1、說明：本實(shí)驗(yàn)由四個(gè)小實(shí)驗(yàn)組 成，其中第一個(gè)實(shí)驗(yàn)（酶的專 一性）必做，其他三個(gè)小實(shí)驗(yàn)選做（至少做一個(gè)）時(shí)間：2021.03.09創(chuàng)作：歐陽法寫實(shí)驗(yàn)報(bào)告時(shí)，可以只寫需要做的實(shí)驗(yàn)內(nèi)容！實(shí)驗(yàn)四酶的特性實(shí)驗(yàn)一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康拿甘巧锎呋瘎?，生物體內(nèi)化學(xué)反應(yīng)基本上都是 在酶的催化下進(jìn)行的。通過本實(shí)驗(yàn)了解酶催化的特異 性、溫度對酶活力的影響、PH對酶活力的影響、激 活劑和抑制劑對酶活力的影響，對于進(jìn)一步掌握代謝 反應(yīng)及其調(diào)控機(jī)理具有十分重要的意義。二、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容本實(shí)驗(yàn)由酶的專一性實(shí)驗(yàn)、溫度對酶活力的影 響、PH對酶活力的影響、激活劑和抑制劑對酶活力 的影響4個(gè)小實(shí)驗(yàn)組成。2021.03.09(一) 酶的專一性1、實(shí)

2、驗(yàn)原理本實(shí)驗(yàn)以唾液淀粉酶對淀粉和蔗糖的作用為例， 來說明酶的專一性。淀粉和蔗糖無還原性，唾液淀粉 酶水解淀粉生成有還原性二糖的麥芽糖，但不能催化 蔗糖的水解。用班氏試劑檢查糖的還原性。班氏試劑 為堿性硫酸銅，能氧化具還原性的糖，生成磚紅色沉 淀氧化亞銅。2、材料、儀器與試劑材料：新鮮配制的唾液及其稀釋液儀器：恒溫水??；沸水浴；試管及試管架；(3)試劑：2%蔗糖溶液；溶于0.3% NaCl的0.5%淀粉 溶液；班氏試劑。3、實(shí)驗(yàn)操作(1) 稀釋唾液的制備 唾液的獲取用一次性杯取一定量的飲用水，漱口以清潔口 腔，然后在嘴中含l()-2()ml飲用水，輕漱2min左右 時(shí)間，即可獲得唾液的原液，內(nèi)含

3、唾液淀粉酶。 不同稀釋度唾液的制備(用大試管)本實(shí)驗(yàn)需制備 1 ： 1、1 ： 5、1 ： 2()、1 ： 5()、1 :200等五個(gè)不同濃度的稀釋唾液。舉例說明：1:5指的是稀釋了 5倍的唾液，制備方法 為1份原液+4份蒸鎬水。1： 2()指的是稀釋了 2()倍的唾液，制備方法為1份1: 5的稀釋液+3分蒸鎬水。(2) 唾液淀粉酶最佳稀釋度的確定(嚴(yán)格按表1添加順序做實(shí)驗(yàn)，用小試管做實(shí)驗(yàn))表1唾液淀粉酶稀釋度的確定管號1 （1：1）2 （1：5）3 （1：20）4 （1：50）5 （1：200）0.5%淀粉溶液(»)44444稀釋唾液(ml)1111137°C恒溫水浴中保

4、溫5分鐘班氏試劑(ml)11111沸水浴23分鐘實(shí)驗(yàn)結(jié)果(2)淀粉酶的專一性表2淀粉酶專一性實(shí)驗(yàn)卜 Z. M1234560.5%淀粉溶液(滴)4442%蔗糖溶液(滴)444最佳稀釋度唾液(ml)11煮沸過的最佳稀釋度唾液(ml)11蒸餡水(ml)1137°C恒溫7浴中保溫5分鐘班氏試劑(ml111111沸水浴23分?實(shí)驗(yàn)結(jié)果(二) 溫度對酶活力的影響1、實(shí)驗(yàn)原理酶的催化作用受溫度的影響。在最適溫度下，酶 的反應(yīng)速度最高。淀粉和可溶性淀粉遇碘呈藍(lán)色，糊 精按其分子的大小，遇碘可呈藍(lán)色、紫色、暗褐色或 紅色。最簡單的糊精遇碘不呈顏色，麥芽糖遇碘也不 呈色，在不同溫度下，淀粉被唾液淀粉酶水

5、的程度可 由水解混合物遇碘呈現(xiàn)的顏色來判斷。2、材料、儀器與試劑(1) 材料：新鮮配制的唾液及其稀釋液(2) 儀器：試管及試管架；恒溫水??；冰??；沸水 浴；(3) 試劑：溶于0.3% NaCl的0.5%淀粉溶液；KI 12碘溶液；3、實(shí)驗(yàn)操作取4支干燥的試管，編號后按下表加入試劑:表3溫度對酶活力影響實(shí)驗(yàn)加樣順序管號1230.5%淀粉溶液(ml)1.51.51.5最佳稀釋度唾液(ml)11煮沸過的稀釋唾液(ml)1實(shí)驗(yàn)結(jié)果搖勻后，將1、3號試管放入37°C恒溫水浴中，2號試管放入冰水中。1()分鐘后1、2、3管均取出 (將2號內(nèi)液體分兩半)，用1<1-12溶液來檢驗(yàn)1、2、3號

6、管內(nèi)淀粉被唾液淀粉酶水解的程度。記錄并 解釋結(jié)果。將2號管剩下的一半溶液放入37°C水浴 中繼續(xù)保溫1()分鐘后，再用1<1-12液實(shí)驗(yàn)，記錄實(shí) 驗(yàn)結(jié)果。(三) PH對酶活力的影響1、實(shí)驗(yàn)原理酶的活力受環(huán)境PH值的彭響極為顯著。不同酶 的最適PH不同。本實(shí)驗(yàn)觀察PH對唾液淀粉酶活性 的影響。唾液淀粉酶的最適PH約為6.8。2、材料、儀器與試劑(1) 材料：新配制的溶于03%NaCl的0.5%淀粉溶液(2) 儀器：試管及試管架；吸管；滴管；恒溫水浴(3) 試劑：PH為5.()、5.8、6.8、8.0的緩沖溶液；KI-I2碘溶液；PH試紙3、實(shí)驗(yàn)操作表4 PH對酶活性的影響實(shí)驗(yàn)PH

7、558688.0緩沖液(ml)33330.5%淀粉溶液(ml)1111向第一個(gè)試管加入稀釋唾液后，置于37C的恒溫水??；等待lmin后向第二個(gè)試管加入稀釋唾液，置于37°C的恒溫水?。阂来晤愅?！最佳稀釋度的唾液(ml)1111檢查淀粉水解程度待向第四只試管加入唾液2min后，每隔1分鐘從第3管中取出1滴 反應(yīng)液于白瓷板上，加碘液檢査反應(yīng)進(jìn)行情況，直至反應(yīng)液變?yōu)榈?棕黃色(顏色有點(diǎn)淡即可)。即可從第一只試管依次添加碘液，時(shí) 間間隔也為lmino碘液(滴)12121212現(xiàn)象為了更好的理解表格內(nèi)容，下面對實(shí)驗(yàn)過程進(jìn)行說明：各取緩沖液3ml,分別注入4支帶有號碼的試管，隨后于各個(gè)試管中添加

8、0.5%淀粉溶液1兇 和最 佳稀釋度的唾液1ml。向各試管中加入稀釋唾液的時(shí) 間間隔為1分鐘。將各試管中物質(zhì)混勻，并依次置 于37°C恒溫水浴中保溫。待向第4管加入唾液2ml后，每隔1分鐘由第3 管取出一滴混合液，置于白瓷板上，加1小滴KI 12 溶液。添加KI 12溶液，檢驗(yàn)淀粉的水解程度。待 混合變?yōu)榈攸S色(顏色有點(diǎn)淡即可)后，向所有試 管依次添加1-2滴KI 12溶液。添加滴KI 12溶液的 時(shí)間間隔，從第1管起，亦均為1分鐘。觀察各試管 中物質(zhì)呈現(xiàn)的顏色，分析pH對唾液淀粉酶活性的影 響。(四) 唾液淀粉酶的活化及抑制1、實(shí)驗(yàn)原理酶的活性受活化劑或抑制劑的影響，氯離子為唾

9、液淀粉酶的活化劑，銅離子為其抑制劑。2、材料、儀器與試劑(1) 材料：().5%淀粉溶液；最佳稀釋度的唾液(2) 儀器：試管及試管架；恒溫水浴(3) 試劑：1% NaCl 溶液；1% CuSO4 溶液；KII2 碘溶液；1%NS()斗溶液3、實(shí)驗(yàn)操作(注意本實(shí)驗(yàn)的淀粉溶液為無NaCl的淀粉溶液)表4唾液淀粉酶活化及抑制實(shí)驗(yàn)管號12340.5%淀粉溶液(ml)1.51.51.51.5最佳稀釋度唾液(ml)0.50.50.50.5l%NaCI溶液（ml）0.51% CuSO4溶液（ml）0.51% Na2SO4 溶液（ml）0.5蒸憎水(ml)0.537°C恒溫水浴中保溫10分鐘KI-I2溶液(滴)23232323現(xiàn)象三、注意事項(xiàng)各人唾