1、僅供個(gè)人參考專題2微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用課題2 土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù)教學(xué)設(shè)計(jì)金堂縣竹篙中學(xué)譚善財(cái) 2013-3-16本節(jié)課內(nèi)容的總體目標(biāo)二、教學(xué)重點(diǎn)與難點(diǎn)課題重點(diǎn)：對(duì)土樣的選取和選擇培養(yǎng)基的配制課題難點(diǎn)：對(duì)分解尿素的細(xì)菌的計(jì)三、課時(shí)：1h四、本課題內(nèi)容標(biāo)準(zhǔn)1、研究培養(yǎng)基對(duì)微生物的選擇作用，“研究”屬于知識(shí)性領(lǐng)域的目標(biāo)動(dòng)詞，應(yīng)用水平2、進(jìn)行微生物的分離，“進(jìn)行”屬于技能性領(lǐng)域目標(biāo)動(dòng)詞，獨(dú)立操作水平3、測(cè)定某種微生物的數(shù)量，“測(cè)定”屬于技能性領(lǐng)域目標(biāo)動(dòng)詞，獨(dú)立操作水平。五、本課題研究思路六、教學(xué)思路:創(chuàng)設(shè)情景 提出問題*自主學(xué)習(xí) 分析問題互動(dòng)探究 解決問題不得用于商業(yè)用途七、教學(xué)流程八、教

2、學(xué)過程復(fù)習(xí)提問教師活動(dòng)1 .微生物最常用的兩種接種方法是什么?2 .什么稀釋涂布平板法？其目的是什么?導(dǎo)入課題 引導(dǎo)學(xué)生閱讀“課題背景”知識(shí)，提出的問題。學(xué)生活動(dòng)學(xué)生回憶學(xué)生自主學(xué)習(xí)回答問題設(shè)計(jì)意圖為細(xì)菌計(jì)數(shù)原理、操作做好鋪墊創(chuàng)設(shè)情景，引入 新課，使學(xué)生明 確分解尿素的細(xì) 菌的重要性，突 出課題的必要性1、DN咪合酶發(fā) 現(xiàn)過程，同學(xué)們得 到什么啟示？2.學(xué)生討論為什么1、教師讓學(xué)生閱讀課本 P21,講解：DN咪合酶作 用，發(fā)現(xiàn)過程。引導(dǎo)學(xué)生得到啟示根據(jù)它對(duì)生存環(huán)研究思路 境的要求，到相應(yīng)的環(huán)境中去尋找（即自然界篩選）。Taq細(xì)菌能從熱泉 p中篩選出來嗎？黃石公園熱泉 底火山3、學(xué)生閱讀課 本P

3、22側(cè)邊欄關(guān)于 本課題使用的培養(yǎng) 基成分相關(guān)內(nèi)容， 討論并回答提供碳 源和氮源的分別是 什么物質(zhì)。海4.學(xué)生分析討論，以尿素為唯一 氮源的培養(yǎng)基能否 篩選出分解尿素的 細(xì)菌3、學(xué)生觀看教 師展示的多媒體圖 片。大腸桿菌顯色培養(yǎng)基 菌株實(shí)驗(yàn)室篩選SARS4、學(xué)生討論培養(yǎng)基如何對(duì)微生物 進(jìn)行篩選。引導(dǎo)學(xué)生對(duì)知識(shí)進(jìn)行遷移學(xué)習(xí)，培養(yǎng)學(xué)生的邏輯遷移思維。通過觀看圖片，使學(xué)生由感性認(rèn)識(shí)過渡到理性認(rèn)識(shí)。培養(yǎng)學(xué)生的學(xué)科素養(yǎng)。2、實(shí)驗(yàn)室中微生物的篩選原理實(shí)驗(yàn)室篩選：人為提1、篩選 供有利于目的菌株生長(zhǎng)的條件（包括營(yíng)養(yǎng)、溫度、菌株 H等），同時(shí)抑制或阻止其他微生物生長(zhǎng)。3、教師展示各種篩選菌株方法的多媒體圖片:4

4、、培養(yǎng)基選擇分解尿素的微生物的原理：培養(yǎng)基的 氮源為尿素，只有能合成月尿酶的微生物才能分解尿素，以尿素作為氮源。缺乏胭酶的微生物由于不能分解尿素，缺乏氮 源而不能生長(zhǎng)發(fā)育繁殖，而受到抑制，所以用此培 養(yǎng)基就能夠選擇出分解尿素的微生物。5、選擇培養(yǎng)基：在微生物學(xué)中，將允許特定種類的 微生物生長(zhǎng)，同時(shí)抑制或阻止其他種類微生物生長(zhǎng) 的培養(yǎng)基。目的是從眾多微生物中分離所需要的微 生物。1、直接計(jì)數(shù)法：最常用的顯微鏡直接計(jì)數(shù)，指出優(yōu) 缺點(diǎn)。2、間接計(jì)數(shù)法：最常用方法稀釋涂布平板法。C:某一稀釋度下平板上生長(zhǎng)的平均菌落數(shù)1、學(xué)生討論能否用來計(jì)數(shù)土壤中的活菌數(shù)。2、學(xué)生討論并區(qū)別：稀釋涂布平板法是用來計(jì)數(shù)的

5、，知識(shí)的遷移，培而平板劃線法是用 養(yǎng)學(xué)生的知識(shí)整來純化的。合能力。2、統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目V：涂布平板時(shí)所用的稀釋液的體積（ ml）M稀釋倍數(shù)每克樣品中的菌株數(shù)=(C+ V) X M3.教師提出計(jì)數(shù)過程中應(yīng)注意那些問題學(xué)生設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)方案：1、實(shí)例：在做分解尿素的細(xì)菌的篩選與統(tǒng)計(jì)菌落數(shù) 目的實(shí)驗(yàn)時(shí)，A同學(xué)篩選出約150個(gè)菌落，但其他同 學(xué)只選擇出約50個(gè)菌落，分析其原因。教師要求學(xué) 生設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)方案。方案一：由其他同 學(xué)用與A同學(xué)相同 土樣進(jìn)行實(shí)驗(yàn)；2、對(duì)照實(shí)驗(yàn)是指除了被測(cè)試的條件外，其他條件都 相同的實(shí)驗(yàn)。滿足該條件的稱為對(duì)照組，未滿足該 條件的稱為實(shí)驗(yàn)組。設(shè)置對(duì)照的主要目的是排除實(shí) 驗(yàn)組中非測(cè)試因素對(duì)實(shí)

6、驗(yàn)結(jié)果的影響，提高實(shí)驗(yàn)結(jié) 果的可信度。3、設(shè)置對(duì)照方案二：將A同學(xué) 配制的培養(yǎng)基在不 加土樣的情況下進(jìn) 行培養(yǎng)，作為空白 對(duì)照，以證明培養(yǎng) 基是否受到污 染。培養(yǎng)學(xué)生的懷疑精神，并根據(jù)自身設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)方案進(jìn)行驗(yàn)證。培養(yǎng)學(xué)生的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)能力。小結(jié)：通過這個(gè)事 例可以看出，實(shí)驗(yàn) 結(jié)果要有說服力， 對(duì)照的設(shè)置是必不 可少的。學(xué)生討論思考下列 問題：1、教師講解樣品的稀釋和稀釋液的取樣培養(yǎng)流程示 意圖。1、如何從平板上 的菌落數(shù)推測(cè)出每 克樣品中的菌落 數(shù)？通過實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)， 培養(yǎng)學(xué)生設(shè)計(jì)實(shí) 驗(yàn)方案能力，培 養(yǎng)學(xué)生的學(xué)科素 養(yǎng)。體驗(yàn)無菌操 作的實(shí)驗(yàn)過程。答：統(tǒng)計(jì)某一稀釋操作提示實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)2、土壤取樣:從肥沃、濕潤(rùn)

7、的土壤中取樣。先鏟去表層土3cm左右，再取樣，將樣品裝入事先準(zhǔn)備好的信封中。3、制備培養(yǎng)基和樣品的稀釋:制備以尿素為唯一氮源的選擇培養(yǎng)基，并按一定倍 數(shù)稀釋。4、微生物的培養(yǎng)與觀察:每隔24h統(tǒng)計(jì)一次菌落數(shù)目。選取菌落數(shù)目穩(wěn)定時(shí) 的記錄作為結(jié)果。1、無菌操作a、取土用小鐵鏟、盛土樣信封在使用前都需要滅 菌。b、應(yīng)在火焰旁稱取土壤。在火焰附近將稱好的土樣 倒入錐形瓶中，塞好棉塞。c、在稀釋土壤溶液的過程中，每步都要在火焰旁操 作。2、做好標(biāo)記度下平板上的菌落 數(shù)，最好能統(tǒng)計(jì)3 個(gè)平板，計(jì)算出平 板菌落數(shù)的平均 值，然后按課本旁 欄的公式進(jìn)行計(jì) 算。2、為什么分離不 同的微生物要采用 不同的稀釋度

8、？答：因?yàn)橥寥乐懈?類微生物的數(shù)量（單位:株/kg ） 是不同的，為獲得 不同類型的微生 物，就需要按不同 的稀釋度進(jìn)行分 離，同時(shí)還應(yīng)當(dāng)有 針對(duì)性地提供選擇 培養(yǎng)的條件。學(xué)生討論實(shí)驗(yàn)過程 的注意事項(xiàng)。培養(yǎng)學(xué)生的創(chuàng)新 思維。注明培養(yǎng)基種類、培養(yǎng)日期、平板培養(yǎng)樣品的稀釋 度等。3、規(guī)劃時(shí)間1、培養(yǎng)物中是否有雜菌污染以及選擇培養(yǎng)基是否篩 選菌落學(xué)生交流成果，分析自己的成功之處和需要改進(jìn)的地方。培養(yǎng)學(xué)生學(xué)會(huì)對(duì)別人評(píng)價(jià)和自我評(píng)價(jià)的能力結(jié)果分析2、樣品的稀釋操作是否成功與評(píng)價(jià)3、重復(fù)組的結(jié)果是否一致在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑。培養(yǎng)某種細(xì)菌后，如果 PH升高，指示劑將變紅，說 明該細(xì)菌能夠

9、分解尿素課題延伸月尿酶的檢測(cè)學(xué)生了解酚紅指示劑的作用，通過對(duì)比七、板書設(shè)計(jì)1.自然篩選和實(shí)臉室篩選1.上壤中分解氏素的細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù)研究思路實(shí)驗(yàn)設(shè):計(jì)-操作提示2、2、結(jié)果分析與評(píng)價(jià)課題鋌伸篩選由琳.統(tǒng)計(jì)甫落數(shù)目設(shè)置對(duì)照上填取樣樣品的林祥2、選擇培養(yǎng)基1直接首數(shù)法L 2.間接計(jì)數(shù)法稚生物的培養(yǎng)與規(guī)察九、課堂鞏固1 .使用選擇培養(yǎng)基的目的是（）A.培養(yǎng)細(xì)菌B.培養(yǎng)真菌C.使需要的微生物大量繁殖D.表現(xiàn)某微生物的特定性狀與其他微生物加以區(qū)別2 .能合成月尿酶的微生物所需要的碳源和氮源分別是（）A.CO2和N2B.葡萄糖和NH3 C.CO2和尿素 D. 葡萄糖和尿素3 .下列說法不正確的是（）A.

10、科學(xué)家從70 80度熱泉中分離到耐高溫的TaqDNAm合酶B.統(tǒng)計(jì)某一稀釋度的 5個(gè)平板的菌落數(shù)依次為 Ml M2 M3 M4 M5以M3作為該樣品菌 落數(shù)的估計(jì)值C.設(shè)置對(duì)照實(shí)驗(yàn)的主要目的是排除實(shí)驗(yàn)組中非測(cè)試因素對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響，提高實(shí)驗(yàn)結(jié)果 的可信度D.同其他生物環(huán)境相比，土壤中的微生物數(shù)量最大，種類最多。4 .酵母菌能在青霉素的環(huán)境中生存而細(xì)菌一般不能，為培養(yǎng)和分離出酵母菌并淘汰雜菌， 常在培養(yǎng)基中加入（）A.較多的氮源物質(zhì)B.較多的碳源物質(zhì) C.青霉素類藥物 D.高濃度食鹽5 .用來判斷選擇培養(yǎng)基是否起到了選擇作用需要設(shè)置的對(duì)照是A.未接種的選擇培養(yǎng)基B.未接種的牛肉膏蛋白月東培養(yǎng)基C

11、.接種了的選擇培養(yǎng)基D.接種了的牛肉膏蛋白月東培養(yǎng)基6 .請(qǐng)選出下列正確的取樣培養(yǎng)操作步驟土壤取樣稱取10g 土壤取出加入盛有 90ml無菌水的錐形瓶中吸取0.1ml進(jìn)行平板涂布 依次稀釋至101、102、103、104、105、106、107稀釋度A.一 一 一 B . 一一 一C. D . 7 .（2011 揭陽(yáng)模擬）下列關(guān)于微生物分離和培養(yǎng)的有關(guān)敘述，錯(cuò)誤的是（）A.微生物培養(yǎng)前，需對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行消毒8 .測(cè)定土壤樣品中的細(xì)菌數(shù)目，常用菌落計(jì)數(shù)法C.分離土壤中不同的微生物，要采用不同的稀釋度D.分離能分解尿素的細(xì)菌，要以尿素作為培養(yǎng)基中唯一的氮源9 .可以鑒定出分解尿素的細(xì)菌的方法是（）A

12、.以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑B.以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入二苯胺試劑C.以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入蘇丹出試劑D.以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入雙縮月尿試劑僅供個(gè)人參考僅供個(gè)人用于學(xué)習(xí)、研究；不得用于商業(yè)用途For personal use only in study and research; not for commercial use.Nur f u r den pers?nlichen f u r Studien, Forschung, zu kommerziellen Zwecken verwendet werden.Pour l ' e tude et la recherche