1、尿有形成分尿有形成分標標 準準 化化現(xiàn)狀、問題、對策現(xiàn)狀、問題、對策曾真尿液檢驗標準化目的v標準程序控制v結(jié)果準確v最少最少人為干預人為干預、人人為誤差為誤差尿液有形成分檢驗的標準問題尿液有形成分檢驗的標準問題 金標準金標準是什么？形態(tài)學鏡檢 問題問題： 如何標準化 如何控制人為誤差和錯誤尿常規(guī)的內(nèi)容尿常規(guī)的內(nèi)容尿液檢驗常規(guī)現(xiàn)狀尿液檢驗常規(guī)現(xiàn)狀理 學 檢 驗化 學 檢 驗有形成分鏡檢有形成分有形成分定量檢驗定量檢驗特檢常規(guī)常規(guī)中尿液有形成分中尿液有形成分定性定性與與定量定量v臨床需要v定量和定性有無差異化v人為誤差干化學干化學應應 用用8 中華醫(yī)學會檢驗分會1995年制定的尿液干化學鏡檢篩選指

2、南建議“尿液干化學檢查結(jié)果為白細胞、白細胞、紅細胞、亞硝酸鹽、蛋白紅細胞、亞硝酸鹽、蛋白四項指標同時皆為陰性時，可視為尿內(nèi)有形成分大致在正常范圍內(nèi)，可免除鏡檢，直接報告尿液內(nèi)有形成大致在正常范圍內(nèi)”干化學干化學 能否取代鏡檢干化學不能替代鏡檢的原因v為化學成分檢測v影響因素眾多v許多有形成分不能檢測 干化學篩選簡單易行，但有一定數(shù)量假陰性，造成漏診，假陽性頗多，不但造成復檢率增加，在短時間要出大量報告困難，也給臨床診斷思給臨床診斷思路造成混亂路造成混亂。干化學替代鏡檢的結(jié)果干化學替代鏡檢的結(jié)果干化學替代鏡檢問題干化學替代鏡檢問題v弊大于利；v影響因素眾多；v不能替代鏡檢；尿液有形成分分析標準化

3、尿液有形成分分析標準化現(xiàn)狀、問題現(xiàn)狀、問題離心鏡檢尿液檢驗標準化委員會文件尿液檢驗標準化委員會文件vECCLS：歐洲臨床檢驗標準委員會vNCCLS：美國臨床檢驗標準委員會JCCLS：日本國家臨床檢驗標準委員會vCCCLS：中國臨床檢驗標準委員會操作規(guī)程影響定量準確的主要問題影響定量準確的主要問題v離心沉淀不完全離心沉淀不完全v離心對有形成分破壞作用離心對有形成分破壞作用v操作誤差大操作誤差大v費時費力費時費力定量不準確離心和非離心尿液比較叢玉隆等 尿液細胞成份定量分析方法學研究中華醫(yī)學檢驗雜志 2006年3期人工離心鏡檢方法的評價人工離心鏡檢方法的評價v定量定量 不準確不準確 結(jié)果顯著偏低v定

4、性定性 理理 想想問題問題1、推廣意義？2、是否所有尿液有形成分 都應定量？不離心尿液有形成分不離心尿液有形成分檢驗參考方法檢驗參考方法2003年實驗血液學學會（年實驗血液學學會（ISLH） 提出了尿中顆粒計數(shù)參考方法。提出了尿中顆粒計數(shù)參考方法。（不離心尿液方法）（不離心尿液方法）主要內(nèi)容如下主要內(nèi)容如下: 計數(shù)池計數(shù)池Fuchs-Rosenthal 計數(shù)盤：計數(shù)盤：2個計數(shù)池，個計數(shù)池，16大格；大格； 每大格：每大格：1*1*0.2mm=0.2ul; 總體積總體積：2*16*0.2=6.4ul；不離心尿液不離心尿液：不離心新鮮尿液標本充不離心新鮮尿液標本充池后靜置沉淀；池后靜置沉淀；低倍

5、鏡低倍鏡（10倍）：觀察計數(shù)大型有形成倍）：觀察計數(shù)大型有形成分（上皮細胞、管型）；分（上皮細胞、管型）；高倍鏡高倍鏡（40倍）：觀察計數(shù)小型有形成倍）：觀察計數(shù)小型有形成分（細胞、真菌、結(jié)晶等）；分（細胞、真菌、結(jié)晶等）；結(jié)結(jié) 果：果：以以“個個/ul”報告。報告。統(tǒng)計學精度統(tǒng)計學精度低倍低倍：（管型和上皮）至少計數(shù)50個， 計數(shù)CV14%；高倍：高倍：（紅、白細胞等）至少計數(shù)200個， 計數(shù)CV7%；不離心尿液不離心尿液檢測檢測有形成分的標準化問題有形成分的標準化問題參考方法人工完成檢驗的可能性v6ul體積：人工計數(shù)不可能完成v即便可以完成，質(zhì)量水分很大。儀器不離心尿液檢測方法儀器不離心尿

6、液檢測方法非形態(tài)學方法：非形態(tài)學方法： 流式技術為代表形態(tài)學方法形態(tài)學方法 機器視覺技術為代表流式技術流式技術尿流式儀器尿流式儀器v傳統(tǒng)流式技術：傳統(tǒng)流式技術： 日本：日本：UF-1000i流式技術優(yōu)點流式技術優(yōu)點v自動化檢測儀器： 1、節(jié)約人力成本 2、檢測速度 60-70 test / 小時v國外品牌優(yōu)勢；尿流式檢測尿流式檢測標準化問題標準化問題非特異性非特異性問題問題層流式技術層流式技術物鏡不能拍攝到清晰圖片仿形態(tài)學技術提供的紅細胞仿形態(tài)學技術提供的紅細胞（RBC）潘揚、衣魯江蘇州大學附二院檢驗科臨床檢驗雜志2008年5期IQ200尿沉渣分析儀尿沉渣分析儀檢測尿紅細胞性能評價檢測尿紅細胞

7、性能評價結(jié)論：對紅細胞的檢測仍僅可作為對紅細胞的檢測仍僅可作為篩查，不能取代鏡檢篩查，不能取代鏡檢尿流式操作程序中補救措施流式檢測陰性陰性陽性陽性鏡檢鏡檢報告報告干化學干化學鏡檢鏡檢 尿尿 流流 式式不同復核方式需要不同復核方式需要商榷商榷 問問 題題 流式+干化學=復核v流式的假陽性用干化學無法驗證流式的假陽性用干化學無法驗證v流式檢測和干化學檢測之間沒有互補性流式檢測和干化學檢測之間沒有互補性v兩種檢測方法均為非形態(tài)學方法兩種檢測方法均為非形態(tài)學方法化學流式過篩報 告理學 如何做到鏡檢復核不打折扣？ 流式結(jié)果流式結(jié)果+鏡檢復核鏡檢復核鏡檢自動化儀器鏡檢自動化儀器現(xiàn)狀和標準化問題現(xiàn)狀和標準化

8、問題形態(tài)學鏡檢儀器形態(tài)學鏡檢儀器鏡檢自動化儀器的優(yōu)點鏡檢自動化儀器的優(yōu)點v形態(tài)學方法：形態(tài)學方法： 真實、可靠，符合方法學溯源v自動化：自動化： 效率高、速度快60-180 tests /hv圖像保持圖像保持 可以共享、追溯、控制v減少人為操作誤差，有利于標準化減少人為操作誤差，有利于標準化鏡檢自動化儀器存在的問題鏡檢自動化儀器存在的問題 智能識別技術不同智能識別技術不同識別能力差異大識別能力差異大圖像識別技術的形式圖像識別技術的形式v第一代圖像分析技術第一代圖像分析技術圖像對比技術 收集各類圖像存貯，將未定圖像與圖像庫內(nèi)的圖像對比來確定圖像分類的技術 v第二代圖像分析技術第二代圖像分析技術光

9、電檢測技術 依據(jù)有形物質(zhì)表面特征在給定光照射后，由于表面差異，造成反射光不同，進而進行判斷確定的技術 數(shù)字圖像識別v第三代圖像分析技術第三代圖像分析技術機器視覺技術機器視覺技術 即采用機器代替人眼來做測量和判斷 優(yōu) 點：大大提高了對于圖像分析的準確度。 核心點：特征參數(shù)的設定。 圖像分析的準確度與特征參數(shù)直接相關。 圖像識別技術的形式圖像識別技術的形式衣服顏色頭發(fā)長短眉毛、胡須、喉結(jié)、肩寬、三圍、曲線、骨骼、肌肉、器官 識別技術簡單、識別準確性低、 識別水平無提升空間 售價低廉 綜合機器人智能化識別技術、 識別準確性最高識別準確性最高 機器視覺識別機器視覺識別 ， 形態(tài)學檢驗新趨向形態(tài)學檢驗新

10、趨向 健康報健康報 2010.10 機器視覺識別技術機器視覺識別技術是一種新興的很有前途是一種新興的很有前途的技術。的技術。叢玉隆叢玉隆機器視覺儀器程序優(yōu)勢機器視覺儀器程序優(yōu)勢樣品儀器檢測陰性陽性識別確認報告復核1、機器視覺：、機器視覺：智能智能識別準確性最高識別準確性最高，但仍不可能達到完全識別。2、人工審核是必須的。熒屏上糾錯，無需重新鏡檢；機器視覺識別代替人的問題機器視覺識別代替人的問題質(zhì)質(zhì) 量量 控控 制制質(zhì)量控制的必要性質(zhì)量控制的必要性v計數(shù)準確性計數(shù)準確性：細胞、顆粒v靈敏度質(zhì)控：靈敏度質(zhì)控：不離心尿液更必須v識別正確性：識別正確性：專家圖譜專家圖譜漏檢是不離心方法的致命問題漏檢是

11、不離心方法的致命問題v離心目的是濃縮；v不離心極易漏檢；儀器檢測的靈敏度是關鍵儀器檢測的靈敏度是關鍵為什么儀器靈敏度會有差異技術不同1、流式：電阻抗2、數(shù)字圖像識別：軌跡搜索3、機器視覺：目標定位、跟蹤低倍鏡低倍鏡確保不漏檢的技術確保不漏檢的技術AVE目標定位和跟蹤目標定位和跟蹤目標定位、目標跟蹤目標定位、目標跟蹤高倍鏡高倍鏡定位、跟蹤定位、跟蹤軌軌 跡跡 搜搜 索索漏檢漏檢不漏檢的原則和意義不漏檢的原則和意義實現(xiàn)早期診斷漏檢常常對病人是致命靈敏度：在 5-10細胞/ul時必須檢出保證不漏檢的方法保證不漏檢的方法v儀器必須有靈敏度質(zhì)控品儀器必須有靈敏度質(zhì)控品（注冊）（注冊）v檢驗科自己制作控制

12、品檢驗科自己制作控制品 2-32-3個細胞個細胞/LP/LP檢測檢測1010次，大于次，大于8 8次檢測出次檢測出 靈敏度差異差異造成正常參考值不同： 儀器必須經(jīng)臨床聯(lián)合檢測正常參考值并公示。正常參考值正常參考值檢驗目的是為臨床診斷服務檢驗目的是為臨床診斷服務 紅細胞：臨床除了需要定量，評價療效，更需要明確紅細胞來源30507090110130150170紅細胞大小紅細胞（%）80130180230紅細胞色度紅細胞（%）80100120140160180200220240050100150200紅細胞大小紅細胞色度大小大小均一性均一性紅細胞色度紅細胞色度圖片圖片正常皺縮紅細胞紅細胞色度紅細胞色

13、度 安徽省臨床檢驗中心文件安徽省臨床檢驗中心文件 皖檢中（2010）2號 關于我省尿液有形成分定量檢驗指南的通知關于我省尿液有形成分定量檢驗指南的通知各醫(yī)療機構檢驗科：隨著科學技術進步和新技術新方法的應用，特別是自動化技術發(fā)展為尿液檢驗的規(guī)范化起到十分重要的作用。尿液檢驗中有形成分鏡檢對臨床診斷和治療有重要意義，但是，不少醫(yī)療單位仍然存在不重視鏡檢以及操作不規(guī)范的現(xiàn)象。為了規(guī)范尿液常規(guī)檢驗，確保尿液檢驗的質(zhì)量，衛(wèi)生部醫(yī)政司發(fā)布的全國臨床檢驗操作規(guī)程（第三版）要求在尿常規(guī)檢驗中對尿液有形成分進行鏡檢。鑒于在尿液常規(guī)檢驗操作中實際存在的問題，省臨床檢驗中心組織省內(nèi)外相關專家進行了專題討論，制定了我

14、省臨床尿液有形成分定量檢驗指南，特發(fā)通知。一、尿液有形成分檢驗質(zhì)量控制應引起足夠重視，各臨床實驗室應根據(jù)相關規(guī)定建立尿液有形成分鏡檢的標準操作規(guī)程，開展尿液有形成分鏡檢工作。二、離心方法檢測尿有形成分因存在有形成分不完全沉淀、細胞破壞現(xiàn)象，定量計數(shù)與真實結(jié)果明顯偏低，結(jié)果不準確，因此定量檢測不建議采用。但離心方法可以提高低濃度有形成分的檢出率，可作定性檢測，報告方式：XX個/HP（LP）或加號/HP（LP）。三、不離心尿液人工做有形成分定量檢測，為避免造成有形成分漏檢，要求對每個標本鏡檢體積不得少于5 l（計數(shù)大于5個計數(shù)板）。由于人工鏡檢計數(shù)體積太大，勞動強度大，檢測時間太長，臨床實際操作性

15、不強，建議使用自動化檢測儀器（如機器視覺識別系統(tǒng)等）。四、對紅細胞、白細胞、結(jié)晶等可以定量的有形成分應該做定量檢測。對管型、粘液絲等不易定量的有形成分可以用半定量的方式報告：個/HP（LP）或加號/HP（LP）。五、干化學檢測是對尿液的化學成分檢驗，不是形態(tài)學分析，而且影響干化學結(jié)果的干擾和影響因素眾多，因此不能用干化學檢測代替鏡檢。六、尿液有形成分分析儀器品牌多，方法原理各異，需有各自的參考值范圍和專門的質(zhì)控品，保證尿液有形成分定量檢驗結(jié)果準確可靠，防止臨界標本漏檢情況發(fā)生。七、尿有形成分報告中應有取尿時間和報告時間，以顯示尿液是否是在2小時內(nèi)檢測。八、今后在對各級醫(yī)院進行臨床檢驗質(zhì)量督查或

16、醫(yī)院等級評審時，將把尿液有形成分定量檢驗是否按本指南操作列為臨床檢驗的重點考察內(nèi)容之一。希望各醫(yī)療機構檢驗科重視尿液鏡檢項目，規(guī)范尿液有形成分檢驗的方法，提高檢工作質(zhì)量，更好地為臨床和患者服務。 安徽省臨床檢驗中心 二O一O年六月二日五、干化學檢測是對尿液的化學成分檢驗，不是形態(tài)學分析，而且影響干化學結(jié)果的干擾和影響因素眾多，因此不能用干化學檢測代替鏡檢不能用干化學檢測代替鏡檢。六、尿液有形成分分析儀器品牌多，方法原理各異，需有各自的參考值范圍需有各自的參考值范圍和專門的質(zhì)控品和專門的質(zhì)控品，保證尿液有形成分定量檢驗結(jié)果準確可靠，防止臨界標防止臨界標本漏檢情況發(fā)生本漏檢情況發(fā)生。第一屆華北地區(qū)

17、臨床檢驗質(zhì)量控制與標準化高峰論壇尿液分析專題會議簡報各臨床實驗室應對尿液常規(guī)檢測的質(zhì)量控制和操作標準化引起足夠重視，并根據(jù)相關規(guī)定建立尿液常規(guī)檢測的標準操作規(guī)程。尿液常規(guī)檢測包括干化學和形態(tài)學檢測，實驗室只進行單一干化學檢測是不完整的，而且影響干化學結(jié)果的干擾和影響因素眾多，因此必須進行尿有形成分的形態(tài)學檢測（鏡檢）。在尿液檢測時，各臨床實驗室可根據(jù)自身具體情況選擇適合的工作流程，如（1）干化學檢測后人工鏡檢；（2）干化學檢測后，流式儀器過篩，陽性標本人工鏡檢或形態(tài)學儀器鏡檢；（3）干化學檢測后，全自動形態(tài)學儀器鏡檢。必須強調(diào)和要求的是檢測方法必須符合方法學溯源要求，即鏡檢形態(tài)學。尿液流式技術

18、儀器因無法進行形態(tài)學方法驗證，實際使用中存在較多的假陽性和假陰性的原因，其檢測只是過篩性質(zhì)，不能作為定量檢測結(jié)果，陽性標本必須重新進行人工或形態(tài)學儀器鏡檢確認后方可向臨床發(fā)出檢測報告。隨著技術水平的不斷發(fā)展，對尿液有形成分中紅細胞、白細胞、結(jié)晶等可以定量的有形成分應做定量檢測。對管型、粘液絲等不易定量的有形成分可以用半定量或定性的方式報告。不離心尿液直接檢測尿液有形成分，特別是自動化儀器的使用對尿液質(zhì)量控制提出更高的要求，討論中認為應該從以下三個方面進行質(zhì)量控制：（1）對儀器定量檢測計數(shù)準確性進行質(zhì)控；（2）對儀器細胞最低檢出濃度進行質(zhì)控，確保有形成分在有臨床價值的臨界濃度時不會因為儀器靈敏度達不到要求造成漏檢。（3