1、液相進(jìn)樣針數(shù) 一、含量方法學(xué)研究所需圖譜 （流動(dòng)相、檢測(cè)限和定量限參照有關(guān)物 質(zhì)，如有關(guān)物質(zhì)和含量方法一致，可以只做進(jìn)樣精密度、溶液穩(wěn)定性） 1、 線性：包含 60%、80%、100%、120%、140%，通常是 57 針， 要求 r.0.999。 2、 進(jìn)樣精密度：用對(duì)照品做，單樣連續(xù)進(jìn)六針，要求 RSD2.0%。 3、 重復(fù)性試驗(yàn)：雙樣雙針，一個(gè)樣進(jìn)兩針，六個(gè)樣，兩個(gè)對(duì)照，總 共16針，要求RSD2.0%。 4、 回收率（準(zhǔn)確度）：總共22針，分別做三個(gè)80%、三個(gè)100%、 三個(gè)120%, 一個(gè)樣兩針，兩個(gè)對(duì)照四針，九個(gè)樣18針，要求回收含 量在 98%102%之間，RSD2.0%。 5

2、、 含量測(cè)定：總共28針，方法驗(yàn)證一兩個(gè)對(duì)照品四針，仿制品兩個(gè) 樣四針，小試樣品兩個(gè)樣四針。中試樣品三批一兩個(gè)對(duì)照四針，一批 雙樣四針，三批六個(gè)樣十二針。 6、 溶液穩(wěn)定性：?jiǎn)螛訂吾?，分別0h、1h、2h、4h、6h、8h, RSD2.0% 7、 專屬性：空白輔料、空白溶劑、正常樣、熱破壞樣、酸破壞樣、 酸液空白樣、堿破壞樣、堿液空白、光破壞樣、氧化破壞樣、雙氧水 空白樣。共九針，需達(dá)到降解約20%，該雜質(zhì)峰與其它峰應(yīng)能完全分 離，分離度不得小于2.0（已知雜質(zhì)）。 8、 穩(wěn)定性試驗(yàn)：包括加速 0、1、2、3、6月30、40C，長(zhǎng)期3、6、 9、 12、24月，均做含量測(cè)定和有關(guān)物質(zhì)。含量測(cè)定

3、雙樣雙針，一樣 兩針，一批兩樣，三批六樣十二針，兩個(gè)對(duì)照四針。有關(guān)物質(zhì)做空白 溶劑，單樣單針，100%樣品、1%白身對(duì)照，共七針。 二、有關(guān)物質(zhì)方法學(xué)研究所需圖譜 1、波長(zhǎng)掃描和流動(dòng)相的選擇: 參照國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)并根據(jù)歐洲藥典、 USPUSP 英國(guó)藥典以及日本藥典中收載的流動(dòng)相做， 取樣品，配成一定濃度進(jìn) 樣，進(jìn)行比較確定，選取其中最合適的。確定流動(dòng)相后，并驅(qū)樣品、 對(duì)照品以及國(guó)外上市樣品，配成參考文獻(xiàn)中的濃度，進(jìn)樣； 要求：分離度達(dá) 1.51.5 以上，分析時(shí)間通常為主身份保留時(shí)間的 2 2- -3 3 倍， 分析時(shí)間長(zhǎng)可考慮采用梯度洗脫，共 n+3n+3 張圖譜 系統(tǒng)適用性試驗(yàn)：配制6份相同濃度

4、的雜質(zhì)溶液進(jìn)行分析，該雜質(zhì)峰 峰面積的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)差應(yīng)不大于 2.0%,保留時(shí)間的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)差應(yīng)不大 于1.0%。另外，雜質(zhì)峰的拖尾因子不得大于 2.0,理論塔板數(shù)應(yīng)符合 質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的規(guī)定。（已知雜質(zhì)） 耐用性：分別考察流動(dòng)相比例變化士 5%、流動(dòng)相pH值變化士 0.2、 柱溫變化士 5C、檢測(cè)波長(zhǎng)變化士 5nm、流速相對(duì)值變化士 20%以及 采用三根不同批號(hào)的色譜柱進(jìn)行測(cè)定時(shí)， 儀器色譜行為的變化，每個(gè) 條件下各測(cè)試兩次。可接受的標(biāo)準(zhǔn)為：各雜質(zhì)峰的拖尾因子不得大于 2.0,雜質(zhì)峰與其他成分峰必須達(dá)到基線分離；各條件下的雜質(zhì)含量 數(shù)據(jù)（n=6）的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)差應(yīng)不大于2.0%,雜質(zhì)含量的絕對(duì)值在士 0.1

5、% 以內(nèi)。 2、空白溶劑以及輔料干擾試驗(yàn)：取溶解樣品用的溶劑，注入液相色 譜儀，記錄色譜圖。觀察溶劑圖譜情況。并取樣品、處方量的空白輔 料按同樣方法配成一定的濃度， 進(jìn)樣，記錄的譜圖?？摧o料是否有干 擾。共三張圖譜，輔料吸收峰面積相對(duì)于主峰 0.05%3, 定量限S/N10。 5、 回收率（已知雜質(zhì)）：分別做三個(gè)80%、三個(gè)100%、三個(gè)120%, 一個(gè)樣兩針，兩個(gè)對(duì)照四針，九個(gè)樣18針，要求回收含量在80%120% 之間，RSD0.999。截距在100%響應(yīng)值的25%以內(nèi)，響應(yīng)因子的相對(duì)標(biāo) 準(zhǔn)差應(yīng)不大于10%。 7、 1%精密度：?jiǎn)螛舆B續(xù)進(jìn)六針，要求 RSD2.0%。 8、 重復(fù)性試驗(yàn)（已知

6、雜質(zhì)）：雙樣雙針，一個(gè)樣進(jìn)兩針，六個(gè)樣，兩 個(gè)對(duì)照，總共16針，要求RSD15.0%。 9、溶液穩(wěn)定性：?jiǎn)螛訂吾?，分別0h、1h、2h、4h、6h、8h, RSD2.0% 按照分析方法分別配置對(duì)照品溶液與供試品溶液， 平行測(cè)定兩次主成 分與雜質(zhì)的含量，然后將上述溶液分別貯存在室溫與冰箱冷藏室 （4C）中，在1、2、3、5和7天時(shí)分別平行測(cè)定兩次主成分與雜質(zhì) 的含量?？山邮艿臉?biāo)準(zhǔn)為：主成分的含量變化的絕對(duì)值應(yīng)不大于 2.0%，雜質(zhì)含量的絕對(duì)值在士 0.1%以內(nèi)，并不得出現(xiàn)新的大于報(bào)告 限度的雜質(zhì)。 10、 小試方法驗(yàn)證及被仿制品：被仿制品1%白身對(duì)照，被仿制品100% 樣品，小試100%,小試1

7、%白身對(duì)照。方法驗(yàn)證：中試樣品三批， 100%樣品和1%白身對(duì)照，空白溶劑。 11、 注明：主峰圖譜要求拖尾因子 0.95v r 1.05,分離度最好要 求1.5,理論板數(shù)一般不低于3000.（個(gè)別品種需根據(jù)實(shí)際要求而定）。 三、聚合物方法學(xué)研究圖譜 1系統(tǒng)適應(yīng)性試驗(yàn) （水和磷酸鹽緩沖液） ：藍(lán)色葡聚糖2000和對(duì)照品， 理論塔板數(shù)要求不低于700。 2、 空白輔料 3、 供試品 4、 專屬性試驗(yàn)：供試品，輔料干擾。 5、 檢測(cè)限與定量限：般以信噪比3: 1相應(yīng)濃度確定最低檢測(cè)限，以 檢測(cè)限X 1000的量或濃度作為測(cè)定量（濃度） 6、 1%進(jìn)樣精密度：?jiǎn)螛舆B續(xù)進(jìn)六針，要求 RSD2.0%。

8、7、 溶 液 穩(wěn) 定 性 ： 單 樣 單 針 ， 分 別0h、1h、2h、4h、6h、8h, RSD2.0%。 8、 線性：（濃度范圍20%-200%） 7個(gè)樣。 供試品溶液的濃度與聚合物測(cè)定結(jié)果的相關(guān)性考察：制備系列的供試 品溶液，濃度范圍為規(guī)定濃度的50% 200%,共三份樣品，以測(cè)得 的高聚物峰面積對(duì)溶液濃度進(jìn)行線性回歸，相關(guān)系數(shù) r應(yīng)大于0.99。 F值測(cè)定的重現(xiàn)性考察：F值為對(duì)照溶液的濃度（mg）與測(cè)得的峰面 積的比值，要求日內(nèi)、日間的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差在 5%以內(nèi)。 對(duì)照品 20% 50% 80% 100% 120% 150% 200% 9、 聚合物測(cè)定（方法驗(yàn)證） 被仿制品供試品 被仿制品對(duì)照 一 質(zhì)量研究供試品 一 質(zhì)量研究對(duì)照 一 中試樣品 一 中試第1批供試品 _ 中試第1批