì)胞外區(qū)219個氨基酸、單一跨膜區(qū)23個氨基酸和一個短的胞質(zhì)段21個氨基酸，與FVII結(jié)合位點位于胞外區(qū)。TF表達(dá)于各種正常組織中，如腦、肺、胎盤、肝、脾、腎、皮膚以及粘膜等重要器官巨噬細(xì)胞、成纖維細(xì)胞、血管外膜、部分上皮細(xì)胞，而其中以腦、肺和胎盤組織中含量最為豐富。生理狀態(tài)下大部分血管內(nèi)膜以外的組織細(xì)胞如血管外膜、平滑肌細(xì)胞、成纖維細(xì)胞均可固有性地表達(dá)TF抗原和MRNA。循環(huán)中的是否含有以及是否能啟動凝血尚存在爭議，循環(huán)中的嚇主要來源于血液中的一些細(xì)胞成分，單核細(xì)胞MNC是最早發(fā)現(xiàn)能夠表達(dá)TF的細(xì)胞，也是目前惟一被公認(rèn)能自身合成TF的細(xì)胞?，F(xiàn)在已經(jīng)確定嗜酸性粒細(xì)胞也表達(dá)，可能與嗜酸性粒細(xì)胞增多癥血栓傾向有關(guān)【18】。但是在正常情況下，TF在與血管接觸的內(nèi)皮細(xì)胞表面含量甚微，活性很低。因此，TF不與循環(huán)血液接觸，以保持血液流動流暢，維持血液循環(huán)功能正常，只有當(dāng)血管壁受損，內(nèi)膜結(jié)構(gòu)裸露，內(nèi)皮功能紊亂，內(nèi)皮細(xì)胞在刺激因素作用下釋放和表達(dá)大量TF。多種因素參與調(diào)節(jié)內(nèi)皮細(xì)胞合成和表達(dá)TF，包括促炎性細(xì)胞因子如耵師Q，IL1P等、胺類如5羥色胺、組織胺等和生物介質(zhì)如VEGF、凝血酶、OXLDL等【191，以及在內(nèi)皮細(xì)胞WEIBELPALADE體中表達(dá)的粘蛋白P選擇素也能誘導(dǎo)TF在內(nèi)皮細(xì)胞中表達(dá)釋放TF。目前血管緊張素ANGII能刺激內(nèi)皮細(xì)胞表達(dá)TF已得到證實【201。在這些刺激因素中，VEGF和TNF0【發(fā)揮主要作用。內(nèi)皮細(xì)胞表達(dá)的TF暴露于循環(huán)血液，和血漿中的F結(jié)合，并使FVIIA的活性增強(qiáng)1000倍，在CA2存在下加速FVIIA活化FX，同時活化FIX。FXA又反饋性海帶多糖L01對腎上腺素直接損傷血管內(nèi)皮細(xì)胞的干預(yù)作用2007級碩士研究生學(xué)位論文地活化FVU變成FVIIA，內(nèi)皮細(xì)胞、F和FIX加速這一反饋過程。這些過程最終導(dǎo)致凝血酶產(chǎn)生，凝血酶進(jìn)而催化纖維蛋白原轉(zhuǎn)變成纖維蛋白并聚合成纖維蛋白血塊。臨床上與許多疾病如敗血癥、癌癥及其動脈粥樣硬化疾病都與TF的高表達(dá)有關(guān)12122。而常見的冠心病、心肌梗死以及腦梗死等血栓性疾病的發(fā)生、發(fā)展均與凝血機(jī)制異常、血管內(nèi)皮細(xì)胞功能受損和單核細(xì)胞表達(dá)TF增加引起的病理性血栓形成有關(guān)。TF抗原、TF活性和TFMRNA已被證實存在于粥樣斑塊中的不同細(xì)胞中，包括內(nèi)皮細(xì)胞、血管平滑肌細(xì)胞SMCS，尤其是富含脂質(zhì)的泡沫細(xì)胞。斑塊的凝固活性和血栓形成于其TF含量直接相關(guān)。是造成冠狀動脈粥樣硬化斑塊不穩(wěn)定的重要因素之一【231。有資料表明腦血管病的基本病理表現(xiàn)為動脈粥樣硬化，其斑塊中含有大量TF，其粥樣斑塊發(fā)生破裂，泡沫細(xì)胞及其碎片即可釋放TF入血【24】，這可能是急性腦梗死發(fā)病時血漿TF水平增高的重要原因。因此，觀察血管內(nèi)皮細(xì)胞TF的表達(dá)與調(diào)控因素，在醫(yī)學(xué)上有著重要意義。目前，很多的研究都從TF著手評價以及研究抗血栓藥物。SONE25】等報道，他汀類藥物辛伐他20MGD治療有高膽固醇血癥的冠心病患者14周后，活性明顯低于用藥前，治療前的TF活性與治療后的變化率高度負(fù)相關(guān)仁O482，P0005。路一平，邱健【26】的研究顯示，在高血糖、高血脂的情況下，阿托伐他汀不僅能夠調(diào)節(jié)血脂，還具有不依賴降脂作用的抗血栓、抗炎作用，可有效地降低主動脈TFMRNA的水平、穩(wěn)定斑塊，對糖尿病大血管病變的發(fā)生、發(fā)展起到一定的防治作用。大量實驗表明，許多植物來源的單體化合物具有抗血栓的形成的作用，而且毒副作用較小，因此，開發(fā)純天然的抗血栓藥物是目前研究新型抗血栓藥物的有效途徑。中藥成分肉桂酸CD蹦通過抑制對轉(zhuǎn)錄因子NFKB活化而發(fā)揮抑制TNF伐誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞TF表達(dá)的作用【271，TNFA誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞表達(dá)主要涉及到蛋白激酶CPKC、蛋白酪氨酸激酶PTK、絲裂素活化蛋白激酶MAPK等海帶多糖L0對腎上腺素直接損傷血管內(nèi)皮細(xì)胞的干預(yù)作用途徑，其最后環(huán)節(jié)是通過NFRBIR,B實現(xiàn)的。熊石龍等研究表明川芎嗪也能抑制TNF0【誘導(dǎo)的內(nèi)皮細(xì)胞TF促凝活性、抗原以及TFMRNA表達(dá)，而且這種作用呈劑量和時間依從性【281。姜黃素CUR可以有效抑制LPS誘導(dǎo)的MNC的TF的表達(dá)，這種作用與CUR加入的時間有關(guān)，呈現(xiàn)明顯的預(yù)防作用291。絲蟲抗凝蛋白NAPC2通過與FXA或FX結(jié)合，從而干擾TFVIIA的催化作用，II期臨床試驗已經(jīng)證明在冠狀動脈血管成型術(shù)中，NAPC2與阿司匹林、氯吡格雷、肝素聯(lián)合使用可以安全有效地抑制凝血酶的生成。本試驗結(jié)果也顯示，海帶多糖L01能減少內(nèi)皮細(xì)胞TF蛋白的表達(dá)。在低劑量濃度的海帶多糖L01作用下，TF蛋白內(nèi)皮平均灰度值的表達(dá)較腎上腺素組高，免疫組化染色較腎上腺素組棕褐色著色較淺，低劑量海帶多糖L01組與腎上腺素組比較，P001，而高劑量海帶多糖L01能進(jìn)一步抑制TF蛋白的表達(dá)，內(nèi)皮平均灰度值進(jìn)一步升高，免疫組化染色呈淡黃色腎上腺素組，低劑量海帶L01組、高劑量海帶多糖L01組比較，P001但高劑量L01組與低劑量L01組之間差別無統(tǒng)計學(xué)意義。說明海帶多糖L01抗凝作用與其抑制血栓形成過程中RRF蛋白的表達(dá)有關(guān)，具體機(jī)制還需進(jìn)一步研究。依諾肝素通過增強(qiáng)抗凝血酶、HCII對XA等因子的滅活起抗凝作用。此外，肝素樣物質(zhì)對VEC具有保護(hù)作用，陳兆榮等用掃描電鏡技術(shù)，發(fā)現(xiàn)肝素能夠拮抗注射去甲腎上腺素引起的家兔動脈形態(tài)學(xué)改變【30】。在本實驗中，依諾肝素與腎上腺素混合后被注入游離的血管段，作用25RNIN后被洗去，不與血液接觸，因而其抗血栓作用與抗凝無關(guān)，而與保護(hù)VEC有關(guān)。TFPI組織因子途徑抑制物是TF內(nèi)源性抑制因子，可抑制XA及VLLATF復(fù)合物，從而特異抑制TF介導(dǎo)的血栓形成過程。無肝素刺激時，TFPI與血管內(nèi)皮表面的多聚葡胺結(jié)合。大量報道證明，肝素抗凝作用與動員結(jié)合在內(nèi)皮細(xì)胞的TFPI釋放有關(guān)。肝素可與TFPI結(jié)構(gòu)中羧基端的氨基酸結(jié)合。注射肝素后，肝素與TFPI競爭內(nèi)皮細(xì)胞結(jié)合位點，使其釋放TFPI，海帶多糖L01對腎上腺素直接損傷血管內(nèi)皮細(xì)胞的二F預(yù)作用促進(jìn)TFPI抑制FVIIA，與FXA更高效結(jié)合，發(fā)揮抗凝作用【3L】。正常人靜脈注射肝素后2“3MINTFPI即可升高，隨著肝素濃度下降，TFPI也降低。也有研究顯示，肝素能在轉(zhuǎn)錄水平抑制內(nèi)皮細(xì)胞和單核細(xì)胞TFMRNA的表達(dá)132。最新研究也顯示，肝素可抑制炎癥介質(zhì)脂多糖誘導(dǎo)的內(nèi)皮細(xì)胞TF活性、抗原及MRNA表達(dá)P對。在本實驗中，依諾肝素組能減少TF蛋白的表達(dá)，TF蛋白內(nèi)皮平均灰度值的表達(dá)較腎上腺素組高，免疫組化染色染色著色明顯變淺，提示依諾肝素對抑制血栓形成的作用于與抑制TF蛋白的表達(dá)有關(guān)，具體作用途徑以及依諾肝素對TFPI的影響還需進(jìn)一步實驗研究。前期研究表明L01具有抗血栓作用，此作用不僅與其抗凝有關(guān)，也與其保護(hù)內(nèi)皮細(xì)胞有關(guān)，本研究從另一角度支持這一結(jié)論。結(jié)果表明，腎上腺素可直接損傷VEC結(jié)構(gòu)完整性，打破其抗凝血與止血功能的平衡，易造成血管栓塞。而海帶多糖L01能夠保護(hù)VEC結(jié)構(gòu)完整性，減少TF表達(dá)，使血液中的凝血因子和血小板不易被激活，有效地抑制血栓的形成，在心血管疾病的防治上顯示出一定價值的研究意義。海帶多糖L01對腎上腺素直接損傷血管內(nèi)皮細(xì)胞的干預(yù)作用2007級碩士研究生學(xué)位論文結(jié)論1利用。腎上腺素直接損傷家兔股動脈可以成功地復(fù)制動物血栓模型。2海帶多糖L01對。腎上腺素引起的內(nèi)皮細(xì)胞損傷具有保護(hù)作用。3海帶多糖L01能夠通過保護(hù)VEC結(jié)構(gòu)完整和維護(hù)VEC抗凝血功能，表現(xiàn)為減少內(nèi)皮細(xì)胞邛蛋白表達(dá)，并使血栓形成時間延長。海帶多糖L01對腎上腺素直接損傷M管內(nèi)皮細(xì)胞的干預(yù)作用2007級碩1二研究生學(xué)位論文參考文獻(xiàn)【1】SUMPIOBE，RILEYJT,DARDIKACELLSINFOCUSENDOTHELIALCELLJINTJBIOCHEMCELLBIOL，2002，3415081512【2】MALYMA，TOMASOVP，HAJEKPETA1THEROLEOFTISSUEFACTORINTHROMBOSISANDHEMOSTASISJPHYSIOLRES，2007，56685695【3】謝露，龐輝，劉愛群等海帶胞壁多糖對血栓和血小板功能的影響J】中國病理生理雜志，2004，20132543【4】謝露，黎靜，劉愛群海帶多糖L01抑制血小板活性與血管內(nèi)皮細(xì)胞保護(hù)作用陰中國病理生理雜志，2007，2346746775】BOORPJ，TRENTMB，LYLESGA，ETCMETHYLAMINEMETABOLISMTOFORMALDEHYDEBYVASCULARSEMICARBAZIDESENSITIVEAMINEOXIDASEJTOXICOLOGY,1992，7332512586YUPH，LAICT,ZUODMFORMATIONOFFORMALDEHYDEFROMADRENALINEINVIVO；APOTENTIALRISKFACTORFORSTRESSRELATEDANGIOPATHYJNEUROCHEMRES，1997，225615620【7】NAPOLIC，DENIGRISF,WILLIAMSIGNARROS,ETA1NITRICOXIDEANDATHEROSCLEROSISANUPDATEJNITRICOXIDE，2006，15262798WAIDOWT，WITTW，WEBERE，ETCNITRICOXIDEDONORINDUCEDPERSISTENTINHIBITIONOFCELLADHESIONPROTEINEXPRESSIONANDACTIVATIONINENDOTHELIALCELLSJNITRICOXIDE，2006，15103113【9BOHMF,PERNOWJ,THEIMPORTANCEOFENDOTHELIN一1FORVASCULARDYSFUNCTIONINCARDIOVASCULARDISEASEJCARDIOVASCRES，2007，76818【10】彭黎明，鄧承祺現(xiàn)代血栓與止血的實驗室檢測及其應(yīng)用【M】北京人民衛(wèi)生出版社20048【1L】王振義，李家增，阮長耿血栓與止血基礎(chǔ)理論與臨床M】3版上海上海海帶多糖L01對腎上腺素直接損傷血管內(nèi)皮細(xì)胞的干預(yù)作用2007級碩七研究生學(xué)位論文科學(xué)技術(shù)出版社，20042112GARYHGIBBONSENDOTHELIALFUNCTIONASADETERMINANTOFVASCULARFUNCTIONANDSTRUCTURE，ANEWTHERAPEUTICTARGETJAMJCARDI011997，795131713】謝露，劉愛群，黎靜，等海帶多糖對腎上腺素致血管內(nèi)皮損傷的防護(hù)作用中國應(yīng)用生理雜志J】，2007，232143146【14】劉愛群，謝露，龍敬倫海帶多糖對內(nèi)皮細(xì)胞的保護(hù)作用【J】，中國公共衛(wèi)生，2008，3334336【15SAITOYNISHIOK，YOSHIDAYETA1CYTOTOXICEFFECTOFFORMALDEHYDEWITHFREERADICALSVIAINCREMENTOFCELLULARREACTIVEOXYGENSPECIESJTOXICOLOGY,2005，21023235245【16】YUPH，WRIGHTS，F(xiàn)ANEH，LUNZR，GUBISNEHARBERLEDPHYSIOLOGICALANDPATHOLOGICALIMPLICATIONSOFSEMICARBAZIDESENSITIVEAMINEOXIDASEJBIOCHIMBIOPHYSACTA，2003，164712193199【17】MOFE，MUNTEANAG，CHENCC，ETA1CYR61CCN1ISESSENTIALFORPLACENTALDEVELOPMENTANDVASCULARINTEGRITYJMOLCELLBIOL，2002，222487098720【18MOOSBAUERC，MORGENSTERNE，CUVELIERSL，ETA1EOSINOPHILSAREMAJORINTRAVASCULARLOCATIONFORTISSUEFACTORSTORAGEANDEXPOSUREJBLOOD，2007，10939951002【19】STEFFELJ，LUSCHERTF，TANNERFCTISSUEFACTORINCARDIOVASCULARDISEASESMOLECULARMECHANISMSANDCLINICALIMPLICATIONS【J】CIRCULATION，2006，11372273120】HEM，HEX，XIEQ，ETA1ANGIOTENSINIIINDUCESTHEEXPRESSIONOFTISSUEFACTORANDITSMECHANISMINHUMANMONOCYTESJTHROMBRES，2006，117579590海帶多糖LOI對腎上腺素直接損傷血管內(nèi)皮細(xì)胞的干預(yù)作用2007級碩士研究生學(xué)位論文【21NADIRY，BRENNERB，ZETSERA，ETA1HEPARANASEINDUCESTISSUEFACTOREXPRESSIONINVASCULARENDOTHELIALANDCANCERCELLSJTHROMBHAEMOST，2006，4112443245122】STEFFELJ，LUSCHERTF，TANNERFCTISSUEFACTORINCARDIOVASCULARDISEASESMOLECULARMECHANISMSANDCLINICALIMPLICATIONSJCIRCULATION，2006，1135722731【23】MACKMANNROLEOFTISSUEFACTORINHEMOSTASIS,THROMBOSIS，ANDVASCULARDEVELOPMENTJ】ARTERIOSCLERTHROMBVASCBIOL，2004，2461015102224JANDDERS,SITZERM，WENDTA，ETA1EXPRESSIONOFTISSUEFACTORIN11IGHGRADECAROTIDARTERYSTENOSISASSOCIATIONWITHDESTABILIZATIONJSTROKE，2001，324850854【25SONJW，KOH，AHNJY，JINDK，ETA1EFFECTOFSTATINONPLAQUESTABILITYANDTHROMBOGENICITYINHYPERCHOLESTEROLEMICPATIENTSWITHCORONARYARTERYDISEASEJINTJCARDIOL，2003，8817782【26】路一平，邱健，阿托伐他汀對鼠糖尿病動脈粥樣硬化主動脈組織因子表達(dá)的影響J】實用醫(yī)學(xué)雜志，2006年第22卷第9期9981000【27李小飛，文志斌，何曉凡等，肉桂酸對腫瘤壞死因子誘導(dǎo)血管內(nèi)皮細(xì)胞組織因子表達(dá)的作用及其機(jī)制【J】血栓與止血學(xué)，2004年第10卷第4期14815128】熊石龍，文志斌，王前等川芎嗪對腫瘤壞死因子致血管內(nèi)皮細(xì)胞組織因子表達(dá)的影響J】中國現(xiàn)代醫(yī)學(xué)雜志，2007年10月第17卷第19期，23302333【29何美霞，曾進(jìn)勝，連亞軍等姜黃素對單個核細(xì)胞組織因子表達(dá)的影響【J】血栓與止血學(xué)，2005年第11卷第4期，150153【30】陳兆榮，吳葆杰F氐效價肝素對兔動脈內(nèi)皮細(xì)胞的影響【J】山東醫(yī)科大學(xué)學(xué)報，1986，241293130海帶多糖LOI對腎上腺素直接損傷血管內(nèi)皮細(xì)胞的干預(yù)作用2007級碩士研究生學(xué)位論文31】ZHIYIYE，TAKANOR，HAYASHIKSTRUCTURALREQUIREMENTSOFHUMANTISSUEFACTORPATHWAYINHIBITORTFPIANDHEPARINFORTFPIHEPARININTERACTIONJTHROMBRES，1998，8926327032】PEPEG,GIUSTIB，ATTANASIOM，ETA1TISSUEFACTORANDPLASMINOGENACTIVATORINHIBITORTYPE2EXPRESSIONINHUMANSTIMULATEDMONOCYTESISINHIBITEDBYHEPARINJSEMINTHROMBHEMOST，1997，2313514133VIGNOLIA，MARCHETTIM，BALDUCCID，ETA1DIFFERENTIALEFFECTOFTHELOWMOLECULARWEIGHTHEPARINMDALTEPARIN，ANDUNFRACTIONATEDHEPARINONMICROVASCULARENDOTHELIALCELLHEMOSTMICPROPERTIESJHAEMATOLOGICA，2006，9120721431海帶多糖L01對腎上腺素直接損傷覷管內(nèi)皮細(xì)胞的干預(yù)作用2007級碩士研究生學(xué)位論文綜述組織因子在血栓性疾病中的研究進(jìn)展摘要組織因子TF屬于細(xì)胞因子超家族成員，是一種單鏈跨膜糖蛋白，是凝血因子VIIA與凝血因子VII的受體，凝血因子VIIA的輔因子。冠心病CHD、腦梗死CI、糖尿病合并血管病變是臨床上常見的血栓性疾病。血栓性疾病血栓形成基本上是由TF與FVII結(jié)合引起外源性凝血途徑啟動。文章重點探討TF特性以及在血栓性疾病中的表達(dá)，以及在血栓形成中的作用和研究進(jìn)展。關(guān)鍵詞組織因子，血栓形成，動脈粥樣硬化血栓栓塞性疾病為臨床常見病，嚴(yán)重威脅著人類的生命和健康。動脈粥樣硬化AS是冠心病CHD、腦梗死CI、糖尿病合并血管病變的病理基礎(chǔ)。研究表明AS的細(xì)胞與非細(xì)胞成份中均含有TF其中以無細(xì)胞的脂質(zhì)核最為豐富。而大多數(shù)的人AS斑塊的凋亡細(xì)胞和微粒中的高密度區(qū)域中也表達(dá)TFTLL。斑塊破裂后，斑塊內(nèi)TF與循環(huán)血液接觸，啟動凝血級聯(lián)反應(yīng)，促進(jìn)血栓的形成。因此，TF被認(rèn)為是一種新的動脈粥樣硬化血栓形成疾病的藥物靶目標(biāo)。本文將就TF在血栓性疾病中的表達(dá)，以及在血栓形成中的作用綜述如下。1TF的一般特性11TF的來源與結(jié)構(gòu)TF是由位于1號染色體的LP2223位點的124KB的基因編碼的，該基因由6個外顯子和5個內(nèi)含子組成。外顯子1編碼信號肽，外顯子2編碼239，外顯子3編碼40105，外顯子4編碼106165，外顯子5編碼166218，外顯予6編碼219263。此外，在由其前體蛋白轉(zhuǎn)化為成熟TF過程中還去海帶多糖LOI對腎上腺素直接損傷血管內(nèi)皮細(xì)胞的干預(yù)作用2007級碩士研究生學(xué)位論文掉32個殘基誘導(dǎo)序列【2】。TF是一種47KD的跨膜單鏈糖蛋白，在CD系統(tǒng)為CDL42。人TF含263個氨基酸，它包括三個結(jié)構(gòu)域胞外區(qū)1219，跨膜區(qū)220242，以及胞漿區(qū)243263。胞外區(qū)有兩個雙硫鍵，其中CYSL86CYS209是TF與FVII結(jié)合及其復(fù)合物的活性所必須的結(jié)構(gòu)，參與凝血過程并涉及信號轉(zhuǎn)導(dǎo)。胞質(zhì)段CYS245通過硫酯鍵與棕櫚酸或硬脂酸發(fā)生結(jié)合，并且在CYS245附近有4個堿性氨基酸殘基，它們的帶正電基團(tuán)與膜磷脂帶負(fù)電基團(tuán)相互作用，這均有利于TF錨定在胞膜上。胞質(zhì)尾在信號傳遞中起著重要的作用。12TF的分布在生理情況下，除與血液直接接觸的血細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞外，其余大部分組織細(xì)胞均表達(dá)TF尤以血管外膜、器官包膜、皮膚表皮及粘膜等處較為豐富，猶如袖套狀圍繞血管與被套狀包繞器官，在體內(nèi)形成一個分布廣泛的止血屏障。這種分布即使循環(huán)血液不直接接觸E避免血管內(nèi)凝血；又使血液一旦流出血管，接觸1F便立即啟動凝血。THIRUVIKRAMAN【3】等用地高辛或生物素標(biāo)記的因子VIIA和XA作探針來檢測TF在組織和細(xì)胞的分布，研究表明TF在腦、肺和胎盤較其它部位正常組織中含量豐富。但即使在含量豐富的腦組織中，TF的含量也是極其少的，每105分子蛋白中只含有1分子的TF。血管內(nèi)皮細(xì)胞與血液中的單核細(xì)胞正常時不表達(dá)TF，只有在受促炎性細(xì)胞因子與損傷因素作用時呈現(xiàn)誘生性表達(dá)。根據(jù)TF合成情況，體內(nèi)細(xì)胞可分為三類，固有性表達(dá)TF細(xì)胞，如腦部星狀膠質(zhì)細(xì)胞，胎盤滋養(yǎng)層細(xì)胞等；不表達(dá)TF的細(xì)胞，為淋巴細(xì)胞、血小板等；誘生性表達(dá)TF細(xì)胞，如血管內(nèi)皮細(xì)胞、單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞。實驗表明固有性TF表達(dá)以鑲嵌蛋白形式存在，誘生性TF表達(dá)主要以小囊泡形式釋放。經(jīng)典的凝血學(xué)說認(rèn)為，循環(huán)中無TF的存在而不能獨立地啟動凝血。但近年的研究卻認(rèn)為外周血中含有TF或含TF微粒，在特定的條件下，甚至在生理條件下，循環(huán)中的TF也能啟動凝血。循環(huán)中的TF主要來自于血海帶多糖L01對腎上腺素直接損傷血管內(nèi)皮細(xì)胞的干預(yù)作用2007級碩士研究生學(xué)位論文液中的一些細(xì)胞成份【4】。而單核細(xì)胞MNC是最早發(fā)現(xiàn)能夠表達(dá)TF的細(xì)胞，也是目前唯一一種被公認(rèn)能自身合成邗的細(xì)胞。靜息狀態(tài)下，血小板中TF存儲在A顆粒內(nèi)，當(dāng)受到刺激時，如ADP、膠原、凝血酶等作用下，血小板以微粒的形式釋放TF，成為血漿中TF的主要來源之一【5】。血液中其它的細(xì)胞成分，如淋巴細(xì)胞己被證明不表達(dá)TF而中性粒細(xì)胞中是否含有TF尚存在爭議。血源性的TF在啟動凝血過程中的功能意義還存在很多爭議，MANNANDCOLLEAGUES認(rèn)為健康人血液中的TF含量極微。無法啟動凝血過程而形成血栓【6。但血源性的TF在凝血過程中有著特殊的作用。首先，處于循環(huán)中的血細(xì)胞釋放的TF更易于優(yōu)先激活同處于循環(huán)中的凝血因子，從而引發(fā)凝血反應(yīng)；其次，許多凝血因子激活的主要場所主要是血小板提供的磷脂催化表面，而且活化的白細(xì)胞也可提供磷脂表面，與血管壁來源的TF激活的凝血因子從血管壁部位彌漫到血小板表面之間的距離相比，血細(xì)胞來源TF激活的產(chǎn)物可在其自身提供的磷脂表面進(jìn)行反應(yīng)，從而大大縮短了凝血因子之間的距離，加速凝血反應(yīng)進(jìn)程，這可能在病理血栓快速形成過程中有重要意義81。TF抗原和MRNA主要表達(dá)在血管外膜成纖維細(xì)胞，血管中膜也有散在的分布。在生理狀態(tài)下，血管內(nèi)膜TF含量以及活性都很甚微，但是在病理情況下，血管受損，內(nèi)皮細(xì)胞TF表達(dá)能被凝血酶、腫瘤壞死因子TNFA、血管內(nèi)皮生長因子VEGF等誘導(dǎo)上調(diào)。13TF表達(dá)的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)可以引起內(nèi)皮細(xì)胞表達(dá)TF的刺激因子，包括細(xì)胞因子TNFQ、IL1、IL8、LPS，生長因子如血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子VEGF、FEG，缺氧等。其中，VEGF和TNFQ發(fā)揮主要作用。目前己知，涉及到誘導(dǎo)TF表達(dá)的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)關(guān)鍵酶主要有以下五種磷脂酶CPHOSPHOLIPASEC，PLC、磷脂酰肌醇3激酶PHOSPHATIDYLINOSITOL3KINASES，P13K、絲裂原活化蛋白激酶海帶多糖LOI對腎上腺素直接損傷皿管內(nèi)皮細(xì)胞的干預(yù)作用MITOGENACTIVATEDPROTEINKINASES，MAPK、蛋白激酶CPROTEINKINASESC，PKC、蛋白酪氨酸激酶PROTEINTYROSINEKINASE，PTKS，這些信號酶分別介導(dǎo)相同或者不同的信號途徑。有研究證實，VEGF與內(nèi)皮細(xì)胞表面受體KDR、FLT1結(jié)合后，其VEGFR2KDR二聚化、自身磷酸化，募集并活化磷脂酶C，引起細(xì)胞內(nèi)鈣儲池的CA2釋放，從而激活下游的PKCL9PLC在VEGF誘導(dǎo)的TF表達(dá)中為關(guān)鍵的信號酶。蛋白激酶C作為PLC的下游信使，PKC的活化是RAFMEKERK信號通路的上游，參與內(nèi)皮細(xì)胞的增殖及血管滲透性作用。VEGF還可通過P38和細(xì)胞外信號調(diào)節(jié)激酶EXTRACELLULARSIGNALREGULATEDKINAS，ERK來誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞TF的表達(dá)。TNFQ可以通過MAPK中所有的三條途徑P38MAPK、P4442MAPK、JNK誘導(dǎo)TF表達(dá)，目前認(rèn)為P38MAPK和P4442MAPK所起作用較JNK重要【101。而VEGF協(xié)同TNFA誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞表達(dá)TF的共同交點可能在MAPK激酶MEK。近期研究可以推測出，在生理狀態(tài)下，血漿中的胰島素或胰島素樣生長因子不斷激活P13K從而抑制TF的表達(dá)。除了主要的能是內(nèi)皮細(xì)胞表達(dá)TF的細(xì)胞因子VEGF與TNFA外，其它細(xì)胞因子以及蛋白也能調(diào)節(jié)血管內(nèi)皮細(xì)胞TF的表達(dá)。如凝血酶可以通過RHORHOK和P38MAPK途徑的激活和AKT去磷酸化作用介導(dǎo)人內(nèi)皮細(xì)胞TF的表達(dá)；組胺也可誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞TF，組胺由肥大細(xì)胞、T淋巴細(xì)胞、單核巨噬細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞和聚集的血小板分泌。入AS斑塊上的內(nèi)皮細(xì)胞和平滑肌細(xì)胞可表達(dá)HL受體，JAN11】等發(fā)現(xiàn)，在血管細(xì)胞中，組胺可通過P38MAPK、ERK及JNK介導(dǎo)H1受體誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞表達(dá)TF。組胺可以通過H1受體誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞表達(dá)P選擇素和NOS，它也可以刺激平滑肌細(xì)胞增殖，對AS的發(fā)生發(fā)展有重要的影響。內(nèi)皮細(xì)胞表達(dá)下調(diào)是通過磷脂酰肌醇激酶PHOSPHATIDYLINOSITOL3KINASE，P13K通路來實現(xiàn)的，P13K激活可導(dǎo)致其下游AKT活化。AKT通過激海帶多糖LOI對腎上腺素直接損傷血管內(nèi)皮細(xì)胞的干預(yù)作用2007級碩匕研究生學(xué)位論文活其下游各種效應(yīng)器來影響細(xì)胞功能，它可活化內(nèi)皮一氧化氮合酶ENDOTHELIUMNITRICOXIDESYNTHASE，ENOS，促進(jìn)一氧化氮產(chǎn)生NITRICOXIDE，NO產(chǎn)生，而NO是一個強(qiáng)有力的血管舒張劑，能夠一直平滑肌細(xì)胞增殖和血小板聚集，也能抑制TF在巨噬細(xì)胞和平滑肌細(xì)胞中的表達(dá)。而VEGF以及TNF0【能抑制P13K和其下游AKT而使內(nèi)皮細(xì)胞1F表達(dá)增加。14TF在血液凝固中的作用當(dāng)血管損傷或者血管內(nèi)皮和單核細(xì)胞受到一些因素如細(xì)菌內(nèi)毒素、腫瘤壞死因子等刺激時，TF與血液接觸，并作為FVII和或FVIIA的受體與其形成復(fù)合物，使無活性的FVII變成有活性的FVIIA，F(xiàn)VIIA使FX轉(zhuǎn)變?yōu)橛谢钚缘腇XA，進(jìn)而使纖維蛋白原變?yōu)槔w維蛋白，完成外源性凝血途徑。同時，F(xiàn)VIIA與組織因子形成的復(fù)合物能使FIX激活成FIXA，從而使外源性凝血途徑與內(nèi)源性凝血途徑聯(lián)系起來【12】。此外，由于血小板表面含有TF，其活化后本身能夠形成一個纖維蛋白生成體系不斷生成纖維蛋白，從而可以穩(wěn)定和鞏固新形成的血栓，血小板TF可以促使整個凝血過程發(fā)生在細(xì)胞表面，促進(jìn)了纖維蛋白的不斷生成【13】。15TF的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)功能近來研究表明，TF細(xì)胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)功能有兩種機(jī)制1依賴于因子VIIA的蛋白水解活性的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)功能【14】。FVIIA與細(xì)胞膜上TF結(jié)合引起細(xì)胞內(nèi)反應(yīng)，使表達(dá)TF的細(xì)胞內(nèi)鈣濃度改變、短暫胞內(nèi)蛋白磷酸化。細(xì)胞外TF因子A信號可激活P4442絲裂原活化蛋白激酶MITOGENACTIVATEDPROTEINKINASE，MAPK，同時也可導(dǎo)致P38MAPK和CJUN氨基末端激酶CJUNTERMINALNH2KINASE，JNK兩條通路上關(guān)鍵部分的磷酸化，從而誘導(dǎo)促炎細(xì)胞因子、生長因子和轉(zhuǎn)錄因子的表達(dá)。同時，TF因子VIIA通過G蛋白耦聯(lián)蛋白酶激活受體2GPROTEINCOUPLED，PROTEASEACTIVATEDRECEPTOR2,PAR2，促進(jìn)腫瘤和血管的生長【15】。HJORTOEGM等證實PAR2特異抗體能阻斷FVIIA誘導(dǎo)的乳腺癌細(xì)胞遷移和IL8基因表達(dá)。這說明TF的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)與海帶多糖L01對腎上腺素直接損傷血管內(nèi)皮細(xì)胞的干預(yù)作用2007級碩士研究生學(xué)位論文PAR2的活化有關(guān)。在腫瘤細(xì)胞、成纖維細(xì)胞或角質(zhì)化細(xì)胞上的TF與因子A結(jié)合可使VEGF、早期生長反應(yīng)基因LEARLYGROWTHRESPONSEGENEL，EGR1和24以及IL8表達(dá)增加。有證據(jù)表明在角質(zhì)化細(xì)胞上，邗與因子VIIA的結(jié)合可使一些損傷修復(fù)相關(guān)的基因表達(dá)上調(diào)。2依賴于TF胞質(zhì)區(qū)的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)功能。近來研究表明TF的胞質(zhì)區(qū)可能與核因子KB的激活及促炎細(xì)胞因子產(chǎn)物的產(chǎn)生有關(guān)。TF胞漿區(qū)可能通過調(diào)節(jié)TFVIIA誘發(fā)的信號而間接影響細(xì)胞信號傳遞。也有研究表明TF胞質(zhì)區(qū)可能間接調(diào)整TF因子VIA介導(dǎo)的細(xì)胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)，AHAMED掣1刀研究顯示TF因子A因子XA通過激活PAR2誘導(dǎo)TF胞質(zhì)區(qū)磷酸化，而這種TF胞質(zhì)區(qū)磷酸化對PAR2介導(dǎo)的血管發(fā)生起負(fù)性調(diào)節(jié)作用具體機(jī)制不明。OTT等發(fā)現(xiàn)邗的刺激細(xì)胞遷移的功能是通過TF胞質(zhì)區(qū)激活鳥苷三磷酸酶LGTPASEL，RACL和P38MAPK，而不依賴于FVIIA蛋白水解活性。16TF的非凝血功能目前，已有很多資料表明，TF還具有許多非凝血的功能。主要包括以下幾個方面TF與惡性腫瘤。惡性腫瘤中通常存在邛于VEGF的高度表達(dá)，TF能促進(jìn)腫瘤血管的新生。1F影響胚胎發(fā)育，剔除TF基因可以導(dǎo)致胚胎死亡，TF與胚胎血管的發(fā)育有關(guān)。TF可以上調(diào)多種促炎性蛋白，與敗血癥以及DIC的發(fā)生有關(guān)。同時，TF還可以促進(jìn)平滑肌的增殖與遷徙。TFVIIA也可促進(jìn)血管平滑肌增殖與遷徙。1F的這些非凝血功能幾乎都是通過TFVLLA做作用于蛋白酶活化受體PAR2實現(xiàn)的。信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑較為復(fù)雜，但主要是與MAPK和P13KPKB兩個途徑有關(guān)，這些途徑最后激活EGR1核轉(zhuǎn)錄因子，引起多個基因轉(zhuǎn)錄，包括促炎細(xì)胞因子、生長因子、轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子等，從而引起非凝血功能。2TF與血栓性疾病21TF在血栓性疾病中的表達(dá)211TF在內(nèi)皮細(xì)胞的表達(dá)海帶多糖LOI對腎一I腺素直接損傷血管內(nèi)皮細(xì)胞的干預(yù)作用當(dāng)內(nèi)皮細(xì)胞如冠狀動脈，腦動脈等血管內(nèi)膜受到損傷后，內(nèi)膜結(jié)構(gòu)裸露，內(nèi)皮功能紊亂，在內(nèi)皮細(xì)胞WEIBELPALADE體中表達(dá)的粘蛋白P選擇素也能誘導(dǎo)TF在內(nèi)皮細(xì)胞中表達(dá)釋放TF。P選擇素和TF的相互作用通過位于血液與動脈內(nèi)膜界面的CD40CDL54受體相互作用而加速纖維蛋白單體的沉積。同時，血管緊張素IIANGII與ANGII型受體結(jié)合，誘導(dǎo)細(xì)胞內(nèi)的氧化應(yīng)激反應(yīng)，NFKB和API激活，刺激內(nèi)皮細(xì)胞表達(dá)1F【181因此，伴有血漿ANGII增高的患者血液促凝活性更高，從而當(dāng)合并內(nèi)皮細(xì)胞損傷時，引起血栓的形成。此外，氧化型低密度脂蛋白OXLDL也能有效地誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞表達(dá)TFTL9】212TF在單核巨噬細(xì)胞的表達(dá)AS斑塊中的耶主要來源于巨噬細(xì)胞、血管平滑肌細(xì)胞、泡沫細(xì)胞、尤其是泡沫細(xì)胞最多。單核細(xì)胞浸潤至血管中膜層，轉(zhuǎn)變成巨噬細(xì)胞和泡沫細(xì)胞。細(xì)胞外的脂質(zhì)也有活化的1F。人體AS斑塊中的許多炎性介質(zhì)如腫瘤壞死因子一A、白介素1、以及動脈損傷、血流動力因素等可誘導(dǎo)或上調(diào)TF的表達(dá)【201。單核巨噬細(xì)胞在收到炎性因子如腫瘤壞死因子僅TNFQ和脂質(zhì)OXLDL、脂多糖LPS、動脈損傷等刺激都表達(dá)TF。巨噬細(xì)胞在表達(dá)嚇的同時還表達(dá)因子，TF含量與泡沫細(xì)胞、巨噬細(xì)胞和淋巴細(xì)胞凋亡釋放的包含邗的微粒有關(guān)。動脈粥樣硬化斑塊的不同部位的巨噬細(xì)胞都發(fā)現(xiàn)了TF的過度表達(dá)。研究表明，脂質(zhì)豐富的粥樣斑塊比纖維斑塊TFMRNA和蛋白表達(dá)水平要高，主要是由于粥樣斑塊內(nèi)含有大量的巨噬細(xì)胞【2L】。巨噬細(xì)胞轉(zhuǎn)化成泡沫細(xì)胞后，TF的表達(dá)較巨噬細(xì)胞有顯著地增加，這表明巨噬細(xì)胞轉(zhuǎn)化為泡沫細(xì)胞后，血栓形成能力進(jìn)一步加強(qiáng)，這也是斑塊破裂后血栓并發(fā)癥頻繁發(fā)生的原因之一【22】。TF在細(xì)胞表面發(fā)揮功能，其活性高度依賴于磷脂酰絲氨酸PHOSPHATIDYLSERINE，PS的存在，活化的TF可以促進(jìn)血管新生和平滑肌細(xì)胞遷移，與斑塊的增長及穩(wěn)定性有關(guān)。另外，脂質(zhì)含量豐富的脆性斑塊帶有薄纖維帽、廣泛巨噬細(xì)胞浸潤和大量的海帶多糖L01對腎上腺素直接損傷血管內(nèi)皮細(xì)胞的干預(yù)作用2007級碩E研究生學(xué)位論文TF表達(dá)，比含膠原豐富的纖維性斑塊更易破裂。22TF為血栓性疾病的危險因子冠心病CHD、腦梗死CI、糖尿病是威脅人們生命健康的重要的血栓性疾病。動脈粥樣硬化是血管系統(tǒng)疾病的主要病理基礎(chǔ)?，F(xiàn)代細(xì)胞分子生物學(xué)技術(shù)顯示，動脈粥樣硬化病變都具有平滑肌細(xì)胞增生，大量膠原纖維、彈力纖維和蛋白多糖等結(jié)締組織基質(zhì)形成，以及細(xì)胞內(nèi)外脂質(zhì)積聚的特點。病變常累及彈性及大中等肌性動脈，一旦發(fā)展到足以阻塞動脈腔，則該動脈所供應(yīng)的組織或器官將缺血或壞死。以往的研究人為AS引起的冠狀動脈管腔進(jìn)行性狹窄是由于斑塊中平滑肌細(xì)胞SMC持續(xù)增生而引起的。但現(xiàn)在的研究表明，大多數(shù)發(fā)生梗塞的病例是因斑塊表面形成血栓，從而使冠狀動脈閉塞。同時，AS的發(fā)展與慢性炎癥過程密切相關(guān)，因為OXLDL不僅通過清道夫受體給MOMC輸送膽固醇以促進(jìn)泡沫細(xì)胞的形成，而且本身作為促炎因子引起免疫性炎癥反應(yīng)，促炎物質(zhì)N旺一Q、MCP1、IL一113等與OXLDL刺激MOMC與泡沫細(xì)胞TF的表達(dá)上調(diào)，致使AS斑塊中心富含TF在AS進(jìn)程的各個階段都有表達(dá)。粥樣硬化斑塊的內(nèi)皮細(xì)胞以及巨噬細(xì)胞表面均可以檢測到TF，而表達(dá)最為豐富的是粥樣斑塊的脂質(zhì)核心，在動脈粥樣硬化斑塊中，脂核內(nèi)TF染色比斑塊的其它部分強(qiáng)，在該區(qū)域發(fā)現(xiàn)血小板和纖維蛋白沉積水平比其它部位高，而其脂核內(nèi)血栓形成的潛力是斑塊細(xì)胞部分的6倍【2引。這表明斑塊是否易于形成血栓與脂核TF含量直接相關(guān)。很多粥樣斑塊狀態(tài)不穩(wěn)定，一旦斑塊在基質(zhì)金屬蛋白酶特別是MMP9作用下，AS破裂。粥樣斑塊破裂后，粥樣斑塊中的TF暴露于血液中，與血液中的凝血因子結(jié)合，從而啟動內(nèi)外源性凝血途徑，激活纖維蛋白原，以及形成凝血酶。引起斑塊表面血栓的形成，阻塞血管。研究發(fā)現(xiàn)，在斑塊的形成過程中，血漿TF特異性的促凝活性不斷升高，這說明在AS病變的早期就有TF的活化以及釋放。因此認(rèn)為，斑塊破裂不是啟動TF活性增強(qiáng)以及啟動凝血途徑的惟一海帶多糖L01對腎上腺素直接損傷血管內(nèi)皮細(xì)胞的干預(yù)作用必要的條件。近年來也有研究表明，在冠狀動脈粥樣斑塊中約有14是相對穩(wěn)定不易破裂的，但是斑塊表面